结直肠癌组织IGF-ⅠR和IGF-Ⅰ与IGF-Ⅱ表达及其意义的研究

目的:通过检测结直肠癌中IGF-ⅠR,IGF-Ⅰ和IGF-Ⅱ的表达情况,分析IGF-ⅠR,IGF-Ⅰ和IGF-Ⅱ的表达与临床病理因素之间的关系及三者表达的相关性,探讨IGF系统在结直肠癌发生发展中的作用。方法:应用免疫组织化学SP法检测104例结直肠癌患者癌组织、癌旁组织、正常组织IGF-ⅠR,IGF-Ⅰ和IGF-Ⅱ单一和联合表达的情况。结果:1)IGF-ⅠR,IGF-Ⅰ和IGF-Ⅱ在癌组织中表达的阳性率均显著高于癌旁组织和正常组织,P<0.05,IGF-ⅠR、IGF-Ⅱ在癌旁和正常组织中表达的阳性率差异无统计学意义,P>0.05,IGF-Ⅰ在癌旁和正常组织中表达的阳性率的差异具有统计学意义。2)IGF-ⅠR,IGF-Ⅰ和IGF-Ⅱ在癌组织中的表达与患者年龄、性别、肿瘤大小、分化程度、Duke分期、TNM分期、原发肿瘤浸润深度T、局部淋巴结转移情况N等均无明显相关,而IGF-ⅠR的表达与肿瘤部位的关系具有统计学意义。3)IGF-ⅠR与IGF-Ⅰ在癌组织中的表达无明显相关,P>0.05,IGF-ⅠR与IGF-Ⅱ在癌组织中的表达的相关性处于临界状态(P=0.05)。结论:IGF系统在结直肠癌的发生发展中的作用不明显,有待于进一步深入研究。

2型糖尿病合并骨质疏松患者IGF-Ⅱ水平的变化

目的研究2型糖尿病合并骨质疏松患者血IGF-Ⅱ水平的变化,及其与骨质疏松发生的关系。方法受试者101例,均测量身高、体重、腰围、血糖、糖化血红蛋白、尿蛋白、IGF-Ⅱ和骨密度。按糖尿病病程将糖尿病患者分为病程<10年组、病程≥10年组;根据糖尿病肾病病程将糖尿病患者分为正常组、肾病病程<10年组、肾病病程≥10年组;根据骨密度结果将所有受试者分为骨密度正常组、骨量减低组、骨质疏松组。结果与非糖尿病组相比,糖尿病病程<10年组及糖尿病病程≥10年组患者骨质疏松的发生率差异无统计学意义。随着糖尿病病程延长,IGF-Ⅱ水平下降;随着骨密度的降低,IGF-Ⅱ水平下降;糖尿病患者中随着骨密度的降低,IGF-Ⅱ水平无明显变化。结论骨质疏松的发生与2型糖尿病无关系,与血糖控制好坏无关。IGF-Ⅱ可能参与了2型糖尿病的发病过程。IGF-Ⅱ的下降参与了骨质疏松的发生。

肝癌患者血清IGF-Ⅱ水平与AFP的关系

目的 :探讨原发性肝癌 (PHC)患者血清IGF -Ⅱ水平及临床意义。方法 :采用放射免疫分析法检测PHC和肝硬化患者血清IGF -Ⅱ和AFP含量 ,并与正常对照组进行比较。结果 :PHC组血清IGF -Ⅱ水平明显高于正常对照组 (p<0 0 1) ,阳性检出率为 78 9%、特异性为 6 1 7%、诊断有效率为 4 8 7% ;肝硬化组亦明显高于正常对照组 (p<0 0 1) ,但与肝癌组比较则明显降低 (p <0 0 1) ,阳性检出率为 6 7 7%。结论 :血清IGF -Ⅱ测定有助于PHC和肝硬化患者病情观察和预后判断 ,IGF -Ⅱ和AFP联检可以相互补充 ,提高PHC的阳性检出率 。

IGF-Ⅱ对肝癌细胞MHCC97-H癌基因C-myc和N-ras表达的影响

目的观察胰岛素样生长因子Ⅱ(IGF-Ⅱ)对肝癌细胞MHCC97-H中癌基因C-myc和N-ras表达的影响。方法培养肝癌细胞株MHCC97-H,用IGF-Ⅱ(50ng/mL)作用48h后,分别采用细胞免疫荧光、Western blot法及Real-time PCR法检测细胞中C-myc和N-ras的表达情况,并与对照组比较,进行定量分析。结果 C-myc及N-ras蛋白阳性表达主要位于细胞核。对照组、IGF-Ⅱ组MHCC97-H细胞中C-myc荧光表达量分别为(100.00±2.89)%、(254.00±35.57)%,N-ras荧光表达量分别为(100.00±14.43)%、(257.30±22.43)%。与对照组相比,IGF-Ⅱ组MHCC97-H细胞中C-myc及N-ras蛋白表达明显增强,差异有统计学意义(P<0.05)。与对照组相比,IGF-Ⅱ组MHCC97-H细胞中C-myc和N-ras的mRNA表达明显增加,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 IGF-Ⅱ可上调肝癌细胞MHCC97-H中癌基因C-myc和N-ras的蛋白及mRNA表达,这可能是IGF-Ⅱ促进肝癌细胞增殖的分子机制之一,这为临床上肝癌防治提供了新线索。

应用寡核苷酸芯片技术检测IGF-Ⅱ基因SNP方法的建立及其在运动能力相关基因研究中的应用

目的 :杰出运动能力受控于基因与环境的相互作用 ,由多基因控制。寡核苷酸芯片技术是近年出现的一类基因结构分析技术 ,此项技术出现使基因突变检测更加程序化和规模化。本研究选取与运动能力有关的胰岛素生长因子Ⅱ (IGF -Ⅱ )基因为该方法学及其应用研究的突破点 ,尝试把DNA芯片技术引入体育科研。方法 :寡核苷酸芯片技术。结果 :(1)IGF -Ⅱ基因SNP的分析中 ,基因组DNA采用 1∶2 0的套式扩增 ,杂交液中加氯化四甲氨 ,杂交温度 4 2℃ ,杂交时间 6 0min效果最好 ;(2 )国家自行车队的 6名队员基因型相同。结果表明 :(1)PCR产物可以直接用于检测突变 ,不对称PCR产物杂交阳性点信号更强 ;(2 )由碱基组成计算的Tm值与其实际的Tm值有一定的差距 ,会影响杂交温度 ;(3)有效的DNA载波片的处理效果直接影响杂交结果 ,是芯片制备中关键环节之一 ;(4)IGF -Ⅱ是研究运动能力相关基因的一个很好的候选基因。

子宫肌瘤中IGF-Ⅱ、PCNA的表达及意义

目的研究胰岛素样生长因子Ⅱ(IGF-Ⅱ)、增殖细胞核抗原(PCNA)在子宫肌瘤中的表达,探讨IGF-Ⅱ、PCNA在子宫肌瘤发生中的作用。方法用免疫组织化学方法,检测IGF-Ⅱ在子宫肌瘤组织、肌瘤旁平滑肌组织及正常子宫平滑肌组织中的表达,并用同法检测组织中PCNA的表达。结果①IGF-Ⅱ在子宫肌瘤组织、子宫肌瘤旁平滑肌组织及正常平滑肌组织中表达的阳性率分别为60%、16.67%、10%,三组表达率差异有显著性(P=0.000)。②PCNA在子宫肌瘤组织、子宫肌瘤旁平滑肌组织及正常平滑肌组织中表达的阳性率分别为83.3%、26.7%、20%,三组表达率差异有显著性(P=0.000)。③子宫肌瘤组IGF-Ⅱ的表达与PCNA的表达相关性研究rs=0.55,呈正相关,P<0.05,有统计学意义。结论①IGF-Ⅱ及PCNA在子宫肌瘤细胞中高表达,提示IGF-Ⅱ及PCNA可能参与子宫肌瘤的发生。②IGF-Ⅱ与PCNA在子宫肌瘤中的表达呈正相关,提示IGF-Ⅱ通过其促进细胞增殖的作用参与了子宫肌瘤的发病。

IGF-Ⅱ mRNA、bcl-2蛋白在结肠直肠腺癌组织中的表达及临床意义

背景与目的:胰岛素样生长因子-Ⅱ(Insulin-likegrowthfactorⅡ,IGF-Ⅱ)能促进细胞分裂、增殖,B细胞淋巴瘤-2(bcl-2)蛋白能明显抑制细胞的凋亡,使细胞寿命延长。近来发现两者在结肠直肠癌中均存在过表达,但两者在结肠直肠癌中的联合检测尚未见报道。本文通过观察结肠直肠腺癌中IGF-ⅡmRNA、bcl-2蛋白的表达情况,结合肿瘤中细胞增殖和凋亡状态的研究,探讨IGF-Ⅱ,bcl-2基因表达的相关性以及与结肠直肠腺癌浸润、转移的关系,并探求两者联合检测的临床意义。方法:选取48例结肠直肠腺癌石蜡标本,采用原位分子杂交检测IGF-ⅡmRNA,S-P法检测bcl-2蛋白,增殖细胞核抗原(PCNA),TUNEL法检测细胞凋亡,多媒体图文分析系统定量肿瘤阳性细胞率。以10例正常结肠直肠组织作为对照。结果:结肠直肠腺癌中IGF-ⅡmRNA,bcl-2蛋白阳性细胞率犤(38.70±7.80)%和(30.97±7.40)%犦均显著高于正常结肠直肠组织犤(23.12±4.07)%和(12.69±1.31)%犦(P<0.01),IGF-ⅡmRNA和bcl-2蛋白表达呈负相关(P<0.05),且均与肿瘤Dukes'分期有关和淋巴结转移有关,而与患者的年龄,性别,肿瘤大小,部位,分化程度无关。IGF-ⅡmRNA与PCNA,细胞凋亡显著正相关(P<0.01),bcl-2蛋白与细胞凋亡显著负相关(P<0.01),而与PCNA表达无关(P>0.05)。

新型有序纳米介孔生物活性玻璃对成骨细胞IGF-Ⅱ基因调控的影响

目的研究新型有序纳米介孔生物活性玻璃的体外生物活性及其对鼠成骨细胞的IGF-Ⅱ基因表达效果,探讨其可能的调控机制。方法定量选取新型的生物活性玻璃MBG(80S15C),浸泡于MEM培养液中,取离子浸出液培养大鼠成骨细胞,使用MTT法和PNPP法测定成骨细胞增殖和ALP的活性,RT-PCR法测定IGF-Ⅱ的mRNA表达,ELISA法测定IGF-Ⅱ蛋白和IGFBP的浓度。结果实验组成骨细胞的ALP活性为对照组的126%,IGF-Ⅱ基因表达为对照组的126%,IGF-Ⅱ蛋白和IGFBP的浓度分别是对照组175%和237%,细胞增殖为对照组的92%。结论MBG的离子浸出液能够明显促进成骨细胞的分化,其机制可能是通过诱导激活IGF-Ⅱ基因的表达,增加IGF-Ⅱ蛋白,IGFBP的合成和分泌,进而促进成骨细胞的分化。

京海黄鸡IGF-Ⅱ基因SNPs及其与生产性能关系研究

以京海黄鸡为材料,采用PCR-SSCP技术测定IGF-Ⅱ基因3个SNPs位点,同时分析它们对不同周龄体重及产蛋性状的遗传效应。结果显示,3个位点分别发生C→G、G→C、G→A的单碱基突变,各检测到3种基因型,P1位点偏离Hardy-Weinberg平衡状态(P<0.05)。最小二乘方差分析表明,AA与BB基因型个体300日龄产蛋数存在显著差异(P<0.05),A为增效等位基因,B为减效等位基因;CD基因型个体12周龄体质量显著高于CC型(P<0.05);EE、EF基因型个体300日龄平均蛋质量显著高于FF型(P<0.05),E为增效等位基因,F为减效等位基因。联合基因型AA/CC/EF平均蛋质量显著高于AB/CD/EE与AB/CD/EF(P<0.05);AB/CD/EF基因型个体300日龄体质量显著高于AA/CC/EF、BB/DD/EE型(P<0.05)。

食管鳞癌组织中胰岛素样生长因子-Ⅱ蛋白的表达

目的:检测食管鳞癌组织中胰岛素样生长因子-Ⅱ(IGF-Ⅱ)蛋白的表达。方法:应用免疫组织化学S P法,检测54例食管鳞癌组织,22例癌旁不典型增生组织及54例正常食管黏膜组织中IGFⅡ蛋白的表达,并分析IGF-Ⅱ表达与食管鳞癌浸润、转移的关系。结果:食管鳞癌组织、癌旁不典型增生组织及正常食管黏膜组织中IGF-Ⅱ蛋白的阳性表达率分别为85.19%、63.64%和22.22%,任意2者间差异有统计学意义(P<0.01)。IGF-Ⅱ蛋白的阳性表达与食管鳞癌的浸润深度和淋巴结转移有关(P<0.05)。结论:IGF-Ⅱ蛋白在食管鳞癌组织中高表达与食管鳞癌的发生发展、浸润转移有关。

血清SCC-Ag、VEGF、IGF-Ⅱ及TK1联合检测在早期宫颈癌诊断中的价值

目的探讨血清SCC-Ag、VEGF、IGF-Ⅱ及TK1联合检测对早期宫颈癌的诊断价值。方法选取2009年6月至2011年11月的49例早期宫颈癌患者为A组,同期的49例宫颈上皮内瘤样病变患者为B组,49名健康体检人员为C组,检测并比较三组人员的血清SCC-Ag、VEGF、IGF-Ⅱ及TK1水平。结果 A组血清SCC-Ag、VEGF、IGF-Ⅱ及TK1水平及阳性率均高于B组及C组,而B组则高于C组,宫颈癌Ⅰa期患者与B组则在血清VEGF、IGF-Ⅱ及TK1水平及阳性率方面存在一定的差异,P均<0.05,差异有统计学意义。结论血清SCC-Ag、VEGF、IGF-Ⅱ及TK1联合检测在早期宫颈癌诊断中有较好的临床价值,对于宫颈癌的早期诊断有着积极的作用。

胃癌中转化生长因子-βRⅡ、胰岛素样生长因子-ⅡR、Bax基因突变与微卫星不稳定性相关性研究

目的:检测胃癌组织中转化生长因子-βⅡ型受体(TGF-βRⅡ)、胰岛素样生长因子Ⅱ型受体(IGF-ⅡR)和Bax基因突变与微卫星不稳定性(MSI)发生情况,探讨其相关性以及MSI在胃癌发生发展中可能的作用机制。方法:胃镜下取36例胃癌标本,酚与氯仿法抽提基因组DNA,银染PCR-SSCP方法同时检测目的位点。结果:胃癌组织中TGF-BRⅡ、IGF-ⅡR和Bax基因发生突变分别有7例、6例和6例,MSI发生率达58.3％,3种基因突变均见于MSI阳性的胃癌,尤其是MSI-H型胃癌。结论:MSI可通过引起靶基因突变,特别是部分抑癌基因突变,促进了部分胃癌的发生发展。

超排卵周期中PCOS与IGF-Ⅱ和IGFBP-3关系的研究

目的 探讨IGF Ⅱ和IGFBP 3与PCOS的关系。方法 分别采用放射免疫法 (RIA)、免疫放射测定法 (IRMA)、磁性分离酶联免疫测定法 (EIA)检测卵泡液及用药前后血清IGF Ⅱ、IGFBP 3和E2 水平。结果 用药后PCOS组血清及卵泡液IGF Ⅱ水平明显低于同期正常组血清及卵泡液IGF Ⅱ水平 (P <0 .0 1) ;用药后PCOS组血清及卵泡液IGFBP 3水平明显高于同期正常组血清及卵泡液IGFBP 3水平 (P <0 .0 1) ;正常组卵泡液IGFBP 3水平与卵泡液IGF Ⅱ水平明显呈负相关 (r=- 0 .6 79,P <0 .0 1)。结论 IGF系统的不平衡状态可能参与PCOS患者疾病的发生发展过程。

子痫前期患者脐血和胎盘组织中IGF-Ⅱ检测的临床意义

目的:探讨IGF-Ⅱ在子痫前期发病机制中的作用。方法:用免疫组织化学方法检测正常晚孕组和轻度、重度子痫前期患者胎盘组织中IGF-Ⅱ的表达,同时用ELISA方法检测3组研究对象胎儿脐血中IGF-Ⅱ的含量。结果:IGF-Ⅱ在脐血中的含量,重度子痫前期组显著高于轻度子痫前期组(P<0.001),轻度子痫前期组显著高于正常晚孕组(P<0.01);IGF-Ⅱ在胎盘组织中的表达,重度子痫前期组显著低于轻度子痫前期组(P<0.01),轻度子痫前期组显著低于正常晚孕组(P<0.01)。结论:子痫前期时脐血IGF-Ⅱ含量升高可能是子痫前期病理变化的结果,而胎盘组织中IGF-Ⅱ表达减少可能是引发子痫前期的重要因素之一。

虹鳟胰岛素样生长因子Ⅰ和Ⅱ在大肠杆菌中的融合表达及促有丝分裂活性

The preparation of recombinant rainbow trout insulin like growth factorsⅠ(IGF Ⅰ) andⅡ(IGF Ⅱ) using the His6 fusion polypeptide technique and the mitogen ic activities of these compounds were investigated. Rainbow trout IGF Ⅰand IGF ⅡB C A D domain cDNA were subcloned into expression vector pET 15b (Nova gen, USA) and expressed in host E. coli BL21 (DE3) as fusion polypeptides co ntai ning a stretch of 6 histidines at the N terminus (referred as His6 fusion polyp e ptide). The addition of IPTG (0 4 mmol/L) induced the expression of polypeptide s with a molecular weight of about 10 0 kDa. The expressed proteins were ammoniu m sulfate fractionally precipitated and further purified using a Ni 2+ His ·Bind R esin (Novagen, USA) affinity column. The reduced SDS PAGE showed that IGF Ⅰ w as of 80% purity and IGF Ⅱ was of 90% purity. The rainbow trout IGF Ⅰ His6 fusi on polypeptide showed dose dependent mitogenic effects on BALB/NIH3T3 cells in th e serum free medium culture, and rainbow trout IGF Ⅱ His6 fusion polypeptide al s o showed this kind of activity, but with lower potency. Taken together,these re sults indicated that the rainbow trout IGF Ⅰ and ⅡHis6 fusion polypeptides pr o duced in E. coli were biologically active, with IGF Ⅰ His6 fusion polypept ide of higher potency.

应用组织微阵列技术研究肺癌组织中IGF-Ⅱ的表达

目的:构建高通量组织微阵列(tissuemicroarray)/组织芯片(tissuechip),检测其上IGFⅡ的表达情况,以明确IGFⅡ表达与肺癌的相关性。方法:用组织阵列仪制备按不同组织学类型排布的组织芯片,然后用免疫组织化学SP法检测一张组织芯片上54例肺癌肿瘤组织和10例正常肺组织样本中的IGFⅡ表达情况,并分析其表达与各临床病理学参数之间的相关性。结果:IGFⅡ蛋白在实验组中的阳性表达率为42.6%(23/54),对照组为阴性,两者之间具有显著性差异(P<0.05);IGFⅡ表达阳性率与大体类型、组织学分级、临床分期有关(P<0.05),而与性别、年龄、组织学分型及淋巴结转移无关(P>0.05)。结论:IGFⅡ的表达与肺癌的恶性行为有关,检测此指标对预测肺癌的预后和指导治疗有一定的参考价值。组织芯片是一较高的技术平台,可以应用此技术进行大规模组织样本的检测。

妊娠期高血压病患者胎盘组织中IGF-Ⅱ、IGFBP-1和抵抗素的表达及相关性分析

目的:探讨胰岛素样生长因子-Ⅱ(IGF-Ⅱ)、胰岛素样生长因子结合蛋白-1(IGFBP-1)和抵抗素在妊娠期高血压病(HDCP)患者胎盘组织中的表达及相关性分析。方法:收集120例HDCP胎盘组织为病例组,其中妊娠期高血压48例,轻度子痫前期40例,重度子痫前期32例,并取正常妊娠胎盘组织50例为对照组。采用免疫组化S-P法检测各组样本IGF-Ⅱ、IGFBP-1和抵抗素表达强度,并进行相关性分析。观察HDCP患者的预后情况,根据预后结果分为预后不良组和预后良好组,观察两组胎盘组织中IGF-Ⅱ、IGFBP-1和抵抗素的表达情况。结果:病例组较对照组IGF-Ⅱ阳性表达率明显降低(P<0.01),IGFBP-1和抵抗素阳性表达率明显升高(P<0.01);病例组内比较,IGF-Ⅱ阳性表达率随病情加重逐渐降低,IGFBP-1和抵抗素阳性表达率随病情加重逐渐升高,重度子痫前期患者胎盘组织IGFBP-1、抵抗素的阳性表达明显高于妊娠期高血压,重度子痫前期IGF-Ⅱ的阳性表达水平明显低于轻度子痫前期患者(P<0.05)。Spearman相关性分析显示,抵抗素与IGFBP-1表达正相关(r=0.5937,P<0.05),与IGF-Ⅱ表达负相关(r=-0.6785,P<0.05);IGFBP-1与IGF-Ⅱ表达负相关(r=-0.6774,P<0.05)。预后不良组IGF-Ⅱ阳性表达明显低于预后良好组,而IGFBP-1和抵抗素阳性表达水平明显高于预后良好组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:IGF-Ⅱ、IGFBP-1和抵抗素可能参与了HDCP的发生发展过程,三者间存在相互作用关系,并与病情严重程度及预后相关。

五种恶性肿瘤血清IGF-Ⅱ水平及意义

目的 :探讨恶性肿瘤患者血清IGF -Ⅱ水平及临床意义。方法 :采用放射免疫分析法检测胃癌、肺癌、肝癌、卵巢癌、子宫内膜癌患者血清IGF -Ⅱ ,并与肝硬化、子宫肌瘤和正常对照组进行比较。结果 :胃癌、肺癌、肝癌患者血清IGF -Ⅱ水平明显高于正常对照组 (p<0 0 1) ,肝硬化患者明显高于正常对照组 (p <0 0 1) ,但与肝癌患者比较则明显降低 (p <0 0 1) ;卵巢癌、子宫内膜癌、子宫肌瘤患者与正常对照组比较均无显著性差异 (p >0 0 5 )。结论 :血清IGF -Ⅱ测定对于子宫内膜癌、卵巢癌和子宫肌瘤患者不具临床应用价值 ,但有助于胃癌、肺癌、肝癌及肝硬化患者病情观察和预后判断。

Ⅱ型胰岛素样生长因子受体(IGFⅡ-R)在胰腺癌组织中的表达研究

目的 :研究Ⅱ型胰岛素样生长因子受体 (IGFⅡ -R)在胰腺癌及癌旁组织的表达水平及其临床意义。方法 :应用免疫组化法研究 38例胰腺癌及其癌旁组织IGFⅡ -R的表达水平 ,结合临床进行半定量的统计学分析。结果 :IGFⅡ -R在胰腺癌组织中的表达指数为 2 .36 6± 1.0 98,癌旁组织为 1.2 33± 0 .971,两者比较有显著性差异 (P <0 .0 5 ) ,其高表达与肿瘤大小、淋巴结转移及预后有明显相关性。结论 :作为肿瘤生长的重要调控因子 ,IGFⅡ

IGF-Ⅱ和HBxAg及ras基因在树鼠句实验性肝癌组织中的表达

用免疫组化方法观察胰岛素样生长因子Ⅱ（ＩＧＦ－Ⅱ）、ＨＢｘＡｇ及ｒａｓ基因的表达蛋白ｐ２１在乙肝病毒（ＨＢＶ）和黄曲霉素Ｂ１（ＡＦＢ１）致树鼠句肝癌过程中的表达。发现这三种基因蛋白的表达与肝癌发生呈正相关系。即接受ＨＢＶ和ＡＦＢ１双因素的树鼠句的肝癌发生率与ＩＧＦ－Ⅱ、ＨＢｘＡｇ及ｐ２１的表达阳性率均显著高于只暴露于单一因素ＨＢＶ或ＡＦＢ１的动物。同时，在带瘤树鼠句中，这三种基因的表达又显著高于无瘤者。提示：ＨＢＶ与ＡＦＢ１能协同激发这些基因的异常表达；