IGF-ⅠR、IGF-ⅡR反义基因对SMMC-7721肝癌细胞生物学行为的影响

目的 研究胰岛素样生长因子Ⅰ型及Ⅱ型受体 (IGF ⅠR、IGF ⅡR)反义基因对SMMC 772 1肝癌细胞生物学行为的影响。方法 应用反义技术 ,在已转染了IGF ⅠR反义基因的肝癌SMMC 772 1 (772 1 IGF ⅠR AS)细胞基础上 ,继续利用IGF ⅡR反义基因真核表达系统 ,通过DOTAP脂质体介导的转染技术 ,将IGF ⅡR反义基因导入该细胞 ,经G41 8及潮霉素双重筛选获得稳定表达IGF ⅠR、IGF ⅡR反义基因的 772 1 IGF R AS细胞。采用光镜、电镜观察形态学变化 ,双层软琼脂克隆形成实验、MTT细胞生长曲线实验及裸鼠皮下接种实验观察转染后细胞体外生长情况。结果 772 1 IGF R AS细胞在光镜、电镜下的肿瘤细胞形态恶性程度减低 ;在软琼脂培养基中的生长能力降低 (P <0 .0 1 ) ;在裸鼠体内的致瘤能力也降低 (P <0 .0 5) ;但细胞生长曲线与对照组比较则无明显差异。结论 IGF ⅠR、IGF ⅡR反义基因对SMMC 772 1肝癌细胞株的恶性行为有明显抑制作用。利用反义技术干预肝癌细胞生长因子受体基因表达可能给肝癌的基因治疗提供新的途径。

IGF-Ⅰ及IGF-Ⅱ受体反义基因对SMMC-7721肝癌细胞株增殖能力的影响

目的 研究胰岛素样生长因子Ⅰ受体、Ⅱ受体 (IGF ⅠR、IGF ⅡR)反义基因对SMMC 772 1细胞体外增殖能力的影响。方法 应用反义技术 ,在已将IGF ⅠR反义基因转染入SMMC 772 1肝癌细胞株的基础上 (获得ⅠR AS细胞 ) ,继续利用IGF ⅡR反义基因真核表达系统 ,通过DOTAPTM脂质体介导的转染技术 ,将IGF ⅡR反义基因导入该细胞 ,经G41 8及潮霉素双重筛选获得稳定表达IGF ⅠR、IGF ⅡR反义基因的SMMC 772 1细胞 (Ⅰ、ⅡR AS细胞 )。结果 光镜、电镜下反义转染细胞形态学上肿瘤性有一定减弱 ;在软琼脂培养基中生长能力低下 (P <0 0 1 ) ;反义G41 8抗性转染细胞克隆形成能力低下 (P <0 0 5) ;在细胞生长曲线上与对照组相比有轻度下降趋势。结论 IGF ⅠR、IGF ⅡR反义基因对SMMC 772 1肝癌细胞株的恶性增殖有明显抑制作用。

人胰岛素样生长因子Ⅱ型受体反义基因对肝癌细胞恶性表型的影响

目的 研究人胰岛素样生长因子Ⅱ型受体 (IGF ⅡR)反义基因对SMMC 772 1人肝癌细胞恶性表型的逆转作用。方法构建IGF ⅡR正、反义基因真核表达质粒 ,用磷酸钙 DNA共沉淀的方法 ,导入SMMC 772 1人肝癌细胞株 ,经G41 8培养基筛选稳定的抗性细胞。采用Northern杂交检测对转染细胞内源性IGF ⅡR基因转录的抑制 ,观察转染细胞克隆形成率 ,细胞生长曲线 ,软琼脂生长及裸鼠致瘤能力的变化。结果 IGF ⅡR反义基因转染肝癌细胞的内源性IGF ⅡR基因转录受到有效抑制 ,转染细胞克隆形成率明显降低 ,并失去在软琼脂上生长的能力 ,裸鼠致瘤性明显降低 ,但细胞生长曲线无明显变化。结论 IGF ⅡR反义基因可以有效阻断IGF Ⅱ至IGF ⅡR的自泌 旁泌生长刺激信号环路 ,一定程度地抑制肝癌细胞的恶性表型。

胰岛素样生长因子Ⅱ及其受体在肝细胞癌变中的表达及意义

目的探讨 ＩＧＦ—Ⅱ及其受体（ＩＧＦ一 ⅡＲ）在肝细胞癌变演化过程中的作用。方法通过 ＤＮＡ、 ＲＮＡ原位分子杂交和 Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交技术，观察和分析慢性肝炎、肝硬化和肝癌中 ＩＧＦ－ Ⅱ， ＩＧＦ－ Ⅱ Ｒ基因的单细胞转录水平的表达与 ＨＢＶ ＤＮＡ整合之间的关系。结果 ＩＧＦ— Ⅱ、 ＩＧＦ一 ⅡＲ ｍＲＮＡ在慢性肝炎、肝硬化和肝癌中均有不同程度的表达，阳性率依次为：慢性肝炎（３３．３％）＜肝癌（６６．７％）＜肝硬化（７２．０％），但在肝细胞再生结节、肝细胞不典型增生及分化较差的肝癌细胞中 ＩＧＦ－Ⅱ、 ＩＧＦ－ ⅡＲ ｍＲＮＡ表达最为显著。结论 ＩＧＦ－Ⅱ、 ＩＧＦ－ ⅡＲ在肝细胞癌变的早期阶段即有表达， ＩＧＦ—Ⅱ、 ＩＧＦ—ⅡＲ在肝细胞癌变演化过程中起重要作用。

人胰岛素样因子Ⅱ型受体反义基因转染对肝癌细胞生长的影响

目的 研究人胰岛素样生长因子Ⅱ型受体 (IGF ⅡR)反义基因对SMMC 772 1人肝癌细胞生长的抑制作用。方法 构建IGF ⅡR正、反义基因真核表达质粒 ,用磷酸钙 DNA共沉淀的方法 ,导入SMMC 772 1人肝癌细胞株 ,经G418培养液筛选稳定的抗性细胞。采用Northern杂交检测对转染细胞内源性IGF ⅡR基因转录的作用 ,观察转染细胞克隆形成率 ,细胞生长曲线 ,软琼脂生长能力的变化。结果 IGF ⅡR反义基因转染肝癌细胞的内源性IGF ⅡR基因转录受到有效抑制 ,转染细胞克隆形成率明显降低 ,并失去在软琼脂上生长能力 ,但细胞生长曲线无明显变化。结论 IGF ⅡR反义基因可有效阻断IGF Ⅱ至IGF ⅡR的自分泌 /旁分泌生长刺激信号环路 ,一定程度抑制肝癌细胞的恶性表型。