4-羟苯基维胺脂联合超声治疗对兔耳增生性瘢痕组织Bax蛋白表达的影响

目的探讨4-羟苯基维胺脂(N-4-hydroxyphenyl retinode,4-HPR)联合超声治疗对兔耳增生性瘢痕组织成纤维细胞凋亡与Bax蛋白表达的影响。方法建立兔耳增生性瘢痕模型,分别设立对照组、4-HPR组、超声组、4-HPR+超声组,兔耳瘢痕形成后进行4-HPR注射及超声治疗,采用免疫组化的方法观察真皮层成纤维细胞中Bax蛋白的表达,对比研究在兔耳增生性瘢痕实验性治疗过程中4-HPR联合超声治疗对成纤维细胞凋亡活性的影响。结果与对照组相比,兔耳增生性瘢痕组织在4-HPR和超声联合治疗时对成纤维细胞Bax蛋白的表达明显增加,差异有统计学意义(P<0.05),并且具有4-HPR浓度依赖性和超声剂量强度依赖性。结论 4-HPR联合超声治疗可能通过Bax途径促进增生性瘢痕组织真皮层的成纤维细胞凋亡,对兔耳增生性瘢痕有明显的防治作用。

曲古抑菌素抑制增生性瘢痕形成的实验研究

目的探讨曲古抑菌素(Trichostatin A,TSA)对兔耳增生性瘢痕的作用及对成纤维细胞周期和凋亡的影响。方法建立兔耳腹侧面瘢痕增生模型,一侧兔耳注射TSA(1.0μmol/L),另一侧注射生理盐水作为自身对照。观察不同时间瘢痕外形变化,组织学变化,检测bcl-2的含量的变化,分析各时间点瘢痕组织内细胞周期及细胞凋亡率的变化。结果随着药物作用时间延长,TSA组与对照组相比①瘢痕增生块厚度明显减小(P<0.05),质地变软。②镜下观察见成纤维细胞数目减少,bcl-2阳性细胞逐渐增多,30天时两组bcl-2阳性细胞所占比率都超过50%。③处在S期的细胞所占比例逐渐减少,细胞被抑制在G1/G2期,与对照组相比变化显著(P<0.05)。④凋亡细胞百分率则呈下降趋势,早期时明显高于对照组,30天时两组比较无明显差别。结论兔耳早期增生性瘢痕局部注射曲古抑菌素可抑制瘢痕增殖过程,使瘢痕纤维化程度减轻。

血卟啉单甲醚-光动力疗法诱导瘢痕成纤维细胞凋亡

目的探讨血卟啉单甲醚-光动力疗法（HMME—PDT）诱导瘢痕成纤维细胞（HSF）的凋亡效应。方法将手术切除的瘢痕组织进行原代培养，建立增生性HSF的传代细胞系，取第4～6代HSF爬片后分为HMME—PDT组（实验组）和对照组，Hoechst 33258染色后在荧光显微镜下观察HMME-PDT后HSF形态学变化；Annexin V—FITC和碘化丙啶（PI）双染后经流式细胞仪（FCM）检测HMME-PDF后HSF凋亡率和坏死率。结果HMMEPDT处理后核染色质高度凝聚，呈团块颗粒状，或呈波纹状、折缝样改变；Annexin V-FITC和PI双染结果表明，PDT后凋亡率显著升高[（34．82±1．42）％VN（3.12±0．28）%，P〈0．05]，并伴有细胞坏死的发生，但组内坏死率显著低于凋亡率[（14．65±1．02）％VS（34．82±1．42）％，P〈0．05]。结论经HMME-PDT（治疗参数：HMME：4ug／ml．照射波长630nm，功率密度10mW／cm2，能量密度2．5J／cm2）处理后HSF发生死亡，其中凋亡率显著高于坏死率，HMME-PDT能诱导原代培养HSF凋亡。

压力疗法对烧伤患者增生性瘢痕中细胞增殖与凋亡的影响

目的探讨压力疗法对烧伤患者增生性瘢痕（HS）中细胞增殖亡的影响，方法笔街尊位2010年9月-2012年9月收治的20例患者，深Ⅱ～Ⅲ度烧伤创向愈合后2周（HS形成初期）开始，每天穿戴由笔者单位康复医师跹身定做的压力衣20h以上，将其设为压力治疗组。另将笔者单位同期收治的深Ⅱ～Ⅲ度烧伤后HS形成3、6、12、24个月未接受任治疗的患者各5例，设为对照组。取压力治疗组治疗后3、6、12、24个月瘢痕切除植皮术中切除弃用的四肢、面部等处HS组织（每个时相点5例患者），取对照组患者入院后2～3d瘢痕切除植皮术中切除弁用的四肢、面部等处HS组织。按照随机数字农法选取前述40例患者中5例患者，取其术中弃用的腹部及大腿正常皮肤组织作为止常对照。采用免疫组织化学染色法检测HS及正常皮肤组织中增殖细胞核抗原（PCNA）的表达，原位末端标记法检测细胞凋亡：情况，实时荧光定量PCR法检测P57^kip2和细胞周期蛋白E的mRNA表达。对数据进行t检验、单因素方筹分析或LSD检验。结果（1）在正常皮肤组织中，仅可于表皮基底层及棘细胞层见PCNA阳性细胞；压力治疗组和对照组可于HS表皮基底层、棘细胞层、颗粒细胞层中下部及真皮中见到PCN阳性细胞。压力治疗组治疗后3、6、12个月HS中PCNA阳性细胞百分比分别勾（40．4±2.9）％、（28．2±6．2）％、（9．9±0．7）％，明显低下对照纰形成3、6、12个月HS中的（48．3±4．7）％、（36，2±3．2）％、（11．4±0．9）％（t值分别为3．186、2．559、2．880，P价均小于0．05）。（2）在正常皮肤组织中，仅可于表皮雎底细胞层见凋亡细胞；压力治疗绀及对照组HS表皮各层均可见捌亡细胞。压力治疗组治疗后6、12、24个月HS中凋亡指数分别为（20．4±1．2）％、（26．1±0．4）％、（26．6±1．0）％，明显高于对照绀形成6、12、24个川Hs的（16．2±1．5）％、（23．1±2．0）％、（24．8±J．1）％（t值分另Ⅱ为一4．904、一3．366、一2．606，，】〈0．05或P〈0．01）。（3）ni力治疗组治疗后3、6、12个月HS中P57kli,2mRNA的表达节分别为3．87±0．20、8．60±0．78、10．00±0．57，明显高j：对照组肜成3、6、12个川HS的3．34±0．15、6．36±0．29、9．34±0．12（t值分刖为一4．880、一6．014、一2．375，P〈0．05或P〈0．01）。正常皮肤组织P57kip2mRNA表达量与压力治疗绀治疗后12、24个月及对照组形成12、24个月HS中P57^kip2 mRNA农达髓相近（P觚均大于0．05）．，（4）压力治疗组治疗后3、6、12个川HS中细胞删期货白EtuRNA的表达量分别为19．30±0．18、12．77±0．30、9．2l±0．18，明显低于对照组形成3、6、12个月HS的19．79±0．34、154l±0．26、9．47±0．17（t值分别为3．186、2．559、2．880，P〈0．05或P〈0．01）。正常皮肷绀织绌胞圳期篮白EmRNA我达堪与压力治疗组治疗后12、24个月及对照组肜成12、24个JJIIsLfJ细胞川期蚩白EtuRNA表达最相近（P值均大于0.05）。结论压力疗法能通过有效抑制HS中细胞增殖同时促进其凋亡，从而加速HS的演变进程，起到抑制瘢痕增生的目的．