利用IBV重组N蛋白建立ELISA抗体检测试剂盒的研究

利用表达鸡传染性支气管炎病毒 Gray株 N蛋白的基因工程重组菌 ,表达 IBV - N蛋白 ,并利用表达载体上带有组氨酸标记的特点 ,应用金属螯合填料将其纯化。用纯化的 IBV- N蛋白作为包被抗原 ,成功地建立了一种检测血清中 IBV抗体的间接 EL ISA方法。确定抗原最佳包被浓度为 0 .5 8μg/ ml;被检血清的最佳稀释度为 1∶ 10 0 ;酶标二抗的工作浓度为 1∶ 10 0 0。确定了血清样品阴、阳性临界 OD值为 0 .14。与 IDEXX公司 IBV抗体检测试剂盒比较 ,结果表明自建 EL