高脂肪饮食促进TLR2的表达促进3T3L1脂肪细胞分泌IFN-γ诱导胰岛素抵抗的发生及发展

目的:探讨高脂饮食诱导胰岛素抵抗的机制,以及了解高脂饮食诱导胰岛素抵抗的脂肪细胞的表型变化。方法:雄性C57 BL/6 J小鼠,给予正常饮食和高脂饮食。从正常饮食或高脂饮食喂养2周的小鼠中分离附睾脂肪组织。实时荧光定量RT-PCR检测γ-干扰素(Interferonγ,IFN-γ)和toll样受体2(toll-like receptor 2,TLR2)mRNA的表达。流式细胞术来检测表达TLR2或IFN-γ的脂肪细胞的数量。苏木精-伊红染色分析胰腺组织。免疫组化分析脂肪组织中TLR2和IFN-γ的表达。FFA或Zymosan A处理3T3-L1脂肪细胞,并通过实时荧光定量RT-PCR检测IFN-γ和TLR2 mRNA的表达。结果:对脂肪细胞中基因表达谱的分析表明,高脂肪摄入诱导了IFN-γ和TLR2的表达提高。流式细胞术分析显示存在共表达TLR2和IFN-γ的脂肪细胞(TLR2/IFN-γ脂肪细胞),与皮下脂肪组织相比,高脂肪摄入增加了内脏脂肪组织中TLR2/IFN-γ脂肪细胞的数量。游离脂肪酸通过TLR2信号增加3T3-L1脂肪细胞中IFN-γ的表达。结论:TLR2/IFN-γ脂肪细胞可能通过诱导内脏脂肪组织IFN-γ的表达,参与高脂诱导的胰岛素抵抗的发生。

牛IFN-γ真核表达系统的构建及单克隆抗体的制备与鉴定

为构建牛γ干扰素(IFN-γ)真核表达系统并制备单克隆抗体,将IFN-γ的基因克隆至pFastBacl载体上,构建pFastBacl-IFN-γ重组质粒,转化到DH10Bac后形成重组Bacmid,经过蓝白斑筛选将重组杆粒转染到Sf9细胞,经鉴定,获得了表达IFN-γ的重组杆状病毒;通过感染处于对数生长期的Sf9细胞,纯化细胞培养液上清获得了真核表达的牛IFN-γ蛋白。用纯化的IFN-γ蛋白免疫Balb/c小鼠,通过杂交瘤技术获得4株能稳定分泌的抗牛IFN-γ单克隆抗体的杂交瘤细胞株。经双抗夹心ELISA方法检测,结果显示4C3和4H11具有较好的夹心效果,为后续牛结核病IFN-γ体外释放ELISA检测试剂盒的研发奠定了基础。

IFN-γ联合IL-6在菌阴性肺结核诊断中的应用分析

目的探讨IFN-γ联合IL-6在菌阴性肺结核临床诊断中的应用及其临床意义。方法收集2021年10月21日至2023年4月27日期间在苏州大学附属传染病医院病例266例。依据肺结核诊断标准(WS288-2017),肺结核患者196例,其中男性130例,女性66例,平均年龄58.4±17.1岁;病灶双侧患者141例,病灶单侧患者55例;菌阳患者92例,菌阴患者104例。职业性尘肺病患者70例,其中男性69例,女性1例,平均年龄62.7±8.9岁。健康对照组20例,其中男性10例,女性10例,平均年龄58.6±6.3岁。采用流式细胞术检测血浆中细胞因子IFN-γ、IFN-α、IL-2、IL-4、IL-5、IL-6、IL-8、TNF-α、IL-10、IL-12P70、IL-1β、IL-17的表达水平,比较不同组别中这12项炎症细胞因子的差异。结果(1)活动性肺结核患者组血浆IFN-γ、IL-6水平显著高于健康对照组以及职业性尘肺病患者组(非结核性肺部疾病对照组)。(2)活动性肺结核患者中,双侧病灶肺结核患者组的血浆IL-6、IL-8水平显著高于单侧病灶肺结核患者组。(3)活动性肺结核患者中,菌阳性肺结核患者组血浆IL-6水平显著高于菌阴性肺结核患者组。(4)活动性肺结核患者中,γ-干扰素释放试验阴性患者组IFN-γ、IL-6水平显著高于健康对照组。(5)菌阴性肺结核患者中,γ-干扰素释放试验阴性患者组IFN-γ、IL-6水平显著高于健康对照组。结论IFN-γ、IL-6、IL-8可反映结核患者的炎症情况、疾病严重程度及细菌负荷,并且IFN-γ联合IL-6可以作为无病原学证据、免疫学检查结果为阴性且具有肺部影像学依据患者诊断的辅助指标,临床医师可以通过IFN-γ、IL-6的表达水平联合肺部影像学证据来为该类患者进行辅助诊断,并评估患者免疫状态,提高患者免疫力,为患者的个性化治疗提供依据。

血清RAGE、HMGB1水平与重症肺炎急性呼吸窘迫综合征发病及IFN-γ/IL-4变化的关系

目的探究血清晚期糖基化终产物受体(RAGE)、高迁移率族蛋白B1(high mobility group protein B1,HMGB1)水平与重症肺炎(SP)急性呼吸窘迫综合征(ARDS)发病及γ-干扰素(IFN-γ)/白细胞介素4(IL-4)变化的关系。方法前瞻性选取2020年3月至2022年2月我院收治的100例SP患儿为研究对象,根据患儿是否发生继发性ARDS将患儿分为ARDS组(n=56)和对照组(n=44),收集患儿一般资料,采集外周血以酶联免疫吸附法进行RAGE、HMGB1、IFN-γ和IL-4表达水平检测,采用多因素logistic回归分析SP患儿继发ARDS的影响因素,采用Pearson相关性分析其与IFN-γ/IL-4的相关性,并采用受试者工作曲线(ROC)分析RAGE、HMGB1表达对SP患儿继发ARDS的预测价值。结果两组SP患儿性别、年龄、体温以及发病季节之间无显著差异,ARDS组致病菌种类多于对照组,PaO_(2)/FiO_(2)和APS评分、血清RAGE、HMGB1、IFN-γ和IL-4表达水平以及IFN-γ/IL-4比值均高于对照组(P<0.05)。经多因素logistic回归分析可知,致病菌种类、PaO_(2)/FiO_(2)、RAGE、HMGB1表达、IFN-γ、IL-4和IFN-γ/IL-4均为SP患儿继发ARDS的影响因素。经Pearson相关检验,SP患儿血清RAGE、HMGB1表达水平与IFN-γ、IL-4和IFN-γ/IL-4均呈正相关(P<0.05)。经ROC曲线分析可得,血清RAGE、HMGB1水平预测SP患儿发生ARDS的AUC分别为0.707和0.750,灵敏度分别为73.2%、64.3%,特异度分别为68.2%、77.3%,两者联合预测的AUC为0.848,灵敏度和特异度分别为80.4%和81.8%。结论SP继发ARDS患儿血清中RAGE、HMGB1表达水平较高,与IFN-γ/IL-4呈正相关,监测患儿血清RAGE、HMGB1表达对SP患儿继发ARDS的风险有一定的预测价值。

结核分枝杆菌Rv3425-16kD融合蛋白原核表达及其刺激ATB患者IFN-γ释放水平研究

目的 原核系统表达与纯化结核分枝杆菌(mycobacterium tuberculosis, MTB)融合蛋白抗原Rv3425-16kD,检测其能否被活动性结核病(active tuberculosis, ATB)中肺结核患者和结核潜伏性感染(latent TB infection, LTBI)者外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells, PBMCs)识别,探讨作为诊断抗原鉴别活动性结核感染的可行性。方法 利用原核表达系统表达融合蛋白Rv3425-16kD并进行亲和纯化,以Western Blot法鉴定;收集结核病医学部收治的的ATB患者、LTBI者和健康人外周血,分离PBMCs,分别用Rv3425-16kD融合蛋白、早期分泌靶抗原6/培养液蛋白10(ESAT-6/CFP10)和MTB全菌裂解液刺激后,提取细胞总RNA,荧光定量PCR方法检测γ-干扰素(Interferon-γ,INF-γ) mRNA的表达,通过t检验分析刺激前后PBMCs IFN-γ mRNA的表达差异。结果 原核系统表达及纯化的Rv3425-16kD融合蛋白相对分子质量均为37kD。健康人PBMCs刺激前,IFN-γ mRNA表达量为4.2±1.6,MTB全菌裂解液刺激后为14.7±3.5,差异具有统计学意义(P<0.001),另外两组刺激没有明显变化;ATB患者PBMCs刺激前,IFN-γ mRNA表达量为3.7±1.2,经Rv3425-16kD融合蛋白、ESAT-6/CFP10抗原多肽和H37Rv全菌裂解液分别刺激后IFN-γ mRNA表达量为:166.0±29.7、13.7±5.8和213.0±33.5,三组抗原在刺激前后IFN-γ mRNA表达量差异均具有统计学意义(P<0.001)。结论 原核重组的Rv3425-16kD融合蛋白可被ATB患者PBMCs细胞识别,具有较强抗原刺激作用和特异性,可用作MTB感染的预防及诊断。

重组鼠IFN-γ腺病毒诱发细胞因子释放综合征小鼠模型的建立和观察

目的:通过向C57Bl/6J小鼠腹腔注射IFN-γ腺病毒(Ad-mIFN-γ)建立细胞因子释放综合征(CRS)的动物模型。方法:构建Ad-mIFN-γ及对照Ad-lacZ腺病毒载体,分别以MOI=100体外转染小鼠腹腔巨噬细胞,流式细胞术检测其对细胞mIFN-γ分泌的影响。将40只雌性C57Bl/6J小鼠按随机数字表法分为对照组、载体对照组、病毒低、中、高剂量组(每组8只),分别向各组小鼠腹腔注射PBS(200μL)、Ad-lacZ(2×10^(7)PFU/只)、Ad-mIFN-γ(5×10^(6)PFU/只)、Ad-mIFN-γ(1.5×10^(7)PFU/只)和Ad-mIFN-γ(2×10^(7)PFU/只)。每日观测小鼠的体质量及生存情况;第3天时采用流式细胞术检测小鼠外周血和脾内单核细胞(CD11b^(+))、巨噬细胞(CD11b^(+)/CD86^(+))比例,免疫荧光染色法检测脾内CD11b^(+)的单核细胞比例;第9天时采用流式细胞术检测小鼠血清中细胞因子的分泌水平;第14天,采用颈椎脱臼法处死小鼠,H-E染色法观察小鼠肝、脾、肺和肾的病理和组织学变化。结果:Ad-mIFN-γ体外感染小鼠腹腔巨噬细胞,在第3天检测到巨噬细胞分泌mIFN-γ达到峰值(118.34±2.90)pg/mL,并在一周内持续高分泌mIFN-γ,Ad-lacZ对照组IFN-γ分泌水平较低后,第3天时为(0.17±0.08)pg/mL。小鼠腹腔注射Ad-mIFN-γ后,在14 d内病毒低、中剂量组无小鼠死亡,病毒高剂量组小鼠体质量持续减轻(P<0.001);第3天,病毒高剂量组小鼠外周血和脾组织内单核细胞、巨噬细胞比例较对照组和中剂量组均显著增加(P<0.05或P<0.01);第9天,病毒低、中、高剂量组小鼠血清中mIFN-γ、IL-6、单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)、IL-1、TNF-α等细胞因子的水平均显著升高(P<0.001);10 d内病毒高剂量组小鼠死亡率达100%。组织病理检测可见病毒高剂量组小鼠的肝、脾、肺、肾组织有明显损伤。结论:Ad-mIFN-γ体外感染小鼠原代腹腔巨噬细胞后,可以快速分泌mIFN-γ;腹腔注射高剂量(2×10^(7)PFU/只)Ad-mIFN-γ导致小鼠出现CRS典型表现,可作为CAR-T细胞治疗诱发CRS的动物模型。

IFN-γ表达与食管癌患者细胞免疫水平及预后的相关性分析

目的:探讨干扰素-γ(interferon gamma,IFN-γ)与食管癌患者细胞免疫水平及预后的相关性。方法:收集40例食管癌患者外周血标本,流式细胞仪检测标本中IFN-γ的浓度及CD4+T/CD8+T细胞比值;利用TISIDB数据库分析IFN-γ表达与免疫调控基因的关系;收集119例食管癌患者临床预后信息,利用Kaplan-Meier生存曲线分析IFN-γ表达与食管癌患者生存预后的相关性。结果:外周血中IFN-γ的浓度和CD4+T/CD8+T细胞比值呈负相关(R2=0.1662,P=0.009);食管癌组织中IFN-γ表达与免疫负调控基因CD274(rho=0.449,P<0.001)和PDCD1(rho=0.778,P<0.001)的表达呈正相关;IFN-γ高表达于食管癌组织(P<0.001),且IFN-γ高表达组患者的总生存(overall survival,OS)显著低于IFN-γ低表达组(P=0.008)。结论:IFN-γ在食管癌组织中的表达与细胞免疫水平呈负相关,同时可作为食管癌患者预后不良的指标。

NT-proBNP、IFN-γ、NO在重症手足口病诊断及预后评估中的价值

目的探讨氨基末端脑钠肽前体(NT-proBNP)、γ干扰素(IFN-γ)、一氧化氮(NO)在重症手足口病诊断和预后评估中的应用价值。方法选取手足口病患儿224例,根据病情分为轻症组和重症组,另选取同期健康儿童30例为对照组;重症组根据预后分为生存组和死亡组。比较各组血清NT-proBNP、IFN-γ、NO水平。采用ROC分析NT-proBNP、IFN-γ、NO对重症手足口病诊断和预后的预测价值。采用Logistic回归分析重症手足口病患儿预后的影响因素。结果重症组、轻症组、对照组血清NT-proBNP、IFN-γ、NO依次降低;死亡组血清NT-proBNP、IFN-γ、NO高于生存组(P<0.05)。死亡组血氧饱和度<90%者死亡率高于血氧饱和度≥90%者。血清NT-proBNP、IFN-γ、NO联合检测对重症手足口病诊断和预后均具有良好的预测价值(P<0.05)。血清NT-proBNP、IFN-γ、NO高表达是重症手足口病患儿不良预后的危险因素,血氧饱和度<90%是预后良好的保护因素。结论重症手足口病患儿血清NT-proBNP、IFN-γ、NO水平升高,联合检测对其诊断和预后评估具有重要价值。

PEG-IFNα-2b联合替诺福韦治疗慢性乙型肝炎的疗效及对HBeAg转阴率、免疫功能的影响

目的:分析聚乙二醇干扰素α-2b(PEG-IFNα-2b)联合替诺福韦治疗慢性乙型肝炎的效果及对HBeAg转阴率、免疫功能的影响。方法:选取某院2019年3月—2022年3月收治的慢性乙型肝炎患者88例作为研究对象,依据随机抽签法分成研究组与对照组,每组44例。对照组接受替诺福韦治疗,研究组接受PEG-IFNα-2b联合替诺福韦治疗,比较2组HBeAg转阴率、HBsAg转阴率、治疗前后肝功能指标[谷氨酰转肽酶(GGT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)]、免疫功能指标(CD3^(+)、CD4^(+)/CD8^(+)、C3、C4)及血清炎性因子[视黄酸受体相关孤核受体(RORγt)、白细胞介素-17(IL-17)、IL-4]水平。结果:研究组HBeAg转阴率、HBsAg转阴率分别为45.45%、13.64%,高于对照组的11.36%、0,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后,研究组GGT、AST、ALT、IL-4、IL-17、RORγt分别为(30.42±5.39)U/L、(31.08±6.64)U/L、(29.37±4.68)U/L、(1.32±0.42)pg/mL、(0.64±0.19)pg/mL、(0.80±0.30),均低于对照组的(56.93±8.75)U/L、(38.72±5.83)U/L、(49.61±6.42)U/L、(3.91±1.14)pg/ml、(3.01±0.87)pg/ml、(1.61±0.36),差异有统计学意义(P<0.05)。研究组CD3^(+)、CD4^(+)/CD8^(+)、C3、C4分别为(66.81±8.55)%、(1.53±0.16)、(1.22±0.01)g/L、(0.42±0.07)g/L,均高于对照组的(61.03±8.49)%、(1.26±0.2)、(0.73±0.09)g/L、(0.22±0.06)g/L,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:PEG-IFNα-2b联合替诺福韦治疗慢性乙型肝炎效果明显,可提高HBeAg、HBsAg转阴率,改善肝功能,增强免疫功能,抑制炎性反应。

二陈汤合三子养亲汤治疗慢性阻塞性肺疾病(痰湿蕴肺证)疗效及对肺功能、IFN-γ、ET-1的影响

目的探究二陈汤合三子养亲汤治疗慢性阻塞性肺疾病(chronic obstructive pulmonary disease,COPD)(痰湿蕴肺证)的疗效及对肺功能、伽马干扰素(interferon γ,IFN-γ)、内皮素(endothelin-1,ET-1)的影响。方法采用随机分组法将医院2019年2月—2022年3月收治的86例慢阻肺患者分为观察组与对照组,两组各43例。对照组采用西医常规治疗,观察组在此基础上联合使用二陈汤合三子养亲汤治疗。观察两组患者治疗前后肺功能、蛋白质羰基(protein carbonyl content,PC)、8-羟基脱氧鸟苷(8-hydroxy-2 deoxyguanosine,8-OHdG)、丙二醛(malonic aldehyde,MDA)含量和IFN-γ、ET-1。观察两组患者临床症状消失时间和临床疗效。结果两组患者治疗后FEV1、PEF和Ppeak水平显著高于治疗前(P<0.05)。治疗后,观察组FEV1、PEF和Ppeak水平显著高于对照组(P<0.05)。两组患者治疗后PC、8-OHdG和MDA水平显著低于治疗前(P<0.05)。治疗后,观察组PC、8-OHdG和MDA水平显著低于对照组(P<0.05)。两组患者治疗后IFN-γ和ET-1水平显著低于治疗前(P<0.05)。治疗后,观察组IFN-γ和ET-1水平显著低于对照组(P<0.05)。观察组临床症状消失时间显著快于对照组(P<0.05)。观察组总有效率为83.72%(36/43)显著高于对照组(65.12%,28/43)(χ^(2)=3.909,P=0.048)。结论二陈汤合三子养亲汤能有效改善慢阻肺患者肺功能,降低氧化应激相关产物蛋白质的含量,减少临床症状持续时间,利于降低FN-γ、ET-1水平,临床疗效得到显著提升。

血清PCT、hs-CRP、IFN-γ、IL-10水平和产妇产褥感染的相关性

目的 研究产妇产褥感染与血清降钙素原(PCT)、超敏C-反应蛋白(hs-CRP)、干扰素-γ(IFN-γ)、白细胞介素10(IL-10)水平的相关性。方法 选择2018年5月至2022年10月间郑州大学第二附属医院收治的108例发生产褥感染的产妇及95例未发生产褥感染的产妇,并设为感染组及未感染组。对比两组孕产妇临床资料、分娩前后的血清PCT、hs-CRP、IFN-γ、IL-10水平情况,统计产褥感染部位构成比,并采用Spearman法统计上述因子与产褥感染的相关性。结果 两组孕周、产次、合并高血压、糖尿病等资料比较差异无统计学意义(P>0.05);与分娩前比较,分娩24 h后两组PCT、hs-CRP、IL-10水平上升,IFN-γ水平下降,其中感染组各因子水平变化最明显,差异有统计学意义(P<0.05);采用Spearman法分析结果显示血清PCT、hs-CRP、IL-10水平与产褥感染呈正相关,而血清IFN-γ与产褥感染呈负相关(P<0.05);108例产褥感染患者中子宫内膜、盆腔腹膜、外阴道及阴道感染患者居多。结论 血清PCT、hs-CRP、IFN-γ、IL-10与产妇产褥感染存在相关性,可作为产褥感染评估的重要指标。

IFN-γ、TLR4、TGF-β1对RSV感染毛细支气管炎患儿病情严重程度的预测价值

目的 分析γ-干扰素(IFN-γ)、Toll样受体4(TLR4)、转化生长因子-β1(TGF-β1)对呼吸道合胞病毒(RSV)感染毛细支气管炎患儿病情严重程度的预测价值。方法 选取82例RSV感染毛细支气管炎患儿,依据病情严重程度分为轻度组、中度组、重度组。多因素Logistic回归分析RSV感染患儿IFN-γ、TLR4、TGF-β1水平以及病情严重程度影响因素。Spearman分析IFN-γ、TLR4、TGF-β1与病情严重程度的相关性。绘制受试者工作特征(ROC)曲线分析IFN-γ、TLR4、TGF-β1水平预测RSV感染毛细支气管炎病情的价值。结果 中、重度组的年龄、IFN-γ水平均低于轻度组且重度组更低,中度组、重度组的早产儿比例、TLR4、TGF-β1水平高于轻度组且重度组更高(P<0.05);RSV感染患儿病情严重程度的保护因素是年龄、IFN-γ,危险因素是TLR4、TGF-β1、早产儿;病情严重程度与TLR4、TGF-β1呈正相关,与IFN-γ水平呈负相关;IFN-γ、TLR4、TGF-β1预测RSV感染毛细支气管炎病情均AUC>0.70,灵敏度>77%,特异度>60%。结论 TLR4、TGF-β1、IFN-γ对RSV感染毛细支气管炎患儿病情严重程度具有较好的预测价值。

基于IFN-γ/JAK1/CXCL10信号通路探讨火针治疗稳定期白癜风的作用机制

目的探讨火针治疗稳定期白癜风的效果及其对γ干扰素(IFN-γ)/酪氨酸激酶1(JAK1)/C-X-C基序趋化因子10(CXCL10)信号通路的影响,为火针临床应用提供科学依据,为防治白癜风提供新靶点和思路。方法选取广州市番禺区中医院2020年5月-2022年5月就诊的稳定期白癜风患者129例,根据就诊序号采用电脑随机数字表法分为3组,每组43例。窄谱中波紫外线(NB-UVB)组给予NB-UVB治疗,火针组采用火针治疗,联合组采用NB-UVB联合火针治疗,3组均治疗12周。比较3组临床疗效及治疗前后皮损色素积分、白斑病损程度[采用白癜风面积评分指数(VASI)评估]、皮损面积、免疫指标[辅助性T细胞17(Th17)/调节性T细胞(Treg)、粒细胞-巨噬细胞集落因子(GM-CSF)、CD4^(+)/CD8^(+)、可溶性细胞间黏附因子-1(sICAM-1)]、炎症指标[白细胞介素-23(IL-23)、IL-6、IL-17、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)]、IFN-γ/JAK1/CXCL10信号通路因子(IFN-γ、JAK1、CXCL10)水平,记录3组不良反应及随访3个月、6个月复发率。结果治疗12周后联合组总有效率为95.35%(41/43),均明显高于火针组的76.74%(33/43)及NB-UVB组的72.09%(31/43),差异均有统计学意义(P均<0.05)。治疗12周后,联合组皮损色素积分及CD4^(+)/CD8^(+)均高于火针组、NB-UVB组(P均<0.05),火针组均高于NB-UVB组(P均<0.05);联合组VASI评分、皮损面积及Th17/Treg、GM-CSF、sICAM-1、IL-23、IL-6、IL-17、TNF-α、IFN-γ、JAK1、CXCL10水平均低于火针组、NB-UVB组(P均<0.05),火针组均明显低于NB-UVB组(P均<0.05);3组不良反应发生率比较差异无统计学意义(P>0.05);治疗后随访6个月,联合组复发率低于NB-UVB组(P<0.05)。结论火针治疗可提高稳定期白癜风患者机体免疫功能,降低炎症反应,促进色素沉积,安全性高,且可降低复发率,考虑与火针可调节IFN-γ/JAK1/CXCL10信号通路有关。

血清IFN-γ、IL-1β联合PCT检测在卵巢囊肿蒂扭转中的临床应用

目的 分析血清干扰素-γ(IFN-γ)、白介素1β(IL-1β)联合降钙素原(PCT)检测在卵巢囊肿蒂扭转中的临床应用。方法 选取2019年8月至2022年12月中国航天科工集团七三一医院收治的158例疑似卵巢囊肿蒂扭转患者为研究对象,经术中探查发现158例疑似卵巢囊肿蒂扭转患者中有83例确诊为卵巢囊肿蒂扭转。分析卵巢囊肿蒂扭转者治疗前后血清IFN-γ、IL-1β、PCT水平,计算血清IFN-γ、IL-1β、PCT单独及联合检测在诊断卵巢囊肿蒂扭转中的阳性预测值、阴性预测值、一致性以及诊断效能。结果经过治疗后,卵巢囊肿蒂扭转患者血清IFN-γ、IL-1β、PCT水平均明显下降,差异有统计学意义(P<0.05);IFN-γ+IL-1β+PCT的阳性预测值、阴性预测值、灵敏度、特异度及准确率分别为98.79%、97.33%、97.62%、98.65%、98.10%,均高于IFN-γ、IL-1β、PCT单独检测;血清IFN-γ、IL-1β、PCT单独以及联合诊断卵巢囊肿蒂扭转与术中探查结果的一致性Kappa值分别为0.511、0.623、0.724、0.976。结论 血清IFN-γ、IL-1β、PCT联合检查卵巢囊肿蒂扭转的诊断效果强于单独检测,血清IFN-γ、IL-1β、PCT联合检查与临床卵巢囊肿蒂扭转的术中探查结果的一致性高,为卵巢囊肿蒂扭转的诊断以及预后提供了更为准确的依据。

miR17-92簇在痛风中的表达及临床意义

目的:探讨miR17-92簇各成员在痛风患者外周血单个核细胞(PBMCs)中的表达,预测其可能靶点及作用通路,评估其在痛风中可能的作用机制及临床意义。方法:选取川北医学院附属医院67例痛风性关节炎(GA)患者,其中急性痛风性关节炎(AG)患者22例,间歇期痛风(IG)患者45例,对照组选取35例正常健康体检者(HC)。RT-qPCR检测miR17-92簇、IFN-γ、IL-10及JAK-STAT通路部分成员表达,收集相关实验室指标分析其相关性。结果:miR17、miR18a、miR19a、miR20a、miR19b在AG、IG、HC中表达差异均有统计学意义(H=8.753,P<0.05;H=6.338,P<0.05;H=6.523,P<0.05;H=9.061,P<0.05;H=9.729,P<0.01)。JAK3、STAT2在AG、IG、HC三组中表达差异有统计学意义(H=10.349,P<0.01;H=14.801,P<0.01)。IFN-γ在三组间表达差异有统计学意义(H=8.734,P<0.05)。AG患者miR18a表达与IBIL、Crea、MO、HGB呈负相关,miR19a表达与TC、UA、HGB呈负相关,miR20a表达与Crea呈负相关,miR19b表达与UA、HGB呈负相关。IG患者miR17表达与IBIL、WBC、LY、MO均呈负相关,miR18a表达与ALP呈正相关,miR19a表达与TC、UA呈负相关,miR20a表达与ADA、UA呈负相关。结论:miR17-92簇可能通过靶向JAK-STAT通路调控痛风发生发展、参与痛风临床生理病理过程。

糖皮质激素影响下哮喘大鼠VEGF和IL-4、IFN-γ的表达及相关性分析

目的:探讨糖皮质激素对哮喘的控制作用,分析哮喘大鼠VEGF和IL-4、IFN-γ糖皮质激素影响下的表达及相关性。方法:将30只大鼠随机分为正常对照组(A组)、哮喘组(B组)及地塞米松干预组(DXM组),比较三组大鼠激发阶段的症状,比较支气管肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid,BALF)中VEGF和IL-4、IFN-γ的水平变化并分析其相关性。结果:糖皮质激素对哮喘具有控制作用,三组间大鼠BALF中VEGF、IL-4、IFN-γ水平差异均具有统计学意义(F值分别为284.433、484.859和581.109,P<0.001)。B组与A组比较,VEGF水平升高、IL-4水平升高、IFN-γ水平降低,差异均具有统计学意义(P<0.001);DXM组与B组比较,VEGF水平降低、IL-4水平降低、IFN-γ水平升高,差异均具有统计学意义(P<0.001);DXM组与A组比较,VEGF水平升高、IL-4水平升高、IFN-γ水平降低,差异均具有统计学意义(均P<0.001)。三组大鼠BALF中VEGF水平与IL-4水平呈正相关(r分别为0.865、0.867和0.918,P<0.05),与IFN-γ水平呈负相关(r分别为-0.918、-0.900和-0.955,P<0.001)。结论:糖皮质激素可通过上调Th1细胞表达的IFN-γ、下调Th2细胞表达的IL-4,维持Th1/Th2细胞因子平衡,控制哮喘发作;通过细胞因子水平的变化相互调节和相互制约,对于哮喘的发生发展具有重要意义。

IL-10、TNF-α、IFN-γ、IL-4在大鼠肝纤维化早期诊断中的意义

目的探讨细胞因子IL-10、TNF-α、IFN-γ、IL-4在肝纤维化形成过程中的变化及意义。方法50只雄性SD大鼠随机分为正常对照组和实验组,实验组腹腔注射四氯化碳(CCL4),联合饮用含硫代乙酰胺的酒精溶液诱导构建肝纤维化模型,共12 w。造模的第2、4、6、8、12 w收集血清及肝脏标本,苏木素-伊红染色观察肝脏的组织学变化,酶联免疫法检测细胞因子IL-10、TNF-a、IFN-γ和IL-4在血清中的表达水平,并分析其相关性。结果组织学观察发现,实验组2 w时细胞肿胀变性;4 w时小灶性肝细胞坏死,门管区大量炎症细胞浸润;6 w时可见明显肝细胞脂肪变性;8 w时肝细胞变性和坏死加重,出现胆汁淤积,门管区炎症细胞浸润及纤维组织增生,可见不完整假小叶形成;12 w时,可见完整假小叶形成。随造模时间延长,与对照组相比,血清中IL-4、IFN-γ、TNF-α的表达逐渐增加,均高于对照组,有统计学意义(P<0.01)。IL-10的表达水平在2 w时达到峰值后,接着开始降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论血清中TNF-α、IFN-γ、IL-4表达水平随肝纤维化程度加重而逐渐升高,在肝纤维化的进展过程中发挥重要作用,对肝纤维的诊断及进展观察有一定的参考价值。

日本血吸虫源多肽SJMHE1通过调节脾脏IFN-γ和IL-10的分泌抑制小鼠自身免疫性甲状腺炎

目的:探讨日本血吸虫源多肽SJMHE1对小鼠自身免疫性甲状腺炎(autoimmune thyroiditis,AIT)的干预作用及其分子机制。方法:将15只6~8周龄雌性C57BL/6小鼠随机分为对照组、AIT模型组和AIT+SJMHE1组,每组5只。对照组小鼠未经任何处理;采用高碘水喂食和皮下多点注射猪甲状腺球蛋白法构建AIT小鼠模型(AIT模型组),并施加SJMHE1干预(AIT+SJMHE1组)。造模28 d后,苏木素-伊红(HE)染色观察各组小鼠甲状腺病理变化;化学发光法检测血清甲状腺球蛋白抗体(TgAb)水平;实时荧光定量PCR检测各组小鼠甲状腺及脾脏组织中IFN-γ和IL-10 mRNA的表达水平;ELISA检测血清中IFN-γ和IL-10含量。另选取未经任何处理的10只雌性C57BL/6小鼠,随机分为实验组和对照组,每组5只;实验组小鼠皮下输注FITC标记的SJMHE1(FITC-SJMHE1),对照组注射等量PBS,用流式细胞技术检测FITC-SJMHE1在甲状腺及脾脏组织中的分布。结果:SJMHE1可减轻AIT小鼠甲状腺组织炎症细胞浸润及滤泡结构破坏,且显著降低血清TgAb水平(P<0.01);此外,SJMHE1显著降低AIT小鼠甲状腺组织和脾脏组织中IFN-γmRNA的表达,而上调IL-10 mRNA的相对表达量(P均<0.05);且血清中IFN-γ和IL-10含量的改变趋势与mRNA一致(P<0.01和P<0.05)。流式细胞技术结果显示FITC-SJMHE1分布于小鼠脾脏组织。结论:SJMHE1可显著抑制AIT小鼠甲状腺炎症反应,其机制可能与其对脾脏IFN-γ和IL-10的调节有关。

肺结核患者治疗过程中血清IFN-γ表达水平变化分析

目的分析血清中干扰素-γ(IFN-γ)水平在肺结核治疗过程中的变化趋势,探讨其可能的影响因素,为明确肺结核治疗过程中血清IFN-γ水平监测的意义提供依据。方法收集2020年9月至2022年12月就诊于广州市胸科医院的56例肺结核患者的血清,利用流式细胞术检测患者治疗前、治疗2个月和治疗6个月血清中IFN-γ的浓度。不符合正态分布的计量资料组间比较采用Kruskal-Wallis和Mann-Whitney检验,配对样本使用Friedman检验。结果肺结核患者血清中的IFN-γ浓度在治疗过程中呈下降趋势,差异有统计学意义(P=0.004)。具有肺部空洞的肺结核患者治疗前血清中IFN-γ浓度高于无肺部空洞的患者,差异有统计学意义。受试者工作特征曲线(ROC)分析显示,血清中IFN-γ的浓度在区分肺结核治疗前与治疗2个月、治疗前与治疗6个月时曲线下面积分别为0.582和0.646,界值分别为1.520和2.345 ng/L,灵敏度分别为91.10%和44.60%,特异度分别为32.10%和69.60%。二元logistic回归分析表明,治疗2个月后血清中IFN-γ浓度是否降到1.520 ng/L以下与是否患有糖尿病有关。当将入组病例限制到治疗前病原学阳性时,ROC分析显示血清中IFN-γ浓度区分治疗前与治疗2个月、治疗前与治疗6个月的曲线下面积分别为0.762和0.770,界值分别为1.725和1.705 ng/L,灵敏度均为93.75%,特异度均为50.00%。结论治疗前肺结核患者血清IFN-γ的浓度与肺部有无空洞有关,治疗过程中总体呈下降趋势,其变化与患者是否合并糖尿病、治疗前患者病原学结果有关。

肺炎支原体肺炎患儿支气管肺泡灌洗液及血清中IL-6、IL-4、IFN-γ的水平变化及相关性分析

目的:探讨肺炎支原体肺炎(MPP)患儿支气管肺泡灌洗液(BALF)及血清中白介素-6(IL-6)、白介素-4(IL-4)、干扰素-γ(IFN-γ)、IFN-γ/IL-4水平的变化及相关性。方法:选取MPP患儿40例为MPP组,病原体检测阴性患者20例为对照组,比较2组患儿BALF及血清中IL-6、IL-4、IFN-γ、IFN-γ/IL-4水平,探讨其与MPP血液生化指标及住院时长的相关性。结果:MPP组BALF及血清中IL-6、IL-4、IFN-γ水平明显高于对照组;MPP组BALF中IL-6、IL-4、IFN-γ水平明显高于其血清水平,差异有统计学意义(P<0.05);采用受试者工作特征曲线(ROC)分析显示,BALF中IFN-γ评估儿童支原体肺炎的曲线下面积(AUC)为0.950,敏感度95%,特异度57.5%;BALF中IFN-γ联合IL-4、IFN-γ/IL-4的AUC为0.969,敏感度95%,特异度95%。结论:MPP感染时BALF和血清中IL-6、IFN-γ、IL-4存在异常表达,血清和BALF中各细胞因子水平呈正相关,MPP患儿BALF中IFN-γ、IL-4、IFN-γ/IL-4可作为预测儿童MPP病情的指标。