IGF—1对ISP损伤大鼠心肌CA变化影响的研究

目的：研究胰岛素样生长因子1（IGF—1）对异丙基肾上腺素（ISP）损伤大鼠心肌儿茶酚胺（CA）的变化影响。方法：采用改良的荧光分光光度法测定CA的含量。结果IGF—1可抑制内源性CA的产生。结论：作者认为IGF—1对ISP损伤大鼠心肌具有保护作用。

老年高血压及痴呆患者IGF-1水平检测及临床意义探讨

目的 探讨与老年高血压及痴呆患者血清胰岛素样生长因子-1(IGF-1)水平及其相关意义。方法 选取2021年1月至2022年12月期间我院收治的老年高血压患者,分成老年高血压伴痴呆、老年高血压无痴呆2个研究组,门诊老年无高血压且无痴呆体检者为正常对照组;分析上述3组受试者的IGF-1水平与老年高血压和痴呆之间的相关性及其意义。结果 (1)老年高血压伴痴呆患者的IGF-1水平均显著低于老年高血压无痴呆患者(分别为70.3±38.5μg/L和88.7±26.2μg/L)(P<0.05);(2)老年高血压伴痴呆患者、老年高血压无痴呆患者的IGF-1水平与正常对照组IGF-1水平(111.3±40.1μg/L)比较显著降低(均P<0.05);(3)多因素Logistic回归分析,IGF-1、高血压病史、左室后壁厚度、室间隔厚度可能是老年高血压伴痴呆的危险因素(OR>1,P<0.05),性别、年龄、空腹血糖、TC、HDL-C、LDL-C、TG、hs-CRP不是老年高血压伴痴呆的危险因素(OR<1,P<0.05);(4)IGF-1水平与老年高血压伴痴呆相关性的ROC曲线分析显示,ROC曲线下面积(AUC)为0.889(95%CI 0.823~0.955,P<0.05);IGF-1为93.5μg/L时,对本组病例诊断老年血压伴痴呆的灵敏度为0.927,特异性为0.711。结论 老年高血压患者IGF-1水平显著低于无高血压人群,而高血压合并老年痴呆患者IGF-1水平进一步降低,差异具有统计学意义,提示高血压和痴呆均为导致IGF-1表达下降的重要因素。IGF-1下降、高血压病史、左室后壁厚度及室间隔厚度增加可能是老年高血压伴痴呆的危险因素,IGF-1水平降低对老年高血压伴痴呆有较好的诊断价值。

3D打印技术用于经鼻蝶窦入路垂体腺瘤切除术应用效果及对血清MMP-9和IGF-1水平的影响

目的:探究3D打印技术在经鼻蝶窦入路垂体腺瘤(PA)切除术的应用效果及对血清基质金属蛋白酶-9(MMP-9)和胰岛素样生长因子-1(IGF-1)水平的影响。方法:选取2020年5月至2022年5月秦皇岛市第一医院收治的84例PA患者,按照随机数表法将其分为观察组和对照组,每组42例。对照组行经鼻蝶窦入路垂体腺瘤切除术,观察组行经鼻蝶窦入路垂体腺瘤切除术联合应用3D打印技术,比较两组肿瘤切除效果、围术期指标、视力改善情况、MMP-9和IGF-1水平,以及鼻腔功能的鼻气道阻力(NAR)、T&T嗅觉测试评分及并发症。结果:观察组肿瘤切除效果优于对照组,差异有统计学意义(U=2.286,P<0.05);观察组手术时间、术中出血量及住院时间均少于对照组,差异有统计学意义(t=4.780、11.438、11.842,P<0.05);术后3 d、7 d时观察组血清MMP-9和IGF-1水平低于对照组,差异有统计学意义(F=7.526、4.985,P<0.05);术后1个月、3个月时观察组NAR及T&T嗅觉测试评分低于对照组,差异有统计学意义(F=6.359、8.436,P<0.05);两组视力视野改善情况及并发症发生率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:3D打印技术用于经鼻蝶窦入路垂体腺瘤切除术可提高肿瘤切除效果,优化手术操作,减少创伤,有利于减轻疼痛,改善嗅觉功能与视力视野,并能降低血清MMP-9、IGF-1水平,且安全性较高。

敲低NIPBL基因对TGF-β1与IGF-1联合诱导骨髓间充质干细胞成软骨分化的影响

目的:探讨敲低NIPBL基因对TGF-β1与IGF-1联合诱导骨髓间充质干细胞成软骨分化的影响。方法:将慢病毒转染的NIPBL shRNA骨髓间充质干细胞分为TGF-β1组、TGF-β1+IGF-1组、NIPBL-空白对照组,并设立未转染的NIPBL+组,对上述四组细胞进行成软骨诱导分化;在培养7、14、21天时应用Western blot技术分别检测Sox-9、Collagen-Ⅱ的蛋白表达水平。结果:(1)在成软骨诱导的各阶段,Sox-9、Collagen-Ⅱ的蛋白表达量均为TGF-β1+IGF-1组高于TGF-β1组,NIPBL+组高于TGF-β1组和NIPBL-对照组(P<0.05);(2)在诱导7、21天时,Sox-9基因的蛋白表达量TGF-β1+IGF-1组高于NIPBL-对照组(P<0.05);(3)在各诱导阶段,TGF-β1+IGF-1组和NIPBL+组间差异无统计学意义。结论:敲低NIPBL基因导致TGF-β1与IGF-1联合诱导骨髓间充质干细胞成软骨分化的能力降低。

体外心肺复苏成功后患者血清GH IGF-1水平与HOMA-IR的相关性研究及生存结局影响因素分析

目的探讨体外心肺复苏成功后患者血清生长激素(GH)、胰岛素样生长因子-1(IGF-1)水平与胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)的相关性,并分析患者生存结局影响因素。方法将80例体外心肺复苏成功后患者设为观察组,选取同期80名健康体检志愿者设为对照组。根据28 d生存结局,将观察组患者分为死亡组49例和生存组31例。收集受试者一般资料,采用电化学发光法和高效液相色谱质谱法分别检测受试者血清中GH、IGF-1水平,采用Pearson相关检验分析GH、IGF-1与糖、脂代谢指标的相关性,采用Logistic回归分析体外心肺复苏成功后患者生存结局的影响因素。结果观察组受试者血清空腹血糖(FBG)、空腹胰岛素(FINS)、HOMA-IR、糖化血红蛋白(HbA1c)、总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、GH水平均高于对照组,高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、IGF-1水平均低于对照组(P<0.01);观察组患者血清GH与IGF-1水平呈显著负相关(r=-0.518,P<0.01);观察组患者血清GH水平与FBG、FINS、HOMA-IR、HbA1c、TC、TG、LDL-C水平呈显著正相关,与HDL-C水平呈显著负相关(P<0.01);血清IGF-1水平与FBG、FINS、HOMA-IR、HbA1c、TC、TG、LDL-C水平呈显著负相关,与HDL-C水平呈显著正相关(P<0.01)。死亡组患者血清FBG、HOMA-IR、HbA1c、GH水平均高于生存组,IGF-1水平低于生存组(P<0.05或0.01)。Logistic回归分析显示GH、IGF-1、HOMA-IR均是体外心肺复苏成功后患者死亡的影响因素(P<0.01)。结论体外心肺复苏成功后患者血清GH水平升高,IGF-1水平降低,导致其HOMA-IR升高,血糖、血脂代谢紊乱,影响患者生存结局。

HMGA2 基因多态性、血清IGF-1对特发性矮小症rhGH疗效影响的交互作用分析

目的探究高迁移率蛋白A2(HMGA2)基因多态性、血清胰岛素样生长因子-1(IGF-1)对特发性矮小症(ISS)重组人生长激素(rhGH)疗效影响的交互作用。方法选取2020年2月至2021年8月本院收治的ISS患儿100例,选取同期于本院接受体检的健康儿童100例纳入对照组,PCR测序分析HMGA2基因多态性情况,所有患儿均予以指导接受rhCH治疗;分析对照组和研究组HMGA2基因多态性分布和血清IGF-1表达;分析不同基因型患儿GH治疗前后IGF-1变化;分析HMGA2基因多态性联合IGF-1对ISS患儿rhGH疗效预测价值。对比不同HMGA2基因多态性ISS患儿rhGH生长情况和IGF-差异;分析不同HMGA2基因多态性和IGF-1、疗效的相关性。结果对照组和研究组儿童在HMGA2基因SNP rs1042725和SNP rs7968682分布差异显著,主要表现为在基因SNP rs1042725中,对照组TT型表达明显高于研究组,SNP rs7968682中GT型表达占比明显高于对照组(P<0.05);研究组ISS患儿血清IGF-1明显低于对照组(P<0.05);治疗后rs1042725和SNP rs7968682基因型患者的IGF-1水平较治疗前均升高,且差异具有统计学意义(均P<0.05);HMGA2基因SNP rs1042725、SNP rs7968682联合血清IGF-1评估ISS患者ROC曲线线下面积为0.935,具有较高的特异性以及灵敏度,联合检测诊断价值明显高于其他3种检测(P<0.05);经rhGH治疗后ISS患儿不同HMGA2基因多态性存在差异,SNP rs042725基因型中CT型表达ISS患儿生长情况显著优于TT和CC型(P<0.05);SNP rs7968682基因型中GT型表达ISS患儿生长情况显著优于TT和GG型(P<0.05);Spearman相关系数分析发现HMGA2基因多态性与IGF-1和疗效均呈现显著正相关(均P<0.05)。结论ISS患儿HMGA2基因多态性与正常儿童有一定差异,且ISS基因SNP rs 1042725和SNP rs7968682位点与疗效之间有显著相关性,与ISS患儿生长发育有关,可能有血清IGF-1调控有关,为临床ISS患儿的诊治提供一定基础。

IGF-1、IGFBP-3在非小细胞肺癌组织中的表达及其临床意义

目的 探讨类胰岛素一号生长因子(IGF-1)、胰岛素样生长因子结合蛋白-3(IGFBP-3)在非小细胞肺癌(NSCLC)患者血清和肺癌组织中的表达及临床意义。方法 收集98例NSCLC纳入观察组,同时收集肺部良性病变40例纳入对照组。统计两组血清及肺癌组织中IGF-1、IGFBP-3表达。结果 观察组血清IGF-1水平高于对照组,IGFBP-3水平低于对照组,P<0.05。血清IGF-1、IGFBP-3水平与TNM分期、淋巴结转移、局部侵犯有关,P<0.05。观察组IGF-1阳性表达率显著高于对照组,IGFBP-3阳性表达率显著低于对照组,P<0.05。IGF-1、IGFBP-3阳性表达率与TNM分期、淋巴结转移、局部侵犯有关,P<0.05。血清IGF-1诊断NSCLC AUC为0.733,灵敏度55.5%,特异度91.2%,最佳截断值150.26μg/L;血清IGFBP-3诊断NSCLC AUC为0.799,灵敏度63.6%,特异度78.6%,最佳截断值1413.54μg/L。结论 NSCLC患者血清IGF-1、IGFBP-3主要与TNM分期、淋巴结转移及局部侵犯存在关系,且血清IGF-1、IGFBP-3水平可作为NSCLC辅助诊断手段。

急性缺血性脑卒中血管内介入治疗效果及对IGF-1、HCY、Lp-PLA2的影响

目的分析急性缺血性脑卒中(AIS)血管内介入治疗效果及对胰岛素样生长因子-1(IGF-1)、同型半胱氨酸(HCY)、血清脂蛋白相关磷脂酶A2(Lp-PLA2)的影响。方法选取自2020年3月—2022年5月唐山市丰润区人民医院收治的203例AIS患者的临床资料,根据治疗方法不同将其分为观察组(血管内介入治疗,n=108)和对照组(药物静脉溶栓治疗,n=95)。比较两组患者临床疗效、神经功能恢复情况[美国国立卫生院神经功能缺损量表(NIHSS)],分析两组治疗前、后血液流变学指标(红细胞压积、血小板聚集率、血浆粘度、全血低切黏度、全血高切黏度)及血清IGF-1、HCY、Lp-PLA2水平变化情况。结果观察组治疗总有效率(87.96%)明显高于对照组(73.68%),差异具有统计学意义(P<0.05)。治疗后观察组各时间点NIHSS评分低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后观察组红细胞压积水平、血小板聚集率、血浆黏度、全血黏度低切值和高切值均低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后观察组HCY、Lp-PLA2水平均低于对照组,IGF-1高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论血管内介入治疗AIS疗效确切,有利于改善AIS患者神经功能缺损症状、血液流变学相关指标及IGF-1、HCY、Lp-PLA2水平,促进患者早日康复。

miR-141-3p对腰椎间盘突出症大鼠背根神经节炎症及下肢疼痛的抑制和改善作用

背景:研究表明,胰岛素样生长因子1/血小板源性生长因子有抑制纤维环细胞凋亡的作用。miR-141-3p微小RNA在骨髓基质细胞中随着年龄的增加而增加,且与炎症信号通路的活化存在一定关系,提示其可能成为腰椎间盘突出症的治疗靶点。目的:探究miR-141-3p通过调控胰岛素样生长因子1/血小板源性生长因子对腰椎间盘突出症大鼠背根神经节炎症及下肢疼痛的影响。方法:选取50只SPF级SD雄性大鼠,随机分为正常组、模型组、miR-NC组、miR-141-3p inhibitor组、miR-141-3p mimics组,每组10只。除正常组外,其余大鼠采用自体髓核移植法进行腰椎间盘突出症建模。建模成功后,对miR-NC组、miR-141-3p inhibitor组和miR-141-3p mimics组大鼠鞘内分别注射10μL 20μmol/L miR-NC,miR-141-3p inhibitor,miR-141-3p mimics,均每天注射1次,连续注射28 d;正常组、模型组同期同位置注射同体积生理盐水。采用热缩足潜伏期阈值评价大鼠下肢疼痛,实时荧光定量PCR检测背根神经节组织miR-141-3p mRNA表达,ELISA法检测背根神经节组织炎症因子,免疫印迹法检测背根神经节组织胰岛素样生长因子1/血小板源性生长因子蛋白表达,并分析miR-141-3p与胰岛素样生长因子1/血小板源性生长因子的相关性。结果与结论:miR-NC组各项指标与模型组比较,差异均无显著性意义。①大鼠热缩足潜伏期阈值:模型组明显低于正常组(P<0.05),miR-141-3p inhibitor组明显低于miR-NC组(P<0.05),miR-141-3p mimics组明显高于miR-141-3p inhibitor组(P<0.05)。②背根神经节组织miR-141-3p mRNA表达:模型组明显低于正常组(P<0.05),miR-141-3p inhibitor组明显低于miR-NC组(P<0.05),miR-141-3p mimics组明显高于miR-141-3p inhibitor组(P<0.05)。③背根神经节组织肿瘤坏死因子α、白细胞介素1β、白细胞介素1含量:模型组明显高于正常组(P<0.05),miR-141-3p inhibitor组明显高于miR-NC组(P<0.05),miR-141-3p mimics组明显低于miR-141-3p inhibitor组(P<0.05)。④背根神经节组织胰岛素样生长因子1、血小板源性生长因子蛋白表达:模型组明显低于正常组(P<0.05),miR-141-3p inhibitor组明显低于miR-NC组(P<0.05),miR-141-3p mimics组明显高于miR-141-3p inhibitor组(P<0.05)。⑤胰岛素样生长因子1与miR-141-3p呈正相关(r=0.904,P<0.001),血小板源性生长因子与miR-141-3p呈正相关(r=0.879,P<0.001)。⑥结论:miR-141-3p可显著改善腰椎间盘突出症大鼠下肢疼痛,抑制背根神经节炎症,其机制可能与促进胰岛素样生长因子1/血小板源性生长因子表达有关。

硝苯地平缓释片联合拉贝洛尔对妊娠期高血压患者血清IGF-1、sFIt-1水平及血管内皮功能的影响

目的:探究硝苯地平缓释片联合拉贝洛尔对妊娠期高血压(HDCP)患者血清胰岛素样生长因子-1(IGF-1)、人可溶性血管内皮生长因子受体1(sFIt-1)及血管内皮功能的影响。方法:将105例HDCP患者按不同治疗方案分为对照组(n=51)和实验组(n=54)。对照组接受拉贝洛尔治疗,实验组采用拉贝洛尔和硝苯地平联合治疗,两组患者均治疗两周。使用ELISA法检测血清IGF-1、sFIt-1、内皮素-1(ET-1)水平,微量一氧化氮(NO)检测仪检测NO。比较两组患者临床疗效,血清IGF-1、sFIt-1、NO、ET-1水平,母婴结局和不良反应。结果:治疗后,实验组患者总有效率(94.44%)高于对照组有效率(80.39%)(P<0.05);两组患者血清IGF-1、sFIt-1、NO水平均升高,ET-1水平均降低;实验组血清IGF-1、sFIt-1、NO水平均高于对照组(P<0.05),ET-1水平低于对照组(P<0.05)。实验组顺产率高于对照组(P<0.05),早产率低于对照组(P<0.05);两组不良反应发生率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:硝苯地平缓释片联合拉贝洛尔治疗HDCP疗效优于单独使用拉贝洛尔,联合用药可以升高患者血清IGF-1、sFIt-1、NO水平,降低ET-1水平,改善妊娠结局,安全性良好。

肥胖儿童IGF-1与中枢性性早熟的相关性研究

目的探讨肥胖儿童体内胰岛素样生长因子-1(insulin-like growth factor-1,IGF-1)、血脂的代谢特征及骨发育情况,并分析其与中枢性性早熟的相关性。方法选取2020年10月~2021年7月在兰州市区肥胖调查问卷中符合肥胖和非肥胖标准的6~10岁儿童157例,其中肥胖儿童81例纳入肥胖组,非肥胖儿童76例纳入非肥胖组。然后再根据肥胖与否、性早熟有无分为4组,即肥胖性早熟组(n=21)、肥胖无性早熟组(n=60)、非肥胖性早熟组(n=10)、非肥胖无性早熟组(n=66)。完善IGF-1、胰岛素生长因子结合蛋3(insulin growth factor binding protein 3,IGFBP3)、总胆固醇(total cholesterol,TC)、甘油三酯(triglyceride,TG)、高密度脂蛋白胆固醇(high density lipoprotein-cholesterol,HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(low density lipoprotein-cholesterol,LDL-C),拍摄左手腕关节骨龄片。比较不同组间儿童性发育、IGF-1、血脂及骨龄发育情况。结果肥胖组儿童性早熟发生率高于非肥胖组,女孩多于男孩(P<0.05);肥胖组儿童的骨龄发育偏早、IGF-1、IGFBP3、TC、TG、LDL-C均高于非肥胖组,HDL-C降低(P<0.05)。与肥胖无性早熟组比较,肥胖性早熟组儿童的骨龄发育偏早,TC、TG、LDL-C较低(P<0.05),IGF-1、IGFBP3略低(P>0.05);与非肥胖无性早熟组比较,非肥胖性早熟儿童的IGF-1水平偏高,LDL-C较低(P<0.05);肥胖性早熟组与非肥胖性早熟组儿童的IGF-1、血脂比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论肥胖是诱发性早熟的关键因素之一。肥胖儿童IGF-1升高、骨龄发育偏早;性早熟儿童骨龄发育偏早,但血脂、IGF-1在不同分组中水平不一样,提示性发育过早时IGF-1、脂质代谢可能是紊乱的。

ACTR调控IGF-1R对肝癌细胞生长的影响

目的探究ACTR调控IGF-1R的表达对肝癌细胞生长的影响及意义。方法外源性免疫共沉淀、内源性免疫共沉淀检测ACTR与IGF-1R之间的相互作用。应用细胞免疫荧光共定位,检测ACTR与IGF-1R在肝癌细胞内共定位情况。qRT-PCR及Western blot实验,检测肝癌细胞中ACTR对IGF-1R表达的影响。将肝癌细胞系分为阴性对照组、转染ACTR组、敲低IGF-1R组、敲低IGF-1R+转染ACTR组,应用CCK8法测定各组细胞生长情况。结果外源性免疫共沉淀、内源性免疫共沉淀均证实ACTR与IGF-1R之间存在相互作用。细胞免疫荧光共定位证实ACTR与IGF-1R在肝癌细胞内存在共定位表达。qRT-PCR证实敲低ACTR后,IGF-1R mRNA表达水平降低(P<0.05),回转ACTR后IGF-1R mRNA表达水平亦可恢复。Western blot证实敲低ACTR后IGF-1R表达降低,而回转ACTR后IGF-1R表达可恢复。细胞生长曲线说明ACTR能够促进肝癌细胞的生长(P<0.05),当应用siRNA敲低IGF-1R后,ACTR的促细胞生长作用减弱。结论ACTR与IGF-1R之间存在相互的作用,IGF-1R介导了ACTR促进肝癌细胞生长的过程,ACTR/IGF-1R轴在肝癌细胞的生长中发挥了必要的作用,有可能成为治疗肝癌的靶点之一,为肝癌的防治提供新的思路。

不同剂量重组人生长激素对特发性矮小症患儿血清IGF-1和IGFBP-3表达的影响

目的:探讨不同剂量重组人生长激素(rhGH)对特发性矮小症(ISS)患儿血清类胰岛素一号生长因子(IGF-1)和重组人胰岛素样生长因子结合蛋白-3(IGFBP-3)表达的影响。方法:以随机抽签法将2019年11月-2020年12月抚州市第一人民医院收治的90例ISS患儿分为三组(低、中、高剂量组),每组30例。三组均给予常规基础治疗,低、中、高剂量组分别给予皮下注射剂量为0.26、0.35、0.41 mg/kg的rhGH治疗,均连续治疗1年。比较三组治疗前和治疗1年后的生长发育相关指标[身高(Ht)、生长速率(GV)、身高标准差积分(HtSDS)、骨龄]和激素类指标(IGF-1、IGFBP-3)水平,评估三组不良反应发生率。结果:治疗前三组Ht、GV、HtSDS、骨龄比较,差异均无统计学意义(P>0.05);治疗1年后,三组Ht、GV、HtSDS、骨龄比较,差异均有统计学意义(P<0.05);治疗1年后,与低、中剂量组比较,高剂量组Ht、GV、HtSDS、骨龄均明显较优,且中剂量组的GV优于低剂量组(P<0.05)。治疗1年后,高剂量组IGF-1、IGFBP-3水平均高于中、低剂量组(P<0.05)。低、中、高剂量组不良反应发生率分别为6.67%、10.00%、16.67%,三组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:与低、中剂量rhGH相比较,给予ISS患儿高剂量rhGH治疗,更能有效促进患儿的生长发育,提高其血清IGF-1、IGFBP-3表达水平,且高剂量rhGH不会增加不良反应发生率,具有较高的安全性。

原发性高血压患者血清sSema4D、IGF-1水平与左心室肥大的相关性分析

目的 探讨原发性高血压患者血清可溶性重组蛋白信号4D(sSema4D)、胰岛素样生长因子-1(IGF-1)水平与左心室肥大(LVH)的相关性。方法 选取2020年6月至2021年7月我院收治的原发性高血压患者135例,根据超声心动图结果分为LVH组70例和非LVH组65例,另外选取同期年龄与性别相匹配的对照人群70例作为对照组。记录受试者基本临床资料,采用酶联免疫吸附试验法检测血清sSema4D、IGF-1水平。结果 与对照组比较,非LVH组和LVH组血清sSema4D、IGF-1水平升高(均P<0.05);且LVH组血清sSema4D、IGF-1水平高于非LVH组(P<0.05)。经多元Logistic回归模型分析,体质指数(P=0.017)、收缩压(P=0.003)、血清sSema4D水平(P<0.001)、血清IGF-1水平(P<0.001)升高是LVH的独立危险因素。利用Pearson相关系数分析和多元线性回归分析,对于原发性高血压患者,血清sSema4D、IGF-1水平与LVM、LVMI均呈正相关(P<0.05)。此外在LVH组患者中,血清sSema4D水平与血清IGF-1水平亦呈正相关(P=0.001)。结论 sSema4D和IGF-1与LVH发病密切相关,有望成为治疗或预防原发性高血压患者LVH发生的新靶点。

IGF-1过表达的骨髓间充质干细胞保护软骨细胞免受IL-1β诱导的损伤

目的探讨胰岛素样生长因子-1(IGF-1)过表达的骨髓间充质干细胞(BMSCs)对白细胞介素1β(IL-1β)诱导的软骨细胞损伤的影响及相关机制。方法慢病毒转染构建IGF-1过表达的BMSCs,使用倒置显微镜观察细胞形态,流式细胞仪鉴定骨髓间充质干细胞表面抗原表达,实时定量PCR和Western blot法检测IGF-1 mRNA及蛋白表达情况。将IGF-1慢病毒转染的BMSCs、空载体慢病毒转染的BMSCs、BMSCs分别与5 ng/mL IL-1β诱导的大鼠软骨细胞共同培养24 h后,CCK-8检测软骨增殖情况;Tunel法检测软骨细胞凋亡率;Western blot法检测Bcl-2相关X蛋白(Bax)、B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)、细胞色素C(Cytc)蛋白表达;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测细胞提取液中IL-1β、白细胞介素6(IL-6)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平。结果IGF-1过表达的BMSCs提高IL-1β处理的软骨细胞增殖活性,抑制IL-1β诱导的软骨细胞凋亡,并降低细胞提取液中IL-1β、IL-6和TNF-α水平(P<0.05),下调软骨细胞中Bax、Caspase-3、Cytc等凋亡蛋白的表达水平,上调抗凋亡蛋白Bcl-2的表达水平(P<0.05)。结论IGF-1过表达的骨髓间充质干细胞可抑制IL-1β诱导的软骨细胞凋亡及炎性因子的表达,提高软骨细胞增殖活性。

基于IGF-1/SDF-1/CXCR4轴研究黑地黄丸含药血清对骨髓间充质干细胞增殖迁移的影响

目的探索黑地黄丸对骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)增殖、迁移的影响及机制。方法全骨髓细胞贴壁法分离BMSCs并鉴定。MTT检测黑地黄丸对BMSCs增殖的影响并确定最佳干预浓度。将BMSCs分为对照组、黑地黄丸含药血清组、黑地黄丸含药血清+胰岛素样生长因子1受体(insulin-like growth factor 1 receptor,IGF-1R)抑制剂组、黄芪甲苷含药血清组,采用细胞划痕实验检测各组BMSCs的划痕愈合率,采用Transwell实验检测BMSCs的迁移数量。ELISA法检测培养上清中胰岛素样生长因子(insulin-like growth factor,IGF)-1的含量,Western blot检测BMSCs中IGF-1、趋化因子受体(C-X-C chemokine receptor type,CXCR)4、基质细胞衍生因子(stromal cell-derived factor,SDF)-1的表达。结果成功提取大鼠BMSCs,1%~10%的黑地黄丸含药血清可促进BMSCs增殖,且5%黑地黄丸含药血清促增殖作用最佳。与对照组比较,5%黑地黄丸含药血清促进BMSCs的迁移(P<0.05),并可显著增加BMSCs培养上清中IGF-1的水平(P<0.05),上调BMSCs内IGF-1、CXCR4的表达(P<0.05),下调SDF-1的表达(P<0.05)。与5%黑地黄丸含药血清组比较,IGF-1R抑制剂可抑制BMSCs的迁移(P<0.05),显著下调CXCR4的表达(P<0.05),上调SDF-1的表达(P<0.05)。结论黑地黄丸可促进BMSCs增殖,并可通过上调BMSCs内IGF-1的表达,促进IGF-1与IGF-1R的结合,增加表面趋化因子CXCR4的表达,进而调控SDF-1/CXCR4轴,促进BMSCs迁移。

保山猪和杜洛克猪IGF-1基因的SNP筛选及生物信息学分析

试验旨在探究IGF-1基因单核苷酸突变位点对保山猪和杜洛克猪生长性能的影响。试验以保山猪和杜洛克猪为研究对象,采用直接测序法对IGF-1基因的多态性进行检测,利用生物信息学软件分析编码蛋白结构。结果显示:在保山猪IGF-1基因编码蛋白的外显子上共筛选出1个SNP位点(Exon4-G189A),该突变属于同义突变,引起密码子改变,但所编码的氨基酸未改变。生物信息学分析结果显示,保山猪IGF-1基因CDS区编码164个氨基酸,分子式为C782H1265N247O239S11,相对分子质量为18303.82,理论等电点为9.89,不稳定性指数为73.25,整体表现为亲水性,不具有跨膜结构,含有信号肽序列;蛋白质二级结构只含有无规则卷曲和α-螺旋,分别占60.37%、39.63%,三级结构预测模型与保山猪IGF-1基因的蛋白结构匹配度为-1.15,具有较好的一致性。研究表明,IGF-1基因在物种进化过程中高度保守,使其编码保山猪和杜洛克猪的氨基酸序列相同,蛋白质结构和功能差异很小或不存在差异,能否作为调控保山猪瘦肉少、脂肪多、生长慢的候选基因还需进行关联性的研究。

肿瘤相关巨噬细胞通过激活IGF-1R信号通路诱导三阴性乳腺癌细胞对白蛋白紫杉醇耐药的研究

目的探讨肿瘤相关巨噬细胞(TAM)对三阴性乳腺癌(TNBC)细胞白蛋白紫杉醇(Nab-PTX)化疗敏感性的影响及作用机制。方法构建并鉴定TAM模型;通过Transwell小室共培养法建立TAM与TNBC细胞系MDAMB-231细胞共培养模式,分为对照组(MDA-MB-231细胞及空白小室)、Nab-PTX组(MDA-MB-231细胞、空白小室及0.5 nmol/L Nab-PTX)、TAM组(MDA-MB-231细胞、含M2型巨噬细胞的小室)、TAM+Nab-PTX组(MDA-MB-231细胞、含M2型巨噬细胞的小室及0.5 nmol/L Nab-PTX)、胰岛素样生长因子1受体(IGF-1R)抑制剂组(MDA-MB-231细胞、含M2型巨噬细胞的小室、0.5 nmol/L Nab-PTX及4 nmol/L IGF-1R抑制剂Linsitinib);CCK-8法检测各组细胞增殖情况;流式细胞术检测细胞凋亡;实时荧光定量PCR(q PCR)检测多药耐药蛋白(MDR)1和胱天蛋白酶(Caspase)-3mRNA水平;Western blot检测IGF-1R信号通路关键蛋白表达。结果THP-1细胞经诱导分化为M2型巨噬细胞;与Nab-PTX组相比,TAM+Nab-PTX组细胞增殖水平升高,凋亡率降低(P<0.01),MDR1 mRNA表达升高,Caspase-3mRNA表达降低(P<0.05),IGF-1R信号通路关键蛋白激活(P<0.01);与TAM+Nab-PTX组相比,IGF-1R抑制剂组细胞增殖水平降低,凋亡率升高,MDR1 mRNA表达降低,Caspase-3 mRNA的表达增高,IGF-1R信号通路关键蛋白的表达降低(P<0.01)。结论TAM可能通过激活IGF-1R信号通路诱导TNBC细胞对Nab-PTX耐药。

miR-29c-3p/IGF1分子轴对肝星状细胞活化,增殖和凋亡的作用机制

目的探讨miR-29c-3p通过IGF-1对肝星状细胞(hepatic stellate cells,HSCs)活化,增殖和凋亡的影响。方法原代培养小鼠HSCs,并通过免疫荧光检测HSCs标志物ɑ-SMA表达。双荧光素酶报告基因实验验证miR-29c-3p和IGF-1的靶向关系。TGF-β激活HSCs,并且外源性调控miR-29c-3p和IGF-1的表达水平后,分别采用Westernbolt,CCK-8,克隆形成实验和流式细胞术检测活化HSCs中活化相关蛋白(ɑ-SMA,DDR2,FN1,ITGB1和GFAP)的表达,增殖,克隆形成数和凋亡。结果ɑ-SMA阳性表达表明成功分离小鼠HSCs。miR-29c-3p mimic可降低野生型IGF-1的荧光素酶活性,但是对突变型IGF-1没有影响。过表达miR-29c-3p和低表达IGF-1能减少ɑ-SMA,DDR2,FN1和ITGB1表达,增加GFAP的表达,并且降低HSCs的增殖活力和克隆形成数,上调其凋亡比例。结论miR-29c-3p通过靶向抑制IGF-1表达,进而抑制HSCs活化和增殖,并促进其凋亡。

基于IGF-1/PI3K/Akt信号通路探讨象皮生肌膏对压力性损伤大鼠模型的影响及机制研究

目的通过动物实验观察并基于类胰岛素一号生长因子(insulin-like growth factors-1,IGF-1)/磷脂酰肌醇3激酶(phosphoinositide3-kinase,PI3K)/蛋白激酶B(protein kinase B,Akt)信号通路探讨象皮生肌膏对压力性损伤大鼠模型的影响。方法将40只SD大鼠(SPF级,雌雄各半)复制压力性损伤大鼠模型,造模成功后随机均分为模型组(生理盐水纱布外敷)、阳性对照组(三乙醇胺乳膏外用)、象皮生肌组(象皮生肌膏外用)、联合给药组(三乙醇胺乳膏与象皮生肌膏联合外用)。另取10只健康SD大鼠作为空白组,仅同部位置入磁性装置,不予施加压力。实验过程中,每天记录各组大鼠愈合情况。实验结束时,HE染色法观察创面病理性损伤情况,ELISA法检测血清肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)、白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)水平,Western blot法及RT-PCR法检测创面组织中PI3K、Akt、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)、IGF-1蛋白及mRNA的表达情况。结果与空白组比较,模型组大鼠创面面积明显增大(P<0.05);与模型组比较,阳性对照组、象皮生肌组、联合给药组大鼠的创面面积均减小(P<0.05);与阳性对照组及象皮生肌组比较,联合给药组创面面积缩小(P<0.05)。HE染色结果显示,空白组大鼠创面病理结构较完整,组织细胞排列较规则且病理致密,未见明显组织坏死碎片、水肿及炎性浸润;模型组可见明显的肌肉纤维坏死碎片,空泡变性,纤维肿大、横断;阳性对照组、象皮生肌组、联合给药组可见不同程度的病理缓解。与空白组比较,模型组大鼠血清炎性因子TNF-α、IL-1β、IL-6水平明显升高(P<0.05),PI3K、Akt、mTOR、IGF-1蛋白及mRNA表达明显升高(P<0.05);与模型组比较,阳性对照组、象皮生肌组、联合给药组大鼠血清炎性因子TNF-α、IL-1β、IL-6水平显著降低(P<0.05),PI3K、Akt、mTOR、IGF-1蛋白及mRNA表达显著升高(P<0.05);与阳性对照组及象皮生肌组比较,联合给药组血清炎性因子TNF-α、IL-1β、IL-6水平以及PI3K、Akt、mTOR、IGF-1蛋白及mRNA表达水平明显降低(P<0.05)。结论象皮生肌膏可改善压力性损伤大鼠模型创面病理情况,可能与象皮生肌膏上调IGF-1/PI3K/Akt信号通路相关蛋白表达,抑制炎性因子表达相关。