胃饥饿素通过miR-455-5p靶向IGF-1R调控肝细胞胰岛素敏感性的作用及机制研究

目的:探究胃饥饿素通过调控miR-455-5p影响肝细胞胰岛素敏感性的作用机制。方法:采用高糖构建HepG2细胞胰岛素抵抗模型,造模成功后使用去酰基化胃饥饿素(DAG,1μmol/L)干预,分别转染miR-455-5p模拟物(miR-455-5p mimic)或对照物(NC mimic)。检测各组细胞葡萄糖消耗量和细胞内糖原含量。采用荧光原位杂交分析HepG2细胞内miR-455-5p表达水平。应用生物信息学分析、荧光素酶报告基因实验来鉴定与miR-455-5p结合的靶基因,Western Blot检测IGF-1R/PI3K/Akt信号通路的表达水平。结果:在胰岛素抵抗HepG2细胞中,miR-455-5p的表达水平显著上调,葡萄糖消耗量和细胞内糖原含量均明显降低。DAG干预后细胞葡萄糖消耗量和细胞内糖原含量增加,miR-455-5p的表达水平下调,IGF-1R/PI3K/Akt信号通路被激活。生物信息学分析表明IGF-1R是miR-455-5p的靶基因。双荧光素酶报告基因检测、miR-455-5p模拟物和抑制剂转染证实DAG通过抑制miR-455-5p从而激活IGF-1R/PI3K/Akt信号通路。结论:DAG通过miR-455-5p介导的IGF-1R/PI3K/Akt信号通路激活并改善胰岛素抵抗,表明抑制miR-455-5p或外源性补充DAG可能是T2DM治疗的潜在靶点。

精氨酸甲基转移酶(PRMT)7通过IGF-1信号通路调控人骨髓间充质干细胞成脂分化的研究

目的本研究旨在明确精氨酸甲基转移酶(PRMT)7在人骨髓间充质干细胞(hBMSCs)成脂分化过程中的变化以及是否调控hBMSCs成脂分化,进而探索相应的调控机制。方法通过定量反转录PCR(qRT-PCR)和蛋白质印迹(Western blot)检测hBMSCs成脂分化过程中PRMT7的变化;通过qRT-PCR和Western blot实验证明PRMT7稳定敲低细胞系构建成功。进行油红O染色和定量分析,以及qRT-PCR和Western blot实验检测PRMT7稳定敲低细胞系成脂分化水平的变化;通过裸鼠体内异位成脂实验,油红O染色检测PRMT7稳定敲低细胞系体内异位成脂的效果;通过qRT-PCR和Western blot证明PRMT7稳定过表达细胞系构建成功。进行油红O染色和定量分析以及qRT-PCR和Western blot实验检测PRMT7稳定过表达细胞系成脂分化水平的变化;通过q RT-PCR和Western blot实验检测敲低PRMT7和过表达PRMT7的细胞中IGF-1表达水平的变化。在PRMT7稳定敲低细胞系中转染siIGF-1并通过qRT-PCR和Western blot检测IGF-1的表达水平验证敲低效率。通过油红O染色和定量分析,qRT-PCR实验检测转染siIGF-1的敲低组hBMSCs成脂分化水平的变化。结果本文发现:在hBMSCs成脂过程中,PRMT7表达水平明显降低(P<0.01);敲低PRMT7后hBMSCs的成脂分化能力增强(P<0.001);敲低PRMT7后hBMSCs的体内异位成脂分化能力增强;过表达PRMT7后hBMSCs的成脂分化能力减弱(P<0.01);PRMT7敲低后IGF-1表达水平增加(P<0.0001);PRMT7过表达后IGF-1表达水平降低(P<0.0001);转染siIGF-1后,各细胞系IGF-1表达水平明显降低(P<0.001);敲低组转染siIGF-1后成脂分化能力明显降低(P<0.01)。结论本研究通过细胞水平和裸鼠皮下移植实验发现PRMT7显著抑制hBMSCs成脂分化,机制研究发现PRMT7对hBMSCs成脂分化的调控作用依赖IGF-1信号通路。上述研究表明,PRMT7可能是治疗相关疾病的潜在分子靶点,为PRMT7和hBMSCs应用于相关疾病治疗提供了新思路。

CircASPH靶向miR-28-5p/IGF-1R轴对多囊卵巢综合征卵巢颗粒细胞增殖迁移和侵袭的影响

目的:探讨环状RNA天冬酰胺β-羟化酶(CircASPH)靶向miR-28-5p/胰岛素样生长因子1受体(IGF-1R)轴对多囊卵巢综合征(PCOS)卵巢颗粒细胞增殖、迁移和侵袭的影响。方法:使用人卵巢颗粒细胞KGN、COV434为研究对象,通过双荧光素酶报告基因实验、下拉实验证实CircASPH、miR-28-5p、IGF-1R三者间的靶向关系。将KGN、COV434细胞分为si-NC组、si-ASPH组、si-ASPH+anti-NC组、si-ASPH+anti-miR-28-5p组,采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测CircASPH、miR-28-5p和IGF-1R mRNA表达水平,并用四甲基偶氮唑盐(MTT)法、5-乙炔基-2′脱氧尿嘧啶核苷(Edu)染色和迁移小室实验分别检测细胞增殖、迁移和侵袭行为;采用蛋白印迹实验检测增殖细胞核抗原、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、波形蛋白、N-钙黏蛋白、E-钙黏蛋白、IGF-1R蛋白表达。结果:生物信息学分析和双荧光素酶报告基因实验显示,CircASPH、IGF-1R与miR-28-5p有靶向结合位点。与si-NC组比较,si-ASPH组CircASPH表达水平、OD 490值、Edu阳性细胞率、细胞迁移与侵袭数、MMP-2、波形蛋白、N-钙黏蛋白降低,miR-28-5p表达水平和E-钙黏蛋白表达升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。与si-ASPH+anti-NC组比较,si-ASPH+anti-miR-28-5p组miR-28-5p表达水平和E-钙黏蛋白降低,OD 490值、Edu阳性细胞率、细胞迁移与侵袭数、MMP-2、波形蛋白、N-钙黏蛋白升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:在KGN、COV434细胞中,抑制CircASPH表达可通过调节miR-28-5p/IGF-1R轴,抑制卵巢颗粒细胞增殖、迁移、侵袭及上皮间质转化,可能成为治疗PCOS的一种新靶点。

HMGA2 基因多态性、血清IGF-1对特发性矮小症rhGH疗效影响的交互作用分析

目的探究高迁移率蛋白A2(HMGA2)基因多态性、血清胰岛素样生长因子-1(IGF-1)对特发性矮小症(ISS)重组人生长激素(rhGH)疗效影响的交互作用。方法选取2020年2月至2021年8月本院收治的ISS患儿100例,选取同期于本院接受体检的健康儿童100例纳入对照组,PCR测序分析HMGA2基因多态性情况,所有患儿均予以指导接受rhCH治疗;分析对照组和研究组HMGA2基因多态性分布和血清IGF-1表达;分析不同基因型患儿GH治疗前后IGF-1变化;分析HMGA2基因多态性联合IGF-1对ISS患儿rhGH疗效预测价值。对比不同HMGA2基因多态性ISS患儿rhGH生长情况和IGF-差异;分析不同HMGA2基因多态性和IGF-1、疗效的相关性。结果对照组和研究组儿童在HMGA2基因SNP rs1042725和SNP rs7968682分布差异显著,主要表现为在基因SNP rs1042725中,对照组TT型表达明显高于研究组,SNP rs7968682中GT型表达占比明显高于对照组(P<0.05);研究组ISS患儿血清IGF-1明显低于对照组(P<0.05);治疗后rs1042725和SNP rs7968682基因型患者的IGF-1水平较治疗前均升高,且差异具有统计学意义(均P<0.05);HMGA2基因SNP rs1042725、SNP rs7968682联合血清IGF-1评估ISS患者ROC曲线线下面积为0.935,具有较高的特异性以及灵敏度,联合检测诊断价值明显高于其他3种检测(P<0.05);经rhGH治疗后ISS患儿不同HMGA2基因多态性存在差异,SNP rs042725基因型中CT型表达ISS患儿生长情况显著优于TT和CC型(P<0.05);SNP rs7968682基因型中GT型表达ISS患儿生长情况显著优于TT和GG型(P<0.05);Spearman相关系数分析发现HMGA2基因多态性与IGF-1和疗效均呈现显著正相关(均P<0.05)。结论ISS患儿HMGA2基因多态性与正常儿童有一定差异,且ISS基因SNP rs 1042725和SNP rs7968682位点与疗效之间有显著相关性,与ISS患儿生长发育有关,可能有血清IGF-1调控有关,为临床ISS患儿的诊治提供一定基础。

血清淀粉样蛋白A、hs-CRP、IGF-1水平与帕金森患者病情的相关性

目的探讨血清淀粉样蛋白A(serum amyloid A,SAA)、高敏C反应蛋白(high-sensitivity C-reactive protein,hs-CRP)、胰岛素样生长因子-1(insulin-like growth factor 1,IGF-1)在帕金森病(Parkinson's disease,PD)患者中的表达水平及其与病情严重程度的相关性,从而评估这些生物标志物在PD患者病情评估及预后指导中的价值。方法选取2021年1月至2023年10月西电集团医院收治的122例PD患者为观察组,并根据疾病病情分为早期组(44例)和中晚期组(78例)。122例PD患者中,男64例,女58例,年龄(68.13±8.45)岁,病程(6.06±2.71)年。以同期50名健康体检者为健康对照组,其中男28例,女22例,年龄(67.25±7.59)岁。比较3组SAA、hs-CRP和IGF-1水平,分析其与疾病病情的相关性。使用多元回归分析影响疾病进展的风险因素。采用受试者操作特征曲线(receiver operating characteristic curve,ROC)评价SAA、hs-CRP和IGF-1在疾病进展评估中的应用价值。采用t检验、χ^(2)检验。结果观察组SAA、hs-CRP水平高于健康对照组[(9.53±1.50)mg/L比(3.71±1.06)mg/L、(5.37±2.74)mg/L比(0.82±0.29)mg/L],IGF-1水平低于健康对照组[(65.73±15.25)μg/L比(84.04±19.72)μg/L](均P<0.05)。疾病严重程度与血清SAA、hs-CRP和IGF-1水平相关(r=0.587、0.492、-0.660,均P<0.05)。多因素回归分析显示,高龄、长病程、高SAA、高hs-CRP、低IGF-1是PD患者疾病严重程度加重的影响因素。血清SAA、hs-CRP和IGF-1水平联合预测的曲线下面积(area under the curve,AUC)为0.967,灵敏度为92.3%,特异度为93.2%。结论血清SAA、hs-CRP和IGF-1水平与PD患者疾病进展密切相关,可作为评估疾病进展的生物标志物。

3D打印技术用于经鼻蝶窦入路垂体腺瘤切除术应用效果及对血清MMP-9和IGF-1水平的影响

目的:探究3D打印技术在经鼻蝶窦入路垂体腺瘤(PA)切除术的应用效果及对血清基质金属蛋白酶-9(MMP-9)和胰岛素样生长因子-1(IGF-1)水平的影响。方法:选取2020年5月至2022年5月秦皇岛市第一医院收治的84例PA患者,按照随机数表法将其分为观察组和对照组,每组42例。对照组行经鼻蝶窦入路垂体腺瘤切除术,观察组行经鼻蝶窦入路垂体腺瘤切除术联合应用3D打印技术,比较两组肿瘤切除效果、围术期指标、视力改善情况、MMP-9和IGF-1水平,以及鼻腔功能的鼻气道阻力(NAR)、T&T嗅觉测试评分及并发症。结果:观察组肿瘤切除效果优于对照组,差异有统计学意义(U=2.286,P<0.05);观察组手术时间、术中出血量及住院时间均少于对照组,差异有统计学意义(t=4.780、11.438、11.842,P<0.05);术后3 d、7 d时观察组血清MMP-9和IGF-1水平低于对照组,差异有统计学意义(F=7.526、4.985,P<0.05);术后1个月、3个月时观察组NAR及T&T嗅觉测试评分低于对照组,差异有统计学意义(F=6.359、8.436,P<0.05);两组视力视野改善情况及并发症发生率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:3D打印技术用于经鼻蝶窦入路垂体腺瘤切除术可提高肿瘤切除效果,优化手术操作,减少创伤,有利于减轻疼痛,改善嗅觉功能与视力视野,并能降低血清MMP-9、IGF-1水平,且安全性较高。

胃癌中PTEN、IGF-1、IGF-1R蛋白表达及其预后意义评价

目的探讨PTEN、IGF-1、IGF-1R蛋白表达在胃癌发生、发展、侵袭转移及预后评价中的作用。方法随访手术胃癌患者，应用免疫组化方法检测有随访资料的胃癌组织和正常胃黏膜组织中PTEN、IGF-1、IGF-1R蛋白的表达。结果胃癌组织中PTEN表达降低，IGF-1、IGF-1R表达增高；PTEN、IGF-1、IGF-1R表达与胃癌临床生物学行为有关，PTEN蛋白表达在无淋巴结转移组高于淋巴结转移组，Ⅰ-Ⅱ期组高于Ⅲ-Ⅳ期组。IGF-1、IGF-1R蛋白表达在进展期胃癌组高于早期胃癌组，低分化组高于高中分化组，有淋巴结转移组高于无淋巴结转移组；Ⅰ-Ⅱ期组低于Ⅲ-Ⅳ期组；进展期胃癌中PTEN蛋白表达阳性患者生存率优于阴性患者，IGF-1、IGF-1R蛋白表达阳性患者生存率差于阴性患者。结论PTEN、IGF-1、IGF-1R蛋白表达改变在胃癌发生、发展中起一定作用，可以帮助判断预后。

绵羊皮肤中GHR、IGF-1和IGF-1R基因表达的发育性变化及品种特点

采用相对定量反转录多聚酶链式反应（RT-PCR）方法，以18S rRNA作内标，研究了罗米丽（Romilly Hillys）×中国美利奴（新疆军垦型）杂交一代优质细毛羊和哈萨克粗毛羊皮肤中生长激素受体（GHR）、胰岛素样生长因子1（IGF-1）和胰岛素样生长因子1受体（IGF-1R）mRNA发育性变化并进行了品种间比较。分别于30、60、90、135、180和255日龄称重、采毛样，并于30、90、135和255日龄采皮样。结果表明：粗毛羊和细毛羊体重、羊毛生长的发育模式没有明显的差异，30-135日龄体重迅速增加，135～255日龄增重十分缓慢；30-135日龄羊毛日增长逐渐增加，135-180日龄羊毛生长十分缓慢，而180-255日龄又上升到较高水平。粗毛羊皮肤中GHRmRNA在30～90曰龄显著增加（P〈0．05），90日龄达到高峰，此后显著下降（P〈0．05）；细毛羊在135日龄时GHR mRNA极显著地升高（P〈0．01），此后又极显著地下降。粗毛羊皮肤中IGF-1、IGF-1R mRNA30—90日龄上升，90日龄之后极显著下降（P〈0．01）：细毛羊皮肤中IGF—1、IGF-1R mRNA出生时较高，然后逐渐下降。品种之间比较，细毛羊GHR mRNA出现高峰晚于粗毛羊，135日龄高峰时显著地高于粗毛羊；粗毛羊IGF—1、IGF-1RmRNA在90日龄出现高峰，并极显著或显著地高于细毛羊；粗毛羊90日龄前GHR、IGF-1和IGF-1RmRNA高于细毛羊，之后低于细毛羊。结果提示：绵羊皮肤中GHR，IGF-1和IGF-1R基因表达有特定的发育模式，并存在品种差异。

蓝塘仔猪IGF-1水平与组织IGF-1、GHR基因的表达

32头不同日龄(出生、3、21、35d)蓝塘仔猪,由前腔静脉采血后剖杀,取肝脏、背最长肌样品。用RIA法测血液、组织中IGF 1浓度,用放射受体法(RBA)检测肝脏、肌肉组织中GHR结合活性,用实时荧光定量PCR法检测IGF 1、GHRmRNA的表达水平。结果表明:(1)血液中IGF 1在出生日显著高于其它时期(P<0 05)。肌肉组织中IGF 1含量高于肝脏组织,肌肉组织IGF 1含量在3、21、35日龄时都显著高于出生日(P<0 05)。(2)肝脏细胞膜GHR结合活性在出生日显著高于3、21日龄(P<0 05),肝脏细胞膜GHR结合活性高于肌肉组织。(3)肝脏组织IGF 1、GHRmRNA的表达量均显著高于肌肉组织(P<0 05)。肝脏IGF 1mRNA的表达在出生日、21日龄时显著高于3、35日龄(P<0 05),GHRmRNA的表达在出生日显著高于其它日龄(P<0 05)。肌肉IGF 1、GHRmRNA的表达在出生日均显著高于其它日龄(P<0 05)。

消渴灵浓缩液对糖尿病大鼠坐骨神经IGF-1 mRNA表达的影响

目的:探讨消渴灵浓缩液对糖尿病大鼠坐骨神经IGF 1mRNA表达的影响。方法:将30只链脲佐菌 素诱导的糖尿病大鼠模型随机分为模型组、西药对照组、中药治疗组,每组10只。另选10只鼠龄、体重相匹配的 大鼠作为正常组。采用相对定量逆转录聚合酶链式反应(RT PCR)检测病程8周后各组大鼠坐骨神经IGF 1mR NA表达的水平。结果:中药组、西药组、正常大鼠组坐骨神经IGF 1mRNA相对表达量均增加,差异无统计学意义 (P=0.213,P=0.822,P=0.304);模型组坐骨神经IGF 1mRNA相对表达量下降,与中药组、西药组、正常大鼠 组比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。IGF 1mRNA表达水平与血糖呈负相关(P<0.05)。结论:糖尿病大鼠 坐骨神经组织IGF 1mRNA的表达下降,消渴灵浓缩液可上调糖尿病大鼠坐骨神经IGF 1mRNA的表达水平,可能 是消渴灵浓缩液防治糖尿病周围神经病变的作用机制之一。

不同日龄鸭肝脏中IGF-1及IGF-1R基因表达规律的研究

为明确鸭肝脏胰岛素样生长因子1(IGF-1)及IGF-1受体(IGF-1R)基因mRNA表达的发育性变化规律,选择0、14、28、42和56日龄高邮鸭和金定鸭各10只(共100只),称测体重后屠宰,采集肝脏组织,采用实时荧光定量PCR法检测IGF-1和IGF-1R基因的发育性变化,并进行品种间比较。结果表明:0～56日龄期间,高邮鸭和金定鸭肝脏IGF-1基因表达量均呈先升后降的趋势,56日龄时高邮鸭肝脏IGF-1基因表达量极显著高于金定鸭;IGF-1R基因表达量基本呈下降趋势,高邮鸭肝脏IGF-1R基因表达量在0日龄时显著高于金定鸭。高邮鸭和金定鸭肝脏IGF-1和IGF-1R基因表达的发育性变化与体重存在不同程度的负相关性。鸭肝脏中IGF-1和IGF-1R基因表达量有特定的发育模式且存在品种差异,IGF-1R基因表达水平的变化不依赖IGF-1基因表达水平。

鸭发育早期肝脏IGF-1 mRNA的表达特异性及其与体质量的相关性分析

选择生长速度不同的高邮鸭和金定鸭,对其胚胎期和出雏早期肝脏IGF-1 mRNA的表达规律及其与体质量的相关性进行了比较研究。采用实时荧光定量PCR方法研究鸭13、17、21、25、27胚龄和出雏后7日龄下肝脏胰岛素样生长因子1(IGF-1)mRNA的表达规律。试验结果证实:鸭肝脏IGF-1 mRNA在13胚龄已有表达。鸭早期发育过程中体质量和肝脏IGF-1 mRNA的表达水平均呈持续上升态势,高邮鸭13、21胚龄和7日龄肝脏IGF-1 mRNA的表达量极显著高于金定鸭(P<0.01),与日增体质量和绝对生长速率的变化情况相吻合。整个观察期内体质量变化和肝脏IGF-1 mRNA的表达量均呈现极显著的品种和时间特异性(P<0.01),并且受到品种和日龄交互作用的极显著影响(P<0.01)。从品种或性别的角度进行分析,均发现鸭发育早期肝脏IGF-1 mRNA的表达与体质量的变化趋势一致,且呈极显著正相关(P<0.01),提示肝脏IGF-1 mRNA的表达可能在鸭早期发育过程中发挥着重要作用。

补肾调冲方对大鼠卵巢颗粒细胞增殖与分泌及其IGF-1 mRNA表达的影响

目的:观察补肾调冲方对大鼠卵巢颗粒细胞增殖与分泌功能及其IGF-1 mRNA表达的影响。方法:制备原代培养的大鼠卵巢颗粒细胞,预培养24h后,分别加入FSH(50ng/mL)和不同浓度的补肾调冲方(100、10、1、0.1μg/mL),继续培养48h后,放免法测定颗粒细胞培养液中E2、P水平及细胞内cAMP含量,用Real-tim e RT-PCR方法实时定量测定颗粒细胞IGF-1 mRNA的表达量。结果:①补肾调冲方可明显增加3H-TdR掺入颗粒细胞DNA中的数量,并促进颗粒细胞分泌E2、P,增加颗粒细胞中cAMP的含量;②补肾调冲方可促进基础状态下颗粒细胞IGF-1 mRNA的表达,在一定范围内呈剂量依赖性。结论:补肾调冲方在无FSH作用的条件下,可直接促进颗粒细胞内IGF-1 mRNA的表达,使细胞内cAMP的含量增加,从而调节颗粒细胞增殖与分泌功能。

胃癌及其区域淋巴结中PTEN、IGF-1/IGF-1R mRNA的表达

目的探讨胃癌及其区域淋巴结中MMAC1基因(PTEN),胰岛素样生长因子1(IGF-1)/胰岛素样生长因子1受体(IGF-1R)mRNA的表达及其在胃癌发生和淋巴结转移中的作用。方法RT-PCR方法检测胃癌组织、正常胃黏膜、胃癌区域淋巴结中PTEN,IGF-1/IGF-1R mRNA的表达。结果胃癌组织中PTEN mRNA表达降低,IGF-1/IGF-1R mRNA表达增高,PTEN/IGF的表达与年龄,性别无关,与肿瘤的分期、分化程度及淋巴结转移明显相关。转移淋巴结中PTEN/IGF表达失衡,并且比原发灶中的失衡更加严重。结论PTEN mRNA表达降低,IGF-1/IGF-1R mRNA表达增高对胃癌的发生和转移起着重要作用。

补偿生长对异育银鲫IGF-1、IGFBP-1水平及IGF-1、IGF-1RmRNA表达的影响

该实验分析饥饿和恢复投喂对异育银鲫血液IGF-1和IGFBP-1水平和肝脏IGF-1、白肌IGF-1RmRNA表达量的影响。结果显示:饥饿期(14d)血液中IGF-1和IGFBP-1水平逐渐下降,在饥饿第14天均出现显著性降低(P<0.05);恢复投喂后第1天IGF-1迅速恢复到对照组水平,而IGFBP-1水平仍显著低于对照组(P<0.05),随后逐渐升高,直至于恢复投喂第14天后显著高于对照组水平(P<0.05);饥饿期肝脏IGF-1mRNA表达量呈下降趋势,但与对照组无显著性差异(P>0.05);恢复投喂初期(第1、3天),IGF-1mRNA表达量仍继续下降(P<0.05),对营养条件的变化反应滞后,至第7天,表达水平恢复到对照组水平。白肌IGF-1RmRNA表达水平在饥饿第3天出现显著性下降(P<0.05),继续饥饿其水平出现补偿性升高;恢复投喂后第14天IGF-1RmRNA表达量显著高于对照组水平(P<0.05)。该结果揭示恢复投喂期高水平的IGFBP-1含量和IGF-1RmRNA表达量可能通过提高IGF-1的促生长作用参与异育银鲫的补偿生长调节。

伴性矮小型鸡GH、GHR和IGF-1基因的表达变化

采用荧光实时定量PCR的方法,从转录水平上分析了伴性矮小型鸡和普通鸡肝脏中GH、GHR和IGF-1基因的表达变化趋势。结果表明:伴性矮小型鸡和普通鸡肝脏组织中GH的mRNA表达量没有明显差异,而GHR在矮小鸡中的表达量明显比普通鸡的高3倍多,但IGF-1基因在矮小鸡肝脏中的表达量却远远低于普通鸡,差异达到2个数量级。这表明,伴性矮小型鸡GHR外显子10和3′非翻译区的长片断缺失并没有降低GHR基因的表达,相反有所增高,这一过程中可能存在相应的功能代偿机制。与此同时,在伴性矮小型鸡肝脏中几乎观察不到IGF-1基因的表达,证明正是由于GHR基因的缺陷影响了GH生理效应的发挥。实验结果印证了伴性矮小表型与GH和GHR的转录水平无关,而可能是GHR编码产物异常阻碍了GH-GHR-IGF信号通路,导致IGF-1表达受阻,不能发挥正常的生理功能。

IGF-1R基因SNPs检测及其与水貂生长性状的关联分析

为了研究胰岛素样生长因子1受体(IGF-1R)基因外显子2和外显子11的单核苷酸多态性,分析该基因变异与水貂生长性状的关联性,以红眼白水貂、金州黑水貂和咖啡水貂共计235个样本的血液基因组DNA为模板,采用PCR产物克隆和Sanger测序技术,筛查IGF-1R基因SNP位点,将差异位点与不同种群的水貂生长性状进行关联分析。结果表明,红眼白、金州黑水貂的外显子2和外显子11上检测到2个SNPs:c.207G>A和c.1782G>A;咖啡水貂在外显子2上检测到2个SNPs:c.207G>A和c.218T>A,在外显子11检测到1个SNPs:c.1782G>A。c.207G>A和c.1782G>A都属于无义突变。c.218T>A位点属于有义突变,氨基酸发生改变,脯氨酸变为精氨酸。关联分析表明:c.207G>A与金州黑水貂和咖啡水貂体长性状显著相关(P<0.05),其中GG基因型个体为水貂体长的优势基因型;c.1782G>A与咖啡水貂的体长和体质量显著相关(P<0.05),且与咖啡水貂的体质量呈现极显著差异(P<0.01),GA基因型作为咖啡水貂的优势基因型,其杂合GA基因型个体的体长、体质量都显著高于纯合GG基因型和纯合AA基因型个体。合并基因型进行关联分析发现:金州黑水貂合并基因型GGGA个体和GGAA个体的体长与GAGA个体体长差异极显著(P<0.01),基因型GGGA个体和GGAA个体的体长高于GAGA个体体长;金州黑水貂合并基因型GGGA个体体质量与GAGA个体差异显著(P<0.05),GGGA个体体质量高于GAGA基因型个体。试验可推断得出c.207G>A位点GG基因型是水貂体长的优势基因型;合并基因型GGGA和GGAA可能是影响金州黑水貂体长体质量的有利基因型,认为IGF-1R基因可能是影响水貂生长性状的候选基因。

检测上皮性卵巢癌患者IGF-1、IGF-1R的表达及临床意义

目的检测IGF信号通路关键蛋白IGF-1、IGF-1R在原发上皮性卵巢癌(EOC)患者血清中及组织中的表达,检测血清IGF-1、IGF-1R及CA125的动态变化,探讨其与上皮性卵巢癌患者预后的关系。方法用免疫组化法检测10例正常卵巢组织,12例良性卵巢上皮性肿瘤、25例EOC手术病理标本中IGF-1、IGF-1R的表达,分析两者表达与EOC临床病理特征的相关性。用ELISA法分别检测以上患者手术前及手术后血清中IGF-1、IGF-1R的表达,探讨与预后的关系。结果 1IGF-1、IGF-1R在EOC组织及血清中的表达显著高于正常卵巢组织及良性卵巢上皮性肿瘤组(P=0.0001);2EOC患者血清中IGF-1、IGF-1R的阳性程度与临床分期、肿瘤细胞减灭术满意度呈显著正相关(P<0.05)。结论 IGF信号通路关键蛋白IGF-1、IGF-1R可能参与了EOC的发生发展过程;IGF-1R与EOC不良预后的重要临床病理指标间呈显著的正相关,IGF-1R可作为卵巢上皮性癌基因靶向治疗的新靶点。

补肾调冲方含药血清对高雄激素培养的卵巢颗粒细胞IGF-1 StAR mRNA表达的影响

目的:运用血清药理学方法观察补肾调冲方对高雄激素培养的大鼠卵巢颗粒细胞(GC)IGF-1、StARmRNA表达的影响。方法:根据血清药理学方法,用6周龄的未成年SD大鼠制备FSH及大、中、小剂量补肾调冲方含药血清,分别加入到过量丙酸睾丸酮处理的GC培养体系中。培养48h后,用实时荧光定量RT-PCR(Real-timeRT-PCR)方法检测GCIGF-1、StARmRNA的表达量。结果:高雄激素抑制GCIGF-1、StARmRNA的表达,补肾调冲方及FSH含药血清可拮抗高雄激素的抑制作用,促进IGF-1、StARmRNA的表达。结论:补肾调冲方含药血清可有效拮抗高雄激素对IGF-1、StARmRNA表达的抑制作用,推测补肾调冲方通过促进IGF-1、StARmRNA的表达,改善雌/雄激素比值来调节卵巢功能。

还原型谷胱甘肽对肉鸡生长及血清IGF-1水平、组织IGF-1 mRNA表达的影响

9日龄黄羽雌性肉鸡1 000只随机分为A、B、C、D 4个组,每组设5个重复,每个重复50只。在A、B、C、D组的日粮中分别添加剂量为0、80、120、160mg/kg的还原型谷胱甘肽(GSH),饲养期84 d。观察GSH对肉鸡生长性能、血清类胰岛素生长因子1(IGF-1)、T3、T4水平以及组织IGF-1 mRNA表达的影响。结果表明,(1)添加GSH的鸡只血中GSH水平显著高于对照组(A组);(2)添加GSH的鸡只平均体质量和平均日增重均高于A组,其中B组显著高于A组;(3)添加GSH的鸡只血中IGF-1水平显著高于A组,血中T3水平明显升高,T4水平有升高趋势;(4)各试验组肝脏IGF-1 mRNA的表达水平有所增高,但不明显。35d时,C组胸肌组织的IGF-1 mRNA表达水平显著性高于A组。结果提示,肉鸡饲粮中添加GSH可增强肝脏IGF-1的分泌和肌肉组织IGF-1 mRNA的表达,血中IGF-1水平升高,而促进鸡只生长。