干扰素诱导的IFI-200蛋白家族研究进展

IFI-200蛋白家族是一组高度保守的干扰素诱导蛋白,家族中的每个成员其C-末端含有一个或几个特征性200氨基酸结构域.到目前为止,已发现有10个IFI-200蛋白家族成员,其中6个成员来源于小鼠,包括p202a、p202b、p203、p204、p205和p206,另外4个成员来源于人体,分别是IFI16、MNDA、AI M2和IFIX.IFI-200蛋白家族成员已知参与细胞生长、细胞衰老、细胞分化及细胞死亡的调控.但是,最近愈来愈多的证据显示IFI-200家族成员在人类肿瘤及自身免疫疾病中起作用.

双荧光素酶报告系统鉴定miRNA-3133对200kD黏着斑激酶家族相互作用蛋白基因的靶向调控作用

目的通过构建分子量大小为200 kD的黏着斑激酶家族相互作用蛋白(FIP200) 3’UTR双荧光素酶报告基因载体,研究FIP200与mi R-3133的靶向关系。方法采用生物信息学软件targetscan预测mi R-3133与FIP200 3’端非翻译区(3’UTR)潜在的互补结合位点;利用PCR扩增FIP200基因3’UTR序列,并克隆到psicheck2载体中,构建FIP200野生型和突变型重组双荧光素酶报告基因载体;将野生型psicheck2-FIP200-wt 3’UTR或突变型psicheck2-FIP200-mut 3’UTR双荧光素酶报告质粒分别与mi RNA-3133 mimics或mimics-NC共转染CNE-1细胞;通过双荧光素酶报告系统检测各组荧光素酶活性,观察mi RNA-3133对FIP200表达的影响。结果生物信息学分析显示FIP200 3’UTR与mi RNA-3133有潜在的结合位点,酶切和测序结果表明野生型和突变型双荧光素酶报告载体构建成功;双荧光素酶报告系统检测显示,mi RNA-3133可抑制野生型FIP200载体的荧光素酶的表达(P <0.05),而对突变型载体的荧光素酶表达无影响(P> 0.05)。结论成功构建FIP200基因3’UTR的双荧光素酶报告载体,mi RNA-3133可以直接靶向调控FIP200基因的表达。