高血压合并焦虑病人血清微RNA-451a、胰岛素样生长因子-1受体表达水平与焦虑程度的关系

目的探讨高血压合并焦虑病人血清微RNA-451a(miR-451a)、胰岛素样生长因子-1受体(IGF1R)表达水平与焦虑程度的关系。方法选取2020年2月至2022年1月在汉中市中心医院进行治疗的高血压病人160例,根据临床诊断和汉密尔顿焦虑量表(HAMA)评估将病人分为高血压组60例、高血压合并轻度焦虑情绪组48例、高血压合并中度焦虑情绪组32例和高血压合并重度焦虑情绪组20例,收集整理所有病例的临床基础资料。采用实时荧光定量PCR法检测血清miR-451a表达水平、ELISA法检测血清IGF1R表达水平;比较分析高血压病人和高血压合并焦虑情绪病人的临床病理特征;采用Pearson法分析HAMA评分与血清miR-451a、IGF1R表达水平的相关性;采用logistic回归分析高血压合并焦虑的影响因素。结果高血压组、轻度焦虑、中度焦虑和重度焦虑组病人血清miR-451a水平依次降低(0.88±0.30,0.59±0.14,0.48±0.11,0.38±0.09),IGF1R水平依次升高[(2.14±0.60)μg/L,(2.66±0.62)μg/L,(3.08±0.66)μg/L,(3.51±0.74)μg/L];血清miR-451a水平与HAMA评分呈负相关(r=−0.50,P<0.05),血清IGF1R水平与HAMA评分呈正相关(r=0.43,P<0.05);高血压合并焦虑组收缩压[(142.26±18.51)mmHg,(135.29±17.84)mmHg]、舒张压[(84.25±11.30)mmHg,(78.23±10.25)mmHg]、C-反应蛋白[(4.47±0.96)mg/L,(4.16±0.91)mg/L]、IL-6水平[(36.95±6.31)μg/L,(27.48±5.49)μg/L]显著高于高血压组,IL-10水平[(12.34±3.26)ng/L,(16.24±3.91)ng/L]显著低于高血压组(P<0.05);多因素logistic回归分析结果显示,收缩压[OR 95%CI=1.33(1.06,1.67)]、舒张压[OR 95%CI=1.20(1.00,1.45)]、IL-6[OR 95%CI=1.89(1.22,2.93)]、IL-10[OR 95%CI=0.38(0.17,2.93)]、miR-451a[OR 95%CI=0.01(0.00,0.47)]、IGF1R[OR 95%CI=7.62(1.21,48.03)]水平为高血压合并焦虑的影响因素(P<0.05)。结论高血压合并焦虑病人血清中miR-451a低表达,IGF1R高表达,且与病人焦虑程度密切相关。

TRIM45靶向IGF-1R抑制乳癌MCF-7细胞增殖和迁移的机制

目的探究三结构域蛋白45(TRIM45)通过靶向胰岛素样生长因子1受体(IGF-1R)抑制人乳癌MCF-7细胞增殖和迁移的作用机制。方法将人乳癌MCF-7细胞分为TRIM45过表达组、空载对照组及阴性对照组。通过细胞增殖实验及划痕实验进行细胞增殖及迁移能力检测,采用蛋白质免疫印迹(WB)法检测自噬相关蛋白p62、微管相关蛋白Ⅰ轻链3B(LC3B)、自噬相关蛋白8(ATG8)的表达,通过免疫沉淀实验分析TRIM45与IGF-1R的结合,采用WB法检测促增殖蛋白IGF-1R和簇集蛋白(CLU)的表达。结果与空载对照组相比较,TRIM45过表达组不同时间的细胞增殖率及迁移率均显著降低(F=19.87~177.91,P<0.05)。与空载对照组相比较,TRIM45过表达组细胞自噬相关蛋白p62的表达显著降低,LC3B和ATG8的表达显著增加(F=22.97~113.50,P<0.05)。TRIM45可以与IGF-1R结合,并且TRIM45过表达组细胞IGF-1R及CLU蛋白表达较空载对照组显著降低(F=51.06、30.45,P<0.05)。结论TRIM45可以与IGF-1R结合,抑制IGF-1R及CLU的表达,诱导乳癌细胞自噬,抑制乳癌细胞的增殖和迁移能力。

IGF受体1分子上IGF-1结合位点的探讨

为了探讨胰岛素样生长因子受体 1(IGF R1)分子上的胰岛素样生长因子 1(IGF 1)结合位点 ,建立了研究IGF 1与IGF R1相互作用的酵母双杂交模型 ;利用基因体外定点突变的方法 ,构建了 7种IGF R1突变体 ;然后通过报告基因活性的定量分析 ,在酵母双杂交模型中检测了IGF 1与各种IGF R1突变体之间相互作用的大小 ,初步确定了IGF R1分子中IGF 1的结合位点 ,并且IGF R1分子上N2 37、T2 38在与IGF 1结合中起着重要作用 .

沉默IGF1和EGF二受体基因的肝癌HepG2细胞株的抗瘤放疗增敏及机制

目的探讨同时沉默IGF1与EGF二受体基因的抗瘤放疗增敏以及其病理机制。方法按照特定的方式创造出靶向EGFR、IGF1R以及两受体的小分子干扰RNA,并在一定的条件下设定出同所有基因不产生同源的阴性对照质粒,对其进行转染超过48 h之后选择使用射线对肝癌Hep G2细胞株进行照射。在成克隆的研究过程中对细胞的存活分数进行检测,选择使用单击多靶模型与线性二次函数模型两种方式共同制定出细胞存活曲线,进而获取放射生物学参数DO、Dq、N以及α、β、SF2的数值。结果将两个组之间进行对比我们可了解到,其明显控制了细胞增殖以及起到诱导细胞死亡的作用,减缓G1/S期的发展过程,bcl-2与cdk2两者之间呈现出明显的下降趋势,p21与bax则呈上升趋势。并且同时沉默EGFR与IGF1R组与对照组细胞的D0数值则是0.588与2.070 4 Gy;Dq的数值则是0.562 5与2.030 7 Gy;a值则是0.515与0.021 6 Gy-1;SF2值则是0.22与0.619。这一组的DO、Dq以及SF2值全部呈下降趋势,α值则呈上升趋势。结论同时沉默EGFR与IGF1R基因对于肝癌Hep G2细胞株增殖以及死亡起到干扰的效果,并且病理机制也同bcl-2与cdk2等有着直接的联系,结合多种方法对此疾病进行治疗是目前发展前景比较广阔的方式,可在临床上进行推广及使用。

子宫内膜癌组织IGF-1与其受体表达及意义

目的探讨子宫内膜癌组织中胰岛素样生长因子-1(IGF-1)及其受体(IGF-1R)表达及其临床意义。方法采用免疫组织化学SP法检测20例正常子宫内膜组织(对照组)及46例子宫内膜癌组织中IGF-1、IGF-1R的表达。结果IGF-1在对照组和子宫内膜癌组阳性表达率分别为60.00%和60.87%,两者差异无显著性(χ2=0.004,P>0.05);过度阳性表达率分别为0和23.91%,差异有显著性(2χ=4.147,P<0.01);子宫内膜癌组织中IGF-1阳性表达及过度表达与手术病理分期无关(χ2=5.434、4.328,P>0.05),而过度表达在不同病理分级之间的差异有显著性(χ2=7.163,P<0.05)。IGF-1R在两种组织中的阳性表达率分别为70.00%和60.87%,差异无显著性(χ2=0.511,P>0.05);过度表达率分别为0和36.96%,差异有显著性(χ2=8.117,P<0.01);子宫内膜癌组织中IGF-1R阳性表达及过度表达与手术病理分期无关(2χ=5.550、4.369,P>0.05),而在高分化与中、低分化内膜癌组织之间差异有显著性(χ2=8.859、8.584,P<0.05)。结论IGF-1I、GF-1R表达与子宫内膜癌发病有关,并可作为子宫内膜癌预后预测的一个指标。

胰岛素样生长因子1受体在胰腺癌治疗中的机制及进展

胰岛素样生长因子(IGF)1受体(IGF-1R)广泛存在于多种类型的细胞表面,与肿瘤细胞的形成、发展密切相关,也为肿瘤的靶向治疗提供了新的方向。对IGF-1R在胰腺癌中的表达、发生、发展以及IGF-1R作为靶点治疗肿瘤的进展作一综述。

胰岛素样生长因子-I受体异常激活与肝癌靶向治疗

肝细胞恶性转化和癌变过程中,胰岛素样生长因子-I受体(IGF-IR)异常活化。IGF-IR过表达既可作为肝癌早期诊断的标志,又可作为肝癌靶向治疗的新靶点,且具有应用前景。本文对IGF-IR信号通路异常激活及分子靶向治疗肝癌等的研究进展作了综述。

肝细胞恶性转化过程中胰岛素样生长因子-I受体的动态表达与改变

目的观察肝细胞恶性转化过程中胰岛素样生长因子-I受体(IGF-IR)的动态表达与改变特征。方法以2-乙酰氨基芴(2-FAA)喂饲雄性SD大鼠诱发肝癌发生,分别观察肝细胞形态学、肝及血IGF-1R的动态变化。以免疫组化法观察肝组织IGF-1R表达,以RT-PCR扩增IGF-1R mRNA表达片段并经测序证实,从基因转录和蛋白水平上分析与肝细胞恶性转化的相互关系。结果诱癌过程中肝细胞出现颗粒样变性、癌前病变到肝癌形成的动态变化,伴肝核酸代谢旺盛,肝IGF-IR表达异常;肝IGF-IR阳性率(%)、肝IGF-IR mRNA阳性率(%)、肝IGF-IR比浓度(ng/mg肝组织)和血IGF-IR(ng/ml)分别为:对照组0、0、0.63±0.17和1.33±0.47;变性组50、61.1、0.65±0.2和1.51±0.46;癌前组88.9、100、0.66±0.14和1.92±0.29;癌变组100、100、0.96±0.09和2.43±0.57。IGF-IR在转录或蛋白水平上呈梯度表达,癌变组显著高于其他组(P<0.01),且肝和血IGF-IR呈显著正相关(r=0.91,t=14.222,P<0.001)。结论 IGF-1R过表达参与肝细胞癌变,是肝细胞恶性转化的早期标志。

胰岛素样生长因子Ⅰ及其受体在子宫内膜异位症中的表达

目的:探讨胰岛素样生长因子Ⅰ(IGF-Ⅰ)及其受体与子宫内膜异位症的关系。方法:应用免疫组织化学法(常规S-P法)对子宫内膜异位症患者的在位子宫内膜(17例)、异位子宫内膜(30例)进行IGF-Ⅰ及其受体的检测,取25例正常子宫内膜组织作为对照。结果:IGF-Ⅰ及其受体在3组子宫内膜的腺细胞强表达,IGF-Ⅰ在3组子宫内膜间质弱表达,IGF-Ⅰ受体在子宫内膜间质不表达。IGF-Ⅰ在子宫内膜异位症患者的在位子宫内膜、异位子宫内膜的表达均强于对照组正常子宫内膜(P<0.01)。IGF-Ⅰ受体在子宫内膜异位症患者的异位子宫内膜的表达强于其在位子宫内膜和对照组正常子宫内膜(P<0.01)。结论:IGF-Ⅰ在子宫内膜异位症的发生、发展中起促进作用。

胰岛素和胰岛素样生长因子-1及其受体在阿尔茨海默病发病中的作用

至2012年为止,美国大约有540万阿尔茨海默病(AD)患者,并且每69 s就会产生1例AD患者,到2050年,这个时间可能缩短至33 s〔1〕。流行病学调查发现糖尿病患者的AD发病率较无糖尿病者明显升高〔2〕。Akiko等〔3〕研究证实糖尿病患者的认知功能与大脑内的胰岛素信号受损有关。在AD的离体实验及动物实验中均发现胰岛素受体(IR)和胰岛素样生长因子-1受体(IGF-1R)分布异常〔4〕。AD患者的尸解发现大脑中IR、IGF-1R。

FGFR1和IGF1R在肺鳞癌中的表达及其临床意义

目的探讨成纤维生长因子受体1(FGFR1)、胰岛素样生长因子受体1(IGF1R)在肺鳞癌组织中的表达及两者的临床意义。方法采用免疫组化法检测260例肺鳞癌术后患者的癌组织及40例癌旁正常组织中FGFR1、IGF1R的表达,分析两者表达与临床病理特征及预后的关系。采用Kaplan-Meier法进行生存分析,用Cox回归模型分析影响肺鳞癌预后的独立因素。结果 FGFR1、IGF1R在肺鳞癌组织中的阳性表达率分别为51.92%(135/260)、55.4%(144/260),均明显高于癌旁正常组织的32.5%(13/40)、30.0%(12/40),差异均有统计学意义(P<0.05)。FGFR1在肺鳞癌组织中的表达与吸烟、淋巴结转移有关,IGF1R表达仅与淋巴结转移有关(P<0.005)。FGFR1、IGF1R蛋白阳性表达者的中位OS分别为38.21个月、38.48个月,均低于阴性表达者的42.55个月、42.51个月(P>0.05)。Cox多因素分析显示,FGFR1、IGF1R表达及淋巴结转移为肺鳞癌患者术后的独立预后因子。结论 FGFR1、IGF1R均参与了肺鳞癌的发生、发展,并且二者均为肺鳞癌的不良预后指标,并有望成为分子靶向治疗的新靶点。

结直肠腺瘤患者IGF-Ⅰ、IGF-ⅠR的表达及其与血清IGF-Ⅰ水平的关系

背景:胰岛素样生长因子(IGF)系统与多种肿瘤的发生密切相关,但其与结直肠腺瘤(CRA)关系的研究目前相对较少。目的:探讨CRA患者IGF-Ⅰ、IGF-Ⅰ受体(IGF-ⅠR)表达及其与血清1GF-Ⅰ水平的关系。方法:选取2011年6月～2012年10月青岛市市立医院50例CRA、30例结直肠癌(CRC)、20例炎性息肉患者。应用免疫组化SP法检测IGF-Ⅰ、IGF-ⅠR表达,放射免疫法测定血清IGF-Ⅰ水平。结果:炎性息肉组、CRA组、CRC组IGF-Ⅰ、IGF-ⅠR表达阳性率呈递增趋势(P<0.05)。CRC组血清IGF-Ⅰ明显高于炎性息肉组(P=0.018)。CRA患者IGF-Ⅰ、IGF-ⅠR表达以及血清IGF-Ⅰ水平与性别、年龄、息肉大小、息肉数量、息肉部位、息肉组织学类型等均无明显关系(P>0.05)。IGF-Ⅰ、IGF-ⅠR阳性表达的CRA患者血清IGF-Ⅰ水平均显著高于IGF-Ⅰ、IGF-ⅠR阴性表达者(P=0.03;P=0.02)。CRA患者IGF-Ⅰ表达与IGF-ⅠR表达呈正相关(r=0.718,P<0.01)。结论:IGF-Ⅰ、IGF-ⅠR表达联合血清IGF-Ⅰ可能成为评估CRA发展和恶变的重要指标。

胰岛素样生长因子Ⅰ及其受体与梗阻肾纤维化的关系

目的:检测胰岛素样生长因子Ⅰ及其受体在慢性梗阻性肾组织中的分布与表达,分析两者与梗阻肾纤维化之间关系,以进一步探讨两者在梗阻性肾病的发病过程中的作用。方法:实验于2005-06/11在解放军第一七五医院实验室完成。①实验材料:分别收集1991-01/2003-12因上尿路梗阻等原因行患肾切除标本47例和10例因其他原因行肾切除的正常肾组织,患者知情同意。②实验方法:对梗阻性肾组织和正常肾组织采用链菌素生物素-过氧化物酶标记物法进行免疫组织化学染色;采用Van Gieson苦味酸酸性复红染色法行胶原纤维染色。③实验评估:检测胰岛素样生长因子Ⅰ及其受体在梗阻性肾组织和正常肾组织中表达;并分析其表达与梗阻肾纤维化之间的关系。胰岛素样生长因子Ⅰ及其受体阳性细胞数分为4个等级。肾纤维化程度判断分为0～3级。结果:①胰岛素样生长因子Ⅰ及其受体在正常和梗阻肾组织中表达阳性率:胰岛素样生长因子Ⅰ在梗阻肾肾小管和间质中表达阳性率均高于在正常肾组织中表达[在肾小管中差异无显著性意义(P>0.05);在间质中P<0.01];胰岛素样生长因子Ⅰ受体在梗阻肾肾小管和间质中表达阳性率[在肾小管中差异无显著性意义(P>0.05);在间质中P<0.01]。②胰岛素样生长因子Ⅰ及其受体表达与梗阻性肾纤维化之间关系:梗阻肾的间质组织中胰岛素样生长因子Ⅰ表达随梗阻肾纤维化程度加重而增高,不同肾纤维化分级之间的间质中胰岛素样生长因子Ⅰ的表达差异有显著性意义(P<0.05),而不同肾纤维化分级之间的肾小管胰岛素样生长因子Ⅰ及其受体表达和间质胰岛素样生长因子Ⅰ受体表达相比较差异均无显著性意义(P>0.05)。结论:胰岛素样生长因子Ⅰ及其受体异常表达参与梗阻性肾病的病理生理过程,尤其在肾间质纤维增生过程中起着重要作用。

胰岛素样生长因子-1受体在恶性黑色素瘤中的表达及临床意义

目的探讨恶性黑色素瘤组织中胰岛素样生长因子-1受体(insulin-like growth factor-1receptor,IGF-1R)的表达及其临床意义。方法选取经病理检查明确诊断的恶性黑色素瘤石蜡切片26例(恶性黑色素瘤组)及正常色素痣石蜡切片20例(正常色素痣组)。采用EnVision两步法,以兔抗人IGF-1R多克隆抗体检测上述两组IGF-1R的表达情况,并分析恶性黑色素瘤组织中IGF-1R的表达与年龄、性别及有无远处转移的关系。结果恶性黑色素瘤组IGF-1R的阳性表达率为57.7%(15/26),正常色素痣组为25.0%(5/20),两组比较差异有统计学意义(χ2=4.912,P=0.023);恶性黑色素瘤组IGF-1R的高表达与有无远处转移相关(P=0.038),而与性别、年龄无关(P=0.453,P=0.701)。结论 IGF-1R的表达量可以预测原发性恶性黑色素瘤的转移及预后,对恶性黑色素瘤的治疗可能具有一定的指导意义。

脂肪源性干细胞穴位注射对大鼠脑缺血再灌注后胰岛素样生长因子1及其受体表达的影响

目的探讨脂肪源性干细胞(ADSC)穴位注射对大鼠缺血/再灌注损伤后胰岛素样生长因子1(IGF-1)及其受体(IGF-1R)表达的影响。方法线栓法制作大鼠大脑中动脉缺血(MCAO)2 h再灌注模型,大鼠随机分为假手术组、模型组、穴位注射ADSC组(治疗组)、穴位注射0.9%氯化钠注射溶液组(对照组)。治疗组取在大椎、双侧内关穴位注射PKH-26标记ADSC细胞悬液。缺血72 h后NSS法检测神经功能恢复,采用实时荧光定量PCR及免疫组织化学方法检测IGF-1、IGF-1R蛋白和mRNA的表达。结果治疗组可见PKH26标记的ADSC在海马区有表达。与模型组和对照组比较,穴位注射ADSC组NSS评分显著降低(P<0.05),海马区IGF-1、IGF-1R蛋白和mRNA表达显著增加(P<0.05)。结论穴位移植脂肪源性干细胞对大鼠脑缺血再灌注有神经保护作用,其作用机制可能与促进海马区IGF-1和IGF-1R表达有关。

IGF信号通路关键蛋白IGF1、IGF1R和AKT在原发性肺腺癌中的表达及意义

目的检测IGF信号通路关键蛋白IGF 1,IGF 1R和AKT在原发性肺腺癌中的表达,探讨其与临床病理学特征和生存时间的关系。方法采用免疫组化方法和免疫印迹技术检测IGF 1,IGF 1R和AKT在31例原发性肺腺癌及12例良性肺病变组织中的表达。结果IGF 1、IGF 1R和AKT在肺腺癌中的表达率分别为41.9%(13/31)、67.7%(21/31)和51.6%(16/31),显著高于良性肺组织(P值分别为0.0252、0.0016和0.0071)。IGF 1和IGF 1R及IGF 1和AKT在肺腺癌中表达呈显著相关(P值分别为0.0344和0.0179)。晚期肺癌(Ⅲ+Ⅳ)IGF 1和IGF 1R表达显著高于早期(Ⅰ+Ⅱ)(P值分别为0.0109和0.0303)。IGF 1、IGF 1R和AKT在伴有淋巴结转移肺癌中的表达显著高于无淋巴结转移肺癌(P值分别为0.0468、0.0490和0.0443)。低分化肺癌中IGF 1和IGF 1R表达显著高于中或高分化肺癌(P值分别为0.0484和0.0291)。IGF 1和IGF 1R阳性患者的生存时间显著短于阴性者(IGF 1:10比14个月,P=0.0103;IGF 1R:13比26个月,P=0.0056)。IGF 1和IGF 1R是肺腺癌预后的影响因素,AKT无预后意义。结论IGF信号通路关键蛋白IGF 1、IGF 1R和AKT表达在肺腺癌的发生和发展中可能起重要作用,进一步的研究有望展示其在肺癌预后和治疗方面的意义。

人胰岛素样生长因子1受体β结构域蛋白的原核表达及活性检测

目的构建人胰岛素样生长因子1受体(IGF1R)β亚基胞外结构域(ED)和胞内激酶(PKD)结构域的原核表达载体,获得纯化的GST-IGF1Rβ-ED和GST-IGF1Rβ-PKD融合蛋白,并检测其活性。方法用PCR方法从乳腺cDNA文库中扩增IGF1Rβ-ED和GST-IGF1Rβ-PKD基因编码序列,将其正确插入pGEX-KG载体。重组质粒转化大肠杆菌Rossate表达后,用GST-Sepharose 4B珠子纯化融合蛋白,并用Western blot法检测融合蛋白表达,最后用GST pull-down技术检测纯化蛋白与已知蛋白表皮生长因子受体2驱动的细胞运动调节蛋白(MEMO)的相互作用。结果构建得到GST-IGF1Rβ-ED和GST-IGF1Rβ-PKD基因的原核表达载体,双酶切鉴定得到与预期片段大小相符的外源基因插入片段,测序后与目的序列一致;在Rossate菌中诱导表达出与预期位置相符的目的蛋白,并经过Western blot检测,融合蛋白成功表达;纯化得到GST-IGF1Rβ-ED和GST-IGF1Rβ-PKD两个融合蛋白,GST pull-down证明蛋白GST-IGF1Rβ-PKD可以和MEMO相互作用。结论成功克隆GST-IGF1Rβ-ED和GST-IGF1Rβ-PKD基因,并获得活性良好的GST-IGF1Rβ-ED和GST-IGF1Rβ-PKD蛋白。

干预胰岛素样生长因子Ⅰ型受体活化联合抗癌药物抑制肝癌细胞增殖的协同作用分析

目的探讨干预胰岛素样生长因子Ⅰ型受体(IGF-ⅠR)基因转录,对抑制肝癌细胞增殖药物的协同作用。方法以p GPU6/GFP/Neo-IGF-ⅠR-shRNA高效质粒,转染IGF-ⅠR高表达的HBV阳性肝癌细胞PLC/PRF/5和HBV阴性Bel-7404,设空白对照组、阴性对照组和IGF-ⅠR-shRNA干预组;以荧光定量逆转录PCR和Western Blot分析RNA和蛋白表达;以细胞计数试剂盒分析细胞增殖;以流式细胞术、Annexin-V-PE/7-ADD分析细胞周期与凋亡。计量资料组间比较采用t检验,计数资料组间比较采用Fisher确切概率法。结果 IGF-ⅠR shRNA转染肝癌细胞PLC/PRF/5效率为71%、肝癌细胞Bel-7404为90%,2种肝癌细胞IGF-ⅠR在mRNA和蛋白表达水平上同步减少;干预组细胞较阴性对照组均明显抑制,2组间肝癌细胞Bel-7404 72h时抑制率比较差异有统计学意义[(61.5±1.7)%vs(11.2±0.9)%,t=5.493,P<0.05],2组间肝癌细胞PLC/PRF/5 72 h时抑制率比较差异有统计学意义[(63.9±3.9)%vs(9.5±1.1)%,t=19.244,P<0.001]。干预组肝癌细胞Bel-7404凋亡率显著高于空白对照组(35.96%vs 12.16%,P<0.001)和阴性对照组(35.96%vs 9.43%,P<0.001),干预组肝癌细胞PLC/PRF/5凋亡率显著高于空白对照组(44.84%vs 6.62%,P<0.001)和阴性对照组(44.84%vs 4.02%,P<0.001);干预组肝癌细胞Bel-7404和PLC/PRF/5 G0/G1期百分率均明显高于阴性对照组[(59.0±1.3)%vs(48.4±0.8)%,t=12.032,P<0.001;(65.4±0.5)%vs(53.5±0.7)%,t=22.789,P<0.001)];干预组肝癌细胞Bel-7404和PLC/PRF/5周期蛋白cyclin D1表达均明显低于阴性对照组[(59.6±4.7)%vs(90.0±3.4)%,t=7.389,P<0.05;(39.9±0.5)%vs(90.2±14.6)%,t=4.876,P<0.05)];肝癌细胞Bel-7404和PLC/PRF/5干预组与阴性对照组在索拉非尼浓度分别为0、2.5、5、10、20 nmol/L和奥沙利铂浓度分别为0、5、10、20和40μmol/L时的光密度值比较差异均有统计学意义(P值均<0.05)。结论下调IGF-ⅠR基因转录,具有抑制肝癌细胞增殖、改善药物敏感性的协同作用。

新疆维、汉族宫颈鳞癌病变与PI3K、ERK、IGF-1R、ER蛋白表达的关系

目的从蛋白质水平观察子宫颈炎和子宫颈鳞癌组织中磷酸肌醇3激酶(PI3K)、细胞外信号调节激酶(ERK)、胰岛素样生长因子-1型受体(IGF-1R)和雌激素受体(ER)在新疆维吾尔族和汉族妇女中的表达及相关关系。方法收集石蜡包埋宫颈炎组织90份(汉族46份,维吾尔族44份)、子宫颈鳞癌组织224份(汉族36份,维吾尔族188份),采用免疫组织化学SP法鉴定蛋白表达水平。结果子宫颈鳞癌IGF-1R、PI3K阳性表达率(58.04%、92.41%)高于宫颈炎组织(13.33%、57.78%),ER、ERK阳性表达率(22.32%、68.30%)低于宫颈炎组织(63.33%、95.56%);汉族、维吾尔族子宫颈鳞癌IGF-1R和PI3K阳性表达率(69.44%和88.89%,55.85%和93.09%)高于宫颈炎组织(15.22%和54.35%,11.36%和61.36%);汉族、维吾尔族子宫颈鳞癌ER和ERK阳性表达率(13.89%和83.33%,23.94%和65.43%)低于宫颈炎组织(65.22%和93.48%,61.36%和97.73%);ERK在维吾尔族子宫颈鳞癌组织中表达(65.43%)低于汉族(83.33%),差异均有统计学意义(P<0.01)。结论 PI3K、ERK、IGF-1R和ER蛋白表达阳性或缺失与宫颈癌发生关系密切,可作为宫颈癌检测的重要生物指标,ERK蛋白在宫颈癌中的表达存在民族间差异。

沉默IGF-1R表达对子宫内膜癌化疗敏感性的影响及其相关机制研究

目的:将慢病毒载体表达的靶向IGF-1R的干扰片段转染子宫内膜癌细胞HEC-1B,探讨转染前后HEC-1B对顺铂化疗敏感性的改变及可能的潜在机制。方法:构建IGF-1R基因RNAi慢病毒载体,转染HEC-1B细胞并检测转染效率,Real-time PCR及Western blot检测转染前后IGF-1R基因及相关蛋白的表达情况,采用MTT及流式细胞仪分析转染前后细胞增殖率及凋亡的改变。结果:慢病毒载体的转染效率高达78%,转染特异IGF-1R siRNA使内源性IGF-1R mRNA降低85%(P<0.05),蛋白降低91.4%(P<0.05);Akt及Erk的磷酸化水平降低,分别是总Akt及Erk的(17.48±3.31)%与(11.55±3.27)%(P<0.05);转染前后的细胞暴露于不同浓度的顺铂作用48h,当顺铂浓度从10μmol/L增加到40μmol/L时,转染特异IGF-1R siRNA的细胞凋亡率从(22.21±4.63)%增加到(41.92±2.5)%(P<0.05);顺铂的IC50值从21.85μmol/L降到10.58μmol/L(P<0.05),同时伴随着cleaved caspase-9的表达增强(P<0.05)。结论:沉默IGF-1R的表达通过抑制下游信号通路的传导,增强子宫内膜癌对顺铂化疗敏感性。