放射性碘化IBZM的细菌内毒素检查法

目的:建立“放射性碘化IBZM”的细菌内毒素检查方法。方法:按“细菌内毒素检查法”操作。结果:样品对鲎试剂无干扰作用。结论:细菌内毒素检查法适用于检测“放射性碘化IBZM”。

神经受体显像剂放射性碘IBZM前体合成及碘标记

合成了苯酰胺类多巴胺Ｄ２受体显像剂Ｉ－ＩＢＺＭ的前体ＢＺＭ及非放射性ＩＢＺＭ，用氯胺－Ｔ法标记及用ＴＬＣ同时将游离碘、反应前体ＢＺＭ与产品Ｉ－ＩＢＺＭ分离，产品放化纯度＞９０％．（Ｓ）－（－）－１２５Ｉ－ＩＢＺＭ能与鼠脑纹状体膜受体制剂特异结合。

^(131)I-IBZM脑多巴胺D_2受体SPECT显像在帕金森病的临床应用价值

目的 探讨131I-IBZM脑多巴胺D2 受体SPECT显像在帕金森病中的临床应用价值。方法 对 12例帕金森病 (PD)和 4例正常对照者进行131I-IBZM脑多巴胺D2 受体SPECT显像。结果 131I -IBZM高度特异性地在双侧基底节浓聚。正常对照两侧无差别。 6例早期PD两侧积聚不对称 ,起病肢体对侧基底节放射性积聚明显高于对侧相应部位。病侧肢体对侧的BG/OC和BG/FC比值较同侧高 (P <0 .0 1) ;长期服用多巴制剂的 6例中晚期PD两侧积聚、BG/OC和BG/FC比值无明显差别 ,但均低于正常对照组 (P <0 .0 1)。结论 131I -IBZMSPECT显像可评价脑多巴胺D2 受体的功能状态 。

用^(125)I-β-CIT与^(125)I-IBZM体内放射自显影研究MPTP致帕金森病小鼠中枢多巴胺转运蛋白与受体变化

应用12 5I- β -CIT和12 5I-IBZM体内放射自显影技术研究了MPTP致帕金森病小鼠中枢多巴胺转运蛋白 (DAT)与多巴胺D2 受体 (D2 R)变化。结果表明 :对于给予MPTP ( 30mg kg·d)日数分别为 1、3、5、7d的小鼠 ,用药早期 ,DAT密度即表现为降低 ,而D2 R密度在早期未有显著改变。随着日数增加 ,D2 R密度表现为升高 ,受体呈超敏状态。提示联合应用DAT与D2 R显像剂同时进行SPECT显像 ,有利于临床PD病诊断与鉴别诊断以及评估黑质 -纹状体DA神经元的变性程度。

放射性碘化IBZM在大鼠体内的分布与代谢

多巴胺D3受体显像的研究是近几年来研究的热点，多巴胺D2受体显像剂是进行多巴胺D2受体显像的必备条件。作者利用新近合成的（s）－BZM进行放射性碘化标记制备具有与多巴胺D2受体高亲和力和高特异性的放射性配体IBZM，并研究其在大鼠体内的生物学分布和在有关组织中的代谢行为。放射性碘化IBZM的大鼠体内生物分布采用常规的方法进行；代谢研究则按照自行设计的离心萃取和硅胶薄层层析技术进行。结果显示：放射性碘化IBZM在多巴胺D2受体富集的脑组织中分布较高，并且其有机萃取相的放射性成分主要是原形产物（RCP≥90％），而周围非多巴胺D2受体官集的脑区放射性分布较低，放射性清除也快。由此提示放射性碘化IBZM是一种较理想的SPECT中枢多巴胺D2受体显像剂。在其显像研究中，需封闭甲状腺。

多巴胺D_2受体显像剂^(125)I-IBZM的合成与标记

合成了标记前体Ｓ－（－）－２－羟基－６－甲氧基－Ｎ－［（１－乙基－２－吡咯烷基）甲基］苯甲酰胺（Ｓ－（－）－ＢＺＭ）。光谱数据与结构相符。以Ｓ－（－）－ＢＺＭ为前体，用１２５Ｉ－ＮａＩ标记，成功地制备了Ｓ－（－）－３－１２５Ｉ－２－羟基－６－甲氧基－Ｎ－［（１－乙基－２－吡咯烷基）甲基］苯甲酰胺（Ｓ－１２５Ｉ－ＩＢＺＭ）。标记率大于８０％，放射化学纯度大于９０％，整个制备过程仅需４５ｍｉｎ，利于药盒化生产。

放射性碘化IBZM对狗脑的SPECT显像研究

利用放射性碘化ＩＢＺＭ ｛左旋－２－羟基－３－碘－６－甲氧基－Ｎ－ ［ （１－乙基－２－吡咯烷基） 甲基］ 苯甲酰胺｝ 和断层显像技术，进行大鼠生物分布和狗脑多巴胺Ｄ２ 受体显像研究，了解放射性碘化ＩＢＺＭ 脑多巴胺Ｄ２ 受体显像的组织分布特性及其受体的选择性， 以及放射性分布与脑血流灌注显像的差异，并了解受体显像的最佳时期。利用低浓度过氧化氢乙酸法制备放射性碘化ＩＢＺＭ，并进行大鼠体内的分布研究。同时，利用狗进行放射性碘化ＩＢＺＭ 及其与Ｈａｌｏｐｅｒｉｄｏｌ竞争性抑制显像的对比研究， 进行放射性碘化ＩＢＺＭ 和９９ｍ Ｔｃ－ＥＣＤ脑血流显像的对比研究， 以及延期显像研究。结果表明：放射性碘化ＩＢＺＭ 能选择性地显示多巴胺Ｄ２ 受体富集的纹状体等脑组织， 纹状体部位的放射性摄取可被Ｈａｌｏｐｅｒｉｄｏｌ竞争性抑制， 表现为纹状体部位的放射性洗脱加快， 并且， 其放射性分布与脑血流灌注显像有明显的差异。在注射显像剂后１～３ ｈ， 显像效果较佳。认为放射性碘化ＩＢＺＭ 是一种特异性的脑多巴胺Ｄ２ 受体显像剂， 在注射显像剂后１～３ ｈ可进行ＳＰＥＣＴ断层显像。

帕金森病模型大鼠脑多巴胺D_2受体放射自显影、病理形态学及行为的联合观察

应用脑立体定位技术，建立稳定、可靠、重复性好、与人类帕金森病的病理及行为学改变相似的偏侧大鼠模型。在此基础上，应用１２５Ⅰ－ＩＢＺＭ对其进行脑内Ｄ２受体分布的放射自显影研究。６只帕金森病大鼠病侧纹状体／额叶皮质放射性计数比值为５．３２±０．３７，较健侧及对照组的比值明显升高（Ｐ＜０．０５），与病理形态改变符合性好、且其增高的数值与阿朴吗啡诱导旋转的转数呈正相关（ｒ＝０．９５６），印证了早期帕金森病时Ｄ２受体的上调效应。１２５Ⅰ－ＩＢＺＭ作为Ｄ２受体配基可以很好地反映脑内Ｄ２受体的分布及变化，为将ＩＢＺＭ用于早期帕金森病的临床影像诊断提供理论依据。

帕金森病模型大鼠经药物治疗前后脑D_2受体与多巴胺含量的研究

应用125I－IBZM大鼠脑D2受体放射自显影、高效液相－电化学检测器检测纹状体多巴胺（DA）及其代谢产物含量，对经美多巴治疗前后的帕金森病（PD）模型大鼠进行对照性研究。结果表明：经美多巴治疗后损毁侧纹状体／小脑125I－IBZM摄取比值为7．23±0．67，比健侧增高17．22±3．94％，但与治疗前组及治疗空白对照组比较。明显下降（P＜0．01）；美多巴治疗组损毁侧纹状体DA等含量较治疗前组及治疗空白对照组明显增高（P＜0．05）。说明美多巴治疗可以提高偏侧PD模型大鼠损毁侧纹状体DA的含量，并可以阻止并反转损毁侧纹状体D2受体的上调效应。

吗啡戒断大鼠脑多巴胺转运蛋白及D2受体的研究

采用多巴胺转运蛋白(DAT)示踪剂125I-甲基-3β-(4-碘苯基)托烷-2β-羧酸酯(β-CIT)及D2受体示踪剂125I-左旋-3-碘-2-羟基-6-甲氧基-N[(1-乙基-2-吡咯烷)甲基]苯酰胺(IBZM)探讨吗啡戒断前、后大鼠脑突触前、后多巴胺(DA)系统的变化。吗啡戒断1、2、3天组大鼠(各10只)分别于连续给予吗啡(20mg/kg)8天后停止给予吗啡1、2、3天再进行实验;吗啡(20mg/kg)组及生理盐水对照组大鼠各12只;对照组大鼠只给予腹腔注射0.3mL生理盐水,共计8天。将吗啡组、戒断1、2、3天组及生理盐水对照组大鼠各进一步随机平均分为两组,分别用于125I-IBZM、125I-β-CIT脑内分布研究。结果:(1)吗啡戒断组大鼠自戒断第2天开始出现明显的腹泻症状,同时还伴有叩齿及寒战等症状出现。(2)在20mg/kg吗啡及戒断组的125I-β-CIT脑内分布中,吗啡组在纹状体(ST)、伏隔核(NAC)的分布明显高于戒断1、2、3天组和对照组(P<0.05),在额叶(FC)、海马(HIP)的分布也高于戒断组及对照组(P<0.05)。戒断1、2、3天组在ST、NAC及HIP的分布与对照组比较差异无显著性(P>0.05)。(3)125I-IBZM在吗啡依赖及戒断组的脑内分布显示:吗啡组在ST、NAC的分布明显低于戒断1、2、3天组和对照组(P<0.05);在HIP及皮层的分布也低于对照组及戒断各组(P<0.05)。戒断1、2、3天组在ST、NAC的125I-IBZM分布增加逐渐增高,其中戒断各组在ST的分布均低于对照组(P<0.05);在NAC戒断1天组仍低于对照组(P<0.05),而戒断2、3天组125I-IBZM在NAC的分布与对照组比较差异无显著性(P>0.05)。由此可得出结论:吗啡戒断组大鼠出现了明显的戒断症状。在吗啡依赖中ST、NAC及HIP等的DAT出现了上调,D2受体则出现一种下调的低敏状态,吗啡戒断使这种增高DA能的活动及DAT回落并趋于正常范围,并使NAC及ST下调的D2受体逐渐回升。

偏侧帕金森病大鼠纹状体多巴胺D_(2)R功能的放射自显影

目的观察偏侧帕金森病 (PD)大鼠纹状体多巴胺D2 受体 (D2 R)的功能变化 ,评价12 5I-IBZMD2 R显像的应用价值。 方法应用 6 -羟基多巴胺 (6 -OHDA)建立部分和完全损毁的偏侧PD大鼠模型 ,静脉注射12 5I -IBZM 5 0～ 80 μCi 2h后进行脑组织放射自显影 ;高效液相色谱—电化学法 (HPLC -ECD)检测纹状体多巴胺 (DA)及其代谢产物的含量 ;免疫组化酪氨酸羟化酶 (TH)染色观察黑质及纹状体的细胞和纤维。 结果偏侧PD大鼠损毁侧纹状体12 5I-IBZM摄取增加 ,部分和完全损毁模型的损毁侧较未损毁侧纹状体 /皮层 (ST/CX)比值分别增加了2 3%和 5 4% ;纹状体DA含量分别降低了 39%和 98% ;TH染色可见损毁侧黑质和纹状体TH阳性细胞和纤维明显减少。 结论偏侧PD大鼠模型损毁侧D2 R功能上调 ,且与损毁程度相一致 ;IBZMD2

早期帕金森病中多巴胺转运体的显像及其与D_2受体显像比较

目的 :了解早期帕金森病患者大脑内多巴胺转运体及多巴胺D2 受体的变化情况。材料和方法 :7例早期帕金森病患者和 7例正常人进行大脑12 3 I β CIT/SPECT显像 ;其中 5例进行12 3 I β IBZM /SPECT显像。计算纹状体与小脑的放射性比值 ,分析双侧纹状体中 β CIT和IBZM的特异性摄取。 结果 :7例患者症状对侧和症状同侧纹状体 18小时的 β CIT特异性摄取指数为 2 .3± 0 .4和 4.1± 0 .3 ,纹状体的非对称指数为 2 3 .3± 6.8;其中 5例患者症状对侧和症状同侧纹状体的12 3 I IBZM特异性摄取指数分别为 1.8± 0 .2和 1.7± 0 .2 ,非对称指数为 2 .0± 0 .1。结论 :早期帕金森病患者双侧纹状体中多巴胺转运体的丢失比D2 受体的变化更早 ,更明显。

MPTP诱发的帕金森病小鼠模型纹状体多巴胺D_2受体活性的放射自显影研究

目的 观察不同损毁程度的帕金森病 (PD)小鼠模型纹状体多巴胺D2 受体 (DR)功能变化 ,探讨12 5I IBZMD2 R功能显像的临床意义。方法 根据注射MPTP(30 0mg·kg-1·d-1)天数的不同将小鼠分为MPTP1,3,5和 7d模型组和对照组 ,静脉注射12 5I IBZM 2 0 μCi,1h后行放射自显影。高效液相色谱 电化学法 (HPLC ECD)检测纹状体多巴胺 (DA)及其代谢产物浓度。免疫组化酪氨酸羟化酶 (TH)染色观察黑质和纹状体的病理改变。结果 与对照组比较 ,MPTP损毁 1,3,5d组的纹状体 /皮层感兴趣区放射活性比值分别增高 8% ,16 %和 17% ,而MPTP损毁 7d组与对照组无明显差异。MPTP损毁各组的纹状体DA浓度分别降低 47% ,75 % ,95 %和 95 %。TH染色可见黑质TH阳性神经元随MPTP损毁加重而数量减少。结论 MPTP损毁的PD小鼠模型纹状体D2 R功能在损毁程度轻时逐渐增强 ,呈上调现象 ;而在损毁程度严重时则降至正常。表明在PD早期宜使用DR激动剂。在体动态监测纹状体的D2 R功能状态有助于了解在疾病的不同阶段PD患者对多巴制剂及DR激动剂的治疗反应性。

Comparative studies of D_2 receptors and brain perfusion inhemi-parkinsonism rats

The relationship between dopamine D2 receptors and brain perfusion in hemi-parkinsonism rats was studied. Hemi-parkinsonism rats were made by stereotaxic 6-hydroxy dopamine (6-OH-DA) lesions in substantia nigra(SN) and ventral tegmental area(VTA), apomorphine (Apo) which could induced the successful model rat rotates toward the intact side was used to select the rats, 125I-IBZM ex-vivo autoradiography analysis and 99mTc-HM-PAO regional cerebral biodistribution were used to evaluate D2 receptors and cerebral blood flow. The HPLC-ECD were used to measure striatum DA and its metabolites content. The lesioned side striatum DA and its metabolites HVA DOPAC reduced significantly than that of the intact side and seudo-operated group, striatum/cerebellum 125I-IBZM uptake ratio was 8.04+-0.71 in lesioned side of hemi-parkinsonism rats, significantly increased compared with the intact side and the seudo-operated group(p <0.05), 30.11+-4.53% enhancement as compared to the intact side, and also show good correlation with 30 min Apo induced rotation numbers (r=0.98), the regional cerebral blood flow study didn’t show significant difference between bilateral brain cortex area(p >0.05). These results indicated that in the 6- OH-DA lesioned side DA content decreased significantly and an up-regulation of striatum D2 receptor binding sites was induced in hemi-parkinsonism rats, which showed good correlation with rotation behavior induced by Apo. Comparing with cerebral blood flow, D2 receptor reflected by IBZM seems to be more specific and earlier to detect the cerebral functional impairment in experimental bend-parkinsonism.