-
题名IGFBP-3在真核细胞中的分泌表达及功能分析
被引量:3
- 1
-
-
作者
吴琛
单耀军
邹民吉
王嘉玺
徐东刚
-
机构
河北大学生命科学学院
军事医学科学院基础医学研究所
-
出处
《生物工程学报》
CAS
CSCD
北大核心
2008年第4期558-562,共5页
-
基金
河北省科技支撑计划项目(No.07275552)
河北大学博士基金项目资助~~
-
文摘
将人胰岛素样生长因子结合蛋白3(IGFBP-3)的cDNA片段亚克隆入pSectagA载体,构建真核分泌型表达载体pSectag-IGFBP3。采用脂质体转染的方法将真核表达载体转染人肾癌786-O细胞,转染48 h后用免疫印迹法检测IGFBP-3的表达状况;同时以Annexin V-EGFP/PI染色,流式细胞仪检测细胞凋亡率,观察分泌表达的IGFBP-3对宿主细胞的促凋亡作用。转染48h后,经Western blotting检测,在细胞培养上清中有分泌表达的IGFBP-3蛋白。流式细胞技术检测结果表明,表达产物可直接作用于宿主细胞,发挥促肿瘤细胞凋亡的作用。由此表明所构建的重组表达质粒pSectag-IGFBP3能在真核细胞水平正常表达并发挥生物学功能,为进一步探索IGFBP-3的作用机制奠定了基础。
-
关键词
胰岛素样生长因子结合蛋白3
真核分泌表达
人肾癌细胞
诱导凋亡
-
Keywords
igfbp-3, eukaryotic secretory expression, human renal cell carcinoma cells, inducing apoptosis
-
分类号
Q78
[生物学—分子生物学]
Q786
[生物学—分子生物学]
-