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FMDV 3D基因真核表达质粒的构建、表达及对Ⅰ型IFN信号通路的作用
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作者 苗勤 吴香菊 +4 位作者 齐静 丛晓燕 李均同 王林 杜以军 《山东农业科学》 北大核心 2024年第2期144-150,共7页
本研究旨在构建口蹄疫病毒(Foot-and-mouth disease virus,FMDV)3D基因真核表达质粒,并探究其对Ⅰ型干扰素(interferon,IFN)信号通路的作用。根据GenBank序列合成3D基因并将其插入真核表达载体pXJ41构建真核表达质粒pXJ41-Myc-3D,经PCR... 本研究旨在构建口蹄疫病毒(Foot-and-mouth disease virus,FMDV)3D基因真核表达质粒,并探究其对Ⅰ型干扰素(interferon,IFN)信号通路的作用。根据GenBank序列合成3D基因并将其插入真核表达载体pXJ41构建真核表达质粒pXJ41-Myc-3D,经PCR、双酶切及测序鉴定正确后分别转染HEK-293T细胞和PK-15细胞,Western blotting及间接免疫荧光试验(indirect immunofluorescence assay,IFA)检测3D蛋白在细胞内的表达及定位。通过双荧光素酶报告基因(Luciferase)、Real-time PCR、TCID50等试验检测HEK-293T细胞中过表达3D蛋白对水疱性口炎病毒(Versicular stomatitis virus,VSV)诱导的Ⅰ型IFN信号通路的影响。结果显示,真核表达质粒pXJ41-Myc-3D构建成功;3D蛋白在HEK-293T细胞中表达,大小约为55 kDa,主要定位在细胞核中;3D蛋白抑制了VSV诱导的IFN-β启动子活性和IFN-β mRNA水平,促进了VSV的复制。本研究为深入探究3D蛋白抑制Ⅰ型IFN信号通路的作用机制奠定了基础。 展开更多
关键词 口蹄疫病毒 3D蛋白 真核表达 Ⅰ型ifn信号通路
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IFNα-2b治疗323例HBeAg阳性慢性乙型肝炎的效果
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作者 徐慧丽 吴志国 孙水林 《南昌大学学报(医学版)》 2024年第3期1-5,共5页
目的 探讨IFNα-2b抗病毒治疗乙型肝炎e抗原(HBeAg)阳性慢性乙型肝炎(CHB)患者的效果。方法回顾性分析2010年1月至2014年1月就诊于南昌大学第二附属医院并接受IFNα-2b治疗的323例HBeAg阳性CHB患者的临床资料,按丙氨酸氨基转移酶(ALT)... 目的 探讨IFNα-2b抗病毒治疗乙型肝炎e抗原(HBeAg)阳性慢性乙型肝炎(CHB)患者的效果。方法回顾性分析2010年1月至2014年1月就诊于南昌大学第二附属医院并接受IFNα-2b治疗的323例HBeAg阳性CHB患者的临床资料,按丙氨酸氨基转移酶(ALT)水平将其分为3组:ALT<2×ULN(A1组,n=111)、2×ULN≤ALT≤5×ULN(A2组,n=111)以及ALT>5×ULN(A3组,n=101)。观察临床疗效及不良反应,并比较3组间的抗病毒效果。结果 在停药时及停药后第12、24、48、72、96、144、192、240周,323例患者的HBV-DNA阴转率分别为39.9%、40.2%、39.0%、36.2%、34.1%、33.4%、31.3%、30.7%、30.7%;HBsAg阴转率分别为6.2%、6.2%、6.2%、5.9%、5.9%、5.9%、5.6%、5.6%、5.6%;HBeAg血清学转换率分别为28.2%、31.0%、32.8%、34.4%、33.7%、33.1%、32.8%、32.5%、31.6%。在各随访时间点,3组患者的HBV-DNA阴转率和HBeAg血清学转换率比较,A3组显著高于A2组,A2组显著高于A1组(P<0.05);3组患者的HBsAg阴转率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。323例患者均出现发热及类流感样症状,238例(73.7%)出现白细胞及中性粒细胞降低,35例(10.8%)甲状腺功能异常,5例(1.5%)斑秃,1例(0.3%)睡眠障碍,经过密切观察和对症处理后,患者均顺利完成疗程,各指标均基本正常。结论 IFNα-2b治疗HBeAg阳性CHB患者在停药时及停药后随访期间均表现出较好的效果,大多数患者可耐受IFNα-2b的不良反应。IFNα-2b的抗病毒效果可能与ALT水平有关。 展开更多
关键词 HBEAG阳性 慢性乙型肝炎 ifnΑ-2B 疗效
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化疗联合免疫治疗局部晚期食管癌疗效及对Sil⁃2R、IFN⁃γ、TSGF水平的影响
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作者 魏丹丹 方金满 +2 位作者 王明喜 王伟 汤振 《分子诊断与治疗杂志》 2024年第8期1524-1528,共5页
目的研究化疗联合免疫治疗局部晚期食管癌(LAEC)疗效及对可溶性白细胞介素⁃2受体(Sil⁃2R)、γ⁃干扰素(IFN⁃γ)及恶性肿瘤特异生长因子(TSGF)水平的影响。方法选择2021年3月至2023年7月于中国科学院合肥肿瘤医院治疗的LAEC患者106例,依... 目的研究化疗联合免疫治疗局部晚期食管癌(LAEC)疗效及对可溶性白细胞介素⁃2受体(Sil⁃2R)、γ⁃干扰素(IFN⁃γ)及恶性肿瘤特异生长因子(TSGF)水平的影响。方法选择2021年3月至2023年7月于中国科学院合肥肿瘤医院治疗的LAEC患者106例,依据随机数字表法将106例患者分为试验组(n=53)、对照组(n=53)。对照组行标准化疗,试验组行化疗联合免疫治疗。观察两组临床疗效、不良反应,比较两组治疗前后血清程序性死亡配体1(PD⁃L1)、程序性死亡受体1(PD⁃1)、Sil⁃2R、IFN⁃γ、TSGF水平。结果试验组客观缓解率(ORR)、疾病控制率(DCR)均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。两组治疗期间各不良反应分级比较差异无统计学意义(P>0.05)。治疗后,试验组血清PD⁃L1、PD⁃1及Sil⁃2R、TSGF水平均低于对照组,血清IFN⁃γ水平高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论化疗联合免疫治疗可有效降低LAEC患者免疫检查点活性,增强机体免疫,可促进产生IFN⁃γ,抑制Sil⁃2R、TSGF生成,疗效较好,且不增加不良反应,具有一定的临床应用价值。 展开更多
关键词 化疗 免疫治疗 局部晚期食管癌 Sil⁃2R ifn⁃γ TSGF
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奶牛乳房炎相关IFNE基因的克隆、表达及功能研究
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作者 王正兴 罗仍卓么 +2 位作者 王晋鹏 包斌武 王兴平 《西南农业学报》 CSCD 北大核心 2024年第2期420-428,共9页
【目的】研究干扰素ε(Interferon epsilon,IFNE)基因在奶牛乳腺上皮细胞(Bovine mammary epithelial cells,bMECs)炎症中的表达模式及其潜在的分子功能。【方法】通过PCR和测序技术得到IFNE基因的编码区(Coding sequence,CDS)序列,并... 【目的】研究干扰素ε(Interferon epsilon,IFNE)基因在奶牛乳腺上皮细胞(Bovine mammary epithelial cells,bMECs)炎症中的表达模式及其潜在的分子功能。【方法】通过PCR和测序技术得到IFNE基因的编码区(Coding sequence,CDS)序列,并采用生物信息学方法分析IFNE基因及其蛋白质特性;利用RNAi和qPCR技术检测IFNE、干扰素β(Interferon beta,IFNB)、干扰素κ(Inter⁃feronκ,IFNK)、半胱天冬酶3(Cystathione aspartase 3,CASP3)、半胱天冬酶9(Cystathione aspartase 9,CASP9)等基因在脂多糖(Li⁃popolysaccharide,LPS)诱导bMECs炎症反应中的表达量。【结果】IFNE基因的CDS长度为582 bp,可编码由193个氨基酸组成的具有亲水性且不稳定的非分泌蛋白。与对照组(0 h)相比,在LPS诱导3、6、12和24 h的bMECs中白细胞介素⁃6(Interleukin⁃6,IL⁃6)和白细胞介素⁃1β(Interleukin⁃1β,IL⁃1β)的表达量均显著上调(P<0.05,下同),白细胞介素⁃8(Interleukin⁃8,IL⁃8)的表达量极显著上调(P<0.01,下同),表明成功构建了炎症细胞模型。在炎症细胞模型构建成功的基础上,采用qPCR检测bMECs内IFNE基因的表达量结果表明,与对照组(0 h)相比,IFNE基因在LPS诱导bMECs 3、6、12和24 h的表达量均极显著上调,且在诱导6 h的表达量最高。RNAi实验结果表明,干扰IFNE可使得炎症性bMECs内的IL⁃8、IFNB、IFNK和白细胞介素⁃10受体亚基β(Interleu⁃kin⁃10 receptor subunitβ,IL⁃10RB)基因的表达量均显著上调,IL⁃6、IL⁃1β、CASP3、CASP9和BAD基因的表达量均呈极显著上调。【结论】IFNE基因在LPS诱导的bMECs炎症反应中的表达量极显著上调,干扰IFNE基因可通过调控IL⁃6、IL⁃8、IL⁃1β、IFNB、IF⁃NK、CASP3和CASP9等基因的表达而缓解bMECs炎症反应,为奶牛乳房炎的分子治疗和抗乳房炎分子育种奠定理论基础。 展开更多
关键词 奶牛 乳腺上皮细胞 ifnE 生物信息学分析 乳房炎
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PEG-IFNα-2b联合替诺福韦治疗慢性乙型肝炎的疗效及对HBeAg转阴率、免疫功能的影响
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作者 王雪艳 吴参参 《淮海医药》 CAS 2024年第3期298-301,共4页
目的:分析聚乙二醇干扰素α-2b(PEG-IFNα-2b)联合替诺福韦治疗慢性乙型肝炎的效果及对HBeAg转阴率、免疫功能的影响。方法:选取某院2019年3月—2022年3月收治的慢性乙型肝炎患者88例作为研究对象,依据随机抽签法分成研究组与对照组,每... 目的:分析聚乙二醇干扰素α-2b(PEG-IFNα-2b)联合替诺福韦治疗慢性乙型肝炎的效果及对HBeAg转阴率、免疫功能的影响。方法:选取某院2019年3月—2022年3月收治的慢性乙型肝炎患者88例作为研究对象,依据随机抽签法分成研究组与对照组,每组44例。对照组接受替诺福韦治疗,研究组接受PEG-IFNα-2b联合替诺福韦治疗,比较2组HBeAg转阴率、HBsAg转阴率、治疗前后肝功能指标[谷氨酰转肽酶(GGT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)]、免疫功能指标(CD3^(+)、CD4^(+)/CD8^(+)、C3、C4)及血清炎性因子[视黄酸受体相关孤核受体(RORγt)、白细胞介素-17(IL-17)、IL-4]水平。结果:研究组HBeAg转阴率、HBsAg转阴率分别为45.45%、13.64%,高于对照组的11.36%、0,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后,研究组GGT、AST、ALT、IL-4、IL-17、RORγt分别为(30.42±5.39)U/L、(31.08±6.64)U/L、(29.37±4.68)U/L、(1.32±0.42)pg/mL、(0.64±0.19)pg/mL、(0.80±0.30),均低于对照组的(56.93±8.75)U/L、(38.72±5.83)U/L、(49.61±6.42)U/L、(3.91±1.14)pg/ml、(3.01±0.87)pg/ml、(1.61±0.36),差异有统计学意义(P<0.05)。研究组CD3^(+)、CD4^(+)/CD8^(+)、C3、C4分别为(66.81±8.55)%、(1.53±0.16)、(1.22±0.01)g/L、(0.42±0.07)g/L,均高于对照组的(61.03±8.49)%、(1.26±0.2)、(0.73±0.09)g/L、(0.22±0.06)g/L,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:PEG-IFNα-2b联合替诺福韦治疗慢性乙型肝炎效果明显,可提高HBeAg、HBsAg转阴率,改善肝功能,增强免疫功能,抑制炎性反应。 展开更多
关键词 乙型肝炎 慢性 PEG ifnα-2b 替诺福韦 免疫功能 HBEAG
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惠阳胡须鸡IFN-α基因克隆和序列分析 被引量:16
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作者 夏春 汪明 +3 位作者 朱凌云 刘津 吴志光 郭玉璞 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2000年第6期563-566,共4页
根据红色原鸡IFN A基因设计了引物对 ,采用PCR法克隆并测序了我国地方标准品种惠阳胡须鸡的IFN α基因 ,定名为HyIFNA4。HyIFNA4与红色原鸡类IFN α比较 ,ORF长度均为 582个核苷酸、编码 162个氨基酸 ,相互间同源性在 97 4 %~ 99%。
关键词 惠阳胡须鸡 ifn 干扰素基因 克隆 序列分析
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IFNγ 防治大鼠胆总管结扎所致肝纤维化的实验研究 被引量:12
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作者 沈宏亮 徐冠南 +3 位作者 陈克明 王元和 张璞 付志仁 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 1999年第1期48-50,F003,共4页
目的:了解IFNγ对持续肝外性淤胆所致肝纤维化的作用。方法:制作大鼠持续肝外性淤胆模型,用药组于胆管结扎同时每日肌注IFNγ5×104U,用药2周;对照组则仅行胆管结扎而不用药。2周后分别测定血清生化指标、肝纤维... 目的:了解IFNγ对持续肝外性淤胆所致肝纤维化的作用。方法:制作大鼠持续肝外性淤胆模型,用药组于胆管结扎同时每日肌注IFNγ5×104U,用药2周;对照组则仅行胆管结扎而不用药。2周后分别测定血清生化指标、肝纤维化指标及肝能量代谢有关指标。结果:IFNγ可改善血清生化指标(P<0.01或P<0.05)。在组织学表现上,用药组肝纤维化程度显著低于单纯结扎组(P<0.01)。用药组大鼠淤胆后肝羟脯氨酸及血清透明质酸水平升高明显受抑(P<0.01)。肝ATP及CP测定显示淤胆合并用药时两者均保持于较高水平。 展开更多
关键词 干扰素 肝外 肝纤维化 ifnΓ 胆汁淤积
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细菌内毒素对鸡NLRC5受体及IFN基因转录的影响 被引量:9
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作者 常国斌 陈蓉 +6 位作者 栾德琴 张颖 刘向萍 马腾 戴爱琴 周伟 陈国宏 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第11期1598-1604,共7页
本研究旨在探讨鸡NLRC5受体及IFN基因对不同细菌内毒素的诱导表达变化,为禽类NLRC5受体的分子功能及其参与先天免疫调控的作用机制提供理论依据。用不同浓度的(0、0.1、1.0、10.0μg.mL-1)来自致病性大肠杆菌(E.coli,EC)和肠炎沙门氏菌(... 本研究旨在探讨鸡NLRC5受体及IFN基因对不同细菌内毒素的诱导表达变化,为禽类NLRC5受体的分子功能及其参与先天免疫调控的作用机制提供理论依据。用不同浓度的(0、0.1、1.0、10.0μg.mL-1)来自致病性大肠杆菌(E.coli,EC)和肠炎沙门氏菌(S.enteriditis,SE)的2种内毒素(LPS)分别刺激鸡天然巨噬细胞系(HD11)2、4和6h,在不同的时间点收集细胞,提取总RNA,并设计相关引物,利用荧光定量PCR分析鸡NLRC5受体以及下游功能基因IFNA和IFNB的转录量变化,探讨HD11细胞对不同来源的细菌内毒素的免疫反应。研究表明:与对照组相比,1.0和10.0μg.mL-1的EC-LPS、SE-LPS均能诱导HD11细胞产生免疫应答,但0.1μg.mL-1组未能诱导成功;不同细菌LPS诱导的免疫应答时间不一致,经EC-LPS诱导的NLRC5和IFNB基因均在刺激后6h达到转录高峰,与2、4h差异显著(P<0.05),与对照组差异极显著(P<0.01);但IFNA基因在2、6h达到高峰,而在4h下降,呈"V"型转录趋势。SE-LPS诱导的NLRC5和IFNA、IFNB转录量随时间均保持一直上升的趋势,在6h达到高峰,且与对照组及2、4h差异显著(P<0.05)。结果表明NLRC5受体与IFNA和IFNB共同参与了细胞对细菌内毒素的免疫应答,NLRC5基因可能对鸡先天免疫功能具有调节作用。 展开更多
关键词 NLRC5 ifn 先天免疫 调节
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猪IFNα基因在毕赤酵母中的高效分泌表达 被引量:12
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作者 黄海 谢蓓 +4 位作者 于瑞嵩 刘惠莉 张德福 曹祥荣 李震 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2005年第2期215-220,共6页
巴斯德毕赤酵母载体质粒 pPICZαA含有强启动子 PAOXⅠ和α MF信号肽序列,构建猪 IFNα基因的重组质粒pPICZαA IFNα,并转入E .coli JM109中,得到转猪IFNα基因工程菌,经酶切鉴定克隆到载体pPICZαA上的外源基因即为猪 IFNα基因。通... 巴斯德毕赤酵母载体质粒 pPICZαA含有强启动子 PAOXⅠ和α MF信号肽序列,构建猪 IFNα基因的重组质粒pPICZαA IFNα,并转入E .coli JM109中,得到转猪IFNα基因工程菌,经酶切鉴定克隆到载体pPICZαA上的外源基因即为猪 IFNα基因。通过电击将经 SacⅠ酶切后线性化的 pPICZαA IFNα质粒转化到巴斯德毕赤酵母 KM71中。SDS PAGE和Western blot鉴定表达产物的结果表明,分泌于胞外的猪 IFNα蛋白分子量比猪IFNα理论值分子量稍大,估计是糖基化的原因。表达的蛋白可发生正确的抗原 抗体反应,表达量为 0.45 mg/mL。将蛋白表达上清经细胞毒性实验检测表达产物的抗病毒活性为2.1×104 IU/mL。 展开更多
关键词 ifnΑ 巴斯德毕赤酵母 基因重组 分泌表达
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当归多糖组分AP-3诱生小鼠脾细胞IL-2和IFN-γ的作用 被引量:24
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作者 杨铁虹 贾敏 梅其炳 《药学学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第1期54-57,共4页
目的研究当归多糖组分AP-3对细胞因子IL-2和IFN—γ的诱生作用,以探讨其免疫调节的特点。方法流式细胞术测定培养的脾细胞中Cd4^+细胞比例;酶联免疫法测定培养上清液中IL-2和IFN-γ的浓度;RT—PCR法测定IL-2和IFN-γ mRNA的转录水... 目的研究当归多糖组分AP-3对细胞因子IL-2和IFN—γ的诱生作用,以探讨其免疫调节的特点。方法流式细胞术测定培养的脾细胞中Cd4^+细胞比例;酶联免疫法测定培养上清液中IL-2和IFN-γ的浓度;RT—PCR法测定IL-2和IFN-γ mRNA的转录水平。结果AP-3在0.6~2μmol·L^-1,能显著提高培养脾细胞CD^4+细胞的百分率;在2~6μmol·L^-1,AP-3时间、剂量依赖性地增加培养的细胞上清液中IL-2的浓度和细胞内IL-2 mRNA的转录水平,而对于IFN-γ和IFN-7 mRNA,则先升高后降低,并呈现剂量依赖性。结论当归多糖能够促进IL-2和IFN-γ的分泌,激活Th1细胞,从而发挥免疫调节作用。 展开更多
关键词 当归多糖 IL-2 ifn—γ TH细胞
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左旋咪唑对实验性过敏性脑脊髓炎大鼠脊髓ICAM-1、iNOS及IFNγmRNA表达的影响 被引量:15
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作者 邢清和 郑荣远 +2 位作者 韩钊 王永铭 贺林 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第6期420-421,共2页
关键词 左旋咪唑 实验性过敏性脑脊髓炎 ICAM-1 INOS ifnΓ MRNA表达 LMS EAE
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促肝细胞生长素、IFN及IL-2对成纤维细胞增殖和分泌作用 被引量:19
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作者 叶红军 金珍婧 +3 位作者 袁继红 王丽华 房家智 石国栋 《临床肝胆病杂志》 CAS 1996年第1期20-22,共3页
本文探讨了促肝细胞生长素(PHGF)、重组干扰素a-2b(IFN)及白细胞介素2(IL─2)对体外培养成纤维细胞增殖的作用。结果表明,IFN和IL─2可促进细胞的增殖和核分裂,发挥丝裂原作用。PHGF则抑制细胞增殖和... 本文探讨了促肝细胞生长素(PHGF)、重组干扰素a-2b(IFN)及白细胞介素2(IL─2)对体外培养成纤维细胞增殖的作用。结果表明,IFN和IL─2可促进细胞的增殖和核分裂,发挥丝裂原作用。PHGF则抑制细胞增殖和核分裂,线粒体和粗面内质网变性,其培养上清羟脯氨酸(HYP)水平降低。提示PHGF通过抑制成纤维细胞增殖和细胞产生HYP的分泌作用,而发挥抗纤维化作用。P<0.01。讨论肝纤维化早期,细胞因子网络异常可导致肝纤维化的发生和发展〔2〕。据CgajaMJ氏研究,IFNγ可减少胶原mRNA水平,抑制肝内纤维的产生〔3〕高春芳等报道,IFN可促进体外培养肝细胞和T3细胞增殖,其机制不清〔4〕。IL─2是由T细胞产生的淋巴因子,在机体免疫调节中发挥重要作用。已有报道,慢性乙肝病人IL─1活性增强,与肝纤维化程度有关。其IL─2活性低下,与肝纤维化无相关性。〔5〕。本文结果表明,IFN和IL─2单独作用于成纤维细胞,均促进细胞分裂,使其数量增多,核分裂明显增多,并使线粒体数量增多。线粒体的增生,可活跃细胞的生物氧化功能和蛋白质合成,促进其代谢和分化,从而发挥丝裂原的作用。HYP是体内胶原纤维的主要成分,其含? 展开更多
关键词 肝纤维化 促肝细胞生长素 ifn IL-2 成纤维细胞
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荨麻疹患者外周血单个核细胞产生IL-4、IL-10及IFNγ水平及意义 被引量:18
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作者 刘宝军 王青 +2 位作者 刘超 赵凯 张士发 《临床皮肤科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第2期87-88,共2页
为研究荨麻疹患者外周血单个核细胞(PBMC)产生白细胞介素-4(IL-4),白细胞介素-10(IL-10)及γ干扰素(IFNγ)的水平,采用双抗体夹心ELISA方法,测定了23例荨麻疹患者PBMC产生IL-4、IL-10及IFNγ水平。结果表明荨麻疹患者PBMC产生IL-4水平... 为研究荨麻疹患者外周血单个核细胞(PBMC)产生白细胞介素-4(IL-4),白细胞介素-10(IL-10)及γ干扰素(IFNγ)的水平,采用双抗体夹心ELISA方法,测定了23例荨麻疹患者PBMC产生IL-4、IL-10及IFNγ水平。结果表明荨麻疹患者PBMC产生IL-4水平明显高于正常人(P<0.01),而产生IL-10及IFNγ水平与正常人相差不显著(P>0.05)。IL-4在Ⅰ型变态反应荨麻疹发病中可能起一定作用。 展开更多
关键词 荨麻疹 白细胞介素-4 白细胞介素-10 干扰素 外周血单个核细胞 IL-4 IL-10 ifnΓ
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黄芩 柴胡及其配伍提取物对心肌炎小鼠心肌组织CVB3m RNA复制及IFNm RNA表达的影响 被引量:8
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作者 刘芳 王雪峰 +3 位作者 闫丽娟 南春红 岳志军 杨贵将 《中华中医药学刊》 CAS 2010年第8期1601-1604,共4页
目的:研究黄芩、柴胡及其配伍提取物对心肌炎小鼠心肌组织CVB3mRNA复制及IFNmRNA表达的影响。方法:将Balb/c小鼠随机分为:柴胡组、黄芩组、配伍组,模型组和正常对照组。腹腔注射CVB3m病毒诱导Balb/c小鼠心肌炎模型,采用RT-PCR技术,检测... 目的:研究黄芩、柴胡及其配伍提取物对心肌炎小鼠心肌组织CVB3mRNA复制及IFNmRNA表达的影响。方法:将Balb/c小鼠随机分为:柴胡组、黄芩组、配伍组,模型组和正常对照组。腹腔注射CVB3m病毒诱导Balb/c小鼠心肌炎模型,采用RT-PCR技术,检测各组小鼠给药后不同时间点心肌组织中CVB3m RNA的复制和IFNm RNA的表达情况。结果:3个给药组心肌组织中CVB3m-RNA的量明显低于模型对照组,其中黄芩组和配伍物组抗病毒作用明显;柴胡组和配伍组均可诱生干扰素,与模型组比较有显著差异。结论:黄芩提取物组具有明显抗病毒作用;柴胡在疾病早期具有明显抗病毒作用,且具有明显诱生干扰素的作用;配伍提取物组具有明显抗病毒和诱生干扰素作用,在疾病极期表现明显优势。 展开更多
关键词 病毒性心肌炎 黄芩 柴胡 中药提取物 ifn CVB3M
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RARE介导的视黄酸可调控的IFN-α表达载体的构建与鉴定 被引量:5
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作者 张乾勇 糜漫天 +2 位作者 程天民 韦娜 朱晓霞 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第4期277-280,共4页
目的构建一个含视黄酸反应元件 ( RARE)的 IFN- α表达载体 ,使其在真核细胞内的表达受视黄酸 ( RA)的诱导。方法运用 DNA重组技术构建含有 4个 RARE重复序列的 IFN- α真核表达载体 ( p RARE4 - IFN- α) ,经酶切、PCR鉴定和测序确认... 目的构建一个含视黄酸反应元件 ( RARE)的 IFN- α表达载体 ,使其在真核细胞内的表达受视黄酸 ( RA)的诱导。方法运用 DNA重组技术构建含有 4个 RARE重复序列的 IFN- α真核表达载体 ( p RARE4 - IFN- α) ,经酶切、PCR鉴定和测序确认后 ,用脂质体转染法使其转染 HL- 60细胞 (人早幼粒白血病细胞系 )、Bcap- 3 7和 MCF- 7细胞 (人乳腺癌细胞系 ) ,RA处理后 ,RT- PCR分析 IFN- α m RNA水平 ,EL ISA检测培养细胞上清中 IFN- α含量。结果 p RARE4 - IFN- α转染的 HL- 60、Bcap- 3 7和 MCF- 7细胞 ,IFN- α分泌量为 16~ 2 4 ng/ ( m L· 10 6 )细胞 ,而经 RA处理 2 4 h,IFN- α表达水平可增加 8~ 13倍 ,但经 RA处理 2 4 h的细胞 ,换无 RA的新鲜培养基继续培养 2 4 h后 ,IFN- α表达水平又下降到 2 5~ 3 4 ng/ ( m L· 10 6 )细胞。结论带有 RARE的 IFN- α表达载体转染细胞后 ,外源性 IFN- α基因的表达受 RA的诱导。 展开更多
关键词 视黄酸 干扰素 高黄酸反应元件 表达载体 ifnΑ 药物治疗 肿瘤
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小儿哮喘发病中CD23、IFN和IgE的作用及其意义 被引量:4
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作者 周云桂 黄绍良 +3 位作者 李树浓 麦贤弟 朱昌国 黄花荣 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1997年第6期381-383,共3页
应用APAAP方法,Dot-blot地高辛标记核酸杂交技术及ABC-ELISA法分别检测哮喘患儿淋巴细胞CD23mRNA,膜CD23分子表达和患儿血浆和淋巴细胞诱生IFN-γ水平。结果,哮喘患儿CD23mRNA表达增... 应用APAAP方法,Dot-blot地高辛标记核酸杂交技术及ABC-ELISA法分别检测哮喘患儿淋巴细胞CD23mRNA,膜CD23分子表达和患儿血浆和淋巴细胞诱生IFN-γ水平。结果,哮喘患儿CD23mRNA表达增高,外周血PBMC和B细胞的CD23表达均显著增加,IFN-γ诱生水平明显低下,血清IgE水平异常升高,B细胞CD23分子表达与IgE水平之间显著正相关,麻疹疫苗治疗后B细胞CD23分子表达明显降低,而IFN-γ诱生水平仍低下。 展开更多
关键词 哮喘 CD23 ifn 基因表达 儿童
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小鼠内皮抑素基因克隆、测序及pEgr-IFNγ-mEndostatin重组双基因表达质粒的构建 被引量:6
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作者 杨巍 刘林林 +5 位作者 孙婷 李秀娟 田梅 朴春姬 潘艳 李修义 《吉林大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2004年第1期17-19,共3页
目的 :克隆小鼠内皮抑素 (m Endostatin)编码区 c DNA序列并构建含 Egr- 1启动子的 IFNγ和 m Endo-statin双基因表达载体。方法 :利用逆转录多聚酶链反应法 (RT- PCR) ,以小鼠肝细胞 m RNA为模板 ,扩增获得全长 m Endostatin,与 p MD1... 目的 :克隆小鼠内皮抑素 (m Endostatin)编码区 c DNA序列并构建含 Egr- 1启动子的 IFNγ和 m Endo-statin双基因表达载体。方法 :利用逆转录多聚酶链反应法 (RT- PCR) ,以小鼠肝细胞 m RNA为模板 ,扩增获得全长 m Endostatin,与 p MD1 8T载体连接作全自动测序 ,并利用基因重组技术构建含 Egr- 1启动子的 IFNγ和m Endostatin双基因表达质粒。结果 :经测序证实获得的 m Endostatin序列与文献报道完全一致 ,并构建了含 Egr-1启动子的 IFNγ和 m Endostatin双基因表达质粒 p Egr- IFNγ- m Endostatin。结论 :利用 RT- PCR法成功克隆了m Endostatin的 c DNA序列 ,构建了 p Egr- IFNγ- m Endostatin重组双基因表达质粒。 展开更多
关键词 内皮抑素 质粒/遗传学 干扰素Ⅱ型 EGR-1 pEgr—ifnγ-mEndostatin
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IFN-α2b对慢性乙肝患者抗病毒及免疫调节作用 被引量:11
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作者 王健 王瑜 江水清 《中国药学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第1期71-74,共4页
目的探讨IFN-α2b对慢性乙肝患者抗病毒效果及对CD25的免疫调节作用。方法选择160例慢性乙肝患者(轻度93例,中度67例),随机分为IFN和常规治疗组,用生物素-链霉亲和素(BSA)法和Real-time PCR法分别动态检测PHA诱导前后CD25和CD25 mRNA的... 目的探讨IFN-α2b对慢性乙肝患者抗病毒效果及对CD25的免疫调节作用。方法选择160例慢性乙肝患者(轻度93例,中度67例),随机分为IFN和常规治疗组,用生物素-链霉亲和素(BSA)法和Real-time PCR法分别动态检测PHA诱导前后CD25和CD25 mRNA的表达水平,PCR法动态检测患者治疗前后HBV-DNA水平。结果轻、中度组患者经干扰素治疗后,静息态和诱导态CD25表达水平逐渐升高,其CD25 mRNA含量亦升高。第3疗程后,轻、中度组中以干扰素治疗者CD25表达水平与同期常规治疗者相比,差异有显著性(P<0.05)。CD25 mRNA表达水平与CD25的表达具有平行性。IFN治疗者血清和PBMC内HBV-DNA阴转率均高于常规治疗者(P<0.05或P<0.01)。结论IFN-α2b对血清和PBMC内HBV-DNA均有较好阴转效果,阴转率明显高于常规治疗者。IFN-α2b可诱导T细胞活化,CD25表达水平增加,通过免疫调节发挥抗病毒作用。 展开更多
关键词 ifn—α2b HBV—DNA CD25 mRNA 定时定量PCR
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补肾强督方对强直性脊柱炎患者外周血IL-18、IFN-γ、IL-4 mRNA表达水平的影响 被引量:8
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作者 王建明 马骁 +4 位作者 周童亮 李桂琴 黄小杰 王平 阎小萍 《中国中医药信息杂志》 CAS CSCD 2007年第3期14-16,共3页
目的探讨补肾强督方治疗强直性脊柱炎(AS)的可能作用机制。方法30例AS患者予补肾强督方进行治疗,疗程为6个月。研究AS患者及健康志愿者外周血中白细胞介素18(IL-18)、干扰素γ(IFN-γ)、白细胞介素4 mRNA(IL-4 mRNA)表达水平及经补肾强... 目的探讨补肾强督方治疗强直性脊柱炎(AS)的可能作用机制。方法30例AS患者予补肾强督方进行治疗,疗程为6个月。研究AS患者及健康志愿者外周血中白细胞介素18(IL-18)、干扰素γ(IFN-γ)、白细胞介素4 mRNA(IL-4 mRNA)表达水平及经补肾强督方治疗前后AS患者外周血中IL-18、IFN-γ、IL-4 mRNA表达水平的变化。结果AS患者外周血单个核细胞IL-18 mRNA、IFN-γ mRNA表达水平及IFN-γ mRNA/IL-4 mRNA较正常对照组显著增高(P<0.001)。经用补肾强督方治疗后,IL-18 mRNA、IFN-γ mRNA表达水平及IFN-γ mRNA/IL-4 mRNA明显下降(P<0.001)。AS患者红细胞沉降率水平与IL-18 mRNA、IFN-γ mRNA、IL-4 mRNA表达水平呈极显著相关(P<0.001);C反应蛋白水平与IL-18 mRNA表达水平呈显著相关(P<0.05),与IFN-γ mRNA表达水平呈非常显著相关(P<0.01)。结论AS患者外周血中IL-18 mRNA、IFN-γ mRNA水平比正常组明显升高;用补肾强督方治疗后,患者IL-18 mRNA、IFN-γ mRNA水平均有明显下降。 展开更多
关键词 补肾强督方 强直性脊柱炎 IL-18mRNA ifn—YmRNA IL-4MRNA
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IFNγ修饰的DC对T细胞增值及杀伤肿瘤细胞作用影响的研究 被引量:5
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作者 薛刚 程莹 +3 位作者 曹永宽 王培红 田伏洲 黄文林 《中国普通外科杂志》 CAS CSCD 2008年第4期340-345,共6页
目的探讨结肠癌细胞抗原致敏的IFNγ修饰的树突状细胞(DC)对T淋巴细胞增殖和分化的影响,以及活化T细胞对结肠癌LoVo细胞的杀伤作用。方法构建携带人IFNγ基因的重组复制缺陷型腺病毒载体(Ad-IFNγ),用其感染人外周血单个核细胞来源的DC... 目的探讨结肠癌细胞抗原致敏的IFNγ修饰的树突状细胞(DC)对T淋巴细胞增殖和分化的影响,以及活化T细胞对结肠癌LoVo细胞的杀伤作用。方法构建携带人IFNγ基因的重组复制缺陷型腺病毒载体(Ad-IFNγ),用其感染人外周血单个核细胞来源的DC;以流式细胞仪检测DC表型的变化。用反复冻融裂解法提取的结肠癌LoVo细胞抗原致敏DC,将其与自身T淋巴细胞共同培养,观察T细胞增殖和分化的情况以及活化T细胞对LoVo细胞的杀伤作用。结果Ad-IFNγ转染后24h内几乎不影响DC的吞噬功能,DC自身表达的IFNγ在一定程度上能促进DC的成熟;IFNγ修饰的DC经LoVo细胞抗原致敏后能明显促进T淋巴细胞的增殖并使其向Th1细胞分化,Th1细胞对结肠癌LoVo有明显的特异性杀伤效应。结论IFNγ修饰的DC能增强促进T淋巴细胞的增殖,诱导细胞免疫,增强T细胞的细胞毒作用,从而有效地杀伤肿瘤细胞。 展开更多
关键词 结肠肿瘤 ifnΓ 树突状细胞 免疫治疗
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