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题名人胰岛素样生长因子-1基因的克隆及其表达
被引量:6
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作者
吴岚晓
李明
王萍
陈白虹
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机构
第一军医大学珠江医院血液科
第一军医大学热带病研究室
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出处
《中国生化药物杂志》
CAS
CSCD
2002年第1期1-3,共3页
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基金
国家科委新药开发项目 ( 10 35计划 )
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文摘
目的获得大量高纯度、具有生物学活性的人胰岛素样生长因子 1(hIGF 1) ,构建hIGF 1原核表达载体 ,并进行表达与纯化。方法以pUCIGF质粒为模板 ,PCR扩增了hIGF 1基因。经适当酶切后 ,构建表达载体pRSET IGF ,转入大肠杆菌BL2 1(DE3)进行表达 ,并经阴离子交换色谱、疏水色谱和凝胶过滤纯化。结果带有重组质粒pRSET IGF的大肠杆菌经IPTG诱导后 ,以可溶性形式表达 7.8kD大小的蛋白 ,其表达量占菌体总蛋白量的10 %~ 2 0 % ,纯化后目的蛋白纯度达 95 %以上 ,Western印迹表明重组蛋白具有hIGF 1抗原活性。结论构建了pRSET IGF重组质粒 ,并成功地在大肠杆菌中获得可溶性表达 。
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关键词
胰岛素样生长因子-1
基因克隆
原核表达
基因工程
igf-1制剂
糖尿病
药物
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Keywords
IGF 1
gene cloning
prokaryotic expression
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分类号
Q78
[生物学—分子生物学]
R977.15
[医药卫生—药品]
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