IAC-HPLC-ESI-MS/MS法测定不同产地柏子仁中4种黄曲霉毒素

目的建立IAC-HPLC-ESI-MS/MS法测定不同产地柏子仁Platycladus orientalis(L.)Franco中黄曲霉毒素B_(1)、B_(2)、G_(1)、G_(2)的含量。方法柏子仁70%甲醇提取物的分析采用HALO 90A C_(18)色谱柱(2.1 mm×100 mm,2.7μm);流动相0.1%甲酸-甲醇,梯度洗脱;柱温40℃;体积流量0.25 mL/min。利用高效液相色谱串联三重四级杆质谱法进行测定。结果黄曲霉毒素B_(1)、B_(2)、G_(1)、G_(2)在各自范围内线性关系良好(r>0.9985),平均加样回收率81.33%~97.92%,RSD 1.36%~15.02%。所测的14批柏子仁样品中,12批样品检测呈阳性,黄曲霉毒素污染率高达71.43%。结论该方法简便快速,重复性高,灵敏度好,适合柏子仁样品中黄曲霉毒素含量的检测。

2种检测粮食中呕吐毒素的免疫技术比较

对检测粮食中呕吐毒素的2种免疫技术,免疫亲合柱(IAC)-HPLC)法和免疫色谱法(速测卡)进行了比较,结果表明I:AC-HPLC法的最低检测限可达到0.1 mg/kg,相对标准偏差为8.76%～9.82%,回收率87.3%～93.6%,方法灵敏、准确;免疫色谱法的最低检测限为0.5 mg/kg,操作快速、简便,适合初筛。

HPLC法检测发酵玉米粉中的黄曲霉毒素B_1、B_2、G_1、G_2

发酵玉米粉用甲醇∶水(80∶20,V∶V)提取黄曲霉毒素(AFT),经免疫亲合柱(IAC)分离纯化、在线光化学衍生器柱后衍生化后,反相高效液相色谱(HPLC)荧光检测器测定AFT(B1、B2、G1、G2)含量。4种毒素在0.5ng/g和2ng/g2个水平下,样品加标回收率平均值分别为B188.0%和93.6%、B285.2%和85.3%、G192.4%和91.5%、G289.6%和85.6%;5次测定的标准差分别为:B12.5和6.3、B23.5和6.0、G12.8和9.0、G22.3和6.9;4种毒素的方法检出限均达到0.05ng/g。

免疫亲和色谱-高效液相色谱法测定河水和土壤中克百威、三唑磷和绿磺隆残留量

将河水或土壤样品的丙酮提取液通过串联的分别装有克百威、三唑磷和绿磺隆免疫亲和吸着剂的3支免疫亲和色谱柱(IAC)或同时装有上述3种吸着剂的多抗体IAC,对样品中克百威、三唑磷及绿磺隆3种农药进行分离。采用串联IAC分离时,在样品溶液过柱后,将串联的IAC柱分开,并用不同配比的甲醇-水溶液分别从3支IAC柱上洗脱农药,用ELISA和HPLC分别测得农药的含量。采用多抗体IAC分离时,用甲醇-水溶液洗脱后,用上述两种方法测得洗脱液中3种农药的含量。对2种分离方法作回收和精密度试验,两方法的回收率和重复性基本一致。

花生中乙草胺残留的免疫亲和柱净化-高效液相色谱分析

建立了免疫亲和柱净化-高效液相色谱-紫外检测器测定花生中乙草胺含量的方法。样品经过纯甲醇提取浓缩,用含有乙草胺抗体的免疫亲和柱(IAC)净化,甲醇洗脱。以C18柱为分离柱,乙腈-水(体积比75∶25,pH值3)为流动相对洗脱液进行高效液相色谱分离及紫外检测,紫外检测波长为215nm。结果表明:乙草胺IAC柱的吸附容量为0.556μg;仪器的检测限为15μg/L,方法检测限为3μg/L;乙草胺的质量浓度为20～500μg/L时与峰面积呈良好的线性关系,相关系数为0.9969;在5～50μg/kg添加水平下,经过IAC柱浓缩净化提取物,测得回收率在94.06%～102.5%之间,变异系数在2.55%～7.95%之间。

稻米中三唑磷残留免疫亲合色谱-高效液相色谱分析

目的提高三唑磷残留的监测效率。方法采用碳酰二咪唑(CDI)将SepharoseCL-4B活化并与纯化的抗三唑磷多克隆抗体共价偶联,合成免疫亲合色谱(IAC)吸附剂并制备对三唑磷具有特异性亲合力的IAC柱。对IAC条件进行了优化,选择0.02mol·L-1pH7.2磷酸盐缓冲液作吸附与平衡介质,60%(体积分数)甲醇水作洗脱剂。结果在试验条件下,IAC柱对三唑磷的动态柱容量达1.91μg·ml-1床体积,当标样溶液中三唑磷含量为2ng·ml-1时,经IAC柱富集的效率近250倍。稻米中添加三唑磷0.1μg·g-1,提取液以IAC柱分离富集,洗脱液采用高效液相色谱(HPLC)法测定,5次重复测定的平均回收率为102.5%,相对标准偏差4.44%。结论成功建立了三唑磷IAC-HPLC分析技术并用于稻米中三唑磷残留的测定。

免疫亲和色谱-高效液相色谱法测定土壤中氯磺隆残留

采用碳酰二咪唑(CDI)将SepharoseCL-4B活化并与纯化的抗氯磺隆抗体共价偶联,合成免疫亲和吸附剂并制备对氯磺隆具有特异性亲和力的免疫亲合色谱(IAC)柱。对IAC条件进行优化,选择0.02mol.L-1pH7.2磷酸盐缓冲液作吸附与平衡介质,80%(体积分数)甲醇水作洗脱剂。结果表明,在实验条件下,IAC柱对氯磺隆的动态柱容量达2.6!g.mL-1床体积。当标样溶液中氯磺隆含量为2.0ng.mL-1时,经IAC柱富集后浓度提高近250倍。土壤中添加氯磺隆0.10!g.g-1、5.0ng.g-1,提取液以IAC柱分离富集,洗脱液采用高效液相色谱(HPLC)法测定,5次重复实验的平均回收率分别为92.9%、94.8%,相对标准偏差分别为8.46%、8.41%。成功建立了氯磺隆IAC-HPLC分析技术并用于土壤中痕量残留氯磺隆的测定。

烯唑醇免疫亲和色谱柱的制备及其在样品前处理中的应用

将四甲氧基硅烷(TMOS)水解后与烯唑醇抗体聚合,采用溶胶-凝胶法合成了烯唑醇免疫亲和色谱(IAC)柱固定相,并用其制备了对烯唑醇具有特异性亲和力的IAC柱。对IAC柱条件进行了优化,选择超纯水作为吸附与平衡介质,30%～50%(体积分数)甲醇水溶液作为洗脱剂。结果表明:在优化条件下,IAC柱对烯唑醇的动态柱容量达125.4μg/g。在河水样品和水果样品中添加烯唑醇,经IAC柱净化富集,洗脱液采用高效液相色谱检测,河水中烯唑醇的平均回收率为90.36%～100.14%,相对标准偏差(RSD)为2.03%～6.08%;水果中烯唑醇的平均回收率为85.55%～94.02%,RSD为3.38%～6.78%。本研究为烯唑醇在河水、水果等样品中的残留分析提供了一种新的高效前处理手段。

血浆华法林HPLC测定法及心脏换瓣术后患者血药浓度监测初探

目的 建立反相 HPL C法测定血浆中华法林浓度 ,并探讨心脏瓣膜替换术后患者华法林血药浓度与抗凝疗效的关系。方法 血浆样品经二氯甲烷 -正己烷 ( 1∶ 9)萃取浓集等预处理后 ,于国产 YWG C18柱上 ,以甲醇 - 5 0 mm ol/ L醋酸铵缓冲液 ( p H2 .5 ) ( 70∶ 30 )为流动相分离 ,紫外 30 8nm波长测定。结果 华法林最低检测浓度为 2 0 ng/ m l,标准曲线线性范围 5 0～ 2 0 0 0 ng/ m l。血浆华法林萃取回收率 78.0 %～ 81.6 % ,方法回收率10 3.1%～ 10 6 .5 % ,日内 RSD 2 .33%～ 5 .46 % ,日间 RSD 5 .2 9%～ 7.73%。用本法监测 70例心脏换瓣术后患者 ,结果 INR值在推荐国人安全范围的 44例中 ,37例 ( 84.1% )患者华法林血药浓度在 6 16 .2± 15 4.8ng/ m l。

高效液相色谱法同时检测粮食中常见8种真菌毒素的含量

建立免疫亲和柱净化-高效液相色谱法同时测定粮食中黄曲霉毒素B1(aflatoxins,AFB1)、黄曲霉毒素B2(AFB2)、黄曲霉毒素G1(AFG1)、黄曲霉毒素G2(AFG2)、赭曲霉毒素A(ochratoxin A,OTA)、玉米赤霉烯酮(zearalenone,ZEN)、呕吐毒素(deoxynivalenol,DON)和T-2毒素的检测方法。样品经乙腈-水提取后,用免疫亲和柱净化,Agilent Elipse Plus C18(100 mm×4 mm,3.5μm)色谱柱分离,以甲醇-乙腈-水-乙酸为流动相,流速1 m L/min,柱温35℃,进样量20μL,检测系统为可变波长检测器串联光化学衍生器串联荧光检测器。根据信噪比为3的峰响应值,确定各真菌毒素的检出限为:AFB1 0.446 ng/m L、AFB2 0.152 ng/m L、AFG1 0.523 ng/m L、AFG2 0.334 ng/m L、ZEN 7 ng/m L、OTA 0.7 ng/m L、DON 200 ng/m L、T-2毒素100 ng/m L。样品中各真菌毒素的平均加标回收率,玉米为80.0%~104.5%,小麦为83.2%~102.8%,方法精密度为2.6%~10.2%。从样品前处理到分析整个过程耗时约2 h。本方法简便、快速、灵敏度高,适用于粮食中多种真菌毒素的快速测定。

绵羊血清中阿维菌素的高效液相色谱法测定

本文报道了测定绵羊血清阿维菌素的高效液相色谱法。样本经免疫亲合色谱净化后直接用高效液相色谱进行测定（ＵＶ２４５ｎｍ）。在２～１００ｎｇ／ｍｌ添加浓度范围内，样本添加回收率为９０．９±４．８％，变异系数＝８．４±５．６％。样本检测极限为２ｎｇ／ｍｌ。

免疫亲和柱-高效液相色谱法测定炒僵蚕中黄曲霉毒素

目的:采用免疫亲和柱-高效液相色谱法,对炒僵蚕饮片中的黄曲霉毒素B_(1)、B_(2)、G_(1)、G_(2)的残留量进行分析,旨在为炒僵蚕饮片质量标准的完善及其市场监管提供依据。方法:样品经过高速匀浆处理,经免疫亲和柱净化,采用高效液相色谱-柱后光化学衍生法测定。采用YMC-C_(18)(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,以甲醇-乙腈-水(32∶18∶50)为流动相,流速为1.0 mL·min^(-1),柱温为30℃,荧光检测器激发波长为360 nm,发射波长为450 nm,对7批炒僵蚕进行分析。结果:本研究采用的黄曲霉毒素B_(1)、B_(2)、G_(1)、G_(2)检测方法的线性关系、精密度、回收率良好,黄曲霉霉毒素G_(2)在多批样品检出,检出率为86%,有1批样品中黄曲霉霉毒素G_(1)含量较高,参照《中华人民共和国药典》(2020年版)黄曲霉毒素的限量标准,其黄曲霉毒素B_(2)、G_(1)和G_(2)总量超出限度规定。结论:本研究为首次采用免疫亲和柱-高效液相色谱法对炒僵蚕中黄曲霉素进行筛查,明确其存在安全风险,为炒僵蚕饮片中黄曲霉素的质控提供参考。

酶联免疫吸附结合免疫亲和柱-高效液相色谱法检测大米中黄曲霉毒素B_1的研究

对大米中两种检测黄曲霉毒素B1方法的结合使用进行了研究,即采用酶联免疫吸附法对大米中黄曲霉毒素B1进行初筛,对可疑样品采用免疫亲和柱-高效液相色谱法进行验证。样品经甲醇水提取、免疫亲和柱净化、高效液相色谱分离、碘柱后衍生、荧光检测器测定。结果表明,黄曲霉毒素B1线性关系良好,相关系数为0.9999,检出限为0.50μg/kg,回收率为89.4%~95.2%,RSD值为1.88%~3.05%。两种方法的结合应用,适用于较大批量样品的检测。

免疫亲和色谱高效液相色谱法检测鲟鱼肌肉中常山酮的残留

试验建立了由免疫亲和色谱-高效液相色谱方法检测鲟鱼肌肉中常山酮的残留。样品经胰蛋白酶酶解,乙酸乙酯提取,再用0.125mol/l的醋酸铵缓冲液分离,经免疫亲和色谱柱净化,以乙腈-乙酸铵缓冲液-水为流动相(含0.1%三乙胺),反相液相色谱-紫外检测法检测,检测波长243nm。在20～200μg/kg添加浓度的范围内,样品回收率分别为75.4%～82.0%,变异系数分别为0.7%～8.6%。方法检测限为10μg/kg。结果显示:本方法灵敏度高,干扰少,重复性好。

HPLC法测定澳洲酸奶中维生素B12的含量

〔目的〕旨在找到一种简单、有效和易行的方法来测定酸奶中维生素B12的含量。〔方法〕使用免疫亲和层析（IAC）萃取的高效效相色谱法（HPLC）。〔结果〕8种酸奶的维生素B12含量为14.9~50.5μg/kg,recovery值为94.2%,BCR-487法测定值为1.07μg/g（标准值为1.12μg/g）。〔结论〕所建立的方法可以作为测定酸奶中维生素B12含量的方法,并将用于建立澳大利亚食物成分表中维生素B12数据库。