慢性乙肝病毒感染者不同免疫阶段IFN-γ斑点水平及其在低丙氨酸氨基转移酶抗病毒治疗中的作用

目的 探讨ELISPOT（Enzyme-linked immuno-spot assay,酶联免疫斑点检测）技术检测IFN-γ斑点数在评价慢性乙肝感染者免疫状态和指导慢性乙肝患者抗病毒治疗的应用价值.方法 将入选的慢性乙肝感染者（低水平丙氨酸氨基转移酶组17例、免疫耐受组14例、免疫清除组16例）和正常对照组15例研究对象分离PMBC（Peripheral blood mononuclear cell,外周血单个核细胞）,用HBsAg刺激物与实验对象的PBMC细胞孵育,采用ELISPOT检测慢性乙肝感染者IFN-γ斑点水平,同时对17例低水平ALT（Manine aminotransferase,丙氨酸氨基转移酶）组行肝穿刺病理检查,分析其IFN-γ斑点水平与肝脏病理炎症分级的相关性;其中9例肝穿病理结果≥G2/S2并接受抗病毒治疗的慢性乙肝感染者3个月后再次采用ELISPOT检测IFN-γ斑点水平.结果 HBsAg刺激PBMC产生IFN-γ斑点水平在各组分别为免疫清除组117 ＆#177;53、低ALT组15 ＆#177;2、免疫耐受组13 ＆#177;2）和正常对照组59＆#177;10,除低ALT组与免疫耐受组之间无显著性差异外（P =0.85 ＞0.05）,其余均有显著性差异.免疫清除组的慢性乙肝感染者中,HBsAg刺激物的IFN-γ斑点水平与血清ALT有显著相关性（r=0.976,P＜0.05）.肝病理穿刺中17例低水平ALT慢性乙肝感染者,其中肝组织病理分期≥G2/S2的共9例,占52.9％;同时其IFN-γ斑点水平与肝脏炎症分级有显著相关性（r=0.630,P=0.009）.9例肝穿病理结果≥G2/S2并接受抗病毒治疗的慢性乙肝感染者抗病毒治疗前后IFN-γ斑点水平有统计学差异（P=0.01）.结论 慢性乙肝感染者免疫清除组IFN-γ斑点水平最高,低水平ALT的慢性乙肝感染者肝穿刺病理结果提示有很大一部分达到抗病毒指征,且其IFN-γ斑点水平与肝脏炎症程度呈正相关,通过ELISPOT检测IFN-γ斑点水平,可更好地判断慢性乙肝感染者免疫状态和评估慢性乙肝感染者抗病毒治疗效果.

慢性乙型肝炎患者不同免疫阶段的IFN-γ斑点水平研究

目的分析处于不同免疫阶段的慢性乙型肝炎感染患者经过HBsAg刺激外周静脉血单个核细胞(PBMC)后产生的IFN-γ斑点水平,从细胞免疫水平探讨慢性乙型肝炎的发病机制,以指导临床治疗。方法采用密度梯度离心法,将52例慢性乙型肝炎感染患者分为免疫清除组19例、免疫耐受组16例、不典型状态组17例,并选取17名健康志愿者,所有受试人员于2014年2月-2015年7月在医院就诊,用HBsAg刺激原刺激PBMC,采用酶联免疫斑点吸附法(ELISPOT)检测各组乙型肝炎感染者IFN-γ的斑点水平,进行统计学分析,并考察各组患者血清ALT水平与IFN-γ斑点水平的相关性。结果 IFN-γ斑点数正常对照组显著高于免疫耐受组和不典型状态组,显著低于免疫清除组,差异有统计学意义(P<0.05);免疫耐受组与不典型状态组患者比较结果差异无统计学(P>0.05),但显著低于免疫清除组(P<0.05);免疫清除组患者IFN-γ斑点数与其他3组比较差异有统计学意义(P<0.05)。免疫清除状态患者体内,IFN-γ斑点数和血清ALT浓度有显著正相关性;免疫耐受状态及不典型状态患者的IFN-γ斑点数与血清中ALT水平没有显著的相关性。结论通过酶联免疫斑点吸附技术,可以更准确的了解患者所处的免疫状态,指导我们寻找治疗最佳时机。