柴胡皂苷D调控CaMKKβ/AMPK信号通路介导ICCs细胞自噬的机制

目的探讨柴胡皂苷D调控CaMKKβ/AMPK信号通路,在功能性消化不良中对胃肠道Cajal间质细胞(Interstitial cells of Cajal,ICCs)细胞自噬的作用及机制。方法分离大鼠原代ICCs细胞,谷氨酸刺激构建ICCs自噬模型,免疫荧光检测Ca2+水平。将原代ICCs细胞分为对照组、模型组、模型+柴胡皂苷D组、模型+CaMKKβ抑制剂组、模型+柴胡皂苷D+CaMKKβ抑制剂组。透射电镜观察自噬体超微结构,ELISA检测Ghrelin和SP的水平,免疫荧光检测Ca2+和LC-3Ⅱ的表达,Western blot检测LC-3Ⅱ/Ⅰ、CaMKKβ、p-AMPK、Drp1、MFN2、IP3R和RyR的蛋白表达水平。结果谷氨酸诱导的模型组ICCs中LC-3Ⅱ荧光表达增强。柴胡皂苷D干预可降低Ca2+浓度,降低CaMKKβ、AMPK和MFN2水平(P<0.01),增加LC-3Ⅱ/Ⅰ、IP3R、RyR、Drp1、Ghrelin和SP水平(P<0.01)。柴胡皂苷D联合CaMKKβ抑制剂STO-609干预后效果更显著。结论柴胡皂苷D可通过CaMKKβ/AMPK信号通路介导Ca2+外流,影响ICCs细胞过度自噬及胃肠动力相关因子的表达。

ICCs细胞在正常大鼠膀胱中的分布及对逼尿肌收缩的影响

目的研究正常SD大鼠膀胱不同部位ICCs细胞(interstitial cells of Cajal,ICCs)的分布及其对局部逼尿肌收缩的影响。方法分别于正常SD大鼠膀胱顶部、体部、底部及三角区取3mm×4mm逼尿肌组织进行免疫荧光组织化学法检测c-kit阳性细胞的表达情况;再于上述部位取2mm×7mm肌条进行张力测定实验,比较各部位肌条频率及幅度的变化,分析其与ICCs密度变化的相关性。结果正常膀胱中存在ICCs,三角区及顶部的ICCs密度较体部和基底部明显增加,差异显著(P<0.05);三角区和顶部以及体部和基底部的ICCs密度均没有显著区别(P>0.05);各部位肌条收缩频率和幅度不同,但顶部和三角区的肌条收缩频率和幅度较体部和基底部明显增大,差异显著(P<0.05),顶部和三角区以及体部和基底部的肌条之间则没有显著区别(P>0.05)。相关性分析结果表明逼尿肌肌条收缩频率和幅度与局部ICCs密度呈显著正相关性(P<0.05)。结论大鼠膀胱中存在ICCs,膀胱各部位ICCs的分布有显著差异,其与膀胱局部肌条收缩有密切关系。

大鼠不稳定膀胱中ICCs细胞中HCN蛋白表达的变化

目的研究HCN离子通道(hyperpolarization-activated cyclic nucleotide-gated cation channel,HCN)蛋白在膀胱Cajal间质细胞(interstitial cells of Cajal,ICCs)中的表达及在不稳定膀胱ICCs细胞中表达的变化,探讨ICCs细胞兴奋性变化与逼尿肌不稳定(detrusor instability,DI)的关系。方法①将30只大鼠随机分为正常对照(10例),逼尿肌稳定组(DS,n=12),逼尿肌不稳定组(DI,n=8):大鼠尿道近端结扎,建立膀胱出口梗阻(bladder outlet obstruction,BOO)模型。②对各组进行HCN和c-kit免疫荧光双标,确定HCN蛋白是否在ICCs细胞上存在及HCN表达的变化。③以Western blot法检测HCN蛋白表达量的变化。结果①免疫荧光双标显示,在c-kit阳性的ICCs细胞膜上,有HCN抗原的表达,c-kit阴性细胞未见HCN表达;与正常组相比,DI组、DS组HCN蛋白表达增加。②Western blot检测显示,与正常组相比,DI组、DS组的HCN表达增高,DI组增高显著(P<0.01)。结论大鼠膀胱ICCs细胞可表达HCN通道蛋白,且DI膀胱ICCs细胞HCN通道明显增多,由此导致的ICCs细胞兴奋性增高可能在DI发生中起重要作用。

P2X嘌呤受体在大鼠膀胱ICCs细胞中的表达

目的探讨P2X嘌呤受体各亚型在大鼠膀胱ICCs细胞(interstitial cells of Cajal,ICCs)的表达及意义。方法制备SD大鼠膀胱组织铺片及冰冻切片,通过免疫荧光法检测大鼠膀胱组织内ICCs细胞分布情况,并进一步采用免疫荧光双标法检测ICCs细胞上P2X嘌呤受体各亚型的表达。结果SD大鼠膀胱中的ICCs细胞主要集中于黏膜下层、肌束边缘以及肌束间,并相互连接呈网络状分布。在7种P2X嘌呤受体亚型中,ICCs细胞上可检测到P2X2和P2X5两种亚型表达。结论大鼠膀胱ICCs细胞可表达P2X2和P2X5两种嘌呤受体亚型,从功能学上证实嘌呤能信号对ICCs细胞功能有影响。

不稳定逼尿肌中ICCs细胞与逼尿肌收缩的关系

目的研究不稳定逼尿肌中ICCs细胞的数量、分布形式的变化及其功能改变对逼尿肌肌条收缩的影响,初步探讨ICCs细胞与逼尿肌不稳定的关系。方法近端尿道结扎法建立大鼠不稳定膀胱模型。分别于正常及不稳定膀胱的相同部位剪取3mm×4mm逼尿肌组织进行免疫荧光组织化学法检测c-kit阳性细胞的表达及分布情况;再于相同部位剪取2mm×7mm肌条进行收缩特性测定实验,并检测c-kit受体阻断剂对收缩的影响。结果不稳定逼尿肌中c-kit阳性细胞的数量较正常逼尿肌明显增多(P<0.05);正常逼尿肌中c-kit阳性细胞以散在分布为主,不稳定逼尿肌中以细胞网络形式存在;不稳定逼尿肌肌条的收缩频率和收缩幅度显著高于正常膀胱(P<0.05);加入Glevic后,不稳定逼尿肌肌条的收缩幅度显著减弱(P<0.05),频率无显著差异(P>0.05)。结论不稳定膀胱中ICCs细胞的数量明显增加,主要以细胞网络的形式存在;不稳定逼尿肌肌条收缩幅度和频率明显增高,但其收缩幅度可以被Glevic削弱,提示ICCs与逼尿肌不稳定的发生有密切关系。

ICCs细胞在糖尿病大鼠膀胱中的密度分布及其对糖尿病膀胱功能的影响

目的观察ICCs细胞(interstitial cells of Cajal,ICCs)在糖尿病(diabetes mellitus,DM)大鼠膀胱中的密度分布情况,探讨其在糖尿病膀胱逼尿肌肌条兴奋性改变以及膀胱功能改变中的作用。方法腹腔注射链脲佐菌素(strepto-zotocin,STZ)建立糖尿病SD大鼠模型。12周后,行充盈性膀胱测压,比较DM组大鼠与对照组膀胱残余尿量、最大膀胱容量、最大膀胱压力及膀胱顺应性变化;行离体逼尿肌肌条实验,比较肌条兴奋性与对照大鼠的差异;应用免疫组织荧光染色法检测2组大鼠膀胱ICCs细胞的密度分布情况。结果DM组大鼠膀胱残余尿量[(0.50±0.28)ml]、最大膀胱容量[(1.72±0.73)ml]和膀胱顺应性[(0.04±0.02)ml/cmH2O]较对照组明显增加(P<0.01),而最大膀胱压力明显降低(P<0.05)。DM组逼尿肌肌条收缩频率较对照组明显降低(P<0.05),而且收缩幅度有降低趋势。DM大鼠膀胱ICCs细胞数量较对照组明显减少(P<0.01)。结论DM大鼠膀胱中ICCs细胞数量减少可能是糖尿病性膀胱病逼尿肌肌条兴奋性降低及在体膀胱功能改变的重要原因之一。

基于G^4 ICCS系统的数据挖掘并行算法

针对传统决策树SPRINT(Scalable Parallelizable Induction of Decision Trees)算法不能处理海量地学数据挖掘的问题,设计实现了基于G4ICCS(Geology Geography Geochemistry Geophysics Information Cloud ComputingSystem)的决策树并行分类算法PSPRINT。该算法使用哈希表存储连续属性分割点两侧的数据记录,为并行节点的分割提供依据,在MapReduce架构下解决了海量地学数据挖掘问题。实验结果表明,在模拟的云计算环境下,决策树并行算法可以处理海量地学数据分类问题,并获得较好的稳定性和较高的处理速度。

胞外钙及胞内钙库钙在膀胱ICCs细胞自发性钙瞬变中的作用

目的观察离体活膀胱肌条铺片中卡哈尔间质细胞(interstitial cells of cajal,ICCs)自发性钙瞬变,并检测胞外钙及胞内钙库钙对ICCs细胞自发性钙瞬变的影响,探讨ICCs细胞自发性钙瞬变产生的机制。方法制作离体膀胱肌条铺片,生理液灌流保持肌条铺片活性。待肌条自发性收缩活动出现后,Fluo-4负载肌条铺片,激光共聚焦显微镜观察其中ICCs细胞自发性钙瞬变,随后观察尼莫地平(Nimodipine)、2-氨基乙基二苯硼酸盐(2-aminoethoxydip henylborate,2-APB)、雷诺丁(Ryanodine)、毒胡萝卜素(Thapsigargin)及无钙、高钙生理液对ICCs细胞自发性钙瞬变的影响,探讨ICCs细胞自发性钙瞬变产生的机制。结果可见离体活膀胱肌条铺片中平滑肌细胞和ICCs细胞均产生节律性自发性钙瞬变,平滑肌细胞钙瞬变频率较快,而ICCs细胞钙瞬变频率相对较慢。尼莫地平能完全抑制平滑肌细胞的自发性钙瞬变,但对ICCs细胞的自发性钙瞬变无显著影响。2-APB、雷诺丁、毒胡萝卜素及无钙生理液均可完全抑制ICCs细胞的自发性钙瞬变,高钙生理液可显著增加ICCs细胞自发性钙瞬变的频率。结论细胞外钙离子通过非L型钙离子通道入胞及细胞内钙库放钙均参与ICCs细胞自发性钙瞬变的产生。

膀胱ICCs细胞SCF/c-kit信号通路研究现状

膀胱ICCs细胞是Smet和Jonavicius等于1996年首先在豚鼠和人逼尿肌发现的类似于胃肠道Cajal间质细胞（In-terstitial cells of Cajal,ICC）的一种特殊间质细胞。它是泌尿系平滑肌蠕动的起搏者,在膀胱逼尿肌兴奋收缩过程中起着重要作用。最新研究表明SCF/c-kit通路与ICCs细胞形态和功能的维持密不可分,信号通路的异常会导致ICCs表型和功能的转变,这一发现为之后的尿动力方面研究提供了新的平台。

国际视野下的公民教育趋向--基于ICCS调查研究的分析

针对时代背景的变化、民主政治的发展、公民教育的新特点,目前国际教育成就协会(IEA)展开了第三次公民教育调查,即"国际公民与公民素养教育研究"(ICCS)。这一调查研究在20世纪70年代和90年代两次国际性的公民教育研究基础上进行了发展和完善。同时,这一评价框架的形成及研究特征体现出国际公民教育发展的趋势:更为关注多维公民身份的评价、主动公民的培养和区域评价模式的构建。

豚鼠膀胱中ICCs样细胞与逼尿肌自主兴奋收缩性的关系探讨

目的:观察在体外环境中使用ICCs(Interstitial cells of Cajal,ICCs)样细胞表面c-kit受体抑制剂Glivec后,豚鼠逼尿肌自主收缩活动的变化,探讨逼尿肌中ICCs样细胞的作用。方法:制作豚鼠膀胱逼尿肌肌条,并在Kreb液中孵育,在体外环境中添加c-kit受体抑制剂Glivec,通过张力换能器输入生理记录仪记录逼尿肌肌条自主收缩活动的变化。结果:与对照组比较,不同剂量Glivec孵育逼尿肌肌条后,逼尿肌肌条收缩幅度明显下降(100μmol/L:547.87±43.00mg,p<0.01,n=15;300μmol/L:197.47±39.20mg,p<0.01,n=15),逼尿肌肌条收缩频率也明显下降(100μmol/L:2.44±0.16次/分,p<0.05,n=15;300μmol/L:1.11±0.17次/分,p<0.01,n=15)。结论:ICCs样细胞在逼尿肌自发收缩中可能充当起搏细胞的角色。

越婢汤对逼尿肌不稳定大鼠膀胱ICCs细胞中HCN通道表达的研究

目的：研究越婢汤对逼尿肌不稳定大鼠膀胱ICCs细胞及HCN通道表达的影响。方法：将Wistar大鼠随机分为膀胱出口梗阻手术组和假手术组,6周后行尿动力检查筛选出手术组膀胱逼尿肌不稳定大鼠和假手术组膀胱逼尿肌稳定大鼠进行研究。将手术组随机分为越婢汤高、中、低剂量组、缩泉丸对照组、模型对照组,加上假手术组共6组,每组10-13只大鼠。给药14天后观察各组变化。用免疫组化方法测试膀胱ICCS细胞含量及HCN蛋白含量,并做出数据处理分析。结果：与假手术组相比,模型对照组大鼠膀胱ICCS细胞含量与HCN蛋白含量明显增多,具有统计学意义（P〈0.01）;与模型对照组相比,越婢汤干预后大鼠膀胱ICCS细胞含量及HCN蛋白含量减少,具有显著的统计学意义（P〈0.01）。结论：越婢汤可以通过调节膀胱兴奋性表达来改善膀胱逼尿肌不稳定。

ICCS学生评价体系在“英语影视赏析”课程中应用的实证研究

教学评估是英语教学过程的重要环节,也是英语教学设计的一个重要方面,科学合理的教学评估会对教学目标的实现产生直接的影响。该文以"英语影视赏析"课程的教学实践为实证研究对象,探讨ICCS学生评价体系中IC模块在该课程中的应用,探索过程性评估和终结性评估相结合的课程设计及应用方式。

“抗帕颗粒”通过PINK1/Parkin信号通路对帕金森小鼠结肠ICC线粒体自噬的影响

目的 探讨“抗帕颗粒”通过PINK1/Parkin信号通路对帕金森(PD)小鼠结肠Cajal间质细胞(ICC)线粒体自噬的影响。方法 MPTP腹腔注射技术用于制作PD小鼠模型,将其随机分为A组(空白对照组)、B组(PD对照组)和C组(PD “抗帕颗粒”组),每组10只。A组和B组接受生理盐水灌胃(1mL·d^(-1)),C组“抗帕颗粒”(40mg·kg^(-1)·d^(-1))的灌胃治疗。4个月后每组中随机取5只小鼠结肠组织被用于免疫组化检测,每组余下5只小鼠结肠壁组织被用于提取蛋白Western blotting法检测,检测项目为PINK1、Parkin的表达;透射电子显微镜观测结肠壁ICC细胞自噬情况。结果(1)经过免疫组化检测,B组和C组的PINK1和Parkin表达水平较A组显著上升(P <0.01);而C组的PINK1和Parkin表达水平较B组则显著下降(P<0.01);(2)经过Western blot检测,与A组相比,B组和C组的PINK1和Parkin表达水平均显著提高(P<0.01);最后,经过与B组对比分析,发现C组PINK1的表达水平没有明显变化,而Parkin的表达水平却有所下降(P<0.05);(3)透射电子显微镜观察发现,PD模型小鼠结肠ICC中存在自噬囊泡,“抗帕颗粒”干预后,这种囊泡的数量明显减少。结论 “抗帕颗粒”通过抑制PD小鼠肠道ICC过度自噬,保护细胞结构;PINK1/Parkin途径是实现这种神经保护作用的通路。

“抗帕颗粒”对帕金森病小鼠结肠ICC细胞及线粒体自噬相关蛋白Beclin-l/LC3B表达的影响

目的探讨中药“抗帕颗粒”通过调控Cajal间质细胞(ICC)及线粒体自噬改善帕金森病(PD)肠道动力障碍的作用机制。方法PD小鼠模型制作采用MPTP腹腔注射法,随机法分组:空白组(A组)、PD对照组(B组)和PD干预组(“抗帕颗粒”)(C组),每组10只。A、B组予生理盐水灌胃(1ml·d^(-1)),C组“抗帕颗粒”灌胃(40mg·kg^(-1)·d^(-1))。4个月后每组中随机取5只小鼠结肠组织被用于免疫组化检测,每组余下5只小鼠结肠壁组织被用于提取蛋白Western blotting法检测,检测内容c-kit、Beclin l、LC3B的表达;透射电子显微镜观测结肠壁ICC细胞结构。结果(1)免疫组化结果显示:与A组相比,B组、C组C-kit、Beclin1、LC3B表达水平均显著升高(^(a)P<0.01),与B组相比,C组C-kit、LC3B表达水平显著降低(^(c)P<0.01),而Beclin1的表达水平无显著变化;(2)Western blot结果显示,与A组相比,B组、C组Beclin1、LC3B、C-kit表达水平均显著升高(^(a)P<0.01);与B组相比,C组的Beclin1、LC3B、C-kit表达水平均显著降低(^(c)P<0.01);(3)透射电子显微镜观察显示,PD模型小鼠的结肠ICC中出现自噬囊泡,“抗帕颗粒”干预后PD模型小鼠自噬囊泡减少。结论“抗帕颗粒”通过抑制肠道ICC过度自噬,保护细胞结构;并且抑制了由ICC过度自噬导致的细胞程序性死亡而出现的ICC数量反应性增加;其主要作用是改善了ICC结构的异常。这可能是“抗帕颗粒”改善PD小鼠肠道传输功能的机制之一。

拜拉姆ICC模型在英语教学中的应用

从态度、知识、技能和批判文化意识四个维度阐述拜拉姆ICC模型,并深入分析模型中四个关键维度的具体内涵。同时,进一步探讨将拜拉姆ICC模型应用于英语教学的方法和效果,并强调多样化课程内容和活动设计对促进学生语言能力发展、跨文化意识和态度培养、跨文化交际技能全面发展的重要性。阐述拜拉姆ICC模型在英语教学中的具体应用。

个性化碘对比剂注射方案对提高肝脏增强图像质量一致性的价值

使用碘对比剂的腹部增强CT是腹部疾病诊断的重要手段,而碘对比剂的剂量、浓度及注射速率均可影响强化效果[1]。既往临床常使用对比剂固定注射速率,但可造成高体质量者对比剂相对总量不足及速率过慢,强化效果不佳,影响诊断.

基于SCF/c-kit信号通路探讨理气通便方对气滞型慢传输型便秘大鼠肠道动力的影响

目的 基于SCF/c-kit信号通路探讨理气通便方对气滞型慢传输型便秘(STC)大鼠肠道动力的影响。方法 将36只Wistar雌性大鼠按随机数字表法分为对照组6只和造模组30只。造模组采用“洛哌丁胺混悬液+夹尾刺激”复制气滞型STC大鼠模型,连续刺激14 d。当大鼠表现出激惹、易怒、烦躁等情况,正常喂养饲料时出现大便干硬、排便数量减少等表现时,说明气滞型便秘模型造模成功。将造模成功的大鼠按照随机数字表法分为模型组、西药组、低剂量组、中剂量组和高剂量组各6只,低、中、高剂量组分别按5.15、10.3、20.6 g/(kg·d)给予理气通便方药液灌胃;西药组按0.18 mg/(kg·d)给予琥珀酸普芦卡必利片混悬液灌胃;对照组和模型组按10 mL/(kg·d)给予无菌水灌胃,每日1次,连续灌胃14 d。比较6组末次给药后6 h的粪便排出量、粪便含水量和小肠推进率;HE染色观察结肠组织病理变化;免疫组化检测结肠组织c-kit蛋白表达水平;Western blot检测结肠组织c-kit、SCF蛋白表达量。结果 HE染色显示:对照组大鼠结肠黏膜完整,杯状细胞和腺体排列整齐,未见炎症细胞聚集;模型组结肠黏膜出现肠腺排列欠整齐,黏膜下层间质血管扩张;各给药组结肠黏膜肠腺排列整齐,未观察到明显上皮损伤。与对照组比较,模型组粪便排出量、粪便含水量和小肠推进率均明显降低(P<0.05),结肠组织c-kit蛋白表达水平和c-kit、SCF蛋白表达量均明显降低(P<0.05)。与模型组比较,西药组、中剂量组、高剂量组粪便排出量、粪便含水率和小肠推进率均明显提高(P<0.05),低剂量组粪便排出量和粪便含水率均明显提高(P<0.05);给药组结肠组织c-kit蛋白表达水平均明显提高(P<0.05);低、中、高剂量组结肠组织c-kit蛋白表达量均明显提高(P<0.05),高剂量组SCF蛋白表达量明显提高(P<0.05)。结论 理气通便方可提高气滞型STC模型大鼠结肠组织中ICC的表达及调控SCF/c-kit信号通路,恢复对胃肠道节律的正常调控来改善便秘的症状。

Footscan测量正常青年人足底压力参数的可靠性分析

利用组内相关系数得出footscan足底压力测量系统测量正常青年人的最佳测试次数。运用文献资料法、测量法、数理统计法,对60名正常青年人10次有利腿足底压力的4项主要参数进行组内相关系数(ICC)分析。结果表明:足底冲量比例测试6次、足底接触面比例测试4次、足底压力时相测试5次、足底各区域压强测试6次(TOE1、TOE 2~5区域除外)的均值即可使可靠性处于0.75以上(P<0.05)。由此得出,6次重复测量的均值可以使足底压力4类参数具有较好的可靠性,能够更为客观地反映受试者的真实情况。