靶向Id-1基因的RNA干扰对人矽肺癌细胞增殖的影响

目的探讨RNA干扰技术沉默Id-1基因表达后对矽肺癌细胞株增殖能力的影响。方法针对Id-1基因mRNA靶向设计合成短发夹RNA,构建重组pGFU6/neo质粒,重组质粒转染矽肺癌YTLMC-90细胞株。反转录-聚合酶链式反应检测转染后Id-1基因的转录;免疫印迹法检测Id-1,核转录因子NF-κB/p50、NF-κB/p65,Bcl-2,Bax,环氧合酶-2,c-Myc基因,血管内皮细胞生长因子,增殖细胞核抗原,β-actin基因的表达;流式细胞术检测细胞周期的变化;~3H-胸腺嘧啶核苷掺入法、四氮唑蓝法和克隆形成实验检测细胞的增殖活力。结果重组质粒经酶切和测序鉴定,证明靶基因序列正确,质粒构建成功;反转录-聚合酶链式反应和免疫印迹法检测结果表明,矽肺癌细胞转染重组质粒后Id-1基因mRNA转录和蛋白合成都明显下降,Bcl-2、环氧合酶-2、c-Myc、增殖细胞核抗原、血管内皮细胞生长因子等与增殖相关基因表达量下降;细胞周期被阻滞在G_0/G_1期,S期细胞明显减少;细胞活力降低,增殖受到抑制。结论构建的重组质粒能靶向沉默Id-1基因,并抑制YTLMC-90细胞株的增殖能力,因此Id-1基因可以作为人矽沉着病并发肺癌基因治疗的候选靶点。

人参皂苷Rg3对子宫内膜异位症组织中ID-1基因表达的影响

本研究采用SupperArray功能分类基因芯片检测的方法,探讨体外培养的经人参皂苷Rg3作用后子宫内膜异位症（EMs）患者在位、异位子宫内膜细胞中ID-1基因的表达,旨在了解其在EMs发病机制中的作用。

Id-1基因与前列腺癌之关系

Id蛋白是碱性螺旋 -环 -螺旋 (bHLH)转录因子之抑制因子。Id - 1蛋白是细胞分化的负性调节因子所以有促进肿瘤发生之功能。本文概述近几年我们研究室在探索Id - 1基因及其功能方面的工作。从动物前列腺癌模型中首次发现Id - 1蛋白之过度表达到人前列腺癌标本中得到验证 ,以及最后在体外培养的前列腺癌细胞株对Id - 1基因之功能研究。实验表明Id - 1是通过抑制P16 RB抑癌基因以及激活有丝分裂原活化蛋白激酶(MAPK)的途径而引起前列腺癌细胞增殖。结果并提示Id -

人参皂苷Rg3对子宫内膜异位症组织中ID-1和NRP-1基因表达的影响

目的探讨人参皂苷Rg3对子宫内膜异位症(EMs)组织中ID-1和NRP-1基因表达的影响。方法采用SuperArray功能分类基因芯片检测的方法筛选EMs血管生成相关基因,并用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法进行验证。结果促血管生成的ID-1和NRP-1基因在异位子宫内膜细胞中表达明显高于在位子宫内膜细胞及正常子宫内膜细胞(P<0.05);经人参皂苷Rg3作用后ID-1和NRP1基因在异位子宫内膜细胞中表达明显低于在位子宫内膜细胞及正常子宫内膜细胞(P<0.05)。结论人参皂苷Rg3有抑制子宫内膜异位细胞中ID-1和NRP1基因表达的作用,ID-1和NRP1基因可能在EMs血管生成中发挥重要作用。

食管细胞系和癌组织中分化抑制因子Id-1mRNA的表达

目的:探讨分化抑制因子Id-1基因在食管癌组织和食管癌细胞系中的表达状况。方法:采用RT-PCR方法检测食管癌细胞系(EC109、EC1、EC18)、食管永生化上皮细胞系(NECA6-E6E7和NECA6-E6E7-hTERT)及20例食管癌及其配对癌旁正常组织中Id-1mRNA基因的表达状况。结果:EC109、EC1、EC18、NECA6-E6E7和NECA6-E6E7-hTERT均出现Id-1mRNA的表达。正常食管上皮中未见其表达,癌旁组织中Id-1mRNA阳性表达率为35%(7/20),癌组织中为65%(13/20),有升高趋势,但差异无统计学意义(χ2=3.6,P>0.05)。结论:Id-1基因可能参与了食管癌的癌变过程。

Id-1在喉癌组织中的表达

目的:证实Id-1基因在喉癌组织和喉癌细胞系中的表达。方法:通过反转录PCR(RT-PCR)和蛋白质印迹杂交法(Western blot法)对30例喉癌组织,10例癌旁正常组织和一个喉癌细胞株在基因和蛋白水平上对ID-1的表达进行检测。结果:喉癌组织和喉癌细胞株中Id-1基因高表达,而正常喉组织中没有Id-1的表达;Id-1蛋白的表达与喉癌组织的、临床分期、分化程度具有相关性(均P<0.05)。结论:ID-1蛋白的表达与喉癌的发生。