脑胶质瘤分子标志物IDH1、IDH2、p53基因突变和Ki-67蛋白表达与病理分级临床特征的关系

目的通过联合检测脑胶质瘤样本异柠檬酸脱氢酶1、2(IDH1、IDH2)基因突变/p53基因突变以及Ki-67蛋白表达情况,明确不同脑胶质瘤基因型特征,探讨其表达与胶质瘤病理分级和临床特征的相关性,为临床诊断与治疗提供分子病理学依据。方法采用直接测序法检测46例胶质瘤样本IDHl基因第132位密码子、IDH2基因第172位密码子突变及p53基因第5~8外显子突变,免疫组织化学方法检测样本Ki-67蛋白表达,分析分子标志物与样本临床特征和病理分级相关情况。结果共检出32.6%(15/46)的样本发生IDH1基因R132H突变,WHOⅡ~Ⅳ级样本中突变率分别为40.0%、58.3%、17.4%,IDH1基因突变与较低年龄(P=0.028)、肿瘤位置发生于额叶(P=0.002)、WHOⅡ~Ⅲ级组织学分级(P=0.047)、Ki-67蛋白低表达(P=0.034)显著相关;检出4例胶质母细胞瘤样本发生p53基因突变,突变位点位于第7、8外显子,并伴IDH1基因野生型;所有样本Ki-67均有阳性表达,在Ⅱ~Ⅳ级胶质瘤中Ki-67表达呈上升趋势,不同级别胶质瘤间Ki-67阳性表达程度有统计学差异(P<0.01),Ki-67低表达组IDH1突变率高于Ki-67高表达组,IDH1基因突变与Ki-67表达呈负相关。结论不同病理分型胶质瘤的IDH1基因突变比例存在差异,在WHOⅡ~Ⅲ级中最高,IDH1、Ki-67表达水平与胶质瘤分级密切相关,p53基因突变在原发性胶质母细胞瘤中更常见,IDH1、p53、Ki-67联合检测有利于胶质瘤的诊断分级和预后评估,具有一定的临床价值。

急性髓系白血病中与IDH1/2突变共存的基因突变分析

目的:探讨急性髓系白血病(AML)患者中与IDH1/2突变共存的基因突变及其与部分临床参数的相关性。方法:采用基因组DNA-PCR联合Sanger测序法筛选IDH1/2基因4号外显子突变;采用高通量DNA测序联合Sanger测序法检测IDH1/2突变患者51种肿瘤靶基因突变。结果:358例患者中共检出46例IDH1/2突变,其中35例IDH1突变,11例IDH2突变。97.8%(45/46)IDH1/2突变患者同时携带其他基因突变,其中双基因突变8例,3个基因突变共存17例,≥4个基因突变共存20例。每例患者平均突变3.52次。伴随基因突变中最常见的基因为NPM1(n=29,63.0%),其他依次为:DNMT3A(n=25,54.3%)、FLT3-ITD(n=7,15.2%)、TET2(n=5,10.9%)及NRAS(n=5,10.9%)。在IDH1突变组中,伴NPM1突变者的平均外周血白细胞水平高于正常者,伴DNMT3A突变患者的CR率明显低于正常者,差异均有统计学意义(P=0.034,0.003);≥4个基因突变患者的白细胞水平明显高于双基因突变者,差异显著(P=0.037)。结论:95%以上伴IDH1/2突变的AML患者同时存在额外基因突变,基因突变个数及突变类型对患者的临床特征及CR率有一定的影响。

IDH1 R132H突变对U87MG细胞增殖抑制作用的体内外研究

目的探讨IDH1 mut(R132H)对U87MG胶质母细胞瘤细胞增殖的影响。方法通过表达IDH1 mut(R132H)的慢病毒浸染胶质瘤细胞,利用RT-PCR验证转染效率并通过细胞计数验证其对细胞增殖的影响;通过人为加入IDH1 mut(R132H)代谢产物2-HG,细胞计数方法验证其对细胞增殖的影响;表达IDH1 mut(R132H)的慢病毒浸染胶质瘤细胞后,NOD/SCID小鼠皮下注射建立动物模型,观察肿瘤生长情况,测量并记录,提取肿瘤组织RNA验证IDH1 mut(R132H)在肿瘤组织中的表达,并利用免疫组织化学染色法对肿瘤组织中Ki-67蛋白的表达进行检测。结果 RT-PCR验证IDH1 mut(R132H)和IDH1 wt表达于U87MG胶质瘤细胞中;其细胞增殖速度慢于IDH1 wt和空白对照组;2-HG能抑制细胞的增长;动物体内实验再次证实,表达IDH1 mut(R132H)的肿瘤生长速度慢于IDH1 wt,并且Ki-67的表达在IDH1 mut(R132H)肿瘤少于IDH1 wt。结论 IDH1 R132H突变对U87MG胶质母细胞瘤细胞增殖起到抑制作用。

基于IDH1/2和p53突变的初诊恶性脑胶质瘤预后分型

目的基于分子病理标志物IDH1/2和p53突变状态对初诊恶性脑胶质瘤（WHOⅡ~Ⅳ级）进行分型。方法选择541例初诊胶质瘤样本,通过焦磷酸测序检测IDH1/2突变状态,免疫组化检测突变型P53蛋白表达水平来获得p53突变状态,进一步联合分析IDH1/2突变和p53突变在初诊脑胶质瘤分型中的临床价值。结果联合IDH1/2和p53突变状态可以将脑胶质瘤分成4种分子亚型。其中IDH1/2突变型/p53野生型（Group1）预后最好,IDH1/2突变型/p53突变型（Group2）预后次之,IDH1/2野生型/p53野生型（Group3）再次之,IDH1/2野生型/p53突变型（Group4）预后最差。结论基于IDH1/2和p53突变状态提出初诊脑胶质瘤的预后分型,其具有更加简便的临床应用性和潜在的治疗指导价值。

IDH1/2突变诱导脑胶质瘤基因组高甲基化及肿瘤细胞分化阻滞

目前异柠檬酸脱氢酶1/2(isocitrate dehydrogenase1/2,IDH1/2)基因突变在脑胶质瘤的致瘤机制还未彻底阐明,但一系列研究提示突变IDH1/2能诱导脑胶质瘤基因组和组蛋白高甲基化,这些表观遗传改变会影响分化相关基因的表达,导致肿瘤细胞分化程度降低,出现恶性表型。同时以突变IDH1/2为抑制靶点的小分子药物能促进肿瘤细胞分化,表现出一定的治疗作用。本文对该方向上的研究进展作一系统综述,期望能为脑胶质瘤的治疗提供一条新思路。

血液肿瘤患者IDH1/IDH2基因突变发生率及其血液病分布特点研究

目的研究血液肿瘤患者IDH1/IDH2基因突变发生率和其血液病的分布特点。方法选取300例不同病情的血液患者骨髓的样品,其中245例是血液肿瘤患者,55例是非血液肿瘤患者,对比检查IDH2和IDH1基因是否在血液肿瘤患者中有突变行为。结果实验共发现了7个错义的突变基因,其中2个为IDH2基因突变,4个为IDH1基因突变;还有2个IDH1同义突变。4个IDH1的突变类型是:199M、R132C、R131D及R132H,前3个突变患者都出现在3例急性髓系的白血病患者中,最后1例出现在急性淋巴细胞的白血病患者中。2个IDH2的错义突变类型是:P167R和R172K,这2例也都出现在急性髓系的白血病患者中。在发生IDH1错义基因突变的4例患者中,其体内白细胞的计数明显升高,且患者年龄均大于60岁。在发生IDH2基因突变的2例患者中,其体内白细胞的计数明显降低,且患者的年龄均小于60岁。结论 96例的急性白血病患者的检测中,共发现了9例突变患者,其IDH的突变率是9.3%,且7例发生于急性髓系的白血病患者中,说明急性髓系的白血病的发病和IDH的突变有紧密的联系。

脑胶质瘤患者异柠檬酸脱氢酶(IDH)1/2基因突变与O6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶(MGMT)基因启动子区甲基化的相关性研究

目的探讨脑胶质瘤患者异柠檬酸脱氢酶(IDH)1/2基因突变与O6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶(MGMT)基因启动子区甲基化的相关性。方法回顾性分析汕头市龙湖区第二人民医院普外科2018年1月至2020年2月脑胶质瘤患者60例临床资料,观察脑胶质瘤患者IDH 1/2基因突变与MGMT基因启动子区甲基化,观察IDH 1/2基因突变与MGMT基因启动子区甲基化相关性分析情况。结果18例患者检测出IDH 1/2基因突变,其中WHO的分级Ⅱ级8例、Ⅲ级7例,Ⅳ级3例,分级在IDH 1/2基因突变分布中,差异有统计学意义(χ^(2)=108.454,P=0.000),33例患者检测出MGMT基因启动子区甲基化,其中WHO的分级Ⅰ级2例、Ⅱ级8例、Ⅲ级8例,Ⅳ级15例,分级在MGMT基因启动子区甲基化分布中,差异无统计学意义(χ^(2)=0.527,P=0.538)。IDH 1/2基因突变与MGMT基因启动子区甲基化呈现明显正相关,差异有统计学意义(r=0.368,P=0.014)。结论脑胶质瘤患者IDH1/2基因突变与MGMT基因启动子区甲基化呈正相关,为指导临床诊断治疗提供了理论依据。

计算弥散加权成像联合瘤周DWI高信号征象评估胶质瘤IDH-1基因分型的临床应用

目的:探讨计算弥散加权成像(cDWI)拟合得到的高b值DWI图像及瘤周DWI高信号(NePDH)征象在区分不同IDH-1基因型胶质瘤中的临床价值。方法:回顾性纳入60例Ⅱ~Ⅳ级胶质瘤患者(IDH-1突变型25例,野生型35例),均行常规MRI平扫、增强及DWI(b=0、1000、3000 s/mm^(2))扫描。使用cDWI技术将DWI_(0,1000)拟合得到cDWI_(0,3000)图像。比较DWI_(0,3000)、cDWI_(0,3000)图像的信噪比(SNR)、对比噪声比(CNR),及医师判读NePDH征象的一致性。评价NePDH征象阳性、肿瘤实质区域表观弥散系数(ADC)_(0,1000)与IDH-1基因型的相关性。绘制受试者工作特征(ROC)曲线并评价各参数的诊断效能。结果:cDWI_(0,3000)图像SNR、CNR优于DWI_(0,3000)(P<0.05)。医师在DWI_(0,3000)、cDWI_(0,3000)上判读NePDH征象的一致性极高(κ=0.958)。不同IDH-1基因型组间,cDWI_(0,3000)上NePDH征象阳性例数差异具有统计学意义(P<0.05),且诊断效能与DWI_(0,3000)相仿(P>0.05)。NePDH征象结合肿瘤实质区ADC值诊断的灵敏度为96.00%,特异度为71.4%,ROC曲线下面积达0.834。结论:高b值cDWI及NePDH征象为术前诊断胶质瘤IDH-1基因型提供了一种无创、可靠的方法。

异柠檬酸脱氢酶1/2突变与胶质细胞瘤的发生

胶质瘤是最常见的中枢神经系统肿瘤。根据组织病理学特点与临床标准世界卫生组织（WHO）将胶质瘤分为I～Ⅳ级，一般认为I级胶质瘤为良性肿瘤，可通过手术切除治愈，且很少发生恶性进展；相比之下Ⅱ、Ⅲ级胶质瘤具有一定侵袭性且恶性程度更高，预后较差；恶性程度最高且预后最差的是Ⅳ级胶质母细胞瘤（glioblastomamultiforme，GBM）。

多形性胶质母细胞瘤112例临床分析

目的探讨多形性胶质母细胞瘤(GBM)手术后联合不同辅助治疗手段对患者预后的影响。方法对112例首诊GBM患者的临床资料进行随访及回顾性分析。采用Kaplan-Meier法计算生存率并绘制生存曲线,用log-rank检验方法进行单因素分析,对影响生存时间的多因素进行COX回归分析。结果 112例患者纳入分析,随访结束存活18例,随访期间死亡94例,平均生存时间(14.7±1.69)个月。手术全切、IDH1突变阳性、术后2~4周内开始放疗、Stupp方案后长周期维持替莫唑胺影响患者的总生存时间。COX回顾分析显示患者手术全切(P=0.003)、术后2~4周开始放疗(P=0.000)是影响生存时间的独立因素。挽救性治疗手段对生存时间的影响,差异无统计学意义(P>0.05)。结论手术全切及术后早期开始放疗能延长GBM患者生存期,以IDH1/2基因为代表的分子检测能很好地判断高级别胶质瘤的生存预后。

RUNX1、IDH2、SRSF2、ASXL1 、SH2B3基因阳性的老年慢性粒单核细胞白血病一例报告

慢性粒单核细胞白血病(chronic myelomonocytic leukemia, CMML)作为侵袭性极强的慢性白血病之一, 在预后和临床表现中都显示出高度差异性, 且该病3~5年内转化为急性白血病的概率为15%~20%[1]。对于CMML的治疗, 部分低危患者主要采取积极支持治疗和密切临床观察, 以改善症状和控制病情为主。对于高危因素较多、症状较明显的患者, 推荐及时采取药物联合化疗以及异基因造血干细胞移植等手段[2]。近期中国人民解放军联勤保障部队第九四○医院血液科(以下简称我院我科)收治1例RUNX1、IDH2、SRSF2、ASXL1、SH2B3基因阳性的慢性粒单核细胞白血病患者, 经联合化疗治疗效果良好, 现报道如下。

TET2、IDH1基因突变在老年急性髓系白血病中的研究

目的:探讨老年急性髓系白血病(AML)患者表观遗传学调控基因TET2、IDH1突变的发生率,并了解其临床特征。方法:采用基因组DNA-PCR方法扩增TET2、IDH1基因外显子,基因测序来分析其基因突变,同时检测NPM1、FLT3-TKD、FLT3-ITD、C-KIT、CEPBA、JAK2V617及MLL-PTD突变情况,随访判定其疗效。结果:50例老年AML(非APL)患者中,12例患者检测到TET2基因突变,8例患者检测到IDH1基因突变,19例(38%)患者检测到至少一种表观遗传学调控基因的突变。TET2及IDH1基因突变与NPM1基因突变有一定的相关性。TET2、IDH1基因突变易发于正常核型的老年AML患者中,在25例正常核型的老年AML患者中,发生TET2或IDH1基因突变为13例,发生率为52.0%(P<0.05)。老年AML患者加用去甲基药物联合化疗可能有较高的完全缓解率。结论:在老年AML患者中,TET2和IDH1两种基因突变较为常见,尤其在正常核型的老年AML中,TET2、IDH1基因突变与患者的临床特点、疗效有一定相关性,对指导老年AML的个体化治疗有一定的意义。

IDH1/2基因突变急性髓系白血病的临床特点和发病机制研究进展

急性髓系白血病（AML）是一组以染色体异常和（或）基因突变为特征的恶性肿瘤.其发病机制十分复杂.最近,测序发现了一种编码代谢酶IDH1/2基因的高频突变.这一发现激起了国内外研究小组的兴趣,进行了一系列的临床和基础研究.文章对这些研究进行综述.

急性髓系白血病患者中IDH1和IDH2基因的突变发生率及其临床特征

目的分析急性髓系白血病患者中IDHl和IDH2基因的突变发生率及其临床特征。方法随机选取医院收治的2013—01—2015-01急性髓系白血病患者50例作为研究组，并同期选择50例缓解期急性髓系白血病患者其作为对照组；对两组患者采用R显带技术对患者染色体进行分析，并对其进行IDH1、IDH2检测。结果对两组急性髓系白血病患者基因检测发现，研究组中，IDHI基因突变发生率为22．0％（11／50），IDH2基因突变发生率为28．0％（12／50）；且与对照组比较，IDH1和IDH2基因突变阳性患者较多，两组对比差异有统计学意义，P〈0．05；同时，IDH1基因突变多发生在白细胞计数高、血小板计数较低患者中，IDH2突变多发生在年龄偏大患者中。结论 临床中，通过检测急性髓系白血病患者IDH1、IDH2基因突变情况，可以作为临床有效诊断急性髓系白血病及其预后的指标，在临床诊治急性髓系白血病中发挥积极作用。

长链非编码RNA-TP53TG1在神经胶质瘤细胞中对糖剥夺应激反应的影响

目的构建长链非编码RNA-TP53TG1的真核表达克隆,并探索其在神经胶质瘤中对糖剥夺应激反应的影响。方法用RT-PCR方法从人胶质瘤细胞中扩增出TP53TG1;构建了TP53TG1的全长真核表达克隆;实时定量PCR检测其在U87MG细胞内的表达;同时用低糖(0.3 g/L葡萄糖、8 h)处理;real-time PCR检测GRP78、IDH1和PKM2的表达水平。结果成功构建了真核重组表达质粒pCIG-TP53TG1;在转染U87MG细胞36 h后,可见绿色荧光的表达,U87MG细胞中TP53TG1 mRNA升高了2.9×106倍(P<0.05);过表达TP53TG1的同时低糖处理,GRP78和IDH1 mRNA的表达水平显著升高(P<0.05),而PKM2 mRNA的表达水平显著降低(P<0.05)。结论在U87MG细胞中,TP53TG1可能通过影响GRP78、IDH1和PKM2 mRNA的表达,而参与到对糖剥夺的应激反应过程。

纤维软骨性结构不良23例临床病理和分子特征分析

目的探讨纤维软骨性结构不良(fibrocartilaginous dysplasia,FCD)的临床病理和分子特征。方法回顾性分析23例FCD的临床病理和影像学特征,运用免疫组化和Sanger测序法分析FCD的免疫表型和分子特征。结果23例FCD中男性14例,女性9例,发病年龄9~55岁,中位年龄19岁。3例为多骨性病变,其余为单骨性病变。病变主要发生于股骨(18/23),尤其好发于股骨颈;余肱骨2例,胫骨、髂骨和指骨各1例。影像学大多数表现为界限清楚的膨胀性磨玻璃样背景中见点状、环状或絮状钙化。镜检:病变内可见增生的纤维母细胞和不成熟编织骨,以及多少不等的高分化透明软骨成分及软骨化骨。免疫表型:纤维骨性成分均表达SATB2,Ki-67增殖指数低,不表达CK、CK5/6、p63等上皮标志物。6例分子检测提示GNAS基因第8外显子突变,分别为CGT>TGT导致的p.R201C位点突变(2例)和CGT>CAT导致的p.R201H位点突变(4例),不同形态区域突变位点一致;IDH1/IDH2均为野生型。结论FCD是少见纤维结构不良特殊形态学亚型。纤维骨性成分和软骨成分同源,软骨成分是纤维结构不良发生、发展过程中的组成部分。纤维结构不良中出现软骨,再结合影像学改变和分子检测可辅助FCD的诊断。

脑胶质瘤病人血清β_2微球蛋白含量的变化

目的探讨脑胶质瘤病人血清β2微球蛋白(β2-MG)含量的变化。方法收集2015～2017年手术切除及病理确诊的胶质瘤标本124例,其中WHOⅠ级9例,Ⅱ级28例,Ⅲ级34例,Ⅳ级53例。术前2～3 d采取静脉血,通过胶乳免疫比浊法检测血清β2-MG含量;并使用石蜡包埋的胶质瘤组织分别通过毛细管电泳法检测基因异柠檬酸脱氢酶1(IDH1)突变和PCR荧光探针法检测06-甲基鸟嘌呤DNA甲基转移酶(MGMT)基因甲基化状态。结果 WHOⅣ级胶质瘤病人血清β2-MG含量显著高于其他级别(WHOⅠ～Ⅲ级)胶质瘤(P<0.05)。IDH1突变型胶质瘤病人血清β2-MG含量显著低于野生型病人(P<0.05)。MGMT甲基化胶质瘤病人血清β2-MG含量与非甲基化病人之间无明显差异(P>0.05)。结论血清β2-MG含量对于WHOⅣ级胶质瘤与其他级别件胶质瘤的鉴别以及IDH1突变与野生型的鉴别中可能具有重要的参考意义。

IDH1/2基因突变急性髓系白血病的临床特点和发病机制研究进展

随着急性髓系白血病研究的逐渐深入,越来越多的研究针对其发病机制有了更进一步的讨论,急性髓系白血病的发病机制在当前研究中被发现与IDH1/2基因突变可能存在直接关系,这一相关联系得到了越来越多的关注。越来越多的研究者将其研究目光放置在IDH1/2基因突变急性髓系白血病的临床特点和发病机制研究进展。急性白血病大的分类是急性淋巴细胞白血病和急性髓系白血病。急性髓系白血病在成年人中属于更为常见的疾病之一。

人脑胶质瘤中的IDH1/2突变

胶质母细胞瘤的基因组突变分析中发现的异柠檬酸脱氢酶(isocitrate dehydrogenase,IDH1)突变对胶质瘤的认识具有突破性意义。随后,在胶质瘤中发现了IDH1的R132碱基和IDH2的R172碱基突变。IDH1突变较多的发生在WHOII-III级胶质瘤和继发胶质母细胞瘤中。这种突变改变了异柠檬酸脱氢酶的结构,从而使将异柠檬酸转化为a-酮戊二酸的能力丧失,而获得将a-酮戊二酸转化为2-羟基戊二酸这一新的酶活性。在临床中,IDH1和IDH2突变已经显示对胶质瘤患者有诊断和预后意义。同时,现今也发展了一些检测方法。

基于改进EfficientNetV2的脑胶质瘤IDH1突变状态预测方法

提出了一种基于改进EfficientNetV2的脑胶质瘤IDH1突变状态预测方法。首先使用k-means聚类算法为无标签的脑胶质瘤MRI数据标注伪标签,并使用Vision Transformer网络对伪标签进行修正,实现脑胶质瘤数据扩增;其次将坐标注意力机制加入EfficientNetV2模型,同时使用果蝇优化算法为模型训练过程中的伪标签数据赋予最优的权重;最后对脑胶质瘤IDH1突变状态进行分类,达到了96.32%的预测准确率。实验结果表明,本文方法能够在术前无创的情况下准确地预测脑胶质瘤IDH1突变状态。