犬实验性感染ICHV的病理学研究

采用北京地区分离的犬传染性肝炎病毒(ICHV)BJ-1株经口服感染1月龄幼犬,对死亡犬和濒死犬进行病理形态学观察和脏器组织中抗源定位的研究。表明,肝脏是ICHV侵害的主要靶器官,胆囊的病理改变和脏器组织中的包涵体形态具有一定的诊断意义;采用BA法诊断犬传染性肝炎,具有特异性强、结果确实可靠、标本易于长期保存等优点。

犬传染性肝炎病毒单克隆抗体的研究——Ⅰ.杂交瘤细胞株的建立

用从病犬分离的犬传染性肝炎病毒(ICHV)免疫BALB/C 小鼠,取其脾细胞与 SP_2/O 骨髓瘤细胞融合,通过 HI 试验筛选出4株分泌抗 ICHV 单克隆抗体的杂交瘤细胞株(C_2B_5、C_4B_8、D_4E_4、G_(10)C_(10))。HI 试验和斑点酶联免疫吸附试验(Dot-ELISA)进行特异性鉴定表明:4株单抗与鸡新城疫病毒(NDV)、牛腺病毒(BAV)、禽腺病毒(Oet株)、犬瘟热病毒(CDV)、犬细小病毒(CPV)均无反应,仅与 ICHV 苗德株反应。杂交瘤细胞株在液氮中保存3个月复苏,仍可分泌特异性抗体。

犬多价高免血清的研制及应用

目的:研制犬多价高免血清用于犬病毒性传染病的紧急预防和治疗。方法:选择1岁以上临床检查健康的昆明狼种犬及部分土犬20条,用犬瘟热病毒(CDV)、犬细小病毒(CPV)、犬传染性肝炎病毒(ICHV)、犬冠状病毒(CCV)、犬副流感病毒(CPIV)弱毒和强毒多次交叉免疫,颈动脉无菌采血,分离血清,实验室采用微量中和试验、血凝抑制试验来检测抗体效价。结果:应用本制品高免血清在临床上取得了较好的效果。结论:研制成稳定、高效的犬多价高免血清,并获得了较好的经济效益和社会效益。

抗传染性犬肝炎病毒单克隆抗体的制备及鉴定

目的制备传染性犬肝炎病毒单克隆抗体。方法将用纯化的犬腺病毒1型（CAV-1）免疫的BALB／c小鼠脾细胞与SP2／0细胞在聚乙二醇作用下融合，通过酶联免疫吸附试验（ELISA）和免疫酶试验（1EA）筛选，以有限稀释法克隆3次，制备单克隆抗体，并对制备完成的单克隆抗体进行生物学鉴定。结果成功得到2株能稳定分泌抗CAV-1的单克隆抗体杂交瘤细胞，命名为1B、2H3，经鉴定其亚型分别为IgG2a和IgG2a，2株均为kappa链。腹水的ELISA效价可达10^7-10^8，IEA效价可达1：2560—1：5120。该单克隆抗体与CPV、CDV、FPV、CCV病毒无交叉反应。结论成功制备了抗CAV-1单克隆抗体，为进一步建立相关诊断方法奠定了基础。

犬传染性肝炎病毒在犬肾传代细胞中增殖过程的观察研究

用免疫荧光技术对犬传染性肝炎病毒（ＩＣＨＶ）在感染犬肾传代细胞中的增殖过程进行了观察。结果：ＩＣＨＶ感染犬肾传代细胞吸附时间为１ｈ，在感染过程中出现二次“隐蔽期”和二次“繁殖高峰”。结果表明，ＩＣＨＶ感染犬肾传代细胞４８ｈ收毒较为合适。

几种犬常见病毒性传染病的诊断要点和防治体会

一九八一年以来,随着我国军、警犬工作的恢复和发展,军内外相继多次从国外引入种犬。由于国内集群养犬单位增多,犬瘟热一直不断地呈周期性的区域流行。因海关检疫不严格,使犬细小病毒病、犬冠状病毒病、犬传染性肝炎、犬钩端螺旋体病等传染病也传入我国,并在全国范围内的军警犬繁育训练基地不断地发生和流行。

MDCK细胞感染犬传染性肝炎病毒后的超微结构观察

MDCK细胞感染犬传染性肝炎病毒(ICHV)BJ—1株后6h未见明显改变;12～18h胞核肿大,核内形成黑色颗粒样球状体;24h胞核内偶见病毒粒子,36h许多细胞内含病毒、病毒副晶体、形态各异的包涵体和多种板层样结构;48h感染细胞核膜以破损或出芽方式将成熟病毒粒子释入胞浆.

犬传染性肝炎病毒的细胞质内发生途径

应用免疫金电子显微镜技术,研究了犬传染性肝炎病毒(ICHV)在犬肾传代细胞内的形态发生及抗原定位,发现ICHV除了在宿主细胞核内发生外,还有细胞质内发生途径.在细胞质内,病毒核壳体的装配以均质致密包涵体和副晶格包涵体为“基地”,这与细胞核内形态发生方式相似.免疫金标记显示,细胞质包涵体中含有大量的ICHV抗原成分,是核壳体在细胞质内装配的病毒结构蛋白来源.同时,在感染的细胞质内也观察到与细胞核内相同的病毒核心样结构.