长白山金丝桃属植物生态分化中的光合特性分析

对长白山地区两种金丝桃属植物长柱金丝桃(Hypericum ascyron L.)与乌腺金丝桃(Hypericum attenuatum Choisy)的净光合速率、蒸腾速率与水分利用率等光合特性,光合色素含量以及其生境土壤中的水分含量之间的差异进行了比较研究.结果表明:长柱金丝桃的净光合速率在两个生长季均明显高于乌腺金丝桃,且差异极显著(P<0.01);长柱金丝桃的水分利用率显著高于乌腺金丝桃(P<0.01);长柱金丝桃中的叶绿素a、叶绿素b及总叶绿素的含量显著高于乌腺金丝桃(P<0.01).水分利用效率与净光合速率显著正相关,与蒸发速率及光合有效辐射显著负相关;蒸发速率与光合有效辐射显著正相关.利用主成分分析筛选出5个区分两植物差异的指标:净光合效率、蒸腾速率、光合有效辐射、温度和光合色素含量.长柱金丝桃的光合性能强于乌腺金丝桃,净光合速率与光合色素含量是导致两种植物生态分化的主要外部因素.

乌腺金丝桃对类风湿关节炎大鼠NO及VEGF表达的影响

目的:探讨乌腺金丝桃对类风湿关节炎大鼠的治疗作用。方法:以胶原诱导性(CIA)大鼠为实验模型,以雷公藤多苷为阳性对照药,观察乌腺金丝桃对类风湿关节炎大鼠血清中NO含量及滑膜组织中VEGF含量的影响。结果:与模型组比较,乌腺金丝桃和雷公藤多苷均能抑制类风湿关节炎大鼠NO及VEGF的表达(P<0.01或P<0.05)。结论:乌腺金丝桃可能通过降低类风湿关节炎大鼠过高的NO及VEGF含量发挥治疗作用。

乌腺金丝桃对抑郁症大鼠海马单胺类神经递质含量5-HT及5-HIAA的影响

目的:探讨乌腺金丝桃对抑郁症大鼠海马单胺类神经递质五羟色胺(5-HT)及五羟吲哚乙酸(5-HIAA)含量的影响。方法:建立大鼠孤养结合慢性不可预计性应激抑郁模型,用酶联免疫法测定药物对单胺类神经递质5-HT及5-HIAA含量的影响。结果:乌腺金丝桃高剂量组(2.88g/kg)能显著提高大鼠慢性不可预计性应激抑郁模型的单胺类神经递质5-HT及5-HIAA的含量。结论:乌腺金丝桃具有一定的抗抑郁作用,其抗抑郁作用可能与增加海马单胺类神经递质5-HT及5-HIAA含量有关。

乌腺金丝桃与黄芪配伍对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用

目的:探讨乌腺金丝桃与黄芪配伍对心肌缺血再灌注损伤的保护作用。方法:采用冠状动脉左前降支结扎法,建立心肌缺血再灌注损伤模型,测定大鼠血清中超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量;采用TUNEL法检测心肌缺血再灌注心肌细胞的凋亡;免疫组化法测定心肌缺血再灌注心肌细胞Caspase-3和TNF-α蛋白表达。结果:与M组比较,P组和H+AM1:2组能够明显提高SOD活性,降低MDA含量;与M组比较,H+AM1:2组明显降低大鼠心肌细胞凋亡指数,P组明显降低大鼠心肌细胞凋亡指数;sham组与M组比较,M组心肌细胞中Caspase-3和TNF-α的蛋白量明显增加,与M组比较,H+AM1:2组和P组能够明显降低Caspase-3和TNF-α的蛋白量。结论:乌腺金丝桃与黄芪配伍对缺血再灌注损伤有一定的保护作用。

乌腺金丝桃对佐剂性关节炎模型大鼠血清中IL-17、PGE2、MMP-9、IFN-γ含量的影响

目的:探讨乌腺金丝桃治疗类风湿关节炎的作用机制。方法:复制佐剂性关节炎(AA)大鼠模型,随机分为空白组、模型组、乌腺金丝桃高剂量组、乌腺金丝桃低剂量组、雷公藤多苷片阳性对照组,采用酶联免疫(ELISA)法检测各组大鼠血清中细胞因子白介素17(IL-17)、前列腺素E_2(PGE_2)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)、干扰素γ(IFN-γ)的含量。结果:乌腺金丝桃高剂量组和低剂量组AA大鼠血清中IL-17、PGE_2、MMP-9、IFN-γ的含量与模型组相比显著降低(P<0.05或P<0.01)。结论:乌腺金丝桃治疗类风湿关节炎的作用机制可能与降低IL-17、PGE_2、MMP-9、IFN-γ含量有关。

乌腺金丝桃与当归配伍对MIRI大鼠保护作用及其相关机制的实验研究

目的:探讨乌腺金丝桃与当归配伍对大鼠心肌缺血再灌注损伤(MIRI)的保护作用、血清中GSH-Px活力及心肌细胞凋亡蛋白Bcl-2、Bax表达的影响。方法:采用乌腺金丝桃与当归单味药及配伍比例1:1、1:2、2:1各组分别作用于MIRI大鼠,观察各给药组对MIRI大鼠心肌病理形态影响,及血清中SOD、MDA含量、NO活力的影响,筛选出对MIRI大鼠心肌具有最佳保护作用的配伍组合。利用GSH-Px试剂盒测定验证抑制氧自由基程度,采用免疫组化法检测Bcl-2、Bax蛋白表达。结果:2:1组可明显改善模型大鼠心肌病理形态,明显减少心肌细胞凋亡,增加SOD活力及降低MDA含量明显,NO含量明显增加(P <0. 01);与模型组比较,2:1组可提高GSH-Px活力(P <0. 05);与模型组比较,2:1组大鼠心肌Bcl-2蛋白表达明显上调,Bax的蛋白表达明显下调(P <0. 01)。结论:2:1组对MIRI具有明显的保护作用,2:1组可提高GSH-Px活力,明显上调模型大鼠心肌Bcl-2蛋白表达,下调Bax的蛋白表达,说明其可通过抑制氧自由基生成以及细胞凋亡而发挥抗心肌缺血再灌注损伤的作用。

药用植物乌腺金丝桃叶片总RNA的提取方法比较

为了探明乌腺金丝桃叶片总RNA的最佳提取方法,比较了Trizol试剂法、CTAB法、改良CTAB法、异硫氰酸胍法和改良异硫氰酸胍法提取乌腺金丝桃叶片总RNA的质量。结果表明,5种RNA提取方法均能从乌腺金丝桃叶片中提取出RNA,但以改良CTAB法提取RNA的质量最好,纯度、得率最高,无降解,其RNA的OD260/OD280为1.98,OD260/OD230为2.29,质量浓度为561μg/mL,28SrRNA和18S rRNA的电泳图条带清晰,完整性较好。因此,改良CTAB法,适用于乌腺金丝桃叶片总RNA的提取。

乌腺金丝桃与当归配伍对心肌缺血再灌注损伤大鼠心肌HSP70、NF-κBp65表达影响

目的观察乌腺金丝桃与当归配伍(金归)干预后的心肌缺血再灌注损伤(MIRI)大鼠心肌细胞中HSP70及NF-κBp65的表达,探讨HSP70与NF-κBp65在MIRI大鼠细胞凋亡或脂质过氧化损伤等进程中的调控作用及机制。方法金归2∶1组作用于MIRI大鼠,采用免疫组化法及荧光定量PCR检测方法观察大鼠心肌HSP70、NF-κBp65蛋白及基因表达水平的影响。结果与模型组比较,2∶1组可明显提高HSP70蛋白的表达,减弱NF-κBp65蛋白活化,HSP70mRNA水平上调,NF-κBp65mRNA水平显著降低,差异均具有统计学意义(P<0.01)。结论金归2∶1组抗MIRI的机制可能与提高HSP70的表达以抑制NF-κB p65通路、抑制心肌细胞凋亡或脂质过氧化损伤等有关。

黑龙江省乌腺金丝桃资源学调查

目的:明确黑龙江省乌腺金丝桃的资源分布,为合理开发利用乌腺金丝桃提供科学依据。方法:查阅资料与实地考察黑龙江省乌腺金丝桃的群丛类型,并采用样方调查法调查了单位面积蓄积量。结果:乌腺金丝桃所在的植物群丛为:榛子灌丛,单位面积蓄积量为5.60 kg/667m2。结论:乌腺金丝桃在黑龙江省分布少,资源有限,应在人工栽培方面做进一步研究。

乌腺金丝桃茎尖离体培养基激素配比筛选

为寻求乌腺金丝桃的高效人工繁殖方法,以乌腺金丝桃茎尖作为外植体,筛选初代诱导、继代增殖、生根培养3个阶段的最佳培养基激素配方。结果得出,把经过消毒后的乌腺金丝桃茎尖切割成0.3 mm、周围带2~3个叶原基,转入MS+6-BA 3.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L+LH 500 mg/L培养基,分化率达到100%,能诱导出大量的健壮不定芽;然后将这些不定芽切割成1 cm小段转入MS+6-BA 2.0 mg/L+IBA 0.2 mg/L+GA_3 1.0 mg/L培养基,增殖效果最好;经过2~3次的继代增殖后,将增殖的大量苗木切割成2 cm小段转入到1/2 MS+IAA 0.2 mg/L生根培养基中,生根效果最佳,平均根数达到4.6,且根系粗壮,有利于今后出瓶移栽。

不同产地、不同物候期对乌腺金丝桃中总黄酮含量的影响

目的:探讨不同产地、不同物候期乌腺金丝桃中总黄酮含量的变化。方法:采用比色法测定了3个产地乌腺金丝桃在不同物候期总黄酮的含量。以总黄酮为技术指标筛选乌腺金丝桃药材的采收期、黄酮含量最高的产地。结果:以总黄酮成分为指标确定的产地、采收期为:佳木斯猴石山产,花盛期采收。结论:通过研究发现乌腺金丝桃药材以勃利县产花盛期采收总黄酮含量最高,对乌腺金丝桃的开发有一定指导意义。

赤霉素浸种对乌腺金丝桃种子发芽的影响试验

以乌腺金丝桃种子为试验材料,研究不同浓度赤霉素、不同浸种时间、不同温度、不同p H值对其种子发芽的影响,从发芽率及发芽势上进行分析,结果表明:在25℃,浸种24h,p H6.5,赤霉素500 mg/L浸种条件下,乌腺金丝桃种子发芽效果最好,发芽势为62.96%,发芽率为67.36%。

黑龙江省两种金丝桃属植物理化鉴别特征

目的 :为了探讨黑龙江省两种金丝桃属植物长柱金丝桃 (Hypericum ascyron L.)、乌腺金丝桃 (H.attenuatumChoisy.)理化鉴别特征。方法 :分别采用黄酮、皂苷、鞣质及金丝桃素的鉴别试验。结果 :黄酮定性反应均为阳性 ;皂苷定性反应表明均含三萜皂苷 ;鞣质的定性反应表明它们所含鞣质为缩合鞣质 ;金丝桃素的定性反应表明乌腺金丝桃含金丝桃素。结论 :二者理化鉴别特征有一定差别 。

乌腺金丝桃和长柱金丝桃生药鉴别研究

目的:研究乌腺金丝桃和长柱金丝桃的生药学鉴别特征并与贯叶金丝桃进行比较,为这3种金丝桃属植物的使用提供质量保证。方法:采用基源、性状和显微鉴别的方法对乌腺金丝桃和长柱金丝桃的原植物形态、药材性状及显微特征进行研究,并将结果与贯叶金丝桃进行比较,写出检索表。结果:长柱金丝桃、乌腺金丝桃和贯叶金丝桃3种金丝桃属植物在形态上主要在茎的高矮、叶上腺体分布、花的颜色及腺点分布和种子颜色及有无龙骨状突起方面不同;性状上三者主要在茎的长短、叶的排列及腺点分布、花的颜色及蒴果是否有腺点分布方面不同;显微特征的区别主要在茎叶是否有分泌细胞团和气孔是否有二联式方面。结论:可以从基源、性状和显微特征三方面区别长柱金丝桃、乌腺金丝桃和贯叶连翘,为正确使用这3种金丝桃属药用植物奠定重要理论基础。

栽培条件下乌腺金丝桃生长与发育节律

通过对栽培乌腺金丝桃(Hypericum attenuatum Choisy)进行形态与发育节律观测,并建立Verhaulst生长模型,研究了药用植物乌腺金丝桃栽培条件下的生长发育节律.结果表明:乌腺金丝桃株高在7月上旬达到峰值,平均为63cm;叶数也是在7月上旬达到最多;分枝出现在5月上旬,数量在7月上旬达到峰值;始花期在6月中旬,盛花期在7月初.株高、叶对数和分枝变化的Verhaulst模型分别为:H=73.902/(1+6.526×e^(-0.051(t-10))),L=27.11/(1+2.48×e^(-0.021(t-10))),B=19.922/(1+5.037×e^(-0.066(t-30))).

金郁欢汤剂灌胃对抑郁症小鼠抑郁样行为的改善作用及其机制

目的观察金郁欢汤剂灌胃对抑郁症小鼠抑郁样行为的改善作用,并探讨其机制。方法60只ICR小鼠随机分为control组、model组、JYH-L组(金郁欢低剂量)、JYH-H组(金郁欢高剂量)、fluoxetine组(氟西汀),每组12只,其中model组、JYH-L组、JYH-H组、fluoxetine组通过CMUS法建立小鼠抑郁症模型。造模完成后,JYH-L组小鼠给予0.2 g/kg金郁欢汤剂灌胃,JYH-H组给予0.8 g/kg金郁欢汤剂灌胃,fluoxetine组小鼠给予氟西汀悬浮液灌胃,control组和model组小鼠同期等体积生理盐水灌胃,每日1次,连续3周。采用糖水偏嗜实验观察各组小鼠抑郁样行为,以糖水偏嗜度表示。采用Nissl染色法观察小鼠海马区神经细胞形态、尼氏小体染色情况,使用JD-801形态学图像分析系统检测各组小鼠海马CA1区尼氏小体积分光密度(IOD)。采用实时荧光定量PCR法检测各组小鼠海马组织中散乱蛋白1(Dvl1)mRNA,采用Western Blotting法检测各组小鼠海马组织中Dvl1蛋白。结果control组、JYH-L组、JYH-H组、fluoxetine组小鼠糖水偏嗜度均高于model组(P均<0.05),JYH-H组、fluoxetine组小鼠糖水偏嗜度均高于JYH-L组(P均<0.05)。model组、JYH-L组神经细胞排列松散或缺失,尼氏小体被轻微染色;JYH-H组与fluoxetine组海马区神经元细胞排列的更密集、更整齐,神经细胞无核固缩深染现象,尼氏小体染色加深。model组小鼠海马CA1区尼氏小体IOD值低于control组(P<0.05),JYH-H组、fluoxetine组小鼠海马CA1区尼氏小体IOD值均高于model组、JYH-L组(P均<0.05)。model组小鼠海马组织中Dvl1 mRNA和蛋白相对表达量均低于control组(P均<0.05),JYH-H组、fluoxetine组小鼠海马组织中Dvl1 mRNA和蛋白相对表达量均高于model组、JYH-L组(P均<0.05)。结论高剂量(0.8 g/kg)金郁欢汤剂灌胃可改善抑郁症小鼠的抑郁样行为,金郁欢汤剂改善抑郁症小鼠抑郁样行为的作用机制可能与其有效成分可上调海马组织中Dvl1的表达水平有关。

基于β-catenin介导金郁欢抗抑郁的初步研究

目的:探讨金郁欢对抑郁小鼠行为的调节作用。方法:将60只ICR小鼠随机分为5组,control组、model组、JYH-L组、JYH-H组、fluoxetine组,每组12只。采用CMUS方法造模。利用旷场实验进行行为学研究,Nissl染色观察海马神经元形态总面积,免疫组织化学法和Western Blot法检测β-catenin蛋白水平,实时定量PCR检测β-catenin mRNA表达水平。结果:行为学旷场实验结果显示,各组小鼠水平移动得分差异无统计学意义(P>0.05);与control组比较,JYH-H组、fluoxetine组直立得分显著增加(P<0.01)。Nissl染色结果显示,与control组比较,model组海马区尼氏小体总面积显著降低(P<0.01);与model组比较,JYH-L组、JYH-H组尼氏小体总面积明显增加(P<0.05),fluoxetine组尼氏小体总面积明显增高(P<0.01)。免疫组织化学和Western Blot法检测结果显示,与control组比较,model组β-catenin蛋白表达量明显下降(P<0.01),与model组相比,JYH-L组、JYH-H组β-catenin蛋白表达显著升高(P<0.05),fluoxetine组β-catenin蛋白表达量亦升高(P<0.01)。实时定量PCR检测结果显示,与control组相比,model组β-catenin mRNA表达量明显下降(P<0.01);与model组相比,JYH-L组、JYH-H组β-catenin mRNA表达量明显升高(P<0.05),fluoxetine组β-catenin mRNA表达量明显升高(P<0.01)。结论:金郁欢能有效改善抑郁症模型小鼠的抑郁样行为,这种改善作用可能通过提高β-catenin表达实现。

乌腺金丝桃不同采收期不同部位中金丝桃苷含量变化研究

本试验采用HPLC法测定乌腺金丝桃不同采收期不同部位中金丝桃苷的含量。结果表明,金丝桃苷含量由低到高依次分布为:果实<花<嫩茎<叶;叶、嫩茎、果实中金丝桃苷含量最高的时期为7月份,花中为8月份。乌腺金丝桃的最佳采收部位是叶,最佳采收期为7月下旬。

反相高效液相色谱法测定乌腺金丝桃中伪金丝桃素的含量

样品(10.000 0 g)经80%(体积分数)乙醇溶液300 mL于70℃下超声提取35 min(超声功率225 W)。分取浓缩后的提取液总质量的10%,用80%乙醇溶解并定容至100 mL,经0.45μm PTEF微孔滤膜过滤后,进行反相高效液相色谱分离。以VP-ODS C18色谱柱为固定相,以不同体积比的0.006 mol·L-1的磷酸氢二钠-磷酸溶液(p H 6.5)和甲醇的混合液为流动相进行梯度洗脱。伪金丝桃素的质量浓度在0.21~200.0 mg·L-1的范围内与其峰面积呈线性关系,检出限为(3S/N)为0.040 mg·L-1。按标准加入法进行回收试验,回收率为95.3%~101%,测定值的相对标准偏差(n=6)均小于3.5%。

乌腺金丝桃叶斑病病原菌生物学特性研究

为探讨乌腺金丝桃Hypericum attenuatum叶斑病发生规律进行病原菌Alternaria sp.生物学特性研究。结果表明：适宜病原菌菌丝生长的碳源为葡萄糖和蔗糖,氮源为硝酸钾;适宜孢子萌发的碳源为麦芽糖,氮源为硝酸钙;菌丝和孢子萌发的适宜温度为20~25℃;p H7中性以及光照条件下更利于孢子萌发及菌丝的生长。