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IFN-α2a-GFE-1融合基因的构建及表达 被引量:1
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作者 张小军 杨玉岭 张英起 《武警医学》 CAS 2003年第8期460-463,共4页
目的  构建IFN -α 2a -GFE - 1融合基因载体 ,检测其在转染细胞的表达 ,为肺癌基因导向药物治疗积累实验资料。方法 应用聚合酶链式反应技术 (PCR)对干扰素 (IFN) -α 2a羧基端的酶切位点进行改造 ,并人工合成肺特异性结合多肽CGFEC... 目的  构建IFN -α 2a -GFE - 1融合基因载体 ,检测其在转染细胞的表达 ,为肺癌基因导向药物治疗积累实验资料。方法 应用聚合酶链式反应技术 (PCR)对干扰素 (IFN) -α 2a羧基端的酶切位点进行改造 ,并人工合成肺特异性结合多肽CGFECVRQCPERC(GFE - 1)的寡核苷酸片段 ,二者连接后克隆入pGEM - 3zf质粒 ,连接产物转化感受态DH5α细胞 ,挑选阳性克隆经EcoRⅠ +PstⅠ酶切鉴定后测序 ,将测序正确的目的基因从测序载体相应酶切位点消化回收并纯化后 ,与上述酶处理过的PBV2 2 0质粒连接 ,连接产物常规转化大肠杆菌DH5α感受态细胞 ,经筛选后随机挑选阳性菌落 ,提取质粒酶切鉴定。结果 序列分析表明合成片段成功的插入IFN -α 2a羧基端 ,大小、位置、方向均正确无误 ;融合基因克隆入PBV 2 2 0表达载体在大肠杆菌中获得有效表达。结论 IFN -α 2a -GFE - 1融合基因载体的构建及表达 。 展开更多
关键词 ifn-α2a-gfe-1 融合基因 干扰素-A 2a 肺特异性结合多肽 肺癌 基因治疗
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过敏性紫癜患儿血浆IL-2、IFN-γ、IL-4与TGF-β1的变化及其意义 被引量:29
2
作者 吴容 王强 董巍 《实用医院临床杂志》 2014年第1期144-146,共3页
目的探讨儿童过敏性紫癜(henoch-schonlein purpura,HSP)血浆白细胞介素-2(IL-2)、干扰素-γ(IFN-γ)、白细胞介素-4(IL-4)与转化生长因子β1(TGF-β1)的变化及其意义。方法四川省人民医院儿科2009年2月至2010年2月收治的急性期HSP患儿4... 目的探讨儿童过敏性紫癜(henoch-schonlein purpura,HSP)血浆白细胞介素-2(IL-2)、干扰素-γ(IFN-γ)、白细胞介素-4(IL-4)与转化生长因子β1(TGF-β1)的变化及其意义。方法四川省人民医院儿科2009年2月至2010年2月收治的急性期HSP患儿46例(HSP组)以及同期常规体检健康儿童30例(对照组),均采用Luminex-100液相芯片技术检测血浆细胞因子IL-2、IL-4及IFN-γ,双抗体夹心ABC-ELISA法检测血浆TGF-β1,比较两组IL-2、IL-4、IFN-γ及TGF-β1的水平。结果 HSP组IL-2、IFN-γ水平均低于对照组,IL-4、TGF-β1的表达水平均高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 HSP患儿存在细胞因子分泌紊乱,可能是HSP患儿发病的分子生物学基础。 展开更多
关键词 过敏性紫癜 儿童 IL-2 ifn-Γ IL-4 TGF-Β1
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IL-4、IL-10和抗IL-12受体β1mAb抑制IL-23诱导正常人记忆T细胞IFN-γ产生 被引量:14
3
作者 范艳莹 吴长有 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第4期353-357,共5页
目的探讨重组人白介素23(IL23)是否能够诱导正常人T细胞IFNγ的产生,作用的靶细胞亚群和调节因素。方法正常人PBMC在抗CD3(antiCD3)单克隆抗体或antiCD3和抗CD28(antiCD28)单克隆抗体刺激的条件下与IL23进行培养,采用酶联免疫吸附试验(E... 目的探讨重组人白介素23(IL23)是否能够诱导正常人T细胞IFNγ的产生,作用的靶细胞亚群和调节因素。方法正常人PBMC在抗CD3(antiCD3)单克隆抗体或antiCD3和抗CD28(antiCD28)单克隆抗体刺激的条件下与IL23进行培养,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测细胞培养液中IFNγ的水平;同时采用流式细胞仪,在单个细胞水平上分析IL23诱导PBMCIFNγ表达的T细胞亚群。结果在未经任何刺激的情况下,PBMC产生很低或不产生IFNγ。IL23呈剂量依赖方式促进由antiCD3活化的PBMCIFNγ产生。细胞亚群分析的结果表明,IL23诱导记忆CD4+和CD8+T细胞表达IFNγ,对活化的CD4+T细胞作用较为明显。Th2细胞因子(IL4、IL10)和抗IL12受体β1mAb(IL12Rβ1)抑制IL23诱导T细胞IFNγ产生。结论IL23促进活化的记忆CD4+和CD8+T细胞IFNγ的产生。Th2细胞因子和抗IL12Rβ1mAb抑制由IL23诱导IFNγ产生,提示这些细胞因子和抗体对IL23引起的自身免疫病具有拮抗作用。 展开更多
关键词 IL-23 ifn-γ TH2细胞因子 抗IL-121 MAB anti-CD3
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IL-2、IFN-α和IFN-γ上调肾透明细胞癌786-0细胞B7-H1的表达 被引量:2
4
作者 方荣金 朱绍兴 +1 位作者 黄世勇 朱德胜 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第6期625-629,共5页
目的:研究IL-2、IFN-α和IFN-γ对人肾透明细胞癌786-0细胞上B7-H1表达的影响。方法:IL-2、IFN-α和IFN-γ刺激786-0细胞,RT-PCR检测刺激后786-0细胞B7-H1mRNA的表达,免疫细胞化学、免疫荧光染色和流式细胞术检测刺激后786-0细胞中B7-H... 目的:研究IL-2、IFN-α和IFN-γ对人肾透明细胞癌786-0细胞上B7-H1表达的影响。方法:IL-2、IFN-α和IFN-γ刺激786-0细胞,RT-PCR检测刺激后786-0细胞B7-H1mRNA的表达,免疫细胞化学、免疫荧光染色和流式细胞术检测刺激后786-0细胞中B7-H1蛋白的表达。结果:RT-PCR检测结果显示,IL-2、IFN-α和IFN-γ组786-0细胞的B7-H1mRNA表达量明显高于未经刺激的786-0细胞(0.75±0.06、0.68±0.05、0.95±0.08vs0.30±0.03,P(0.05或P<0.01);免疫细胞化学和免疫荧光检测结果显示,B7-H1蛋白主要表达在786-0细胞的细胞膜上,IL-2、IFN-α和IFN-γ刺激后B7-H1表达明显上调;流式细胞术检测结果显示,IL-2、IFN-α和IFN-γ组786-0细胞的B7-H1分子表达阳性率明显高于未经刺激的786-0细胞[(65.70±3.26)%、(56.52±1.75)%、(84.05±3.52)%vs(20.49±1.03)%,P<0.01]。结论:IL-2、IFN-α和IFN-γ均上调786-0细胞B7-H1mRNA和蛋白的表达,其中IFN-γ上调程度最高,IFN-α上调程度最低。 展开更多
关键词 肾透明细胞癌 B7-H1 IL-2 ifn-α ifn-γ 肿瘤免疫
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Th2细胞因子和抗IL-12Rβ1mAb抑制由IL-23诱导PBMCIFN-γ的产生 被引量:9
5
作者 范艳莹 吴长有 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第3期195-199,共5页
目的:探讨重组人白介素23(IL-23)诱导正常人PBMC IFN-γ的产生,细胞亚群和调节因素。方法:正常人PBMC在不同条件下与IL-23进行培养,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测细胞培养液中IFN-γ的水平。同时采用流式细胞仪,分析IL-23诱导PBMC I... 目的:探讨重组人白介素23(IL-23)诱导正常人PBMC IFN-γ的产生,细胞亚群和调节因素。方法:正常人PBMC在不同条件下与IL-23进行培养,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测细胞培养液中IFN-γ的水平。同时采用流式细胞仪,分析IL-23诱导PBMC IFN-γ表达的细胞亚群。结果:IL-23呈剂量依赖性诱导PBMC IFN-γ产生,并可与IL-2协同诱导IFN-γ的产生。细胞亚群分析的结果表明,IL-23诱导高表达CD56+NK细胞产生IFN-γ,对CD4+和CD8+T细胞无明显作用。Th2细胞因子和抗IL-12受体β1mAb(IL-12Rβ1)抑制IL-23诱导IFN-γ产生。结论:IL-23可直接作用于CD3-CD56+NK细胞,诱导产生IFN-γ。Th2细胞因子和抗IL-12Rβ1mAb抑制IL-23诱导IFN-γ产生,提示可以用于由IL-23引起自身免疫病的治疗。 展开更多
关键词 IL-23 ifn-Γ TH2细胞因子 抗IL-121 MAB NK细胞
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尖锐湿疣患者血清IL-8、IL-12、TNF-α和IFN-γ水平的研究 被引量:18
6
作者 黄蓉 张谊芝 +2 位作者 张敏 易勤 陈晓玫 《中国麻风皮肤病杂志》 2005年第3期196-197,共2页
探讨IL-8、IL-12、TNF-α、IFN-γ在尖锐湿疣中的发病机制。采用ELISA双抗体夹心法,测得40例尖锐湿疣患者血清IL-8、IL-12、IFN-γ水平显著低于正常对照组,而TNF-α水平显著高于正常对照组。IL-8与IL-12水平、IL-8与IFN-γ水平、IL-12与... 探讨IL-8、IL-12、TNF-α、IFN-γ在尖锐湿疣中的发病机制。采用ELISA双抗体夹心法,测得40例尖锐湿疣患者血清IL-8、IL-12、IFN-γ水平显著低于正常对照组,而TNF-α水平显著高于正常对照组。IL-8与IL-12水平、IL-8与IFN-γ水平、IL-12与TNF-α水平、IL-12与IFN-γ水平、TNF-α与IFN-γ水平均呈正相关,IL-8与TNF-α水平无相关性。尖锐湿疣患者体内存在细胞因子表达异常,尤其是Th1、Th2细胞因子失衡。 展开更多
关键词 IL-12 ifn-Γ TNF-Α 尖锐湿疣 血清IL-8 患者 对照组 正常 Th1 TH2细胞因子
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IFN-γ、Bcl-2、MMP-9及STIM-1在肿瘤患者中的表达及其相关性 被引量:1
7
作者 杨子彬 李戈 +4 位作者 李善华 赵桂荣 陈洪萍 张龙飞 崔伟 《广东医学》 CAS CSCD 北大核心 2011年第18期2451-2452,共2页
目的探讨IFN-γ、Bcl-2、MMP-9及STIM-1在肿瘤患者中的表达及相关性。方法采集32例肿瘤患者(肿瘤组)和34例健康体检者(对照组)外周血,提取RNA并反转录成cDNA,运用实时定量PCR方法检测IFN-γ、Bcl-2、MMP-9及STIM-1 mRNA的表达。结果肿瘤... 目的探讨IFN-γ、Bcl-2、MMP-9及STIM-1在肿瘤患者中的表达及相关性。方法采集32例肿瘤患者(肿瘤组)和34例健康体检者(对照组)外周血,提取RNA并反转录成cDNA,运用实时定量PCR方法检测IFN-γ、Bcl-2、MMP-9及STIM-1 mRNA的表达。结果肿瘤组IFN-γ、Bcl-2、MMP-9及STIM-1mRNA表达水平较对照组明显降低,差异有统计学意义。IFN-γ、Bcl-2、MMP-9及STIM-1相互之间都具有正相关性。其中IFN-γ与Bcl-2的相关系数为0.984,IFN-γ与MMP-9的相关系数为0.982,IFN-γ与STIM-1的相关系数为0.985;Bcl-2与MMP-9的相关系数为0.980,Bcl-2与STIM-1的相关系数为0.956,MMP-9与STIM-1的相关系数为0.951。结论肿瘤患者IFN-γ、Bcl-2、MMP-9及STIM-1 mRNA表达较健康人明显降低,并且在肿瘤患者中4项指标之间均呈正相关。 展开更多
关键词 肿瘤 ifn-Γ BCL-2 MMP-9 STIM-1 实时定量PCR
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IL-1β、IFN-γ对灌流大鼠卵巢中基质金属蛋白酶-2,-9mRNA基因表达的影响 被引量:2
8
作者 于晓光 张清媛 +2 位作者 赵炜明 刘秀萍 倪江 《哈尔滨医科大学学报》 CAS 2001年第5期321-323,共3页
目的 探讨IL 1β、IFN γ对基质金属蛋白酶 - 2 ,- 9(MMP - 2 ,- 9)mRNA基因表达的影响。 方法 采用体外灌流卵巢系统、原位杂交 (insituhybridization)等方法检测IL 1β、IFN γ对大鼠卵泡发育过程中MMP - 2 ,- 9mRNA基因表达变化 ,... 目的 探讨IL 1β、IFN γ对基质金属蛋白酶 - 2 ,- 9(MMP - 2 ,- 9)mRNA基因表达的影响。 方法 采用体外灌流卵巢系统、原位杂交 (insituhybridization)等方法检测IL 1β、IFN γ对大鼠卵泡发育过程中MMP - 2 ,- 9mRNA基因表达变化 ,并通过密度扫描方法对原位杂交结果进行半定量分析。结果 IL 1β对MMP - 2mRNA的表达无明显的刺激或抑制作用 ,但可显著增加卵泡膜细胞的MMP - 9mRNA的表达 ;IFN -γ可显著降低MMP - 2 ,- 9mRNA的表达。结论 IL 1β、IFN γ可通过调节卵泡发育过程中MMP - 2 ,- 展开更多
关键词 MMP-2 原位杂交 mRNA 体外灌流 基因表达 MMP-9 IL-1Β ifn-Γ
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结核菌素纯蛋白衍生物对哮喘儿童外周血单个核细胞IL-12、IFN-γ/IL-4表达的影响 被引量:3
9
作者 李孟荣 陈小芳 +3 位作者 李昌崇 李迎春 陈晓冰 王秀娣 《基础医学与临床》 CSCD 北大核心 2005年第12期1177-1178,共2页
关键词 ifn-Γ/IL-4 外周血单个核细胞 结核菌素纯蛋白衍生物 哮喘患儿 IL-12 Th1/Th2细胞 儿童 TH1类细胞因子 结核菌素纯蛋白衍化物 Th2类细胞因子
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流式微珠阵列法检测IFN-γ诱导的Jurkat细胞Th1/Th2细胞因子表达 被引量:2
10
作者 李婉红 王玲莉 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2006年第2期356-358,共3页
本研究旨在探讨流式微珠阵列法检测Th1/Th2细胞因子表达及IFN-γ应用于T淋巴细胞白血病治疗的临床价值。以不同浓度IFN-γ诱导培养Jurkat细胞48小时,用流式微珠阵列法检测培养上清液中IL-2、IL-6、TNF-α和IFN-γ表达,并采用流式细胞术... 本研究旨在探讨流式微珠阵列法检测Th1/Th2细胞因子表达及IFN-γ应用于T淋巴细胞白血病治疗的临床价值。以不同浓度IFN-γ诱导培养Jurkat细胞48小时,用流式微珠阵列法检测培养上清液中IL-2、IL-6、TNF-α和IFN-γ表达,并采用流式细胞术检测膜上IL-2受体(CD25)的表达。结果表明:IFN-γ诱导Jurkat细胞IL-2和TNF-α的表达呈浓度依赖性升高,未检测到IL-6表达,CD25表达明显升高。结论:Jurkat细胞能被IFN-γ诱导高表达Th1细胞因子和CD25,流式微珠阵列法能准确客观地反映Th1/Th2细胞因子表达的动态变化。 展开更多
关键词 流式微珠阵列 TH1/TH2细胞因子 ifn-Γ T淋巴细胞白血病
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IL-12对伯氏疟原虫红内期感染小鼠IFN-γ、TNF-α、IL-10水平的影响 被引量:2
11
作者 陈姝 陆惠民 +2 位作者 张山鹰 高琪 唐学恒 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2005年第6期537-538,共2页
关键词 IL-12 疟原虫红内期 ifn-γ TNF-α IL-10 感染 小鼠 水平 NK细胞毒活性 免疫保护作用 细胞因子 毒副反应 生物学活性 伯氏疟原虫 TH细胞 T细胞 Th1 CD2
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山仙颗粒对Lewis肺癌C_(57)BL/6小鼠IFN-γ、TXB_2和6-酮-PGF1α影响的实验研究 被引量:3
12
作者 庞淑珍 王旭 《肿瘤基础与临床》 2008年第5期396-398,共3页
目的通过山仙颗粒对荷Lewis肺癌C57BL/6小鼠脾细胞IFN-γ活性及血浆中TXB2、6-Keto-PGF1α水平的影响,探讨其抗侵袭与转移的机理。方法将40只C57BL/6小鼠随机取出10只作为空白对照组(A组),把Lewis肺癌细胞接种于其余小鼠右腋皮下,将它... 目的通过山仙颗粒对荷Lewis肺癌C57BL/6小鼠脾细胞IFN-γ活性及血浆中TXB2、6-Keto-PGF1α水平的影响,探讨其抗侵袭与转移的机理。方法将40只C57BL/6小鼠随机取出10只作为空白对照组(A组),把Lewis肺癌细胞接种于其余小鼠右腋皮下,将它们随机分成荷瘤对照组(B组)、金龙胶囊组(C组)、山仙颗粒组(D组)。接种24 h后,C、D组分别以金龙胶囊(50 mg/mL)、山仙颗粒(0.5 g/mL)悬液灌胃,A、B组用生理盐水灌胃,观察出瘤时间。造模第21天后处死小鼠,测移植瘤重、体质量、肺转移灶数及血浆中TXB2、6-Keto-PGF1α的水平。结果D组小鼠出瘤时间明显延长(P<0.01),瘤重及肺转移灶数均比B组低(P<0.01),而体重比B组高(P<0.01);D组小鼠脾细胞IFN-γ活性较B组高(P<0.05),且山仙颗粒能使血浆中TXB2降低,使TXB2/6-Keto-PGF1α的比值向不利于血栓形成方向变化。结论山仙颗粒有抑制肿瘤生长及抗转移的作用,其机理与增强宿主脾细胞IFN-γ活性及调节血浆中TXB2/6-Keto-PGF1α的比值趋于平衡有关。 展开更多
关键词 山仙颗粒 转移 ifn-Γ TXB2 6-Keto—PGF1α
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桑叶和鸭跖草对人TH_1、TH_2细胞IFN-γ、IL-4水平影响的体外实验研究 被引量:1
13
作者 林霞 吴炜 +1 位作者 朱海红 陈智 《浙江预防医学》 2004年第8期17-19,共3页
目的 用体外实验观察中药桑叶、鸭跖草对正常人外周血Th1 、Th2 细胞IFN γ、IL 4水平的影响。方法 选取健康献血员 3 0名无菌采集静脉抗凝血 ,用淋巴细胞分离液分离外周血单核细胞 (PBMC) ,并调成 1× 10 6 /ml浓度加PHA P10 μg... 目的 用体外实验观察中药桑叶、鸭跖草对正常人外周血Th1 、Th2 细胞IFN γ、IL 4水平的影响。方法 选取健康献血员 3 0名无菌采集静脉抗凝血 ,用淋巴细胞分离液分离外周血单核细胞 (PBMC) ,并调成 1× 10 6 /ml浓度加PHA P10 μg/ml。分二组 ,分别加入含中药桑叶、鸭跖草的小鼠血清及不含药小鼠血清(对照 ) ,置 5 %CO2 细胞培养箱 3 7℃孵育 48h ,取上清液川流式细胞术检测IFN γ、IL 4水平。结果 正常人外周血单核细胞Th1 /Th2 处于动态平衡 ;桑叶组Th1 、Th2 细胞的IFN γ、IL 4水平明显升高 ,与对照组相比P<0 0 5 ;鸭跖草组Th1 、Th2 细胞的两类细胞因子水平虽有所上升 ,但与对照纽相比不显著 (P >0 0 5 )。结论 中药桑叶具有提高正常人Th1 、Th2 细胞的IFN γ、IL 4水平 ,鸭跖草的作用不明显。 展开更多
关键词 桑叶 鸭跖草 TH1细胞 TH2细胞 ifn-Γ IL-4 体外实验 细胞因子
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观察全身热疗、化疗联合治疗晚期NSCLC患者对其机体Th1Th2平衡及IL-2、IFN-γ、IL-4、IL-10、VEGF水平的影响 被引量:2
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作者 王跃 《中国急救医学》 CAS CSCD 北大核心 2018年第A01期214-215,共2页
目的 探讨全身热疗、化疗联合应用于晚期非小细胞肺癌患者治疗过程中的具体效果及对机体Th1/Th2平衡、IL-2、IFN-γ、IL-4、IL-10、VEGF水平的影响情况.方法 研究组晚期NSCLC患者选择全身热疗+化疗,对照组晚期NSCLC患者选择局部热疗+化... 目的 探讨全身热疗、化疗联合应用于晚期非小细胞肺癌患者治疗过程中的具体效果及对机体Th1/Th2平衡、IL-2、IFN-γ、IL-4、IL-10、VEGF水平的影响情况.方法 研究组晚期NSCLC患者选择全身热疗+化疗,对照组晚期NSCLC患者选择局部热疗+化疗.结果 研究组临床总有效率(60.00%)显著高于对照组(33.33%),P<0.05;两组治疗前Th1/Th2、VEGF、IL-2、IFN-γ、IL-4、IL-10检测值对比均P>0.05,治疗后研究组Th1/Th2、IL-2、IFN-γ水平提高幅度以及VEGF、IL-4、IL-10水平下降幅度均大于对照组(P<0.05).结论 应用全身热疗、化疗联合治疗晚期NSCLC患者可显著提高其临床疗效,有利于改善相应实验室检查指标. 展开更多
关键词 晚期非小细胞肺癌 全身热疗 化疗 Th1/Th2 IL-2 IL-4 IL-10 ifn-Γ VEGF 影响效果
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犬新孢子虫刺激小鼠免疫细胞IFN-γ和IL-12的变化 被引量:1
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作者 郭衍冰 苑淑贤 +2 位作者 姚新华 程荣华 曹利利 《吉林畜牧兽医》 2015年第5期27-30,共4页
犬新孢子虫是一种传播范围极广的寄生性原虫,是导致母畜流产、死胎,新生胎儿运动或神经障碍的主要病原之一。本研究主要通过收集纯化了犬新孢子虫,制备可溶性抗原,分离培养小鼠脾细胞和树突状细胞,观察犬新孢子虫对小鼠脾细胞和树突状... 犬新孢子虫是一种传播范围极广的寄生性原虫,是导致母畜流产、死胎,新生胎儿运动或神经障碍的主要病原之一。本研究主要通过收集纯化了犬新孢子虫,制备可溶性抗原,分离培养小鼠脾细胞和树突状细胞,观察犬新孢子虫对小鼠脾细胞和树突状细胞的作用,发现犬新孢子虫滋养体抗原可以刺激小鼠T淋巴细胞和树突状细胞,分别产生很高的INF-γ和IL-12,说明犬新孢子虫感染宿主后可引起机体产生Th1型免疫反应,为进一步研究犬新孢子虫的感染和宿主免疫应答机制奠定基础。 展开更多
关键词 犬新孢子虫 小鼠免疫细胞 ifn-Γ IL-1 2
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O型FMDVP1-2A基因与猪IFN-γ基因共表达质粒的构建及其在BHK-21细胞中的表达
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作者 吴国华 张强 +6 位作者 颜新敏 侯俊玲 赵志荀 崔力凡 李健 朱海霞 朱彩珠 《华北农学报》 CSCD 北大核心 2010年第5期11-15,共5页
为了构建O型FMDVP1-2A基因与猪IFN-γ基因共表达质粒并在BHK-21细胞中进行表达,本研究利用聚合酶链式反应(PCR)从阳性质粒pGEM-P12A克隆到P1-2A基因,将扩增产物纯化、双酶切后连接到pBudCE-IFN载体,构建重组质粒pBudCE-IFN-P1-2A。重组... 为了构建O型FMDVP1-2A基因与猪IFN-γ基因共表达质粒并在BHK-21细胞中进行表达,本研究利用聚合酶链式反应(PCR)从阳性质粒pGEM-P12A克隆到P1-2A基因,将扩增产物纯化、双酶切后连接到pBudCE-IFN载体,构建重组质粒pBudCE-IFN-P1-2A。重组表达质粒鉴定后,在脂质体介导下转染BHK-21细胞,用RT-PCR和直接免疫荧光试验分别检测P1-2A和IFN-γ在BHK-21细胞中的表达。RT-PCR检测显示,重组表达质粒转染细胞后P1-2A和IFN-γ基因成功转录出mRNA;免疫荧光试验表明目的基因在BHK-21细胞中获得了表达。结果证明,本研究成功构建了重组质粒pBudCE-IFN-P1-2A并在体外进行了表达,这为研制抗FMDVDNA疫苗和IFN-γ的佐剂作用奠定了坚实基础。 展开更多
关键词 FMDV P12A基因 ifn-Γ基因 共表达
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1,25-(OH)_2D_3对体外培养围产期奶牛外周血淋巴细胞转化率及γ-干扰素(IFN-γ)的影响
17
作者 曹荣 王加启 +2 位作者 胡菡 卜登攀 雒秋江 《中国奶牛》 2007年第S1期26-29,共4页
体外培养围产期奶牛外周血淋巴细胞,分别添加0、0.01、0.1、1、10和100nM的1,25(OH)_2D_3,研究1,25-(OH)_2D_3对奶牛外周血淋巴细胞免疫功能的影响。结果表明,1,25-(OH)_2D_3对淋巴细胞转化率没有影响,但可以通过抑制IFN-γ的分泌影响... 体外培养围产期奶牛外周血淋巴细胞,分别添加0、0.01、0.1、1、10和100nM的1,25(OH)_2D_3,研究1,25-(OH)_2D_3对奶牛外周血淋巴细胞免疫功能的影响。结果表明,1,25-(OH)_2D_3对淋巴细胞转化率没有影响,但可以通过抑制IFN-γ的分泌影响奶牛的细胞免疫功能。添加0.01~100nM的1,25-(OH)_2D_3对淋巴细胞的转化率没有显著影响,但剂量依赖性抑制了ConA和PWM诱导的淋巴细胞IFN-γ的产量。当1,25(OH)_2D_3浓度达到0.1nM、1nM时与对照组相比分别显著(P<0.05)和极显著(P<0.01)抑制ConA诱导的淋巴细胞IFN-γ的产量。以PWM激活的细胞在培养48h、72h,1,25-(OH)_2D_3添加量在0.1~100nM范围均极显著抑制IFN-γ的产生(P<0.01)。添加0.01nM 1,25(OH)_2D_3对IFN-γ的抑制作用相对较小(P>0.05),在培养48h后并未表现出显著的抑制作用,但培养72h后也极显著的抑制了IFN-γ的产生(P<0.01)。 展开更多
关键词 1 25-(OH)_2D_3 体外 外周血淋巴细胞 转化率 ifn-Γ
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TGF-β_1对γδT细胞TLR-4受体及IL-2、IFN-γ水平的影响 被引量:5
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作者 杜发旺 刘红梅 +2 位作者 何正光 杜先智 罗晓斌 《中国现代医学杂志》 CAS 2018年第11期27-32,共6页
目的探讨转化生长因子β_1(TGF-β_1)对γδT淋巴细胞Toll样受体4(TLR-4)蛋白表达的影响,及TGF-β_1对γδT淋巴细胞分泌淋巴因子白细胞介素2(IL-2)、干扰素γ(IFN-γ)的影响。方法从健康志愿者外周血中分离纯化γδT淋巴细胞,并用外源... 目的探讨转化生长因子β_1(TGF-β_1)对γδT淋巴细胞Toll样受体4(TLR-4)蛋白表达的影响,及TGF-β_1对γδT淋巴细胞分泌淋巴因子白细胞介素2(IL-2)、干扰素γ(IFN-γ)的影响。方法从健康志愿者外周血中分离纯化γδT淋巴细胞,并用外源性TGF-β_1、脂多糖(LPS)刺激γδT淋巴细胞,分为4组培养:空白对照组、LPS组、LPS+TGF-β_1组、TGF-β_1组。培养12 d后采用酶联免疫吸附法检测淋巴因子IFN-γ、IL-2的表达,Western blot检测TLR-4蛋白的表达,PCR检测TLR-4基因的转录。结果与空白对照组相比,LPS组、LPS+TGF-β_1组TLR-4蛋白的转录及表达水平升高(P<0.05),淋巴因子IL-12和IFN-γ的表达增加;TGF-β_1组TLR-4蛋白的表达、转录及IL-2的表达降低(P<0.05)。与LPS组相比,LPS+TGF-β_1组TLR-4蛋白的转录及表达、淋巴因子IL-12和IFN-γ的表达降低(P<0.05)。结论TGF-β_1能抑制γδT淋巴细胞TLR-4蛋白的表达,降低γδT淋巴细胞分泌IFN-γ、IL-2淋巴因子的水平。 展开更多
关键词 TGF-β1 ΓΔT淋巴细胞 TLR-4 IL-2 ifn-Γ
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Visfatin Protects Rat Pancreatic β-cells against IFN-γ-Induced Apoptosis through AMPK and ERK1/2 Signaling Pathways 被引量:7
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作者 XIANG Ruo Lan MEI Mei +3 位作者 SU Yun Chao LI Li WANG Jin Yu WU Li Ling 《Biomedical and Environmental Sciences》 SCIE CAS CSCD 2015年第3期169-177,共9页
Objective Interferon-γ (IFN-γ) plays an important role in apoptosis and was shown to increase the riskof diabetes. Visfatin, an adipokine, has anti-diabetic, anti-tumor, and regulating inflammatoryproperties. In t... Objective Interferon-γ (IFN-γ) plays an important role in apoptosis and was shown to increase the riskof diabetes. Visfatin, an adipokine, has anti-diabetic, anti-tumor, and regulating inflammatoryproperties. In this study we investigated the effect of visfatin on IFN-γ-induced apoptosis in ratpancreatic β-cells.Methods The RINm5F (rat insulinoma cell line) cells exposed to IFN-γ were treated with or withoutvisfatin. The viability and apoptosis of the cells were assessed by using MTT and flow cytometry. Theexpressions of mRNA and protein were detected by using real-time PCR and western blot analysis.Results The exposure of RINm5F cells to IFN-γ for 48 h led to increased apoptosis percentage of thecells. Visfatin pretreatment significantly increased the cell viability and reduced the cell apoptosisinduced by IFN-γ. IFN-γ-induced increase in expression of p53 mRNA and cytochrome c protein,decrease in mRNA and protein levels of anti-apoptotic protein Bcl-2 were attenuated by visfatinpretreatment. Visfatin also increased AMPK and ERK1/2 phosphorylation and the anti-apoptotic actionof visfatin was attenuated by the AMPK and ERK1/2 inhibitor.Conclusion These results suggested that visfatin protected pancreatic islet cells against IFN-γ-inducedapoptosis via mitochondria-dependent apoptotic pathway. The anti-apoptotic action of visfatin ismediated by activation of AMPK and ERK1/2 signaling molecules. 展开更多
关键词 VISFATIN ifn-Γ Pancreatic β-cell Apoptosis AMPK ERK1/2
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牙周炎患者外周血Th1、Th2、Th17表达及与牙龈组织IL-17、IFN-γ水平的相关性研究 被引量:10
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作者 马赫 陈瑶 刘桂红 《北京口腔医学》 2021年第4期213-217,共5页
目的观察牙周炎患者外周血辅助性T1(Th1)、辅助性T2(Th2)、辅助性T17(Th17)和牙龈组织白细胞介素(IL-17)、干扰素-γ(IFN-γ)表达水平,分析其相关性。方法选择我院口腔科2017年7月~2019年12月97例牙周炎患者作为研究对象,根据炎症严重... 目的观察牙周炎患者外周血辅助性T1(Th1)、辅助性T2(Th2)、辅助性T17(Th17)和牙龈组织白细胞介素(IL-17)、干扰素-γ(IFN-γ)表达水平,分析其相关性。方法选择我院口腔科2017年7月~2019年12月97例牙周炎患者作为研究对象,根据炎症严重程度分别纳入轻度组(n=29)、中度组(n=35)和重度组(n=33),选择30名牙周健康自愿者作为对照组。收集每名者拔除的无保留价值患牙的牙龈组织,行IL-17、IFN-γ免疫组化染色,采用McCarty的H-score评分法评价染色结果。同时取患者外周血采流式细胞检测法检测Th1、Th2、Th17。采用Pearson法分析Th1、Th2、Th17和牙龈组织IL-17、IFN-γ表达的相关性。结果3组外周血Th1、Th2、Th17水平、牙龈组织IL-17、IFN-γ细胞的H-scorce评分差异均有统计学意义(P<0.05)。3组各项指标均高于对照组,中度组、重度组各项指标均高于轻度组,重度组各项指标高于中度组,差异均有统计学意义(P<0.05)。3组外周血Th2均低于对照组,中度组、重度组外周血Th2均低于轻度组,重度组外周血Th2低于中度组,差异均有统计学意义(P<0.05)。Th1、Th17与IL-17呈正相关(r=0.716,0.572,P<0.05);Th1、Th17与IFN-γ呈正相关(r=0.639,0.529,P<0.05);Th2与IL-17、IFN-γ呈负相关(r=-0.489,-0.406,P<0.05)。结论牙周炎患者机体免疫功能降低,且与牙周组织感染和破坏程度相关,Th细胞亚群可能参与了牙周局部的炎症反应,而IL-17、IFN-γ可能是重要的促炎细胞因子。 展开更多
关键词 牙周炎 TH1 TH2 Th17 IL-17 ifn-Γ 炎症细胞因子
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