IκB激酶β在肿瘤中的作用及其抑制剂的研究进展

近年来,IκB激酶β(inhibitor kappa B kinaseβ,IKKβ)在肿瘤发生发展过程中的作用逐渐被发现。IKKβ通过作用多种分子通路参与肿瘤细胞增殖、存活等过程,抑制IKKβ已被确定为治疗癌症有希望的手段。研究人员开发一系列IKKβ抑制剂,发现它们能够有效抑制肿瘤的生长,但目前尚无IKKβ抑制剂投入到临床上治疗癌症。在这篇综述中,我们将介绍IKKβ介导肿瘤发生发展及主要IKKβ抑制剂的研究进展。

电针通过调节IκB激酶β表达抑制局灶性脑缺血再灌注大鼠脑内炎症损害的机制

目的观察局灶脑缺血再灌注后大鼠脑内炎性损害的变化,探讨炎症反应中激活核因子-κB (NF-κB)信号通路的关键蛋白IκB激酶(IKK)β的启动作用及电针抑制炎性损害的机制。方法将雄性Sprague-Dawley大鼠240只按随机数字表法随机分为假手术组、模型组、电针组、IKKβ沉默组、IKKβ过表达组和IKKβ过表达+电针组,每组设再灌注后6 h、12 h、24 h、48 h和72 h共5个时间点。利用改良线栓法制备右侧大脑中动脉闭塞再灌注模型。利用基因沉默及基因过表达技术对IKKβ基因进行干预。结果与模型组比较,IKKβ沉默组神经功能评分升高(P <0.05),脑梗死体积减小(P <0.05),NF-κB p65激活受抑制,促炎因子含量降低(P <0.05)。与IKKβ沉默组比较,IKKβ过表达组上述结果均明显变差(P <0.05),且大脑缺血皮质区小胶质细胞明显活化。IKKβ过表达+电针组小胶质细胞活化及IKKβ激活明显受抑制。结论 IKKβ基因沉默能明显抑制NF-κB信号通路介导的大脑缺血皮质区的炎症反应,IKKβ过表达则缺血皮质区炎性损害程度较重。电针通过调节IKKβ活性从而抑制局灶脑缺血再灌注后的炎症损害。

IκB激酶β在非酒精性脂肪性肝炎发病机制中的作用

目的:探讨IκB激酶β(inhibit kappa B kinase beta,IKKβ)在非酒精性脂肪性肝炎(nonalcoholic steatohepatitis,NASH)大鼠肝组织中的表达及意义.方法:健康♂Wistar大鼠40只,随机分为正常对照组(n=20)和高脂模型组(n=20),分别给予标准饲料喂养和高脂饲料喂养.16 wk末空腹处死全部大鼠,收集血清和肝组织标本.检测血清中ALT、AST及ELISA法检测血清TNF-α水平;光镜下观察肝组织病理变化;RT-PCR和EMSA法分别检测肝组织IKKβmRNA表达和核因子-κB(NF-κB)活性改变.结果:模型组大鼠血清ALT、AST、TNF-α水平、肝组织IKKβmRNA表达及NF-κB活性均较正常对照组明显增强(96.63±14.2 U/L vs 39.50±12.2 U/L,156.13±14.7 U/L vs 71.25±14.4 U/L.48.23±3.4 U/L vs 6.74±1.3 U/L,0.85±0.03 vs 0.22±0.02.10.12±1.34 vs 1.58±1.23,P<0.01);病理则表现不同程度的脂肪变性、炎症、坏死及窦周纤维化与对照组相比有显著差异(25.63±7.21 vs 1.24±3.24,3.21±0.52 vs 0.49±0_36.6.26±1.86 vs 3.02±1.17,P<0.01).相关分析显示:肝组织IKKβmRNA的表达与NF-κB活性(r=0.930)、脂肪变性(r=0.681)和炎症坏死程度(r=0.864)以及血清TNF-α水平(r=0.762)正相关(P<0.05).结论:IKKβmRNA表达增加在NASH发病机制中发挥重要作用,其通过介导NF-κB活化,引起TNF-α的大量生成、释放,诱导加重NASH的发生发展.

壳聚糖磷酯酰胆碱对AD大鼠海马中诱导型一氧化氮合酶和IκB激酶β表达的影响

目的研究壳聚糖磷酯酰胆碱对大鼠海马内注射Aβ25-35诱导的阿尔茨海默病(AD)诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、IκB激酶β(IKKβ)表达和AD大鼠学习记忆能力的影响。方法双侧海马注射Aβ25-35建立AD炎性模型,采用Morris水迷宫和免疫组化方法分别观察大鼠的学习记忆能力和炎性因子iNOS、IKKβ表达情况。结果模型组大鼠的平均逃避潜伏期(AEL)、单位时间内跨越原平台次数和在原平台象限时间与对照组和药物组比减少,差异有统计学意义(P<0.05)。模型组大鼠海马iNOS和IKKβ阳性细胞表达明显高于对照组(P<0.01),药物组iNOS和IKKβ阳性细胞表达较模型组显著下降(P<0.05)。结论壳聚糖磷酯酰胆碱对AD大鼠脑海马部位炎症反应有一定的抑制作用,及提高AD大鼠学习记忆能力的作用。

IκB激酶β在脊髓损伤后炎症反应机制中作用的研究进展

IκB激酶β(IKKβ)是核因子κB(NF-κB)信号通路中的关键激酶。在脊髓损伤后,IKKβ被活化,NF-κB信号通路异常激活,产生大量炎症因子,对脊髓损伤后的恢复产生不利影响。本文主要对IKKβ的结构功能及其在脊髓损伤后炎症反应中的应用进行综述,试图寻找一种治疗脊髓损伤的新靶点。

急性缺血性肾损伤中IκB激酶β(IKKβ)的变化及其意义的初步研究

目的:通过建立大鼠肾脏急性缺血再灌注(I/R)及缺血预适应/再灌注(I/P+I/R)模型,初步研究不同的缺血方式后肾脏IκB激酶β(IKKβ)的变化及其与中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)的相互关系。方法:雄性SD大鼠摘除右肾、分离出左肾动脉后随机均分为3组:假手术组(sham组);缺血再灌注组(I/R组);缺血预适应+缺血再灌注组(I/P+I/R组)。分别用生化学检测血清肌酐(Scr)的变化,组织病理学评价肾小管损伤程度评分,用免疫荧光定量分析IKKβ的表达,免疫组织化学染色检测肾脏组织中NGAL的表达,免疫印迹检测肾脏组织中IKKβ、NGAL的表达。结果:Scr水平及肾小管损伤评分提示,I/R组肾脏组织病理改变明显,与sham组比较损伤程度重(P<0.01);与I/R组比较,I/P+I/R组损伤程度则明显减轻(P<0.05)。免疫荧光定量分析与免疫印迹检测IKKβ的表达提示,I/P+I/R组的表达明显高于sham组(P<0.01,P<0.05);I/R+I/P组较I/R组则明显减少(P<0.05)。免疫组织化学染色检测与免疫印迹检测NGAL的表达提示,I/P+I/R组的表达明显高于sham组(P<0.01,P<0.05);I/R+I/P组较I/R组则明显减少(P<0.05)。且IKKβ与NGAL两种蛋白的表达呈正相关(P<0.01)。结论:IKKβ参与了肾脏的缺血再灌注损伤,促进了肾损伤标志物NGAL的产生,肾脏缺血预适应抑制IKKβ的激活,减少NGAL的产生,与肾脏保护作用有关。

IκB激酶β在乳腺癌组织中的表达及意义

目的：检测IκB激酶β（IKKβ）在乳腺癌和正常乳腺组织中的表达并探讨其临床意义。方法收集2004年1月至2014年12月就诊于中南大学湘雅三医院的乳腺癌患者80例的手术标本，以同期10例正常乳腺组织手术标本作为对照，应用免疫组化法检测乳腺癌组织和正常乳腺组织中IKKβ的表达，分析其与乳腺癌临床病理参数的关系。结果乳腺癌和正常乳腺组织中IKKβ表达阳性率分别为62.5%（50/80）和10.0%（1/10），组间比较差异有统计学意义（P＜0.05）。IKKβ表达与乳腺癌T分期及淋巴结转移有关（均P＜0.05），与患者年龄、肿瘤组织学类型、病理分级及远处转移无关（均P＜0.05）。结论 KKβ表达与乳腺癌的发生发展有关，可能在乳腺癌的发生发展中发挥重要作用。

山莨菪碱对失血性休克肝枯否细胞IκB激酶-β的影响及意义

目的 :探讨 IκB激酶 β( IKKβ)在失血性休克肝脏损伤中可能的病理机制以及山莨菪碱 ( 6 5 42 )的治疗作用。方法 :通过失血性休克和内毒素双项打击制备家兔休克模型 ,采用原位杂交方法 ( ISH)结合原位定量分析检测肝枯否细胞 ( KC)中 IKKβ的 m RNA表达 ;用凝胶电泳迁移率改变分析法 ( EMSA)和酶联免疫吸附实验 ( EL ISA)分别检测 KC中 NFκB活性和细胞培养液上清中 TNFα含量 ,并进行肝脏组织的病理学光镜检查。结果 :休克组 KC中 IKKβ的 m RNA表达 ( 0 .2 1± 0 .0 3)、NFкB活性 ( 2 .2 9± 0 .2 5 )和培养液上清中TNFα含量〔( 5 6 0 .2 1± 31.0 4) ng/ L〕均较正常对照组明显增高 ( P均 <0 .0 1)。 6 5 42能明显降低 IKKβm RNA的表达 ( 0 .14± 0 .0 3)、NFκB的活性 ( 1.35± 0 .17)以及 TNFα的含量〔( 30 0 .79± 2 3.47) ng/ L〕,P均 <0 .0 1,并能减轻肝脏组织的损伤程度。结论 :IKKβ激活在失血性休克和内毒素导致的肝脏损伤中起关键作用 ;6 5 42通过抑制 IKKβ表达 ,影响 IKKβ、NFκB和 TNFα信号转导通路 ,发挥对失血性休克继发肝脏损害的保护作用。

IκB激酶研究进展

NF κB是一类具有重要生理功能的转录因子 ,能调节许多细胞基因的表达 ,在细胞的生理活动中具有重要作用。在静息细胞中 ,NF κB以无活性的形式存在于胞质中。受信号刺激后 ,NF κB被激活。IκB激酶在NF κB激活中起着重要作用。介绍了IκB激酶的组成。

IκB激酶在肝脏缺血再灌注中的作用

目的:探讨IκB激梅(IKK)在肝脏缺血再灌注(HIR)中的作用. 方法:Wister大鼠随机分为对照组、缺血再灌注组(HIR 组)、PDTC保护组(HIR+PDT组).HIR组将肝左叶及肝中叶入肝血流阻断60 min后再灌注.保护组先经阴茎背静脉注射PDTC 120 mg/kg-1后立即依HIR组致伤,对照组仅显露肝中叶及肝左叶肝蒂,不阻断,自阴茎背静脉注射无菌生理盐水1 mL.分别采用原位杂交、EMSA、免疫组化及赖氏法检测再灌注后1、6、12 h IκB激酶表达、NF-κB活性、TNF-α的表达及血浆中ALT含量. 结果:损伤后IκB激酶表达水平、NFκB结合活性、TNF- α表达水平、血浆中ALT含量升高;HIR+PDTC组与HIR 组相比较,IκB激酶表达水平、NF-κB活性、TNF-α表达水平、血浆ALT水平降低. 结论:HIR后肝内IκB激酶可促进NF-κB的高水平激活引起肝内TNF-α等炎症相关细胞因子表达增强,从而导致肝脏损伤.干预IKK-NF-κB通路可能是防止HIR后急性肝脏损伤发生、发展的一个有效途径.

IκB激酶IKKε的研究进展

IκB激酶(IKK复合体)是NF-κB信号转导途径中的重要调节因子。最近,对IKKε在免疫信号中的功能和作用机制的研究已经取得了显著的进步。此外,IKKε影响细胞的增殖和转化,因此也被列为致癌基因。IKKε基因敲除小鼠的研究已经说明了IKKε在炎症和代谢性疾病中的关键角色。本文将讨论IKKε在肿瘤及炎症、代谢性疾病中的作用,并探讨其作为一个新的治疗靶点的潜力。

IκB激酶在炎症与2型糖尿病中的作用

近年来糖尿病发病率显著增加．2型糖尿病以外周胰岛素抵抗、肝葡萄糖输出增加和胰岛素分泌减少为表现。核转录因子－κB（nuclear factor-κB，NF-κB）是调控基因转录的关键性因子．在机体免疫应答、炎症反应等多种生理、病理过程中发挥重要作用。NF-κB的过度表达可引起多种疾病。如炎症性疾病、哮喘、肺纤维化、肿瘤和艾滋病等。IκB激酶（IKBkinase，IKK）作为NF-κB通路中重要的激酶，其生物学特性及作用机制已成为研究的热点。

灯盏花素通过抑制IκB激酶β/核因子κB通路抑制耐药非小细胞肺癌细胞的作用及其机制

目的探讨灯盏花素对紫杉醇耐药非小细胞肺癌细胞的作用及其延缓紫杉醇耐药的相关潜在机制。方法用不同浓度灯盏花素作用A549细胞和紫杉醇耐药A549(A549/紫杉醇)细胞,采用MTT法检测灯盏花素对A549/紫杉醇细胞生长活力及对紫杉醇敏感性的影响;流式细胞术检测灯盏花素对A549/紫杉醇细胞凋亡及细胞周期的影响;免疫印迹法检测细胞凋亡、细胞周期相关蛋白表达;胞浆胞核分离实验检测灯盏花素对核因子(nuclear factor,NF)-κB p65核入位的影响;表面等离子共振(surface plasmon resonance,SPR)技术分析灯盏花素与IκB激酶β(IκB kinase β,IKKβ)的结合关系。结果灯盏花素可抑制A549/紫杉醇细胞生长活力且呈时间-浓度依赖性(P<0.05)。随着灯盏花素浓度的升高,紫杉醇对A549/紫杉醇细胞的半抑制浓度值逐渐下降(P<0.05)。与灯盏花素和紫杉醇单独作用相比,灯盏花素联合紫杉醇作用明显促进了A549/紫杉醇细胞凋亡,上调凋亡相关蛋白切割半胱氨酸蛋白酶-3、切割半多聚腺苷二磷酸核糖聚合酶表达,下调抗凋亡蛋白B细胞淋巴瘤2表达(P<0.05);联合作用显著增加了A549/紫杉醇细胞周期阻滞在G1期,降低细胞周期相关蛋白细胞周期素D1、周期素依赖性激酶4表达(P<0.05)。灯盏花素抑制IKKβ、IκB磷酸化,减少NF-κB p65核入位。灯盏花素与IKKβ野生型纯化蛋白直接结合,紫杉醇联用灯盏花素可逆转单纯紫杉醇对IKKβ/NF-κB通路的活化。结论灯盏花素能够抑制A549/紫杉醇细胞生长,阻碍细胞周期停滞在G1期,促进细胞凋亡,可提高A549/紫杉醇细胞对紫杉醇的敏感性。灯盏花素可能通过抑制A549/紫杉醇细胞中IKKβ、IκB磷酸化及NF-κB p65核入位,进而抑制IKKβ/NF-κB通路活化来延缓对紫杉醇的耐药。

RNA干扰介导的IκB蛋白激酶α及γ基因沉默对巨噬细胞分泌细胞因子的影响

目的:探讨IκB蛋白激酶α及γ基因沉默对巨噬细胞分泌的NF-κB依赖性的下游炎性因子表达的影响.方法:应用RNA干扰技术将IκB蛋白激酶α及γ基因沉默后,观察RAW264.7小鼠巨噬细胞经LPS刺激后,NF-κB的活化以及多种NF-κB依赖性的下游炎性因子的表达.结果:RNA干扰处理后RAW264.7巨噬细胞中IKKα及IKKγ基因表达出现明显下调,而对照组中IKKα及IKKγ基因表达无明显变化.经LPS刺激活化,IKKα和IKKγ表达随作用时间逐渐增强.IKKα及IKKγ基因沉默后,可导致TNF-α、iNOS、IL-10、IκBα等多种炎症相关基因表达的明显下调.结论:IKKα及IKKγ两种蛋白激酶参与NF-κB信号通路的调节,NF-κB信号通路的活化是全身性炎症反应的中心环节.

IκB激酶-β抑制剂的研究与开发

IκB激酶-β(IKK-β)与炎症和肿瘤的发生、发展密切相关。目前,IKK-β抑制剂的研究与开发已成为抗炎、抗肿瘤药物研究的一个新方向。近年来,相继报道了一些新型的合成或天然的IKK-β抑制剂,其中不乏一些高活性且具有药物开发前景的化合物。本文对新报道的IKK-β抑制剂进行了总结,并对这类结构化合物的开发做出展望。

大鼠血管平滑肌细胞IκB激酶2对血管舒缩调控的作用及机制

目的探讨血管平滑肌细胞IκB激酶2(IKK2)对血管平滑肌肌球蛋白轻链(MLC)激酶(MLCK)的调控作用。方法去除血管内皮的大鼠主动脉环由血管收缩剂去氧肾上腺素、KCl、U-46619、离子霉素、花萼海绵体诱癌素A预处理后,分别加入选择性IKK2抑制剂IMD0354、竞争性IKK2抑制剂SC-514,并设置IKK2抑制多肽对照组,采用Multi Myograph System计算机生物信号采集分析系统记录血管张力变化。将MCL与EGTA(为MLCK抑制剂)或对照组中分别加入IKK2、MLCK共孵育1 h,通过Western blotting检测MLC第19号丝氨酸的磷酸化水平。用SC-514舒张血管,观察SC-514舒血管效应的可逆性。结果 IKK2抑制剂IMD-0354和SC-514均能对常见缩血管因素引起的主动脉环的收缩产生舒张效应(P均<0.05)。MLCK抑制剂EGTA可显著抑制MLCK对MLC磷酸化作用(P<0.05)。IKK2亦可使MLC磷酸化,而加入EGTA对IKK2的磷酸化无抑制作用(P>0.05)。经SC-514处理产生血管舒张效应主动脉环,再被去氧肾上腺素处理后舒血管效应可逆转。结论 IKK2对MLC的收缩调控作用不依赖MLCK,且其抑制剂对血管平滑肌的舒张功能存在可逆性。

IkB激酶的研究进展

IkB激酶是核因子-kB/Rel蛋白参与一系列基因表达调控过程中最为关键的激酶。IkK包括分子量85kD的IkKα和分子量为87kDβ的IkK其多肽分为激酶区、亮氨酸拉链样结构和螺旋环状结构。正常情况下，IkK以IkKα，IkKβ和NIK三聚体复合物形式存在；NIK激活后可活化IKK而使IkBs磷酸化，其中IkKβ使IkKαSer32/36和IkKβSer19/23等效磷酸化，而IkKα使IkKαser32-36和IkBβSer23磷酸化。它们对IkKβSer19磷酸化都很弱；IkKα使IkBα磷酸化诱导其降解和NF-kB活化速度较IkKβ快但其强度仅为后者的1/20。

IκB激酶-β与慢性肝病

IκB激酶-β(IKK-β)是核因子-κB活化所必需的催化亚单位,在受到脂多糖、炎症细胞因子等刺激时呈高表达,通过调节炎症相关基因和抗凋亡基因的表达在慢性肝病的发生发展中起重要作用,应用IKK-β特异抑制剂可能有助于减轻相应的肝脏病变。

IκB激酶结构和功能研究进展

在哺乳动物中,核转录因子NF-κB家族包括五个成员:NF-κB1(p105/p50),NF-κB2(p100/p52),RelA(p65),RelB,and c-Rel。它们调控与炎症反应,细胞增殖分化及凋亡相关基因的表达。IKK(IκB激酶)是一个蛋白激酶复合体,属于丝/苏氨酸激酶,在核转录因子的活化过程中起着重要的作用。外部刺激因子通过激活IκB激酶(IKK),引起核转录因子的抑制蛋白IκB磷酸化,泛素化和降解,从而使核转录因子活化,进入细胞核内,调节相应基因的转录。此外,有很多研究也表明,IKK的组成性活化和细胞的恶性转化有密切关系。目前已经发现并克隆出了细胞因子诱导的IKK复合体的四个主要组分:IKKα、IKKβ、IKKγ和IKAP。本文综述了IKK的结构、功能,及其与肿瘤发病的关系。

慢病毒介导核转录因子-κB诱导激酶和IκB激酶连接蛋白基因沉默对人结肠癌细胞上皮-间质转化的影响

目的探讨慢病毒介导的核转录因子-κB诱导激酶和IκB激酶连接蛋白(NIBP)基因沉默后对人结肠癌HCT116细胞上皮-间质转化(EMT)的影响。方法通过DNA重组技术,进行设计并构建人NIBP基因的慢病毒载体以及无关序列的Lenti-EGFP慢病毒载体,感染HCT116细胞后分别为转染组(NIBP-RNAi组)和阴性对照组(NC组),而未予转染处理的HCT116细胞则为空白对照组(CON组)。将实验分为非肿瘤坏死因子-α(TNF-α)组和TNF-α组:非TNF-α组包括NIBP-RNAi组、NC组、CON组,TNF-α组包括NIBP-RNAi+TNF-α组(NIBP-RNAi+组)、NC+TNF-α组(NC+组)、CON+TNF-α组(CON+组),其中TNF-α组均予TNF-α进行干预。检测非TNF-α组NIBP mRNA及蛋白的表达情况,以及各组上皮性钙黏附分子(E-cadherin)和神经性钙黏附分子(N-cadherin)mRNA及蛋白的表达;采用倒置相差显微镜观察各组细胞形态的变化。结果 NIBP-RNAi组NIBP的mRNA及蛋白表达均显著低于NC组及CON组(P<0.05);与CON组比较,CON+组、NC+组的细胞发生明显的EMT,E-cadherin的mRNA和蛋白的表达均明显降低、N-cadherin的mRNA和蛋白的表达均明显上升(P<0.05),NIBP-RNAi组及NIBP-RNAi+组的细胞由间质细胞形态转变为上皮细胞形态,E-cadherin的mRNA和蛋白的表达均明显上升、N-cadherin的mRNA和蛋白的表达均明显降低(P<0.05);而CON组和NC组比较,以及CON+组和NC+组E-cadherin及N-cadherin的mRNA和蛋白表达比较,差异均无统计意义(P>0.05)。结论靶向下调NIBP基因表达可抑制人结肠癌HCT116细胞EMT的发生。