鸡传染性法氏囊病病毒单克隆抗体的研究

用纯化的鸡传染性法氏囊病病毒 ( IBDV) CA毒株和 B87株混合抗原脾内免疫 BALB/C小鼠 ,取其脾细胞与 SP2 /0骨髓瘤细胞融合 ,采用间接 ELISA方法进行筛选 ,共检出 31个原始阳性孔 ,阳性率为 1 5.4%。选择其中 3个孔 ,分别进行 3次克隆 ,最后获得 3株杂交瘤细胞 ,命名为 B2 8、B3 4、C2 8。通过与其它禽源病毒的交叉试验证明 ,分泌的抗体均具有高度特异性。3株细胞的平均染色体数分别为 94、87、89条。3种单克隆抗体均无免疫沉淀特性。相加 ELISA试验结果表明 ,3种单克隆抗体识别的是病毒抗原上互不相同的表位。3株杂交瘤细胞的细胞上清和小鼠腹水单克隆抗体的ELISA效价分别达 1 :1 2 8～ 2 560和 1 0 -3～ 1 0 -6,其中 B3 4显著高于另 2株。通过中和试验证明 ,仅 B3 4单克隆抗体能特异中和 IBDV CA株。连续培养 2 1代 ,B3

传染性囊病病毒诱导细胞凋亡的初步观察

用１株ＩＢＤＶ强毒株感染易感小鸡，对病鸡法氏囊进行电镜观察及ＤＮＡ电泳分析，直接观察到病鸡法氏囊中Ｂ淋巴细胞凋亡的典型形态学特征和生化变化：染色质凝聚成团，集于核膜旁，胞膜与核膜出现凹陷，细胞拉长变形，最后细胞裂解成由膜包围着的小团，被网状细胞和巨噬细胞吞噬；感染ＩＢＤＶ２４～４８ｈ的法氏囊细胞总ＤＮＡ在电泳谱上呈梯状条带，而从正常的法氏囊提取的总ＤＮＡ在电泳谱上只有１条带。结果表明，ＩＢＤＶ感染小鸡之后，导致了法氏囊中Ｂ淋巴细胞的凋亡。作者据此推断，细胞凋亡是造成Ｂ淋巴细胞数量减少。