人工栽培桑黄HPLC指纹图谱及主成分含量测定

为建立人工栽培桑黄瓦宁纤孔菌的HPLC指纹图谱,采用化学计量学分析方法对其进行分析和筛选出桑黄的4个标志性成分,并以其中最主要成分Hypholomine B为指标建立含量测定方法。参照2020年版《中国药典》(四部)通则中高效液相色谱法,建立桑黄指纹图谱,利用“中药色谱指纹图谱相似度评价系统2004 A版”评价其相似度,确定共有峰,同时测定桑黄中苯乙烯吡喃酮类成分Hypholomine B的含量。结果表明,建立了10批桑黄的HPLC指纹图谱,共有12个共有峰,相似度均大于0.92。系统聚类分析(HCA)、主成分分析(PCA)和正交偏最小二乘判别分析(OPLS-DA)结果一致,将样品分为两类。在1.25~20.00μg范围内,Hypholomine B的进样量与峰面积具有良好的线性关系(R^(2)=0.9999);精密度、稳定性和重复性试验的相对标准偏差(RSD)值均小于2.0%(n=6);加样回收率为95%~99%,其RSD值为1.48%;10批桑黄样品中Hypholomine B的含量范围为0.15%~0.95%。指纹图谱与HCA、PCA和OPLS-DA相结合可全面地评价桑黄药材质量,该方法稳定、可靠,可为桑黄质量评价提供参考。

HPLC法同时评价不同桑黄提取物中3种主要化合物的含量

以95%的乙醇作为提取溶剂,对11种不同来源桑黄样品中的有效成分进行提取,应用高效液相色谱(high performance liquid chromatography,HPLC)对桑黄提取物中davallialactone、hypholomine B、inoscavin A含量进行检测。结果表明,davallialactone、hypholomine B、inoscavin A在2.5μg/mL^10μg/mL范围内线性关系良好(r=0.9989、0.9981、0.9999),精密度相对标准偏差(relative standard deviation,RSD)分别为0.49%、0.57%、0.75%,稳定性RSD为0.67%、0.66%、0.73%,重复性RSD为0.62%、0.58%、0.41%(n=5)。该方法精密度、稳定性和重复性良好。通过对比11种不同桑黄提取物中3种化合物的含量,发现在不同的桑黄提取物中3种化合物含量差异较大,可能与桑黄生长环境、生长年份以及培育方式有关。该研究为桑黄食药用菌的质量控制以及相关药物的研发提供一定的试验基础。

液态发酵桑黄菌丝体抗A型流感(H1N1)病毒之效用评估

本研究旨在利用细胞试验评估液态发酵桑黄(Sanghuangporus sanghuang)菌丝体萃取物之抗A型流感病毒(H1N1)的能力,并进而分析活性所在之分层。实验使用MTS法评估桑黄菌丝体萃取物分别在预防、共培养以及治疗三种试验中减轻病毒对于宿主细胞的毒杀性的效果。结果显示酒萃物优于水萃物,再将酒萃物进行层析分离,共获得四种分层,分别为水层(PlH2O)、1-丁醇层(PlBtOH)、二氯甲烷层(PlDCM)以及己烷层(PlHex)。其中,以PlBtOH、PlDCM两组在预防试验、共培养试验以及治疗试验中,皆可见显著提升细胞存活率之效果(p 【0.05)。对比四分层的UPLC图谱后发现,PlBtOH及PlDCM内皆含有较高的hispidin,PlBtOH另含有hypholomine B (HB),抗病毒试验中则以PlBtOH最强,PlDCM次之,因此推估液态发酵桑黄菌丝体之抗H1N1流感病毒功效可能来自于hispidin以及HB。