蚌肉多糖的提取分离及对UVB损伤的修复作用

为提高三角帆蚌采珠副产物的利用率,本研究开发利用蚌肉多糖(Hyriopsis cumingii Polysaccharide,HCP),探究了蚌肉多糖对正常细胞的增殖迁移效果和对UVB损伤细胞的修复作用。采用DEAE纤维素-52阴离子交换、葡聚糖G-100凝胶和纳滤法分离纯化蚌肉多糖,采用高效液相色谱、高效凝胶渗透色谱和红外光谱对各组分进行结构检测,并通过细胞增殖实验、细胞划痕实验、UVB损伤实验、蛋白表达检测探究多糖组分的抗UVB损伤效果及作用机制。结果表明,分离纯化得到了三个均一的多糖组分,其中组分2(HCP-2)是蚌肉多糖中对细胞增殖发挥主要作用的组分,且能够促进HaCaT细胞迁移;随着HCP-2浓度的增加,促进UVB损伤细胞活力恢复的效果也越明显;在样品浓度相同的情况下,修复效果优于保护效果;HCP-2上调了抗凋亡蛋白bcl-2表达,抑制了凋亡相关蛋白casp9、p-Akt、p-p38表达,说明HCP-2能够通过调控UVB损伤后的细胞凋亡来修复HaCaT细胞。综上所述,蚌肉多糖能够抑制细胞凋亡,为后续在食品、保健品等领域的开发应用提供理论基础。

三角帆蚌多糖对肉仔鸡生长性能、抗氧化及免疫功能的影响

为探究三角帆蚌多糖(Hyriopsis cumingii polysaccharides,HCP)对肉仔鸡生长性能、抗氧化及机体免疫功能的影响。随机将240只1日龄爱拔益加(AA)肉仔鸡分为4组,每组设6个重复,每个重复10只鸡。正常对照组(HCP-0)饲喂基础饲粮,三角帆蚌多糖低(HCP-1)、中(HCP-2)、高(HCP-3)剂量组分别在基础饲粮中添加200、400和800 mg·kg^(-1)剂量的HCP,试验期42 d。结果表明:1)与HCP-0组相比,HCP-2、HCP-3组肉仔鸡平均日增重显著提高,差异极显著(P<0.01),肉仔鸡平均日采食量和料重比在各组间无显著差异(P>0.05);2)与HCP-0组相比,HCP-2、HCP-3组肉仔鸡血清中总抗氧化能力(T-AOC)、总超氧化物歧化酶(T-SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性显著增加(P<0.05或P<0.01)、丙二醛(MDA)含量显著降低(P<0.05),HCP-1组仅T-SOD活性显著增加(P<0.01),过氧化氢酶(CAT)活性在各组间均无显著差异(P>0.05);3)HCP-2组肉仔鸡脾脏指数显著高于HCP-0组(P<0.05),其余各组间无显著差异(P>0.05),胸腺指数和法氏囊指数在各组间均无显著差异(P>0.05);4)在试验21 d时,HCP-2组肉仔鸡血清中IgG含量较HCP-0组显著增加(P<0.05),HCP-1、HCP-2和HCP-3组肉仔鸡血清中IgA含量均显著高于HCP-0组(P<0.05);在试验42 d时,HCP-2、HCP-3组肉仔鸡血清中IgG含量均显著高于HCP-0和HCP-1组,差异极显著(P<0.01),HCP-1与HCP-0组间无显著差异(P>0.05);试验21 d和42 d时血清中IgM含量在各组间均无显著差异(P>0.05)。综上可知,日粮添加HCP可以显著提高肉仔鸡的平均日增重、抗氧化性能和改善机体的免疫功能,本试验条件下,经回归方程分析,肉仔鸡饲料中HCP适宜的添加量为514~679 mg·kg^(-1)。

三角帆蚌多糖的微波辅助提取及脱蛋白工艺

运用微波辅助处理、热水浸提、乙醇沉淀、Sevag法脱蛋白的方法提取制备三角帆蚌多糖。在单因素实验基础上,运用正交实验对三角帆蚌多糖微波辅助提取及Sevag法脱蛋白的工艺参数进行优化。结果显示:三角帆蚌多糖微波辅助提取的最优条件为:水料比15 mL/g、提取温度50℃、微波处理时间150 s、微波功率1080 W。在此条件下,多糖的提取得率为4.06%。三角帆蚌多糖Sevag法脱蛋白的最优参数组合为:正丁醇与氯仿体积比0.20、正丁醇-氯仿混合液用量占多糖溶液的体积百分比20%、脱蛋白振摇时间10 min、脱蛋白次数8次。在此条件下,多糖的蛋白去除率、多糖保留率分别是52.24%和65.13%。

珠蚌多糖对实验性移植肿瘤及NK细胞活性的作用

目的研究珠蚌多糖对实验性移植小鼠肿瘤以及对自然杀伤细胞(NK细胞)活性的影响。方法采用两种小鼠移植性肿瘤模型,观察珠蚌多糖对在体肿瘤细胞生长的影响;通过脾淋巴细胞与K562肿瘤细胞的共培养,体外检测NK细胞的活性。结果珠蚌多糖200,100mg·kg^(-1)对小鼠S_(180)肉瘤的抑制率分别达到49.4％和47.1％,对C_(57),BL／6小鼠B_(16)BL_6黑色素瘤的押瘤率分别为39.1％和34.2％;显著提高S_(180)肉瘤小鼠免疫脏器胸腺指数、脾指数;体外10.100μg·mL^(-1)珠蚌多糖可增强NK细胞对K562细胞的抑制活性．结论珠蚌多糖对实验移植性小鼠肿瘤生长有明显的抑制作用,体外一定荆量范围内可诱导NK细胞活性。

三角帆蚌多糖的超声波辅助提取及体外抗菌活性

运用超声波辅助热水浸提、乙醇沉淀、Sevag法脱蛋白的方法提取三角帆蚌多糖。在单因素实验基础上,运用响应面法中的Box-Behnken设计对三角帆蚌多糖的超声辅助提取参数进行优化。牛津杯-抑菌圈法测量三角帆蚌多糖的体外抗菌活性。结果表明:超声波辅助提取三角帆蚌多糖的最优提取条件为超声功率600W、超声提取温度50℃、超声提取时间48min、水料比12mL/g。使用此操作条件,多糖的得率为4.61%。当质量浓度小于40mg/mL时,三角帆蚌多糖对大肠杆菌、藤黄微球菌无抑制作用;质量浓度大于10mg/mL时,对蜡样芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌均有抑制作用,并且呈现出剂量-效应关系。三角帆蚌多糖对3种细菌抑制作用的强弱顺序是:金黄色葡萄球菌>蜡样芽孢杆菌>枯草芽孢杆菌。

珠蚌多糖对四氯化碳诱导肝细胞损伤的保护作用

目的研究珠蚌多糖(HCP)对肝细胞损伤的保护作用及其机制。方法培养L-02型肝细胞,用四氯化碳(CCl4)体外诱导肝细胞损伤,检测培养上清液中天门冬氨酸转换酶(AST)和丙氨酸氨基转换酶(ALT)水平,测定上清液中丙二醛(MDA)的含量和过氧化物岐化酶(SOD)活力,MTT法检测细胞存活和增殖活性。结果珠蚌多糖(25,250及1000μg.L-1)剂量组均可明显降低由CCl4升高的肝细胞培养上清液中AST和ALT水平及MDA含量,还可提高CCl4降低的肝细胞存活率和SOD活力。结论提示珠蚌多糖对肝细胞损伤有直接保护作用,该作用可能与其抗氧化作用有关。

三角帆蚌多糖抑瘤作用的实验研究

目的 研究三角帆蚌多糖的抗肿瘤活性。方法 给荷HepA腹水瘤小鼠胃饲三角帆蚌多糖 (每日剂量 5 0 ,2 5 0和5 0 0mg/kg) 8d ,检测抑瘤率、胸腺指数和脾指数 ;采用3H TdR掺入法 ,检测三角帆蚌多糖对HepA腹水瘤细胞DNA合成的影响。结果 在上述三种试验剂量 ,三角帆蚌多糖对小鼠HepA腹水瘤的抑制率分别为 3 4.9%、48.6%和 5 1.0 % ;与对照组比较 ,试验组的胸腺指数分别提高 5 5 .6% ,61.1%和 77.8% ,脾指数分别提高 8.2 % ,12 .3 %和 16.3 % ;在离体细胞培养试验中仅高浓度组 (10 0 0 μg/mL)三角帆蚌多糖对HepA瘤细胞DNA合成和细胞增殖有显著的抑制作用 (P <0 .0 5 )。 结论 三角帆蚌多糖有一定的抗肿瘤活性 ,其作用机制可能与增强胸腺免疫功能有关。

蚌肉多糖对四氯化碳诱导急性肝损伤小鼠的保护作用

研究蚌肉多糖对四氯化碳诱导急性肝损伤小鼠的保护作用。将小鼠随机分为对照组、模型组、100 mg·kg-1蚌肉多糖组、200mg·kg-1蚌肉多糖组、护肝片组。实验组小鼠预防给药每天灌胃一次,连续8d。末次灌胃2h后,对照组腹腔注射调和油溶液,其他各组注射0.15%CCl4调和油溶液。测定血清ALT活性,肝匀浆NO含量和肝体指数,H&E染色观察肝脏组织形态学的改变。实验结果表明200mg·kg-1蚌肉多糖能显著抑制血清ALT活性和降低肝组织NO含量,组织形态学观察结果发现蚌肉多糖明显改善了肝细胞的水样变和脂肪变,阻遏炎性反应的发生,但对肝体指数无明显影响。因此,蚌肉多糖对四氯化碳诱导急性肝损伤小鼠有保护作用,作用机制可能与其抗炎作用有关。

三角帆蚌多糖制备及基本理化性质

为充分利用三角帆蚌资源、开发利用其中的多糖类物质,运用热水浸提、乙醇沉淀、Sevag法脱蛋白质、乙醇再沉淀的方法提取获得了三角帆蚌多糖(HCPS),提取率为3.5%左右。运用DEAE-纤维素-52色谱和葡聚糖G-100色谱对三角帆蚌粗多糖进行分离纯化,得到3个纯化组分(HCPS-1、HCPS-2和HCPS-3),3个组分HCPS-1、HCPS-2和HCPS-3的得率分别是26.9%、30.2%和3.9%。运用化学的、物理的方法测量分析了三角帆蚌粗多糖及其纯化组分的部分理化性质,包括总糖质量分数、蛋白质质量分数、硫酸基质量分数、相对粘度、单糖组成、相对分子质量以及红外光谱(FTIR)。HCPS-3具有较高的蛋白质质量分数、较高的硫酸基质量分数和复杂的单糖组成,这些与HCPS-1、HCPS-2明显不同。

三角帆蚌软体组织干燥工艺的考察

目的通过比较不同温度,干燥时间和摊层密度等与干燥工艺直接相关的因素,以三角帆蚌中多糖的含量为指标,得出规范的操作性较强的工艺参数。方法蒽酮-硫酸比色法。结果与结论最佳干燥工艺为摊层密度为2.5 kg/m2,温度为90℃,连续干燥2h后的三角帆蚌,测得三角帆蚌中总多糖含量为21%。

蚌肉多糖提取物抗UVB致人真皮成纤维细胞损伤的研究

利用人真皮成纤维细胞(HDF-a)和中波紫外线(306 nm)建立皮肤光损伤模型,以该模型考察蚌肉多糖提取物(HCP)抵御光损伤的能力,分别对其抑制氧化损伤和炎症损伤的功效进行评价。结果显示:质量浓度为0.1,1和10 g/L的HCP能显著提高光损伤HDF-a的存活率,最高可达86.63%;在抑制氧化损伤方面,HCP能有效提高细胞内SOD活性和GSH含量并降低MDA含量,增强细胞清除自由基的能力;在舒缓炎症方面,HCP能阻断NF-κB信号通路,从而抑制IL-6等炎症因子的释放。

蒽酮-硫酸比色法测定三角帆蚌软体组织多糖含量

目的测定三角帆蚌动物多糖的含量,为三角帆蚌质量控制及资源开发提供科学依据。方法以葡萄糖为对照品,采用硫酸-蒽酮比色法测定三角帆蚌多糖的含量。结果在580 nm波长处有最大吸收峰,葡萄糖在0.02～0.10 mg/mL范围内线性关系良好,r=0.9997,回收率100.02%,RSD为0.29%。结论该方法快速准确重现性好,可用于三角帆蚌多糖的含量测定。

三角帆蚌副产物中活性成分研究进展

三角帆蚌是中国特有的优质淡水珍珠养殖品种,在采珠过程中会产生大量的蚌肉、外套膜、蚌泪等富含营养物质的副产物。文章概述三角帆蚌采珠后的副产物中营养成分及特点,着重阐述三角帆蚌副产物中多糖、蛋白质、多肽等活性成分的研究现状,并对三角帆蚌副产物中活性成分的研究方向进行展望。