miR-542-5p对1-磷酸鞘氨醇诱导的IEC-6细胞增殖的抑制作用

目的:观察miR-542-5p对1-磷酸鞘氨醇(S1P)诱导的大鼠小肠隐窝上皮IEC-6细胞增殖的影响。方法:建立稳定表达鞘氨醇激酶1(SphK1)的IEC-6细胞系(SphK1-IEC-C1和SphK1-IEC-C2),Western blot检测SphK1蛋白表达,放射性同位素示踪法测定SphK1酶活性和S1P分泌,细胞计数绘制生长曲线观察细胞增殖,流式细胞术分析细胞周期变化,实时荧光定量PCR检测miR-542-5p表达。结果:与对照细胞相比,细胞系SphK1-IECC1和SphK1-IEC-C2中SphK1蛋白表达显著升高,SphK1酶活性升高,细胞内外S1P浓度升高,细胞生长速度加快,细胞周期中S期细胞所占比例升高,miR-542-5p的表达量降低;在IEC-6细胞的培养液中加入S1P(0.5~10μmol/L),能显著抑制miR-542-5p表达;采用siRNA干扰降低IEC-6细胞的SphK1,可明显升高miR-542-5p表达。升高SphK1-IEC-C1和SphK1-IEC-C2细胞中miR-542-5p水平,则可降低S期细胞比例,抑制细胞增殖。结论:S1P通过降低IEC-6细胞中miR-542-5p水平,引起细胞周期由G1期向S期转换,促进IEC-6细胞增殖。

肠黏膜上皮细胞的载体分布及功能

目的:谷氨酰胺是肠道细胞的主要氧化燃料,必须通过载体的转运才能进入细胞内。研究IEC-6细胞膜上分布的谷氨酰胺载体种类及其功能。方法:体外培养肠黏膜上皮细胞株IEC-6,检测细胞膜上不同谷氨酰胺载体(ASCT2、SN1、SN2、ATA1、ATA2、LAT1、LAT2)的mRNA;检测载体ASCT2蛋白;测定不同载体对同位素标记谷氨酰胺的转运特性。结果:在IEC-6细胞膜上载体ASCT2、SN1、ATA1、LAT1、LAT2的mRNA均得以表达。细胞外缓冲液中Na+存在时,[3H]-谷氨酰胺摄取率为(164.07±37.94)fmol/(mg protein.10 min);Na+不存在时,[3H]-谷胺酰胺摄取率为(58.71±10.51)fmol/(mg protein.10 min);饱和剂量甲氨基异丁酸(methylamino-isobutyric acid,MeAIB)阻断A类载体后,[3H]-谷氨酰胺摄取率为(81.02±19.59)fmol/(mg protein.10 min)。结论:在IEC-6细胞膜上可能存在载体ASCT2、SN1、ATA1、LAT1、LAT2;Na+依赖性氨基酸载体起主要作用(约64.22%),其中A类载体占50.62%,非A类载体占13.60%,非Na+依赖载体起次要作用(35.78%)

厄贝沙坦对放射诱导小肠黏膜上皮细胞分泌IL-6和PAI-1的影响

[目的]分析血管紧张素Ⅱ受体拮抗剂厄贝沙坦(Irbesartan)对X射线照射大鼠空肠上皮细胞(IEC-6)诱导纤溶酶原抑制物-1(PAI-1)、白介素-6(IL-6)mRNA表达和IEC-6增殖活性的影响。[方法]用RT-PCR证实IEC-6表达血管紧张素转换酶1受体(AT1受体)mRNA和AT2受体mRNA。用RT-PCR观察10Gy X射线照射IEC-6细胞前后PAI-1、IL-6mRNA的表达情况,同时观察照射+厄贝沙坦对IEC-6细胞PAI-1、IL-6mRNA表达的影响。采用MTT法观察对细胞增殖活性的影响。[结果]RT-PCR检测结果显示10Gy X射线照射48h后IEC-6细胞中PAI-1、IL-6mRNA表达明显升高[0.16∶0.76、0.20∶0.75(F=3.60,P=0.010)],10GyX射线+厄贝沙坦48h后明显降低[0.69∶0.46、0.77∶0.53(F=3.80,P=0.010)]。MTT结果显示10GyX射线照射会抑制IEC-6细胞的增殖,1、10、50μmol/L厄贝沙坦均促进IEC-6细胞照射后的增殖[0.38∶0.52、0.53、0.54(F=2.50,P=0.005)]。[结论]X射线照射IEC-6细胞后炎症因子IL-6、PAI-1mRNA表达升高。厄贝沙坦降低了IL-6、PAI-1mRNA的高表达,并促进了肠上皮细胞的增殖。

福禄克网络公司的DTX系列电缆认证分析仪通过UL精度认证

美国福禄克网络公司近日宣布DTX系列电缆认证分析仪的精度标准通过了UL(美国保险商实验所)的精度认证。通过这一认证意味着福禄克网络的电缆认证分析仪符合严格的UL精度标准，用户可以放心选用。