长柱金丝桃(Hypericum ascyron L.)分泌结构的研究

对长柱金丝桃各类器官进行了整体透明和解剖学研究,确定合理的采收部位和采摘时间。结果表明,植株富含分泌囊和分泌小管道两种分泌结构;叶片中分泌囊(道)的发育属于裂生型;地上部分泌结构分布较多,尤以叶片中数量最多、分布密度最大;确定植物的最佳采收时期是每年8～9月的花果期、最佳采收部位是地上部。此研究结果为此药用植物合理的采收部位和采收时间的确定提供解剖学依据,同时为其他植物分泌囊(道)发育规律的研究提供理论依据。

HPLC法测定红旱莲中金丝桃苷的含量

目的建立红旱莲中金丝桃苷含量的测定方法。方法采用高效液相色谱法，分析柱为C18色谱柱，进行梯度洗脱，流速1．0ml·min^-1，检测波长：360nm，柱温为35℃。结果金丝桃苷浓度在5．8-58mg·L^-1范围内呈良好线形关系，平均回收率为98．38％，RSD=1．07％。结论该方法灵敏度高、准确、操作简便，可用于红旱莲药材及其制剂的含量测定。

UPLC法同时测定红旱莲中5个成分含量

目的:建立超高效液相色谱法(UPLC)同时测定红旱莲中芦丁、金丝桃苷、槲皮素、异槲皮苷、山柰苷5个有效成分含量方法。方法:采用Waters Acuity UPLC HSS T3色谱柱(2.1mm×150 mm,1.8μm),流动相为乙腈-0.1%磷酸水溶液,梯度洗脱,流速为0.2 mL·min^(-1),检测波长为360 nm,柱温为35℃。结果:芦丁、金丝桃苷、槲皮素、异槲皮苷、山柰苷线性范围分别为1.34~21.52(r=0.9993)、1.07~17.1(r=0.9996)、1.34~21.388(r=0.9995)、1.64~26.18(r=0.9998)、0.88~14.16μg·mL^(-1)(r=0.9999),平均加样回收率(n=9)分别为103.72%、98.27%、98.45%、103.05%、100.25%,RSD均小于1.5%。测定6个批次的供试品中5个成分的含量。结果:槲皮素含量最高,其次为金丝桃苷和异槲皮素,山柰苷和芦丁的含量较低。结论:UPLC可用于红旱莲中5个有效成分的含量测定,且方法简单、有效、结果准确,可用于其质量控制。

Box-Behnken效应面法优化红旱莲总黄酮提取工艺的研究

目的:提出拟合响应曲面的3水平设计(Box-Behnken设计)优化红旱莲中总黄酮回流提取工艺。方法:以总黄酮得率为评价指标,乙醇浓度、提取温度、提取时间及溶剂量为考察因素,采用Box-Behnken效应面法优化回流提取工艺条件,并进行预测分析。结果:试验表明乙醇浓度和提取温度对红旱莲总黄酮提取量具极显著影响,最优提取工艺为乙醇浓度53.2%,提取温度78.7℃,提取时间2.3h,液料比13.3mL/g,二项式拟合复相关系数较高(r=0.9846),回归模型的提取率预测值与测定值偏差率为-4.01%。结论:Box-Behnken效应面法用于优化红旱莲的提取工艺是可行的,建立的数学模型和实验观察数据相符。

长柱金丝桃生长发育及人工繁殖技术研究

目的：了解长柱金丝桃形态变化、生长状况及人工繁殖技术。方法：利用现场观察记录形态的变化,测量长柱金丝桃的株高和直径,利用SPSS软件建立生长的数学模型;在人工栽培地进行有性和无性繁殖。结果：长柱金丝桃于每年4月末萌发,5月末出现分枝、6月末开花,8月初为盛果期,10月初种子成熟。株高、叶和分枝变化的Verhaulst模型分别为：H=127.109/1＋23.7441×e-0.062t、L=23.343/＋11.303×e-0.062t、B=22.037/1＋73.068×e-0.068t。无性繁殖中整株移植成活率为100%,分株成活率为67.2%;有性繁殖中种子发芽率为15.2%,移苗成活率在36%。结论：长柱金丝桃生长发育期为4~10月,可以进行人工繁殖。

红旱莲总黄酮对黄嘌呤氧化酶抑制作用及抗氧化研究

通过抑制率及抑制动力学的测定,研究红旱莲总黄酮(HAF)对黄嘌呤氧化酶(XOD)的抑制作用及抑制机理。利用对羟基自由基清除能力、总抗氧化能力和总还原能力的测定,评估了红旱莲总黄酮体外抗氧化能力。结果表明,红旱莲总黄酮是一种可逆的竞争型XOD抑制剂,红旱莲总黄酮对XOD的抑制呈现浓度依赖关系,其半抑制质量浓度(IC50)为11.73μg/mL,抑制常数Ki为0.61μg/mL。红旱莲总黄酮有较好的羟基自由基清除能力(IC50=0.135μg/mL)及明显的总还原能力和总抗氧化能力。红旱莲黄酮可作为潜在的抗氧化剂和预防高尿酸血症的药物或膳食功能因子。

长柱金丝桃抗抑郁作用有效部位的实验研究

在长柱金丝桃抗抑郁药效学研究的基础上,对长柱金丝桃抗抑郁有效部位进行了筛选研究.选用小鼠强迫游泳模型对长柱金丝桃抗抑郁有效部位进行了筛选研究.实验结果表明30%乙醇洗脱部分能明显缩短小鼠强迫游泳绝望时间,并在此基础上判断30%乙醇洗脱部分为长柱金丝桃抗抑郁有效部位.首次研究了长柱金丝桃抗抑郁有效部位,为合理开发和利用资源提供依据.

红旱莲总黄酮的超声波提取工艺研究

通过单因素试验和正交试验,研究乙醇浓度、料液比、超声时间、超声温度对红旱莲总黄酮提取率的影响。结果表明:影响红旱莲总黄酮提取率因素的主次关系是料液比>乙醇浓度>超声温度>超声时间,最佳工艺条件为乙醇浓度90%、料液比1∶20、超声时间35min、超声温度70℃。通过与传统醇提法相比,超声波法提取时间缩短了3/4,而总黄酮提取量提高了30%。

红旱莲总黄酮的含量分析

目的测定红旱莲中总黄酮的含量。方法以芦丁为对照品,用分光光度法于410 m处测定红旱莲中总黄酮的含量。结果红旱莲总黄酮含量为2.75%,芦丁在12.688-76.128 mg·L^-1（r=0.9999）范围内线性关系良好,平均回收率为97.38%。结论该测定方法简便易行,准确可靠,可作为红旱莲总黄酮质量控制的方法。

不同生境对黑龙江省野生长柱金丝桃生长状况的影响

通过对不同生境野生长柱金丝桃伴生植物的株高及茎粗进行研究,发现伴生植物类型与生长环境有关。其中,草甸中野生长柱金丝桃的伴生植物以禾本科植物为主,而林缘、路旁野生长柱金丝桃的伴生植物以双子叶植物为主;而且,潮湿草甸中的野生长柱金丝桃的株高为(124.16±3.74)cm,茎粗为(5.91±0.2)mm,明显高于坡地草甸中生长的野生长柱金丝桃。这主要与野生长柱金丝桃生长环境中的土壤条件有关,因此在引种栽培中要注意肥水管理。

大孔树脂分离纯化红旱莲黄酮

通过静态吸附和解吸实验,筛选适合分离纯化红旱莲黄酮的大孔吸附树脂并确立纯化工艺参数。结果表明,NKA-9型大孔吸附树脂是性能良好的红旱莲黄酮吸附剂,其最佳吸附条件为样液初始浓度3.5mg.mL-1,样液pH 6.0,吸附温度35℃;最佳解吸条件为解吸乙醇体积分数60%,解吸液料比101(60%乙醇溶液大孔吸附树脂,mL.g-1)。

不同采收期及药用部位的长柱金丝桃中有效成分的含量变化

目的考察长柱金丝桃药用部位、采收期对金丝桃苷和金丝桃素的含量变化。方法采用HPLC法,色谱柱为Agilent Zorbax Extend-C18(250mm×4.6mm,5μm),金丝桃苷的流动相为乙腈-0.4%磷酸梯度洗脱,柱温为室温,检测波长360nm,流速1.0mL·min-1;金丝桃素流动相为甲醇-0.1mol·L-1磷酸二氢钠(90∶10),柱温为室温,流速为1.0mL·min-1,检测波长590nm。结果长柱金丝桃花中金丝桃苷及金丝桃素的含量最高;长柱金丝桃在5月中旬其有效成分含量达到最高,后又逐渐降低。结论长柱金丝桃中金丝桃苷和金丝桃素的含量随着采收时间的不同而不同,而且不同器官中含量差异显著。

红旱莲黄酮的色谱分析及酪氨酸酶抑制作用

采用高效液相色谱技术分析了纯化后的红旱莲黄酮中的主要黄酮组分,通过测定抑制率和抑制动力学,评估了红旱莲总黄酮对酪氨酸酶的抑制作用及抑制机理。结果表明,槲皮素是纯化后的红旱莲黄酮中的主要黄酮成分,其后依次为芦丁、黄芪苷、山奈酚、金丝桃苷和异槲皮素,其总黄酮含量为44.7%。与阳性对照曲酸相比,红旱莲黄酮是一种有效的酪氨酸酶抑制剂(IC50=46.99μg·mL-1),其抑制类型是典型的可逆竞争型,抑制常数Ki为34.07μg·mL-1。

王不留行和地区习用药的组织鉴别

对中国药典（１９９５年版）收载的王不留行及３种王不留行的地区习惯用药：薜荔、拔毒散、黄海棠进行了组织和粉末鉴别，绘制了组织图，并附有摘要检索表。

红旱莲石油醚部位的化学成分研究

目的研究红旱莲（Hypericum ascyron L.）石油醚部位的化学成分。方法采用薄层层析、硅胶柱层析、Sephadex LH-20和高效制备液相对其化学成分进行分离和纯化,通过理化性质和波谱数据分析鉴定化合物的结构。结果从红旱莲石油醚部位中分离得到11个化合物,分别为：木栓酮（friedelin,1）、正二十八烷醇（1-octacosanol,2）、十一酸（hendecanoic acid,3）、正二十八烷（octacosane,4）、正二十六酸（hexacosanoic acid,5）、正二十烷酸（arachidic acid,6）、furohyperforin（7）、furoadhyperforin（8）、十八烷酸（octadecanoic acid,9）、正三十烷酸（n-triacontanoic acid,10）和正十八烷（n-octadecane,11）。结论化合物1~11均为首次从该植物中分离得到。

延边地区长柱金丝桃中4种酮类成分的含量测定

为长柱金丝桃（Hypericum ascyron L.）质量标准的研究提供参考,在色谱柱为Diamonsil C18（250mm×4.6mm,5＂m）、流动相为甲醇乙腈0.6%磷酸水溶液、线性度（R2）高于0.999 0、回收率为92.15%～108.37%、相对标准偏差为1.57%～1.91%的条件下,使用高效液相色谱法同时测定了延边地区长柱金丝桃中芦丁、金丝桃苷、槲皮素和山奈酚4种成分的含量.实验结果表明：长柱金丝桃中芦丁、金丝桃苷、槲皮素和山奈酚的含量随区域有较大差异;本文方法准确、灵敏、可靠.

黑龙江省两种金丝桃属植物理化鉴别特征

目的 :为了探讨黑龙江省两种金丝桃属植物长柱金丝桃 (Hypericum ascyron L.)、乌腺金丝桃 (H.attenuatumChoisy.)理化鉴别特征。方法 :分别采用黄酮、皂苷、鞣质及金丝桃素的鉴别试验。结果 :黄酮定性反应均为阳性 ;皂苷定性反应表明均含三萜皂苷 ;鞣质的定性反应表明它们所含鞣质为缩合鞣质 ;金丝桃素的定性反应表明乌腺金丝桃含金丝桃素。结论 :二者理化鉴别特征有一定差别 。

长柱金丝桃对大鼠佐剂性关节炎治疗作用活性部位筛选研究

目的通过佐剂性关节炎大鼠模型,筛选出长柱金丝桃抗类风湿性关节炎的活性部位。方法制备长柱金丝桃石油醚、乙酸乙酯、正丁醇、水部位提取物,参照经典急性毒性实验方法确定长柱金丝桃不同提取部位的急性毒性;将佐剂性关节炎模型大鼠,随机分成7组:正常对照组、模型对照组、阳性对照组(雷公藤多苷)、石油醚部位组、乙酸乙酯部位组、正丁醇部位组、水部位部位组,每组8只。分组给药24 d,观察测定足肿胀度、关节炎评分指数、免疫器官(胸腺、脾脏)指数的变化。结果长柱金丝桃乙酸乙酯部位、正丁醇部位半数致死量(LD50)分别为22.13 g·kg^-1、31.37 g·kg^-1;水部位、石油醚部位最大给药量(MLD)分别为58.66 g·kg^-1、60.12 g·kg^-1;与模型组相比,乙酸乙酯部位给药组大鼠足肿胀度及关节肿胀指数显著降低(P<0.01);胸腺指数、脾脏指数均显著升高(P<0.01)。结论长柱金丝桃对大鼠佐剂性关节炎治疗作用活性部位为乙酸乙酯提取部位。

酶法辅助提取红旱莲中总黄酮工艺优化

优化酶法辅助提取红旱莲(Hypericum ascyron L.)中总黄酮的工艺。通过单因素试验和正交试验,研究酶解温度、pH、酶用量和酶解时间对总黄酮提取量的影响。结果表明,酶法提取红旱莲中总黄酮的最佳工艺条件为酶用量1.5%,酶解温度35℃,酶解时间1.0 h,pH 5.2,总黄酮提取率可达13.26 mg/g,比直接超声法提取提高了10.2%。

黑龙江省两种金丝桃属植物RAPD反应的初步研究

利用RAPD技术,对黑龙江省金丝桃属两种植物进行DNA分子遗传标记鉴别,从30种随机引物中筛选出,对乌腺金丝桃、长柱金丝桃扩增具有较明显多态性的3种引物,进而从基因水平探讨其遗传本质。结果表明:引物S75、S76、S80可作为乌腺金丝桃、长柱金丝桃的高特异性引物,用这三种鉴别引物对样品的DNA进行PCR反应,经琼脂糖凝胶电泳,就可以准确鉴别。