乌司他丁对热打击诱导人肠上皮细胞释放白细胞介素-8与p38信号通路的研究

目的 研究乌司他丁对热打击诱导人肠上皮细胞释放细胞因子的影响以及可能参与调控的信号通路.方法 用不同温度的热打击(39、41、43 ℃)1 h刺激培养的人肠上皮细胞株(SW480)后,继续于37 ℃下培养24 h,收集细胞和细胞上清液.另将细胞进行热打击(43 ℃,1 h),同时加用100 kU/L和1 000 kU/L的乌司他丁继续于37 ℃下培养24 h后收集细胞和细胞上清液;用酶联免疫吸附法(ELISA)检测上清液中白细胞介素-8(IL-8)的含量,用蛋白质免疫印迹法(Western blotting)检测细胞裂解液中p38蛋白表达.结果 低温度的热打击(39 ℃)对SW480细胞分泌IL-8没有诱导作用,但高温(41 ℃、43 ℃)可明显诱导IL-8水平的升高(均P【0.01);而乌司他丁可明显抑制热打击对SW480细胞IL-8的诱导表达作用(均P【0.01),尽管大剂量乌司他丁对IL-8的抑制作用较小剂量组更加明显,但两个剂量乌司他丁组间无明显差异.不同温度的热打击可诱导SW480细胞p38表达上调,并具有一定剂量依赖效应(均P【0.01).而乌司他丁不仅可以抑制SW480细胞p38的基础表达水平,并且小剂量的乌司他丁即可明显抑制热打击对p38的诱导表达作用(P【0.01),但两个剂量乌司他丁组间无明显差异.结论 乌司他丁可能通过降低p38表达来抑制热打击对肠上皮细胞释放IL-8的诱导作用,但同时也存在其他信号通路参与的可能,这为理解肠屏障细胞的炎症反应在重症中暑中肠道细菌和内毒素移位中的作用机制提供了一定的实验基础,也为乌司他丁作为免疫调节剂未来用于治疗重症中暑提供了实验依据.

血必净注射液对内毒素诱导急性肺损伤大鼠γ-干扰素/白细胞介素-4失衡的影响

目的 探讨血必净注射液对急性肺损伤(ALI)大鼠γ-干扰素/白细胞介素-4(IFN-γ/IL-4)比值失衡的影响.方法 将56只SD大鼠随机分为对照组、模型组和血必净组,后两组又分别分为给药后1、2、4 h 3个亚组,每个亚组8只.采用舌下静脉注射脂多糖(LPS)5 mg/kg建立ALI模型,血必净组注射LPS后腹腔注射血必净注射液10 ml/kg,模型组、对照组腹腔注射等量生理盐水.检测各组肺湿/干重 (W/D) 比值及血清IFN-γ、IL-4的水平和IFN-γ/IL-4比值.结果 模型组给药后各时间点肺W/D比值、血清IFN-γ、IL-4水平和IFN-γ/IL-4比值均较对照组显著升高(均P【0.01);血必净组大鼠肺W/D比值、血清IFN-γ和IFN-γ/IL-4比值均较模型组显著降低(P【0.05或P【0.01),血清IL-4水平均显著升高(均P【0.01).结论 血必净注射液可使LPS所致ALI大鼠失衡的IFN-γ/IL-4比值趋于平衡,减轻大鼠ALI的程度.

血必净注射液预先给药对内毒素诱导肺泡Ⅱ型上皮细胞分泌细胞因子的影响

目的 探讨血必净注射液对内毒素诱导大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞(ATⅡ)分泌细胞因子的影响.方法 原代培养ATⅡ,将细胞分为空白对照组(C组)、脂多糖(LPS)组、血必净5 mg/ml+LPS组(X1+LPS组)、血必净15 mg/ml+LPS组(X2+LPS组)、血必净45 mg/ml+LPS组(X3+LPS组)、血必净5 mg/ml组(X1组)、血必净15 mg/ml组(X2组)、血必净45 mg/ml组(X3组)8组进行实验,每组平行6孔.预先给予相应浓度血必净注射液,10 min后加入LPS,培养24 h后检测细胞培养液中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-8(IL-8)和单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)的浓度.结果 与C组比较,LPS组、X1+LPS组、X2+LPS组TNF-α、IL-8和MCP-1浓度增加(P【0.05或P【0.01);X3+LPS组、X1组、X2组和X3组差异无统计学意义(均P】0.05).与LPS组比较,X1+LPS组、X2+LPS组、X3+LPS组TNF-α、IL-8和MCP-1浓度随血必净剂量增加而进一步下降(P【0.05或P【0.01).结论 血必净注射液预先给予可使内毒素诱导ATⅡ分泌细胞因子TNF-α、IL-8和MCP-1明显下降,且呈剂量依赖性;而单纯使用血必净注射液无此作用.