献血者混合标本与单标本核酸检测扩增效率及成本分析

目的比较献血者血液混合标本与单标本核酸检测性能及估算成本效益,为献血者血液安全检测提供依据。方法对本站2021年完成的95895份核酸检测结果进行分析,比较混合标本核酸检测阳性拆分单标本核酸检测阴性组、混合标本核酸检测阳性拆分单标本检测阳性组、混合标本核酸检测阴性单标本检测阳性组的Ct值;用PCR原理估算混合标本核酸检测模式与单标本核酸检测模式的扩增效率;对12份混合标本核酸检测阴性单标本检测阳性组的标本进行5~10次模拟混合标本核酸检测。结果混合标本核酸检测阳性Ct值均明显高于单标本核酸检测阳性Ct值(P<0.05),6标本混合核酸检测的扩增效率是单标本核酸检测效率的0.16~0.71倍,12份混合标本核酸检测阴性单标本检测阳性标本中11份经5~10次模拟混合标本核酸检测均至少出现1次阳性,其中11份ELISAHBsAg为0.3<S/Co<Cutoff;相对于混合标本核酸检测,单标本核酸检测将延长设备工作时间3.5倍,试剂经费投入增大5.9倍。结论混合核酸检测的扩增效率低于单标本核酸检测,低病毒载量标本采取混合标本核酸检测容易发生漏检,单标本核酸检测设备工作时长及试剂经费投入是混合标本的3.5~5.9倍。建议在HBV高流行区提倡对献血者行单标本核酸检测。

献血者HBsAg阴性NAT可疑标本HBV感染状态确认

目的了解天津地区无偿献血者应用PANTHER单人份核酸检测(ID-NAT)后,联检反应性,鉴别试验阴性(NAT可疑)标本HBV感染情况。方法本中心2021年1—8月69362份无偿献血者标本经常规检测和ID-NAT检测后,共检出HBsAg-PANTHER核酸检测联检反应性而鉴别非反应性献血者标本(以下简称NAT可疑标本)66份。采用单纯随机抽样方法选取23份应用超高速离心富集病毒后,采用超敏荧光定量PCR(qPCR)检测HBV DNA,ID-NAT复测鉴别实验,补充电化学发光法乙肝两对半检测。结果23份NAT可疑标本中经血清学和分子生物学检测共确认HBV DNA阳性14份,HBV感染者抗-HBc阳性率为92.8%。感染者中92.8%(13/14)为隐匿性乙型肝炎病毒感染(OBI)。超敏荧光定量PCR检测共有10份标本获得病毒载量,5份可定量,病毒载量定量(11~464)IU/mL,中位数为15.4 IU/mL。结论NAT可疑标本中仍能检出60%标本为HBV DNA阳性。抗-HBc检测能排除大多数NAT无法检测到的OBI,应提高目前NAT检测灵敏度,确保输血安全。

单人份核酸联合ELISA血液筛查方案初探

目的分析并探索合理的单人份核酸筛查方案,为核酸检测后的批放行提供依据。方法对南京地区无偿献血者的63 792份血液标本,采用2种ELISA检测试剂和1种单人份核酸检测试剂平行检测。NAT首先对HIV-1/HCV/HBV 3种病毒进行联合检测,检测结果阴性则判为NAT阴性,阳性则判为NAT阳性,血液报废。NAT初筛阳性标本中与ELISA同为阳性的标本,则直接进行鉴别检测(鉴别病毒种类),ELISA阴性的标本则进行联检2遍复试之后再鉴别。结果 63 792份标本中共NAT初筛(+)标本260例,初筛阳性率0.4%,成功复试和鉴别标本243例,总鉴别阳性率仅为64.2%(156/243)。其中ELISA(+)标本的鉴别阳性率为89.0%(121/136),ELISA(-)标本的鉴别阳性率为32.7%(35/136),复试阳性率为44%(47/107)。NAT初筛S/CO的均值与复试、鉴别结果具有明显相关性,初筛S/CO≤5对复试(--)且鉴别(-)结果有较强的指示作用。结论本中心目前的核酸筛查方案能够最大程度地减少病毒漏检现象,降低输血残余风险,保障临床供血安全。

血液核酸筛查中混样检测和单人份检测的应用分析

目的比较核酸混检模式与单检模式在献血者筛查中的检测性能。方法对本站126 359份献血者标本进行核酸检测,对初次反应性(IR)标本进行鉴别或者拆分试验。Panther联检阳性鉴别阴性的标本(NDR)再用Cobas s201系统进行单人份检测;将部分Cobas s201拆分检测阴性(NRR)标本及拆分阳性(RR)标本再用Panther进行检测(ID-NAT)。结果 Cobas s 201系统共检测标本85 128例,初次混样阳性61例(IR),经拆分后共检出阳性(RR)29例(0.34‰);Panther共检测标本41 231例,联检阳性74例(1.79‰),经鉴别后共检出HBV阳性22例,鉴别阳性(DR)率为29.73%(22/74)。28例Panther联检阳性鉴别阴性(NDR)的标本中,7例Cobas s201单样本(PP1)复检HBV DNA阳性,这7例再用s 201模拟混样(MP6)检测均为非反应性。s201拆分阳性(RR)标本28份利用Panther复检,结果阳性24例,阴性4例。2系统复检不一致的11例标本,补充血清学检测10例为抗-HBc阳性,病毒载量低。结论 Panther阳性检出率高于Cobas s201,鉴别试验阴性标本部分为OBI,有必要对未鉴别出标本进一步跟踪验证。2者检测性能各有优势,Cobas s201更适合大标本量混样NAT检测,Panther上样灵活操作简便,更适合中等标本量NAT单检。

构建安全的局域网策略

网络安全是一门涉及计算机科学、网络技术、密码技术、信息安全技术、应用数学、教论、信论等多种学科的综合性学科，它涉及的因素主要包括物理安全、系统安全、信息安全和文化安全等范围。局域网络中人为的、非人为的，有意的、无意的；非法用户入侵、计算机病毒、黑客的不断侵袭等随时威胁局域网的安全。随着计算机网络技术迅速发展，网络安全问题也日渐突出。该文分析了威胁局域网安全的主要因素，探讨了从物理环境、网络层、应用层以及管理制度方面，运用VPN、NAT、VLAN、IDS、身份验证等技术构建安全局域网的策略。