儿童急性淋巴细胞白血病IG/TCR重排的特点及临床意义

目的探索急性淋巴细胞白血病(ALL)患儿免疫球蛋白基因(IG)和T细胞受体基因(TCR)重排特点及其在白血病危险度分层中的作用。方法收集189例ALL患儿的骨髓标本及临床资料,采用BIOMED-2引物行多重PCR方法检测患儿IG/TCR重排,并进行统计分析。结果 189例ALL患儿中176例携带IG/TCR重排,其中男102例、女74例;IGVH重排阳性136例(77. 3%),IGDH阳性46例(26. 1%),IGK阳性92例(52. 3%),IGλ阳性11例(6. 3%),TCRB阳性47例(26.7%),TCRD阳性77例(43.8%),TCRG阳性88例(50.0%);25例患儿(14.2%)的IG/TCR重排仅有1个克隆,41例(23.3%)含2个克隆,61例(34.7%)含3个克隆,49例(27.8%)含3个以上克隆。与中危和标危相比,高危患儿中IGK阳性的比例较高,且具有统计学意义(χ~2=7.48,P=0.024);其他类型的IG/TCR重排与白血病的危险度无相关性(P>0.05)。结论 ALL患儿中IG/TCR重排普遍存在,IGK重排与ALL患儿的危险度相关。

IG/TCR重排二代测序技术检测急性淋巴细胞白血病微小残留病的研究

目的:比较免疫球蛋白(IG)/T细胞受体(TCR)重排二代测序技术(next-generation sequencing,NGS)与其他急性淋巴细胞白血病(acute lymphoblastic leukemia,ALL)微小残留病(minimal residual disease,MRD)检测手段间的差异,评估IG/TCR重排NGS在ALL MRD监测中的价值。方法:回顾性分析2018年9月至2023年12月本院收治的25例ALL患者,同时采用NGS、流式细胞术(FCM)和实时定量聚合酶链反应技术(q-PCR)检测MRD。结果:48.0%的患者初诊时NGS检测存在3个或以上异常高频克隆。81.3%的患者治疗后的主要残留克隆与初诊时最高频克隆一致。在FCM判定MRD阴性的69例样本中24例(34.8%)经NGS检测仍阳性,MRD中位水平为4.13×10^(-5),显著低于FCM阳性患者的MRD水平(4.70×10^(-3))(P<0.05)。Ph+ALL患者同时采用NGS、q-PCR、FCM三种方法进行MRD检测,阳性率依次为59.1%、50.0%、27.3%,NGS阳性率显著高于FCM(P=0.035)。FCM判定阴性的16例样本中7例(43.8%)经NGS检测为阳性,中位MRD水平为1.99×10^(-5),较NGS/FCM双阳性组的中位MRD水平有降低趋势,但差异无统计学意义(P>0.05)。q-PCR判定阴性的11例样本中3例(27.3%)经NGS检测为阳性,中位MRD水平为7.59×10^(-6),较NGS/q-PCR双阳性组的中位MRD水平有降低趋势,但差异亦无统计学意义(P=0.053)。结论:NGS检测MRD的灵敏度和深度均优于FCM;Ph+ALL患者中NGS检测的灵敏度及深度较q-PCR有改善趋势。IG/TCR重排NGS是能保证足够检测深度的有效MRD检测手段。

应用Ig/TCR重排监测儿童淋巴瘤微小残留病

淋巴瘤微小残留病（MRD）的准确检测对判断预后、评价疗效、监测复发和指导治疗具有十分重要的意义.免疫球蛋白（Ig）/T细胞受体（TCR）重排可以作为肿瘤特异性PCR标志用于MRD的监测.BIOMED-2策略是欧洲协作组制定的标准化多重PCR反应方法.MRD的检测可以通过实时荧光定量PCR的方法完成.对Ig/TCR重排监测儿童淋巴瘤MRD的原理及其相关研究进展进行了综述.

儿童急性祖B淋巴细胞白血病Ig和TCR基因重排的特征及其临床意义

目的探讨儿童急性祖B淋巴细胞白血病(ALL) Ig和TCR基因重排与临床特征的关系及其对预后的影响。方法纳入2003年4月至2009年12月首都医科大学附属北京儿童医院血液肿瘤中心收治的祖B-ALL患儿,采用多重PCR联合异源双链电泳及测序方法检测IgH、IgK、IgL、TRD、TRG和TRB基因重排,其中单克隆、双克隆和寡克隆重排为阳性组,多克隆和未重排者为阴性组;各标志阳性组中根据基因克隆特性分为单克隆亚组和双/寡克隆亚组。采用卡方检验比较阳性组和阴性组临床特征的差异; Kaplan-Meier生存分析比较阳性组和阴性组、单克隆和双/寡克隆亚组无事件生存率(EFS)的差异。结果 40例祖B-ALL患儿进入本文分析,均检测到至少1种Ig或TCR克隆性重排,IgH、IgK和IgL的检出率依次为90.0%、32.5%和10.0%;跨系TCR基因重排的比例为72.5%,TRD、TRG和TRB的检出率分别为52.5%、30.0%和17.5%。TRD基因单克隆性重排比例最高(95.2%),主要为Vδ-Dδ和Dδ-Dδ不完全重排。TRD基因重排阳性患儿白血病细胞表达CD22的频率显著低于未重排者。MLL基因重排阳性患儿未检测到TRB基因重排。各标志重排阳性组与阴性组泼尼松反应、微小残留病水平及预后差异均无统计学意义。IgH双/寡克隆亚组患儿EFS显著低于IgH单克隆亚组患儿,5年EFS分别为(58.8±12.3)%和(84.2±8.4)%,P=0.044。结论祖B-ALL患儿TRD基因重排与CD22表达相关,IgH单克隆性重排患儿的预后优于双/寡克隆性重排者。

BIOMED-2标准化基因重排检测在非霍奇金淋巴瘤诊断中的意义

目的:利用BIOMED-2标准化免疫球蛋白(Ig)/T细胞受体(TCR)基因重排检测非霍奇金淋巴瘤(NHL)患者骨髓Ig或TCR基因重排,探讨Ig/TCR基因重排在非霍奇金淋巴瘤诊断中的应用意义。方法:从骨髓及石蜡包埋组织(FFPE)标本中提取基因组DNA,采用BIOMED-2系统引物,进行多重PCR扩增并利用PCR片段分析法进行Ig/TCR基因重排的克隆性分析。结果:在235例T细胞非霍奇金淋巴瘤(T-NHL)中,TCRγ和TCRx单克隆重排阳性率分别为57.9%和50.2%,TCRγ和TCRβ的联合检出率为71.9%。在583例B细胞非霍奇金淋巴瘤(BNHL)IgH和IgK单克隆重排阳性率分别为70.7%和69.3%,IgH和IgK的联合检出率为81.6%。套细胞淋巴瘤与滤泡淋巴瘤、弥漫大B细胞淋巴瘤IgH(84.8%对34.0%(P<0.001);84.8%对9.2%(P=0.025)和IgK(75.8%vs 50.9%,P<0.001;75.8%vs 16.1%(P<0.001)重排阳性率差异具有统计学意义。Ig基因重排阳性BNHL患者中,65例(13.7%)患者存在TCR重排阳性。TCR重排阳性T-NHL患者中,未见Ig基因重排阳性。30例弥漫大B细胞淋巴瘤患者FFPE标本有25例(83.3%)检出Ig基因重排,与骨髓标本重排检出率相比较,差异具有统计学意义(P<0.001)。结论:利用BIOMED-2标准化Ig/TCR基因重排检测对于淋巴瘤的诊断有辅助性作用,并且利用序列分析法可提高重排检测的敏感性和特异性,对于淋巴瘤的早期诊断有很高的价值。

Ig/TCR基因重排检测在淋巴系统恶性增殖性疾病诊断及疗效监控中的意义

目的:评估Ig/TCR抗原受体基因重排技术在可疑淋巴系统增殖性疾病中的鉴别诊断意义及其在疾病监控中的作用。方法:使用BIOMED-2多重聚合酶链反应技术,检测405例患者的515份样本,分析受体基因重排结果,并与其最终诊断及疾病状态的相关性进行分析。结果:在确诊的118例淋巴细胞增殖性疾病中,共有82例标本(69.5%)检测到单克隆抗原受体基因重排,其中多发性骨髓瘤78.6%(11/14),急或慢性淋巴细胞白血病74.4%(29/39),非霍奇金淋巴瘤骨髓浸润65.7%(23/35),非霍奇金淋巴瘤病理确诊组织样本63.3%(19/30)。组织标本阳性检出率明显高于骨髓标本(50.0%∶12.5%,P<0.05)。对部分初诊时抗原受体基因重排阳性,但治疗后达完全缓解的患者进行随访发现,达到完全缓解的患者骨髓均未检测出单克隆性抗原受体基因重排。不伴骨髓浸润的非霍奇金淋巴瘤的58份骨髓标本和非淋巴系统增殖性疾病的204份样本,均未发现单克隆性抗原受体基因重排(特异性100%)。结论:抗原受体基因重排单克隆检测对淋巴系统增殖性疾病的诊断、鉴别诊断及治疗后疗效评价有重要意义。

以Ig／TCR基因重排为靶目标检测微小残留白血病的研究进展

微小残留白血病（MRD）是引起白血病复发的主要原因，准确检测MRD对判断预后、评价疗效、监测复发和指导治疗都具有十分重要的意义。免疫球蛋白／T细胞抗原受体（immunoglobulin／T cell receptor，Ig／TCR）基因重排具有高特异性和高发生率，是检测白血病MRD的分子基础。目前，国际上已建立了基于Ig／TCR基因重排、多中心、大样本、结合临床的实时定量聚合酶链反应监测标准，为临床上判断MRD水平并据此确定治疗方案提供了指导。本文就近年来以Ig／TCR基因重排作为MRD检测靶目标的研究进展作一综述。