IFITM1和Wnt/β-catenin信号通路在结肠癌发生发展中的作用

目的探究干扰素诱导跨膜蛋白1(IFITM1)在结肠癌中的表达以及其在结肠癌中发挥的作用。方法应用生物信息学分析IFITM1在结肠癌中的表达情况和预后情况,并分析IFITM1与β-连环蛋白的相关性。免疫组化观察IFITM1和β-catenin在结肠癌及癌旁组织中的表达情况。构建IFITM1过表达细胞模型,CCK-8实验检测细胞增殖能力的变化,双荧光素酶报告基因检测TCF/LEF转录因子的激活情况,Western blot检测Wnt/β-catenin信号通路上关键蛋白β-catenin、C-myc、CyclinD1的表达情况。结果在线数据库分析结果显示,IFITM1在结肠癌中高表达(P<0.05),且与患者的预后不良显著相关;IFITM1与β-catenin之间存在正相关关系。免疫组化染色结果显示,IFITM1和β-catenin在结肠癌组织中的表达显著高于癌旁组织,IFITM1的表达同肿瘤直径大小及组织浸润程度有关(P<0.05),与其他因素无关(P>0.05);β-catenin的表达与仅与肿瘤直径大小有关(P<0.05),与其余因素无关(P>0.05),且二者之间存在正向相关性。在结肠癌细胞HCT-15中过表达IFITM1后,OE-IFITM1组细胞的增殖能力显著高于OE-NC组(P<0.05),OE-NC组和MOCK组之间无差异(P>0.05)。双荧光素酶报告基因结果显示,OE-IFITM1组的启动子活性高于OE-NC组(P<0.05),OE-NC组与MOCK组之间无差异(P>0.05)。Western blot结果显示,OE-IFITM1组的β-catenin,CyclinD1,C-myc的表达量高于OE-NC组(P<0.05),OE-NC组和MOCK组之间蛋白表达无差异(P>0.05)。结论IFITM1在结肠癌组织中的表达显著高于癌旁组织,并可能通过Wnt/β-catenin信号通路促进细胞增殖。

Ifitm1基因在小鼠卵泡发育与排卵过程中的功能及相关调控机制

为深入了解哺乳动物卵泡发育的机制,对小鼠卵巢颗粒细胞中干扰素诱导的跨膜蛋白1(interferon-induced transmembrane protein 1,Ifitm1)基因进行超表达和抑制表达分析,通过流式细胞术、荧光定量PCR、EdU法及western blot分析Ifitm1对小鼠颗粒细胞生长的影响及对小鼠排卵相关基因表达的调控作用,并用相关通路抑制剂处理颗粒细胞,探究Ifitm1影响小鼠卵泡发育及排卵的相关机制。结果显示,在小鼠卵巢颗粒细胞中成功地超表达和抑制表达了Ifitm1基因,干扰Ifitm1基因表达使细胞周期蛋白Ccnd1表达降低了63.5%,G0/G1期细胞占比也下降,使细胞阻滞在G2/M期,从而抑制颗粒细胞增殖;干扰Ifitm1基因还导致排卵标记基因Lhr、Ereg、Cyp19a1表达水平提高了1.95~6.76倍(P<0.05),并抑制PI3K/AKT信号通路上关键蛋白p-AKT(Ser473)的表达,而阻断PI3K/AKT信号通路后再抑制Ifitm1基因表达,Lhr、Ereg和Cyp19a1的mRNA水平则未出现明显改变,说明Ifitm1基因通过抑制PI3K/AKT信号通路活性影响排卵。以上结果表明,Ifitm1基因通过PI3K/AKT通路介导在小鼠颗粒细胞生长以及卵泡排卵过程中发挥重要作用。

沉默IFITM1基因对卵巢癌CP70细胞增殖和侵袭能力的影响

目的探讨siRNA沉默IFITM1基因表达对卵巢癌CP70细胞增殖和侵袭的影响。方法利用脂质体转染法将靶向IFITM1的小干扰RNA(siRNA)转染卵巢癌细胞株CP70;qRT-PCR和Western blot观察转染后CP70细胞IFITM1mRNA和蛋白表达的变化;平板克隆形成实验和Transwell小室分别检测各组细胞增殖和侵袭能力的变化。结果转染组CP70细胞的IFITM1mRNA和蛋白表达明显受抑制;转染组、阴性对照组及转染试剂对照组形成克隆数分别为84、181、178,克隆形成率分别为42%、90.5%、89%,迁移出的细胞分别约为59个、121个、126个,转染组结果与其他两组之间有统计学差异,说明转染IFITM1siRNA抑制了卵巢癌CP70细胞增殖和侵袭能力。结论沉默IFITM1可以降低卵巢癌细胞的增殖和侵袭能力,IFITM1可能成为卵巢癌治疗的潜在新靶点。

IFITM1基因启动子甲基化与新疆维吾尔族妇女子宫颈癌的相关性

目的探讨IFITM1基因启动子甲基化与新疆维吾尔族妇女子宫颈癌的相关性以及早期诊断的可行性,分析IFITM1基因甲基化对mRNA表达的影响。方法采用甲基化特异性PCR方法和HPV16、HPV18特异的PCR方法分别检测了40例正常子宫颈组织和40例新疆维吾尔族妇女子宫颈癌组织的IFITM1基因启动子甲基化情况和高危险性HPV的感染情况,并分析两个指标的相关性。用RT-PCR方法检测10例甲基化阳性和10例甲基化阴性的组织IFITM1基因的mRNA表达情况。结果 31例子宫颈癌组织IFITM1基因启动子甲基化,3例子宫颈正常组织发生甲基化,在子宫颈癌中高危险性HPV的感染例数为27例,在正常组织中为5例。40例子宫颈癌组织中,HPV16、HPV18感染阳性的组织IFITM1基因甲基化的发生率增高(P<0.05),在10例甲基化阳性的组织中IFITM1基因mRNA的表达水平明显低于10例甲基化阴性的组织(P<0.01)。结论 IFITM1基因启动子甲基化是子宫颈癌发生的关键分子标志物,具有大规模临床筛选试验的价值。

IFITM1克隆测序及生物信息学分析

目的研究干扰素诱导的跨膜蛋白-1基因（interferon induced transmembrane protein 1．IFITM1）克隆、测序，对序列进行分析，并获取生物学信息。方法以IFITM1的cDNA为模板，用Pfu酶做PCR扩增，在EcoR Ⅰ和Hind Ⅲ双酶切后，将IF—ITM1的cDNA片段克隆到pUCm—T质粒，对重组的pUCm—T-IFITM1测序后，采用All GenBank＋EMBL＋DDBJ＋PDBSe—quences Database和Simple Modular Architecture Research Tool（SMART）对IFITM1的eDNA进行生物信息学分析。结果扩增后，含有IFITM1基因eDNA的PCR产物约1000bp，IFITM1的eDNA成功克隆到pUCm—T质粒并进行测序。序列分析结果显示，IFITM1结构cDNA全长683bp，有2个外显子。IFITM1的mRNA编码的氨基酸在37～57和87～107有2个跨膜区，编码125个氨基酸的多肽，其蛋白相对分子质量为14kDa。结论，IFITM1基因的成功扩增、克隆、测序，获取了IFITM1基因的eDNA、mRNA以及编码蛋白质氨基酸的生物学信息，有利于研究IFITM1基因与大肠癌的关系。

DDR2和IFITM1在非小细胞肺癌中的表达及临床意义

目的:探讨DDR2和IFITM1在非小细胞肺癌中的表达及临床意义。方法:选取135例非小细胞肺癌组织和癌旁组织,免疫组织化学法检测组织中DDR2和IFITM1蛋白表达,分析DDR2和IFITM1表达与患者临床病理特征之间关系,Spearman相关分析法分析非小细胞肺癌组织中DDR2和IFITM1表达相关性,Kaplan-Meier法评估DDR2和IFITM1表达与非小细胞肺癌患者生存期的关系,Cox回归模型分析影响患者预后因素。结果:与癌旁组织相比,非小细胞肺癌组织中DDR2和IFITM1蛋白阳性表达率均显著提高(P<0.05),且两者表达具有高度一致性。肿瘤分化程度越低、TNM分期越高及淋巴结转移时DDR2和IFITM1蛋白阳性表达率越高(P<0.05)。DDR2阳性表达患者3年生存率为40.00%,显著低于阴性表达患者63.33%(P<0.05);IFITM1阳性表达者3年生存率36.00%显著低于阴性表达患者54.35%(P<0.05)。DDR2和IFITM1均是影响患者预后的独立因素。结论:非小细胞肺癌组织中DDR2和IFITM1均异常表达,两者参与该疾病的发展过程,与患者预后不良相关,对预后评估有一定参考价值。

siRNA沉默IFITM1对卵巢癌细胞系CP70生物学效应的影响及机制研究

目的:采用siRNA技术沉默IFITM1基因表达,观察对卵巢癌CP70细胞侵袭及凋亡能力的影响及其可能的分子机制。方法:利用脂质体转染法将靶向IFITM1的小干扰RNA转染卵巢癌CP70细胞株;Westernblot检测CP70细胞IFITM1蛋白的表达;Transwell侵袭小室、MTT、流式细胞仪检测转染细胞侵袭力、顺铂敏感性和凋亡的变化;Western blot观察转染后CP70细胞caspase-3的表达变化。结果:转染IFITM1siRNA后卵巢癌CP70细胞的IFITM1表达受到高效而特异的抑制,减低了卵巢癌细胞的侵袭力,增加了细胞对顺铂的敏感性,促进了细胞凋亡,蛋白印迹结果显示转染细胞在顺铂作用下caspase-3磷酸化水平明显上调。结论:沉默IFITM1可以降低卵巢癌细胞的侵袭能力,提高对顺铂的敏感性,促进细胞凋亡可能与上调凋亡相关的关键分子密切相关,IFITM1可能成为卵巢癌治疗的潜在靶点之一。

维吾尔族妇女子宫颈癌组织中IFITM1、Ki-67和PCNA的表达

目的探讨维吾尔族妇女子宫颈癌组织中IFITM1、PCNA和Ki-67蛋白的表达。方法采用免疫组化SP法检测IFITM1、PCNA和Ki-67蛋白在维吾尔族妇女子宫颈癌和慢性子宫颈炎组织中的表达。结果 IFITM1蛋白在子宫颈鳞癌组织中的表达低于慢性子宫颈炎组织,差异有统计学意义(P=0.003);子宫颈癌组织中Ki-67和PCNA蛋白表达高于慢性子宫颈炎组织,差异有统计学意义(P=0.019,P=0.000)。结论 IFITM1蛋白在子宫颈癌组织中的表达降低,Ki-67和PCNA蛋白在子宫颈癌组织中的表达水平增高,可能与维吾尔族妇女子宫颈癌的发生有关。

IFITM1基因克隆及其在不同生长阶段牦牛各组织中的表达分析

为鉴定牦牛IFITM1基因并分析其在不同生长阶段牦牛5种组织中的转录水平和蛋白表达量。本研究采用根据普通牛IFITM1基因设计的引物,PCR扩增牦牛IFITM1基因并利用生物信息学软件分析其序列,结果显示,获得牦牛546 bp的IFITM1基因cDNA序列,其中编码(CDS)区为375 bp,编码124个氨基酸残基。牦牛IFITM1基因序列与普通牛的同源性最高,为98.7%。进一步采用荧光定量PCR检测IFITM1基因在不同生长阶段牦牛各组织中的转录水平,结果显示,IFITM1在1日龄、15月龄和5岁龄牦牛的心脏、肝脏、脾脏、肺脏和肾脏中均有不同程度的转录水平,在肝脏中的转录水平均显著高于在脾脏、肺脏和肾脏中的转录水平(p<0.05),随着年龄的增长IFITM基因在牦牛肝脏中的转录水平呈现先上升后下降的趋势,15月龄相对于1日龄时的转录水平显著升高(p<0.01),随着年龄的增长IFITM1基因的转录水平在耗牛肺脏中呈现持续下降的趋势,而在脾脏和肾脏中呈现先下降后稳定的趋势,且5岁龄相对于1日龄时的转录水平均显著降低(p<0.01)。同时采用免疫组化技术检测IFITM1蛋白在牦牛肝脏中的定位及表达。结果显示,IFITM1蛋白在3个生长阶段牦牛的肝脏中均有表达并定位于细胞膜,且该蛋白表达量随着年龄的增长呈现先下降后上升的趋势。本研究为深入探究IFITM1蛋白的功能奠定基础。

白来航鸡IFITM1基因表达规律分析及其对鸡内源性反转录病毒转录的影响

IFITMs在天然免疫中发挥重要作用,抑制多种病毒复制。试验取5和30日龄白来航鸡心、肝、脾、胸腺和法氏囊,RT-qPCR检测其IFITM1基因的表达差异;用0.5μmol·L^-1 DNA甲基化酶抑制剂DAC处理鸡成纤维细胞CEF和鸡巨噬细胞HD11,RT-qPCR检测处理后IFITM1的表达水平;PCR扩增IFITM1基因CDS区克隆、测序,进而构建pcDNA3.1-IFITM1真核表达载体;将过表达载体转染至CEF和HD11细胞,RT-qPCR检测IFITM1过表达对鸡内源性反转录病毒ALVE1、OVEX1和EAV-HP转录的影响。结果表明:IFITM1基因在胸腺、法氏囊等免疫器官中的表达量高于心、肝和脾等非免疫器官,且随着日龄的增长,在胸腺中的表达量上升,而在法氏囊中的表达量下降;DAC处理后,IFITM1表达极显著上调;测序发现IFITM1基因CDS区大小为342bp;IFITM1过表达后,ALVE1、OVEX1在CEF和HD11细胞中转录均极显著下调,EAV-HP只在CEF细胞中极显著下调,而在HD11细胞中无显著变化。这一研究初步分析了鸡IFITM1基因的表达规律,构建了其真核表达载体,检测了其对鸡内源性反转录病毒转录的影响,为进一步研究其功能奠定了基础。

奶牛早期妊娠阶段外周血中IFITM1和RSAD2基因的表达

为研究干扰素刺激基因IFITM1和RSAD2在奶牛早期妊娠阶段外周血中的表达规律,于人工授精后0、14、18、21和28d采集奶牛外周血,利用荧光定量PCR检测IFITM1和RSAD2的相对表达量,采用化学发光法同步检测血清中孕酮浓度;并深入分析自然发情和同期发情2种状态下青年母牛外周血中RSAD2基因的相对表达及其在18d和21d外周血白细胞亚类(淋巴细胞、NK细胞、单核细胞)中的相对表达。结果表明,妊娠牛与空怀牛血清孕酮在21d和28d呈显著差异。人工授精后14d和18dIFITM1基因在妊娠牛与空怀牛中都显著下调,但在空怀牛与妊娠牛间差异不显著。妊娠牛外周血中RSAD2于21d显著上调;18d时,RSAD2在妊娠青年牛外周血中的表达量显著高于空怀牛。进一步分析结果表明:自然发情条件下,妊娠牛外周血中RSAD2表达量显著高于空怀牛,同期发情条件下该基因在趋势上与之类似但统计学上不显著。人工授精后18d和21d,RSAD2在妊娠牛与空怀牛外周血淋巴细胞、NK细胞和单核细胞中的表达均无显著差异。研究提示:IFITM1不适合用于奶牛早期妊娠诊断;利用RSAD2的相对表达量可望对青年牛在18d做出早期诊断,具体判别标准有待于进一步扩群分析。

IFITM1在肝癌组织中的表达及临床意义

目的探讨肝癌组织中干扰素诱导的跨膜蛋白1(IFITM1)的表达及其在病理分级中的意义。方法采用免疫组织化学法检测IFITM1在肝癌组织中的表达并分析其与病理分级的关系。结果IFITM1在肝癌组织中的表达低于正常肝组织,差异有显著统计学意义(P<0.01);肝癌组织病理分级与IFITM1表达呈正相关,肝癌组织的分化程度越高,IFITM1表达水平越高,肝癌的恶性程度越低;而肝癌组织的分化程度越低,IFITM1表达水平越低,肝癌的恶性程度越高,差异有显著统计学意义(P<0.01)。结论IFITM1在肝癌组织中低表达,不同病理分级中IFITM1的表达不同,可能与肝癌的发生有关。

胃癌组织IFITM1表达与临床及预后价值的探讨

目的 探讨胃癌组织中干扰素诱导跨膜蛋白-1（IFITM1）的表达在胃癌侵袭转移过程中的作用及预测胃癌患者预后的价值.方法 采用免疫组化方法检测68例胃癌组织和27例距癌组织5cm以上胃大部切除黏膜组织中IFITM1的表达情况.同时评估IFITM1表达与临床病理因素（年龄、性别、Lauren＇s分型、肿瘤分化程度、肿瘤浸润深度、淋巴结转移和临床分期）之间的关系.用Kaplan-Meier法及单因素和多因素分析来评估胃癌患者术后生存率.结果 胃癌组织中IFITM1阳性表达率为85.3%（58/68）,与距癌组织5cm以上胃大部切除黏膜组织中的表达阳性率（22.2%）比较,差异有统计学意义（P〈0.01）.IFITM1阳性表达率与Lauren＇s分型（P=0.026）、肿瘤分化程度（P=0.033）、淋巴结转移（P=0.001）、肿瘤浸润深度等因素（P=0.041）有关.IFITM1阳性表达率与年龄、性别、肿瘤大小和临床分期无显著性相关.胃癌患者的生存分析显示,IFITM1阴性组,低表达组和高表达组生存率之间差异有统计学意义（P=0.011）.结论 IFITM1高表达与胃癌的浸润和转移密切相关,可以作为预测胃癌预后的一个生物学指标.

基于生物信息分析的IFITM1与结直肠癌的研究

结直肠癌(Colorectal cancer)是胃肠道中常见的恶性肿瘤。IFITM1是干扰素诱导的跨膜蛋白家族(IFITMs)的重要组成成分,在多种癌组织中高表达,同时也因能够通过促进肿瘤发展过程而牵扯进来。但是人们对IFITM1的了解仅限于其参与机体对抗病毒过程。方法:这项研究通过使用Oncomine(https://www.oncomine.org),基因表达谱互动分析(GEPIA),Kaplan-Meier绘图仪、cBioPortal、GeneMANIA和TIMER这些工具,分析结直肠癌癌患者中的IFITM1的差异表达、预后价值、基因改变和免疫细胞浸润。结果:IFITM1在结直肠癌组织中的表达水平明显升高,IFITM1与患者的临床癌症分期和短无病生存期(OS)有关。其可能是结直肠癌患者生存的潜在预后生物标志物。此外,IFITM1的功能主要与免疫应答、细胞对刺激的反应、免疫效应器过程、生物体之间的物种间相互作用以及细胞表面受体信号通路有关。在结肠癌和直肠癌中,IFITM1的表达与多种免疫细胞和浸润明显相关,包括六种类型的CD4+T细胞、巨噬细胞、中性粒细胞、B细胞、CD8+T细胞和树突状细胞。结论:这项研究可能为选择IFITM1作为结直肠癌预后生物标志物提供新的见解。

干扰素介导的跨膜蛋白1与卵巢上皮性癌耐药相关性研究

目的:探讨干扰素介导的跨膜蛋白1(IFITM1)与卵巢上皮性癌化疗耐药性的相关性。方法:应用免疫组化测定68例初治卵巢上皮性癌组织和卵巢癌顺铂敏感细胞株A2780、顺铂耐药细胞株CP70中IFITM1的表达,Western blotting检测两种卵巢癌细胞株中IFITM1蛋白的表达。结果:免疫组织化学显示铂类化疗敏感性卵巢癌组和耐药性卵巢癌组的表达强度之间的差异有统计学意义(P=0.043),Western blot实验显示卵巢癌CP70细胞株中IFITM1表达水平明显高于A2780细胞株。结论:IFITM1表达强度与卵巢癌铂类化疗的敏感性相关,检测IFITM1对判断卵巢癌化疗疗效具有临床意义。

干扰素诱导的跨膜蛋白1在结直肠癌中表达及其临床意义

目的探讨干扰素诱导的跨膜蛋白1(IFITM1)在结直肠癌中的表达及临床意义。方法收集144例具有完整临床病理资料的结直肠腺癌组织标本,运用组织芯片技术和免疫组化法检测IFITM1在结直肠癌及其对应癌旁组织中的表达,分析IFITM1表达与临床病理特征、总生存时间(OS)的关系,以及影响预后的因素。结果 IFITM1在结肠腺癌组织中的高、中、低表达率分别为7.7%、36.9%、55.4%,癌旁组织中分别为3.1%、27.7%、69.2%,差异有统计学意义(P=0.044);IFITM1在直肠腺癌组织中高、中、低表达率分别为1.3%、39.2%、59.5%,在癌旁组织中分别为5.1%、36.9%、58.2%,差异无统计学意义(P=0.569)。IFITM1表达水平和结直肠癌组织分化有关(P=0.031),与年龄、性别、淋巴结转移、远处转移及TNM分期等无关(P>0.05)。IFITM1高、中、低表达结直肠癌患者的中位OS分别为34.3个月、45.7个月和46.7个月(P=0.700);结肠癌患者的中位OS分别为38.2个月、48.0个月和43.5个月;直肠腺癌患者的中位OS分别为15.0个月、42.7个月和50.1个月(P=0.037)。单因素和多因素分析显示,IFITM1的表达水平不是影响结直肠癌预后的因素。结论结直肠癌组织中IFITM1表达与组织分化无关。

干扰素介导的跨膜蛋白1在卵巢上皮性癌中的表达

目的探讨卵巢上皮性癌中干扰素介导的跨膜蛋白1(IFITM1)基因的表达及其临床意义。方法应用免疫组织化学检测42例正常卵巢、51例卵巢良性肿瘤、48例卵巢交界性肿瘤和85例卵巢上皮性癌组织中IFITM1的阳性表达,同时分析IFITM1蛋白表达状况与上皮性卵巢癌各临床病理因素之间的关系。结果免疫组化显示IFITM1蛋白表达强度在正常卵巢、良性卵巢肿瘤、交界性卵巢肿瘤、上皮性卵巢癌间有统计学意义(x^2=8.407,P=0.004)。正常卵巢组织中IFITM1阳性表达率为40.5%(17/42),卵巢良性肿瘤组织中70.5%(36/51),卵巢交界性肿瘤组织中为70.8%(34/48),卵巢上皮性癌中为77.6%(66/85),IFITM1的阳性表达率在4种卵巢组织中比较有统计学意义(x^2=18.491,P<0.001)。IFITM1在上皮性卵巢癌中的表达与FIGO分期、细胞分化程度和组织学类型性有关(x^2值分别为4.307、6.959、8.539,均P<0.05),早期卵巢癌(Ⅰ+Ⅱ)中IFITM1蛋白表达低于晚期卵巢癌(Ⅲ+Ⅳ)x^2=4.307,P=0.038),随着肿瘤细胞分化程度的降低,IFITM1表达率逐渐增高。IFITM1蛋白表达与淋巴转移、腹水无统计学相关性(x^2值分别为0.111、0.024,均P>0.05)。耐药性卵巢癌中IFITM1阳性表达显著高于敏感组(x^2=34.843,P<0.001)。结论 IFITM1表达在卵巢上皮性癌组织中明显高于正常卵巢、卵巢良性肿瘤和卵巢交界性肿瘤,提示IFITM1参与了卵巢癌的发生和进展,并对以铂类为基础的化疗耐药性产生有临床预测价值。

干扰素诱导跨膜蛋白1对猪源冠状病毒吸附宿主细胞的影响

为探索干扰素诱导跨膜蛋白1(interferon-inducible transmembrane protein 1,IFITM1)对猪源冠状病毒复制的影响,本研究选用猪传染性胃肠炎病毒(Transmissible gastroenteritis virus,TGEV)高致病毒株及其宿主细胞PK15作为研究对象。正常PK15细胞接种TGEV后,实时荧光定量PCR检测感染后不同时间点PK15细胞中一些干扰素刺激基因(interferon-stimulated genes,ISGs)的mRNA表达水平;利用慢病毒表达系统构建稳定表达和稳定干扰IFITM1表达的PK15细胞系。将一段靶向干扰猪源IFITM1的shRNA序列及猪源IFITM1全长,分别插入pLKO.1-EGFP-Puro载体及pLVML-Myc-MCS-IRES-Puro载体中,分别构建出pLKO.1-IFITM1shRNA-EGFP-Puro及pLVML-Myc-IFITM1-IRES-Puro重组质粒。将重组质粒与慢病毒包装质粒共转染293FT细胞后获得带有目的基因的重组慢病毒,慢病毒侵染PK15细胞后用嘌呤霉素进行筛选,获得稳定表达及稳定干扰IFITM1表达的PK15细胞系,分别命名为PK15-IFITM1及PK15-IFITM1-/-,并分别用实时荧光定量PCR、间接免疫荧光试验(IFA)及Western blotting检测IFITM1干扰效率及表达情况;TGEV接种PK15-IFITM1-/-和PK15-IFITM1,实时荧光定量PCR测定细胞中TGEV的拷贝数。结果显示,PK15细胞接种TGEV后的48 h内,一些ISGs的mRNA水平均有所上升;PK15-IFITM1-/-细胞系的干扰效率为70%,PK15-IFITM1细胞系表达成功;在PK15-IFITM1-/-细胞系中,IFITM1的mRNA水平显著下调,促进了TGEV的复制。反之,在PK15-IFITM1细胞系中,TGEV的复制受到了抑制。但IFITM1的表达或缺失却不影响TGEV对PK15的吸附作用。总之,IFITM1对TGEV有显著的抗病毒作用,IFITM1不影响TGEV对PK15细胞的早期吸附,这为后续IFITM1抗冠状病毒机制的研究奠定了基础。

IFITM1基因多态性对儿童流感发病风险和病情严重程度影响的研究

探讨干扰素诱导跨膜蛋白1(IFITM1)基因多态性对儿童流感发病风险和病情严重程度之间的关系。方法 选择来我院治疗的98例流感患儿和110例健康儿童。通过聚合酶链反应-限制性片段长度多态性技术(PCR-RFLP)来分析IFITM1基因3个不同区域的多态性位点(rs77537847、rs11246062和rs3197137)。使用SHEsis在线网站分析IFITM1基因3个位点的哈德温伯格平衡(HWE)。以流感类型和病情严重程度为条件,进行亚型分析。结果 与对照组相比,rs77537847位点的GG基因型频率和G等位基因频率在流感患儿中明显较高(P<0.05)。在亚组分析中,发现rs77537847的基因型频率分布与患儿流感类型无关(P>0.05)。但该位点的GG基因型与更重的病情程度有关(P<0.05)。结论 IFITM1基因rs77537847位点的GG基因型与儿童较高的流感感染率有关,并预示着更严重的流感病情。这可能为将来筛查流感易感及重症人群提供了潜在标志物。

IFITM1蛋白在新疆维吾尔族妇女子宫颈癌mRNA的表达水平

目的:研究IFITM1蛋白在新疆维吾尔族妇女子宫颈鳞癌组织中的表达及临床意义。方法:应用实时定量逆转录PCR方法检测15例维吾尔族妇女子宫颈鳞癌及其癌旁子宫颈正常组织中IFITM1基因mRNA表达水平。结果:15例子宫颈癌组织中IFITM1的mRNA表达丰度为(64.79±42.71)%,正常宫颈组织中IFIM1的mRNA的表达丰度为(128.29±88.77)%,正常宫颈组织表达丰度显著高于子宫颈癌组织(t=-2.497,P=0.09)。新疆维吾尔族妇女慢性子宫颈炎与子宫颈鳞癌组织中IFITM1基因mRNA的表达具有统计学差异(P<0.05)。结论:IFITM1蛋白与新疆维吾尔族妇女的子宫颈鳞癌有着密切的关系,该基因可能是一种潜在的抑制子宫颈鳞癌发生的基因。