TRIM45靶向IGF-1R抑制乳癌MCF-7细胞增殖和迁移的机制

目的探究三结构域蛋白45(TRIM45)通过靶向胰岛素样生长因子1受体(IGF-1R)抑制人乳癌MCF-7细胞增殖和迁移的作用机制。方法将人乳癌MCF-7细胞分为TRIM45过表达组、空载对照组及阴性对照组。通过细胞增殖实验及划痕实验进行细胞增殖及迁移能力检测,采用蛋白质免疫印迹(WB)法检测自噬相关蛋白p62、微管相关蛋白Ⅰ轻链3B(LC3B)、自噬相关蛋白8(ATG8)的表达,通过免疫沉淀实验分析TRIM45与IGF-1R的结合,采用WB法检测促增殖蛋白IGF-1R和簇集蛋白(CLU)的表达。结果与空载对照组相比较,TRIM45过表达组不同时间的细胞增殖率及迁移率均显著降低(F=19.87~177.91,P<0.05)。与空载对照组相比较,TRIM45过表达组细胞自噬相关蛋白p62的表达显著降低,LC3B和ATG8的表达显著增加(F=22.97~113.50,P<0.05)。TRIM45可以与IGF-1R结合,并且TRIM45过表达组细胞IGF-1R及CLU蛋白表达较空载对照组显著降低(F=51.06、30.45,P<0.05)。结论TRIM45可以与IGF-1R结合,抑制IGF-1R及CLU的表达,诱导乳癌细胞自噬,抑制乳癌细胞的增殖和迁移能力。

肿瘤相关巨噬细胞通过激活IGF-1R信号通路诱导三阴性乳腺癌细胞对白蛋白紫杉醇耐药的研究

目的探讨肿瘤相关巨噬细胞(TAM)对三阴性乳腺癌(TNBC)细胞白蛋白紫杉醇(Nab-PTX)化疗敏感性的影响及作用机制。方法构建并鉴定TAM模型;通过Transwell小室共培养法建立TAM与TNBC细胞系MDAMB-231细胞共培养模式,分为对照组(MDA-MB-231细胞及空白小室)、Nab-PTX组(MDA-MB-231细胞、空白小室及0.5 nmol/L Nab-PTX)、TAM组(MDA-MB-231细胞、含M2型巨噬细胞的小室)、TAM+Nab-PTX组(MDA-MB-231细胞、含M2型巨噬细胞的小室及0.5 nmol/L Nab-PTX)、胰岛素样生长因子1受体(IGF-1R)抑制剂组(MDA-MB-231细胞、含M2型巨噬细胞的小室、0.5 nmol/L Nab-PTX及4 nmol/L IGF-1R抑制剂Linsitinib);CCK-8法检测各组细胞增殖情况;流式细胞术检测细胞凋亡;实时荧光定量PCR(q PCR)检测多药耐药蛋白(MDR)1和胱天蛋白酶(Caspase)-3mRNA水平;Western blot检测IGF-1R信号通路关键蛋白表达。结果THP-1细胞经诱导分化为M2型巨噬细胞;与Nab-PTX组相比,TAM+Nab-PTX组细胞增殖水平升高,凋亡率降低(P<0.01),MDR1 mRNA表达升高,Caspase-3mRNA表达降低(P<0.05),IGF-1R信号通路关键蛋白激活(P<0.01);与TAM+Nab-PTX组相比,IGF-1R抑制剂组细胞增殖水平降低,凋亡率升高,MDR1 mRNA表达降低,Caspase-3 mRNA的表达增高,IGF-1R信号通路关键蛋白的表达降低(P<0.01)。结论TAM可能通过激活IGF-1R信号通路诱导TNBC细胞对Nab-PTX耐药。

沉默IGF-1R表达对子宫内膜癌化疗敏感性的影响及其相关机制研究

目的:将慢病毒载体表达的靶向IGF-1R的干扰片段转染子宫内膜癌细胞HEC-1B,探讨转染前后HEC-1B对顺铂化疗敏感性的改变及可能的潜在机制。方法:构建IGF-1R基因RNAi慢病毒载体,转染HEC-1B细胞并检测转染效率,Real-time PCR及Western blot检测转染前后IGF-1R基因及相关蛋白的表达情况,采用MTT及流式细胞仪分析转染前后细胞增殖率及凋亡的改变。结果:慢病毒载体的转染效率高达78%,转染特异IGF-1R siRNA使内源性IGF-1R mRNA降低85%(P<0.05),蛋白降低91.4%(P<0.05);Akt及Erk的磷酸化水平降低,分别是总Akt及Erk的(17.48±3.31)%与(11.55±3.27)%(P<0.05);转染前后的细胞暴露于不同浓度的顺铂作用48h,当顺铂浓度从10μmol/L增加到40μmol/L时,转染特异IGF-1R siRNA的细胞凋亡率从(22.21±4.63)%增加到(41.92±2.5)%(P<0.05);顺铂的IC50值从21.85μmol/L降到10.58μmol/L(P<0.05),同时伴随着cleaved caspase-9的表达增强(P<0.05)。结论:沉默IGF-1R的表达通过抑制下游信号通路的传导,增强子宫内膜癌对顺铂化疗敏感性。

阿司匹林对糖尿病脑病大鼠认知功能及海马IGF-1R/p-IGF-1R表达的影响

目的观察阿司匹林对糖尿病脑病大鼠认知功能、海马组织胰岛素样生长因子1受体(IGF-1R)及磷酸化胰岛素样生长因子1受体(p-IGF-1R)表达的影响,探讨阿司匹林可能的大脑保护作用机制。方法大鼠随机分为正常对照组(Con)、阿司匹林对照组(Con+Asp)、糖尿病脑病组(DM)和阿司匹林治疗组(DM+Asp),每组10只,后2组大鼠采用一次性腹腔注射链脲佐菌素(60mg/kg)建立糖尿病脑病大鼠模型,建模成功1周后,Con+Asp组和DM+Asp组给予阿司匹林[10mg/(kg·d)]灌胃,Con组给以同等剂量生理盐水灌胃,持续14周。第14周时Morris水迷宫观察大鼠认知功能变化,蛋白质印迹法观察大鼠海马组织IGF-1R及p-IGF-1R表达的变化。结果经阿司匹林治疗后,糖尿病大鼠认知功能得到改善:Morris水迷宫实验DM+Asp组逃避潜伏期短于DM组(P<0.01);DM+Asp组平台穿越次数、目的象限时间均多于DM组(P<0.01或P<0.05)。H-E染色结果显示:DM+Asp组海马神经元数量较DM组增多。与Con组相比,DM组海马区p-IGF-1R表达减少(P<0.01),经阿司匹林治疗后糖尿病大鼠海马区p-IGF-1R表达增多(P<0.01),但各组大鼠海马总IGF-1R蛋白水平差异无统计学意义。结论阿司匹林可能通过调控IGF-1R信号通路对糖尿病脑病大鼠发挥脑保护作用。

PCOS病人血清TNF-α及IGF-1水平变化及意义

目的探讨血清肿瘤坏死因子α(TNF-α)、胰岛素样生长因子1(IGF-1)水平的变化与多囊卵巢综合征(PCOS)发病的关系。方法采集90例PCOS病人和41例正常人血清,应用酶联免疫吸附试验(ELISA)方法检测两组TNF-αI、GF-1的表达水平。结果PCOS病人血清TNF-α及IGF-1的表达水平明显高于对照组,差异有显著性(t=32.341、3.986,P<0.01);TNF-α含量与PCOS病人是否肥胖有关(t=21.760,P<0.01);PCOS病人血清TNF-α水平与IGF-1的含量呈正相关关系(r=0.74,P<0.05);正常对照组血清TNF-α水平与IGF-1的含量无明显相关性(P>0.05)。结论TNF-αI、GF-1水平升高可能与PCOS的发病有关。

肾癌组织中IGF-1R和MMP-2蛋白表达及其临床意义

目的观察胰岛素样生长因子-1受体(IGF-1R)和基质金属蛋白酶-2(MMP-2)两种蛋白在肾细胞癌组织中的表达并探讨其临床病理意义。方法应用免疫组化两步法检测72例肾癌组织和33例同期癌旁正常肾组织中IGF-1R和MMP-2蛋白的表达水平,分析IGF-1R和MMP-2与肾细胞癌病理类型、分级、分期及肿瘤发生、发展和转移之间的关系。结果肾细胞癌组织中IGF-1R和MMP-2的表达率分别为69.4%(50/72)和72.2%(52/72),明显高于同期非肿瘤癌旁正常肾组织中的39.3%(13/33,P<0.05)和27.3%(9/33,P<0.05),两种蛋白在肾细胞癌组织中的表达水平均与患者的肿瘤大小、淋巴结转移、病理分级和临床分期存在相关性(P均<0.05),与肿瘤的病理分型、患者年龄、性别无相关性(P>0.05);IGF-1R和MMP-2两种蛋白的表达呈正相关(P<0.05)。结论 IGF-1R和MMP-2与肾细胞癌的发生、发展和转移过程密切相关,同时检测这两种蛋白的表达可以对肾细胞癌恶性程度的判定及进一步治疗提供参考依据。

低频脉冲电磁场通过IGF-1R/NO信号通路促进大鼠颅骨成骨细胞成熟及矿化

目的:观察低频脉冲电磁场(PEMF)是否通过胰岛素样生长因子1受体(IGF-1R)/一氧化氮(NO)信号通路促进大鼠颅骨成骨细胞成熟及矿化。方法:体外分离培养乳鼠颅骨成骨细胞,传代后随机分成9组,每天用50 Hz 0.6 mT PEMF处理不同的时间,通过检测成骨细胞中NO含量确定PEMF最佳处理时长。将传代后的成骨细胞随机分成空白对照组、PEMF组、GSK(IGF-1R阻断剂)组、PEMF+GSK组,PEMF处理成骨细胞3 d后,采用蛋白质印迹法检测蛋白激酶(AKT)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)和cGMP依赖性蛋白激酶(PKG)蛋白表达水平;PEMF处理第6天时测定碱性磷酸酶(ALP)活性;PEMF处理第12天时采用茜红素染色法观察钙化结节形成情况。结果:经1.5 h电磁场处理后的成骨细胞中NO含量显著提高(P<0.01),遂后续采用PEMF处理1.5 h。与空白对照组比较,PEMF组AKT、iNOS、PKG蛋白表达量增加(均P<0.01),ALP活性升高(P<0.05),且茜红素染色面积增大(P<0.01);GSK组AKT、iNOS、PKG蛋白表达量减少,ALP活性降低(P<0.05),茜红素染色面积最小(P<0.01);PEMF+GSK组上述实验结果均高于GSK组但低于PEMF组(P<0.05或P<0.01)。结论:PEMF可能通过IGF-1R/NO信号通路促进大鼠颅骨成骨细胞成熟与矿化。

染料木素促乳癌细胞增生和IGF-1R mRNA表达机制

目的研究染料木素促人乳癌(MCF-7)细胞增生及IGF-1R mRNA表达机制。方法MCF-7细胞常规培养后,用ICI182,780或JB-1与染料木素共同培养,以阻断雌激素受体(ER)或IGF-1R。MTT法观察细胞生长情况,RT-PCR技术观察IGF-1R基因表达情况。结果染料木素对MCF-7细胞具有增生效应,与对照组相比差异有统计学意义(F=14.627,q=3.76,P<0.05),此效应可以被ER拮抗剂ICI182,780或IGF-1R拮抗剂JB-1完全阻断(q=3.89、4.25,P<0.05);染料木素可增加IGF-1R基因表达(F=21.695,q=4.94,P<0.01),此效应也能够被ICI182,780或JB-1完全阻断(q=5.03、5.89,P<0.01)。结论染料木素可以促进MCF-7细胞的增生和IGF-1R mRNA的表达,此作用可以被ER拮抗剂ICI182,780或IGF-1R拮抗剂JB-1完全阻断。

胰岛素样生长因子-1及其受体在2型糖尿病合并胃癌患者中的表达及其临床意义

背景:胰岛素样生长因子-1(IGF-1)是体内重要的促有丝分裂因子,具有强烈的促增殖和抗凋亡作用,在多种恶性肿瘤中异常表达。目的:探讨IGF-1及其受体(IGF-1R)在2型糖尿病(T2DM)合并胃癌(GC)患者中的表达及其临床意义。方法:收集2010年1月-2013年1月接受手术治疗的338例GC患者,并分为GC组和GC-T2DM组。以免疫组化法检测IGF-1、IGF-1R表达情况,并分析两者表达与临床病理参数的关系,评估对患者生存情况的影响。结果:与GC组相比,GC-T2DM组IGF-1阳性率(81. 3%对42. 3%;χ^2=31. 427,P <0. 001)、IGF-1R阳性率(87. 5%对46. 7%;χ^2=34. 794,P <0. 001)均显著升高。在GC组中,IGF-1、IGF-1R表达与肿瘤分化程度、淋巴结转移、TNM分期密切相关(P <0. 05)。在GC-T2DM组中,IGF-1、IGF-1R表达仅对淋巴结转移有明显影响(P <0. 05)。Spearman相关性分析发现,GC组、GC-T2DM组中IGF-1表达与IGF-1R表达均呈明显正相关(P <0. 05)。在GC、GC-T2DM患者中,IGF-1(-)组与IGF-1(+)组、IGF-1R(-)组与IGF-1R(+)组之间的总体生存率相比均无明显差异(P>0. 05)。结论:与GC患者相比,GC-T2DM患者的IGF-1、IGF-1R阳性率明显更高,且对患者的临床病理参数有一定的消极影响,提示两者可能通过某种机制促进GC的发生、发展。

子宫内膜癌组织IGF-1与其受体表达及意义

目的探讨子宫内膜癌组织中胰岛素样生长因子-1(IGF-1)及其受体(IGF-1R)表达及其临床意义。方法采用免疫组织化学SP法检测20例正常子宫内膜组织(对照组)及46例子宫内膜癌组织中IGF-1、IGF-1R的表达。结果IGF-1在对照组和子宫内膜癌组阳性表达率分别为60.00%和60.87%,两者差异无显著性(χ2=0.004,P>0.05);过度阳性表达率分别为0和23.91%,差异有显著性(2χ=4.147,P<0.01);子宫内膜癌组织中IGF-1阳性表达及过度表达与手术病理分期无关(χ2=5.434、4.328,P>0.05),而过度表达在不同病理分级之间的差异有显著性(χ2=7.163,P<0.05)。IGF-1R在两种组织中的阳性表达率分别为70.00%和60.87%,差异无显著性(χ2=0.511,P>0.05);过度表达率分别为0和36.96%,差异有显著性(χ2=8.117,P<0.01);子宫内膜癌组织中IGF-1R阳性表达及过度表达与手术病理分期无关(2χ=5.550、4.369,P>0.05),而在高分化与中、低分化内膜癌组织之间差异有显著性(χ2=8.859、8.584,P<0.05)。结论IGF-1I、GF-1R表达与子宫内膜癌发病有关,并可作为子宫内膜癌预后预测的一个指标。

结直肠腺瘤患者IGF-Ⅰ、IGF-ⅠR的表达及其与血清IGF-Ⅰ水平的关系

背景:胰岛素样生长因子(IGF)系统与多种肿瘤的发生密切相关,但其与结直肠腺瘤(CRA)关系的研究目前相对较少。目的:探讨CRA患者IGF-Ⅰ、IGF-Ⅰ受体(IGF-ⅠR)表达及其与血清1GF-Ⅰ水平的关系。方法:选取2011年6月～2012年10月青岛市市立医院50例CRA、30例结直肠癌(CRC)、20例炎性息肉患者。应用免疫组化SP法检测IGF-Ⅰ、IGF-ⅠR表达,放射免疫法测定血清IGF-Ⅰ水平。结果:炎性息肉组、CRA组、CRC组IGF-Ⅰ、IGF-ⅠR表达阳性率呈递增趋势(P<0.05)。CRC组血清IGF-Ⅰ明显高于炎性息肉组(P=0.018)。CRA患者IGF-Ⅰ、IGF-ⅠR表达以及血清IGF-Ⅰ水平与性别、年龄、息肉大小、息肉数量、息肉部位、息肉组织学类型等均无明显关系(P>0.05)。IGF-Ⅰ、IGF-ⅠR阳性表达的CRA患者血清IGF-Ⅰ水平均显著高于IGF-Ⅰ、IGF-ⅠR阴性表达者(P=0.03;P=0.02)。CRA患者IGF-Ⅰ表达与IGF-ⅠR表达呈正相关(r=0.718,P<0.01)。结论:IGF-Ⅰ、IGF-ⅠR表达联合血清IGF-Ⅰ可能成为评估CRA发展和恶变的重要指标。

大肠杆菌偏嗜性人胰岛素样生长因子1基因的克隆及表达

目的:提高以大肠杆菌为工程菌制备重组人胰岛素样生长因子1(rhIGF-1)的产率。方法:依据大肠杆菌遗传密码子使用频率表,人工合成3条DNA单链,PCR拼接扩增出适于在大肠杆菌中表达的人IGF-1基因。将此基因克隆入pGEM-T载体进行DNA序列分析后亚克隆入表达载体pBV220,诱导表达,表达产物行聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)鉴定,酶联免疫分析(ELISA)检测表达产物中rhIGF-1的含量。结果:经基因改造后,rhIGF-1主要以包涵体的形式存在于碎菌后的沉淀中,其产率较改造前提高近4倍。结论:所构建的大肠杆菌偏嗜性人IGF-1基因可显著提高rhIGF-1的产率。

转化生长因子β_1、胰岛素样生长因子1受体在子宫肌瘤中的意义

目的探讨转化生长因子β1(TGF-β1)和胰岛素样生长因子1受体(IGF-1R)在子宫肌瘤中的表达及其相关性。方法采用原位杂交方法检测50例子宫肌瘤及瘤旁正常的子宫肌层中的TGFβ1 mRNA的表达,同时采用免疫组化技术检测相应标本中TGFβ1和IGF-1R蛋白的表达。结果(1)TGFβ1 mRNA及蛋白阳性表达均位于细胞浆。在子宫肌瘤中的表达水平分别为1.02±0.38、1.42±0.67,在相应的正常子宫肌壁中的表达水平分别为0.66±0.48、0.58±0.50,两者差异有统计学意义(P<0.01)。(2)IGF-1R在子宫肌瘤和相应的子宫肌壁中的表达水平分别为1.92±0.88、0.80±0.49,两者比较差异有统计学意义(P<0.01)。(3)各指标在增殖期、分泌期肌瘤和肌壁中的表达差异无统计学意义。(4)TGFβ1与IGF-1R无相关性。结论TGFβ1、IGF-1R是子宫肌瘤生长的重要因素。

脂肪源性干细胞穴位注射对大鼠脑缺血再灌注后胰岛素样生长因子1及其受体表达的影响

目的探讨脂肪源性干细胞(ADSC)穴位注射对大鼠缺血/再灌注损伤后胰岛素样生长因子1(IGF-1)及其受体(IGF-1R)表达的影响。方法线栓法制作大鼠大脑中动脉缺血(MCAO)2 h再灌注模型,大鼠随机分为假手术组、模型组、穴位注射ADSC组(治疗组)、穴位注射0.9%氯化钠注射溶液组(对照组)。治疗组取在大椎、双侧内关穴位注射PKH-26标记ADSC细胞悬液。缺血72 h后NSS法检测神经功能恢复,采用实时荧光定量PCR及免疫组织化学方法检测IGF-1、IGF-1R蛋白和mRNA的表达。结果治疗组可见PKH26标记的ADSC在海马区有表达。与模型组和对照组比较,穴位注射ADSC组NSS评分显著降低(P<0.05),海马区IGF-1、IGF-1R蛋白和mRNA表达显著增加(P<0.05)。结论穴位移植脂肪源性干细胞对大鼠脑缺血再灌注有神经保护作用,其作用机制可能与促进海马区IGF-1和IGF-1R表达有关。

体重指数与IIS系统在脊髓小脑共济失调3型研究中的作用

目的研究脊髓小脑共济失调3型(spinocerebellar ataxia type 3,SCA3)患者体重指数(body mass index,BMI)与胰岛素/胰岛素样生长因子1(IIS)系统、临床和生化指标的相关性。方法比较21例SCA3型患者和性别年龄与之相匹配的22例健康对照者的BMI、血清胰岛素(Ins)、胰岛素样生长因子1(IGF-1)及其结合蛋白3(IGFBP-3)的差异,并分析BMI和Ins、IGF-1、IGFBP-3、CAG重复序列、年龄、发病年龄、病程及国际协作共济失调评估量表(ICARS)总评分及各分项评分间的相关性。结果(1)与健康对照组相比,SCA3型患者BMI以及Ins、IGF-1、IGFBP-3水平降低(均P<0.05),血清IGF-1/IGFBP-3比值在两组间比较差异无统计学意义(P>0.05)。(2)Spearman相关分析显示,BMI与血清Ins水平呈正相关(r=0.504,P=0.020),与CAG重复序列、ICARS总评分及眼球运动评分呈负相关(r=-0.566,P=0.018;r=-0.503,P=0.047;r=-0.617,P=0.011),与其他临床及生化指标无明显相关性(P>0.05);姿势和步态障碍评分与中、重度SCA3患者组BMI值呈负相关(r=-0.824,P=0.006),与轻度SCA3患者组BMI值无明显相关性(r=-0.404,P=0.171)。结论体质量减轻可能是SCA3型患者的早期症状,可协助临床诊断及疾病分期。

胰岛素样生长因子-1受体在恶性黑色素瘤中的表达及临床意义

目的探讨恶性黑色素瘤组织中胰岛素样生长因子-1受体(insulin-like growth factor-1receptor,IGF-1R)的表达及其临床意义。方法选取经病理检查明确诊断的恶性黑色素瘤石蜡切片26例(恶性黑色素瘤组)及正常色素痣石蜡切片20例(正常色素痣组)。采用EnVision两步法,以兔抗人IGF-1R多克隆抗体检测上述两组IGF-1R的表达情况,并分析恶性黑色素瘤组织中IGF-1R的表达与年龄、性别及有无远处转移的关系。结果恶性黑色素瘤组IGF-1R的阳性表达率为57.7%(15/26),正常色素痣组为25.0%(5/20),两组比较差异有统计学意义(χ2=4.912,P=0.023);恶性黑色素瘤组IGF-1R的高表达与有无远处转移相关(P=0.038),而与性别、年龄无关(P=0.453,P=0.701)。结论 IGF-1R的表达量可以预测原发性恶性黑色素瘤的转移及预后,对恶性黑色素瘤的治疗可能具有一定的指导意义。

胰岛素样生长因子-1受体在恶性黑色素瘤中的表达及临床意义

目的探讨恶性黑色素瘤组织中胰岛素样生长因子-1受体(insulin-like growth factor-1 receptor,IGF-1R)的表达及其临床意义。方法选取经病理检查明确诊断的恶性黑色素瘤石蜡切片26例(恶性黑色素瘤组)及正常色素痣石蜡切片20例(正常色素痣组)。采用EnV ision两步法,以兔抗人IGF-1R多克隆抗体检测上述两组IGF-1R的表达情况,并分析恶性黑色素瘤组织中IGF-1R的表达与年龄、性别及有无远处转移的关系。结果恶性黑色素瘤组IGF-1R的阳性表达率为57.7%(15/26),正常色素痣组为25.0%(5/20),两组比较差异有统计学意义(χ2=4.912,P=0.023);恶性黑色素瘤组IGF-1R的高表达与有无远处转移相关(P=0.038),而与性别、年龄无关(P=0.453,P=0.701)。结论 IGF-1R的表达量可以预测原发性恶性黑色素瘤的转移及预后,对恶性黑色素瘤的治疗可能具有一定的指导意义。

胰岛素样生长因子1受体及其通路在原发性肝癌中的机制及进展

胰岛素样生长因子1受体(IGF-1R)的生物学功能主要表现为形成并维持细胞的转化表型,参与细胞增殖、分化,抑制细胞的凋亡。除此之外,IGF-1R对细胞周期具有调节作用,与表皮生长因子、血小板衍生生长因子共同作用,介导细胞周期从G1期进入S期。过度表达的IGF-1R己经成为原发性肝癌影像诊断及定位治疗的热点靶蛋白之一。抑制IGF-1R的表达或功能可有效控制肿瘤细胞生长和转移,并增强其对化疗、放疗的敏感性。综述了IGF-1R及其通路在原发性肝癌诊断及治疗中的作用及意义。

miR-187通过靶向胰岛素生长因子-1受体基因对人乳腺癌细胞增殖和凋亡的影响

目的研究miR-187通过靶向胰岛素生长因子-1受体(IGF-1R)基因对人乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖和凋亡的影响。方法采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测人正常乳腺上皮细胞HBL-100和不同乳腺癌细胞中miR-187的表达水平。在MDA-MB-231细胞中分别转染miR-187 mimics(miR-187组)或阴性对照mimics-NC(miR-NC组),以未转染的MDA-MB-231细胞为空白对照(空白对照组)。采用qRT-PCR和蛋白免疫印迹(Western blotting)法分别检测转染后细胞中miR-187和IGF-1R蛋白表达水平,噻唑蓝(MTT)法和流式细胞术分别检测细胞增殖和凋亡情况。Western blot检测与增殖和凋亡相关蛋白表达水平。采用双荧光素酶报告基因实验验证miR-187与IGF-1R靶向调控关系。结果与人正常乳腺上皮细胞HBL-100(1.00±0.10)相比,乳腺癌细胞中miR-187表达水平明显降低(P<0.05),在MDA-MB-231细胞中表达水平最低(0.11±0.01)。与miR-NC组和空白对照组相比,miR-187组的miR-187表达水平明显上调[(0.98±0.09)、(1.00±0.11)比(3.18±0.33),P<0.05],IGF-1R蛋白表达水平明显下调[(0.28±0.03)、(0.27±0.03)比(0.09±0.01),P<0.05],细胞增殖活力OD值[(0.79±0.08)、(0.82±0.08)比(0.43±0.04)]和PCNA表达水平[(0.39±0.04)、(0.40±0.04)比(0.20±0.02)]均显著降低(P<0.05),凋亡率[(5.02±1.13)%、(4.61±1.01)%比(20.38±3.44)%]和Cleaved Caspase-3表达水平[(0.09±0.02)、(0.08±0.02)比(0.58±0.07)]显著升高(P<0.05)。双荧光素酶报告基因实验显示miR-187与IGF-1R基因3’非编码区(UTR)存在靶向关系。结论miR-187对乳腺癌MDA-MB-231细胞具有增殖抑制和凋亡诱导作用,其作用机制与靶向抑制IGF-1R基因表达有关。