伴有MYC基因重排和11q异常的高级别B细胞淋巴瘤的临床病理学分析

目的探讨伴有MYC基因重排和11q异常的高级别B细胞淋巴瘤(high grade B cell lymphoma with concurrent MYC rearrangement and 11q aberrations,HGBCL-MYC-11q)的临床病理特征、分子遗传学特征、治疗及预后。方法收集3例HGBCL-MYC-11q的临床资料,行HE、免疫组化EnVision法染色、EBER原位杂交和FISH检测,并复习相关文献。结果患者均为男性,年龄分别为10、61和74岁。Ann Arbor分期均为Ⅳ期。3例均为活检,分别发生于鼻咽部、上咽部和回盲部。3例形态学相似,肿瘤细胞弥漫浸润性生长,细胞中等大或中等偏大,形态较单一,细胞核圆形到稍不规则,染色质细腻,核分裂象易见;1例局灶可见坏死;1例“星空”现象明显。肿瘤细胞均表达CD20、BCL6和MUM1;2例表达CD10,2例表达BCL2;Ki67增殖指数高(例1、例3近100%,例2约70%);不表达CD3、CD30和TDT;EBER原位杂交检测均为阴性。FISH检测3例均见C-MYC基因重排及11q异常,其中1例仅见11q23.3扩增,1例仅见11q24.3缺失。随访时间1~18个月,1例死亡,2例带病生存。结论HGBCL-MYC-11q少见,形态学类似Burkitt淋巴瘤/高级别B细胞淋巴瘤,但同时伴有MYC基因重排和11q异常,应加强对该疾病的认识,提高对这类疾病的精准诊断及鉴别诊断。

同时具有IGH-BCL2和MYC基因重排的B细胞淋巴瘤是一种在临床及病理特征上与伯基特淋巴瘤和弥漫性大B细胞淋巴瘤不同的侵袭性肿瘤

同时具有IGH-BCL2和MYC基因重排的B细胞淋巴瘤,也被称为＂二次打击＂淋巴瘤（double-hit lymphomas,DHL）,是一种具有高度侵袭性、核型复杂以及具有一系列病理形态学特征的少见肿瘤,其形态学特征与伯基特淋巴瘤（BL）、弥漫性大B细胞淋巴瘤（DLBCL）及B淋巴母细胞淋巴瘤/白血病（B-lymphoblastic lymphoma/leukemia,B-LBL）可相互重叠。

FISH检测c-MYC/IgH基因重排在淋巴组织增生性疾病中的意义

目的:探讨c-MYC/IgH基因重排在淋巴组织增生性疾病中的意义及其临床应用价值。方法:收集本院病理科的淋巴组织增生性病变10例,应用EBER原位杂交检测EBV感染情况,荧光原位杂交(FISH)检测淋巴组织增生性疾病c-MYC/IgH基因重排,PCR检测IgH/IgK或TCRγ基因重排,分析FISH技术在淋巴组织增生性疾病中的诊断和鉴别诊断意义。结果:10例淋巴组织增生性病变中仅1例EBV感染,所有病例均未检测到c-MYC/IgH基因重排,部分病例检测到c-MYC/IgH或TCRγ基因单克隆性重排。结论:通过FISH检测c-MYC/IgH基因重排在淋巴组织增生性疾病中的诊断价值尚需进一步探讨。

基于捕获法的靶向测序技术在弥漫大B细胞淋巴瘤IgH基因重排检测中的应用价值

目的探讨基于捕获法的靶向测序技术在弥漫大B细胞淋巴瘤IgH基因克隆性重排检测中的应用价值。方法收集2020年3月~2022年1月苏州大学附属第一医院送检的DLBCL标本99例,提取患者基因组DNA,使用基于捕获法的靶向测序技术进行IgH基因克隆性重排检测。结果27.3%(27/99)患者检测到IgH基因完全IgHV-IgHD-IgHJ重排,50.5%(50/99)患者检测到IgH基因不完全IgHD-IgHJ重排,IgH基因克隆性重排联合检出率为66.7%(66/99)。27例患者检测到32种IgHV-IgHD-IgHJ重排,50例患者检测到52种IgHD-IgHJ重排,在IgHV-IgHD-IgHJ重排中,IgHV3、IgHD3和IgHJ4家族基因的取用频率最高,在IgHD-IgHJ重排中,IgHD3和IgHJ4家族基因的取用频率最高。3例患者捕获到未知IgH基因融合伴侣,其中2例为MIR4507-IgH融合,1例为IRF8-IgH融合。结论基于捕获法的靶向测序技术不仅可以检测IgH基因克隆性重排具体方式,还能发现IgH基因未知融合伴侣,对DLBCL诊断及个体化治疗策略制定具有重要意义。

用PCR方法检测B细胞淋巴瘤克隆性IgH基因重排

用ＰＣＲ方法检测克隆性ＩｇＨ基因重排正在成为Ｂ细胞淋巴瘤基因诊断的有效手段。与Ｓｏｕｔｈｅｒｎ分析法相比，前者有明显的优点：快速简便，标本用量少并可用于石蜡切片，无放射性危害等。ＰＣＲ所用引物是辨认ＩｇＨ基因可变区（Ｖ）和连接区（Ｊ）中存在的相对保守...

原发性睾丸恶性淋巴瘤克隆性IgH基因重排的检测

目的 :探讨原发性睾丸淋巴瘤克隆性IgH基因重排的检测方法。方法 :用半巢式PCR方法和聚丙烯凝胶 (PAGE) 银染法检测 14例睾丸恶性淋巴瘤的IgH基因重排。结果 :与免疫组化对照 ,PCR检测的睾丸原发性B细胞淋巴瘤FR3A的检出测率为 85 71% ,FR2的检出率为 6 4 2 9% ,而二者的综合检出率为 10 0 % ,互补性较强。结论 :半巢式PCR方法及PAGE 银染法对于原发性睾丸B细胞淋巴瘤IgH基因的检出率有较高的灵敏度 ,FR3A和FR2引物的共同应用可以有效提高综合检出率。在目前情况下 ,应用PCR方法来鉴别恶性淋巴瘤 ,必须结合HE形态和免疫表型等综合判断。

甲状腺原发MALT淋巴瘤12例临床病理、免疫表型及IgH基因重排研究

目的:观察甲状腺原发MALT淋巴瘤的临床病理表现、免疫组织表型和免疫球蛋白重链(IgH)基因重排情况。方法:对12例甲状腺原发MALT淋巴瘤进行回顾性研究,包括临床病理表现、免疫表型(CD20、CD45RO、CD5、CD10、CyclinD1、bcl-2、κ、λ)分析及多聚酶链反应(PCR)检测IgH基因重排。结果:按2001新版WHO关于淋巴造血组织肿瘤分类,12例均被确诊为MALT淋巴瘤。其中男2例,女10例,男女之比为1:5,中位年龄为63岁。免疫表型检测:所有病例之瘤细胞均表达B细胞分化抗原CD20;4例(33.3%)检测出免疫球蛋白轻链限制性表达;bcl-2阳性1例;CD45RO、CD5、CD10和CyclinD1均为阴性。8/12例(66.7%)检测出IgH基因克隆性重排。随访11例,失访1例,死亡3例(25%),存活8例(66.7%)。结论:甲状腺原发MALT淋巴瘤属惰性淋巴瘤,需要结合其病理组织形态、免疫组织化学染色及必要的分子生物学技术才能作出正确的诊断。

PCR检测非霍奇金淋巴瘤IgH和TCRβ基因重排

目的 探讨PCR方法检测IgH和TCRβ基因重排在非霍奇金淋巴瘤 (NHL)诊断中的临床意义。 方法 用PCR方法检测 40例非霍奇金淋巴瘤和 5例慢性淋巴结炎的基因重排情况。结果 2 0例B细胞NHL中检测出 19例IgH基因重排 ,2 0例T细胞NHL中检测出 17例TCRβ基因重排。 结论 PCR方法检测NHL中IgH和TCRβ基因重排具有敏感、特异的优点 ,在非霍奇金淋巴瘤的诊断中具有重要价值。

血浆游离DNA IgH和TCRγ基因克隆性重排在非霍奇金淋巴瘤诊断中的意义

目的探讨非霍奇金淋巴瘤(NHL)患者检测外周血血浆游离DNA免疫球蛋白重链基因(IgH)和T细胞受体gamma基因(TCRγ)克隆性重排的意义。方法对235例NHL患者进行了254例次血浆游离DNA提取,通过globin基因确定血浆游离DNA存在,通过PCR方法检测IgH(FR3A/VLJ H)和TCRγ(TVG/TJX)基因克隆性重排。并与病理组织DNA及外周血单个核细胞DNA基因克隆性重排结果同时进行对比观察。结果初发及复发患者220例中219例均成功提取到血浆游离DNA。B-NHL患者140例中IgH重排阳性118例(84.3%),TCRγ重排阳性1例(0.7%);T-NHL患者80例中TCRγ重排阳性44例(55%),IgH重排阳性2例(2.5%),IgH和TCRγ重排同时阳性4例(5%);34例临床缓解病例中仅3例(8.8%)提取出血浆游离DNA,但IgH和TCRγ重排均阴性。56例NHL患者血浆游离DNAIgH或TCRγ基因重排结果与病理组织结果一致(P>0.05)。67例NHL患者血浆游离DNA与外周血单个核细胞DNAIgH和TCRγ基因重排结果显示,血浆游离DNA阳性率高于单个核细胞DNA(P<0.05)。结论采用血浆游离DNA检测NHL患者IgH和TCRγ基因克隆性重排具有较高的临床诊断价值,与病理标本高度一致;标本取材简单方便,对NHL的治疗反应监测也有重要参考价值。

MALToma Ig重链蛋白、IgH基因重排/断裂检测的临床意义

目的探讨Ig重链蛋白、IgH基因重排/断裂在黏膜相关淋巴组织淋巴瘤(mucosa-associated lymphoid tissue lymphoma,MALToma)诊断中的应用价值。方法选取40例MALToma作为实验组,15例反应性淋巴组织增生(reactive lymphoid hyperplasia,RLH)作为对照组,应用免疫组化、PCR、FISH技术分别检测两组中Ig重链蛋白、IgH基因重排、IgH基因断裂情况。结果(1)Ig重链蛋白表达根据免疫组化结果可分为三种模式:单种Ig重链蛋白表达(模式Ⅰ)、Ig重链蛋白全阴性(模式Ⅱ)、多种Ig重链蛋白表达(模式Ⅲ)。实验组模式Ⅰ/Ⅱ的阳性率(87.5%)显著高于对照组(0)(P<0.01)。(2)实验组IgH基因重排、IgH基因断裂的阳性率分别为72.5%(29/40)、32.5%(13/40),而对照组未检出IgH基因重排、IgH基因断裂(P<0.01,P<0.05)。(3)Ig重链蛋白模式Ⅰ/Ⅱ和IgH基因重排联合检测以及Ig重链蛋白模式Ⅰ/Ⅱ、IgH基因重排和IgH基因断裂联合检测的阳性率均高达97.5%。(4)在Ig重链蛋白模式Ⅱ中,有9例检出IgH基因断裂(90%);在模式Ⅰ/Ⅲ中,仅有4例检出IgH基因断裂(13.3%),两组相比差异有统计学意义(P<0.01)。Ig重链蛋白表达和IgH基因断裂呈正相关(r s=0.323,P<0.05)。结论联合检测Ig重链蛋白表达模式和IgH基因重排可有效辅助鉴别MALToma和RLH;IgH基因断裂可能与Ig重链蛋白表达缺失高度相关。

非霍奇金淋巴瘤bcl-2/IgH基因重排及在微小残留病变检测中的应用

目的：探索ｂｃ１ － ２ 基因重排在非霍奇金淋巴瘤（ Ｎ Ｈ Ｌ） 的发生及演变中的作用，以ｂｃ１ － ２／ Ｉｇ Ｈ 重排为克隆标志，建立敏感的检测淋巴瘤微小残留病变的方法。方法：多聚酶链反应（ Ｐ Ｃ Ｒ） 检测ｂｃｌ－ ２／ Ｉｇ Ｈ 基因重排，系列稀释试验检测该方法的灵敏度。结果：９ 种恶性淋巴瘤细胞系中， Ｓｕ － Ｄ Ｈ Ｌ－ ４， Ｓｕ － Ｄ Ｈ Ｌ－ ６ 有ｂｃ１ － ２／ Ｉｇ Ｈ 基因重排，系列稀释试验检测该方法的灵敏度为１ ∶１０５ 。２９ 例 Ｎ Ｈ Ｌ 石蜡包埋的组织标本中，共检出６ 例有ｂｃ１－ ２ 基因重排，其中滤泡型 Ｎ Ｈ Ｌ（ Ｆ－ Ｎ Ｈ Ｌ） ４ 例（３６ ．４ ％ ） ， 弥漫型 Ｎ Ｈ Ｌ（ Ｄ－ Ｎ Ｈ Ｌ） ２ 例（１８．２ ％ ） ，全部在 Ｂ 细胞性 Ｎ Ｈ Ｌ 中检出。１６ 例 Ｆ－ Ｎ Ｈ Ｌ 患者中，４ 例外周血和骨髓中同时检出ｂｃ１ － ２／ Ｉｇ Ｈ 基因重排，化疗达 Ｃ Ｒ 后依然存在。结论：ｂｃ１－２ 基因重排主要与低度恶性的 Ｂ 细胞性淋巴瘤有关，重排方式以ｂｃ１ － ２（ Ｍ Ｂ Ｒ）／ Ｉｇ Ｈ 为主。ｂｃ１ － ２ 基因重排的检测为滤泡性淋巴瘤微小残留病变的检测提供了一个快速、敏感、特异的方法，对疾病的分期、疗效和预后的评估有一定的临?

Castleman病10例IgH基因重排检测结果分析

采用PCR技术检测10例Castleman病(CD)患者淋巴结组织免疫球蛋白重链(IgH)基因重排情况,免疫组化法观察其细胞表型;对7例患者进行96个月随访。结果1例IgH基因重排阳性,24个月时确诊为B系非霍奇金淋巴瘤,3个月后死亡;6例基因重排阴性,其中3例10～85个月死亡,余3例随访至今仍存活。提示CD可能不是一种单纯的良性淋巴组织增生性疾病,而为交界性具有恶变潜能的疾病,特别是多灶性CD(MCD)。组织学判断CD的恶变倾向困难,基因重排对判定CD的病变性质有重要作用。

IgH基因重排在B淋巴瘤微小残留病中的应用

目的 探讨IgH基因重排在B细胞淋巴瘤临床诊治中的应用。方法 应用半巢式PCR技术对IgH基因的CDRⅡ区和CDRⅢ区进行基因重排检测。共检测 4 5例骨髓标本。其中正常标本 8例 ,淋巴瘤标本 37例 (B细胞淋巴瘤 2 7例 ,T细胞淋巴瘤 10例 )。结果 8例正常标本未检测到FR2A或FR3A的重排 ;2 7例B细胞淋巴瘤中 ,2 3例 (85 .2 % )可检测到FR2A或FR3A重排 ,其中FR2A重排 16例 (5 9.3% ) ,FR3A重排 2 0例 (74 .1% ) ,FR2A、FR3A均有重排者 13例 (48.1% ) ;10例T淋巴瘤中FR2A重排 1例 ,FR3A重排 3例。骨髓穿刺检查 :2 7例B淋巴瘤中 5例原幼淋细胞 >5 % ,FR2A和FR3A阳性各 4例 ;2 2例原幼淋细胞 <5 %者 ,FR2A阳性 12例 ,FR3A阳性 16例。

霍奇金淋巴瘤组织中H/RS细胞与其背景细胞的微切割及其IgH基因重排检测

目的从基因水平探讨霍奇金淋巴瘤(HL)组织中H/RS细胞(Hodgkin and Reed-Sternberg cells)是否起源于B细胞、H/RS细胞的克隆性以及与背景淋巴细胞的相互关系。方法对33例经典霍奇金淋巴瘤(cHL)石蜡刮片组织进行IgH基因重排分析,并对其中6例重排阳性的病例经B细胞特异性激活蛋白(BSAP)免疫标记,将标记阳性的H/RS细胞和背景淋巴细胞进行微切割后进一步行IgH基因重排分析。结果16例石蜡刮片组织IgH基因重排阳性。对6例经BSAP标记的cHL成功进行了微切割,其中19管H/RS细胞中,有14管出现重排阳性,细胞数目不同的各管阳性率无显著性差异(P=0.290);12管背景淋巴细胞有2管出现重排阳性,H/RS细胞与背景淋巴细胞的阳性率有显著性差异(P=0.002)。结论支持H/RS细胞来源于B细胞的理论,认为部分背景淋巴细胞可能具有瘤性增生活性,参与H/RS细胞的前体细胞组成。

不同临床期多发性骨髓瘤患者骨髓瘤克隆IgH基因重排研究

为探讨多发性骨髓瘤（Ｍｕｌｔｉｐｌｅｍｙｅｌｏｍａ，ＭＭ）平台期脱逸机制，以克隆性ＩｇＨ基因重排作为骨髓瘤细胞克隆的基因标志，应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）基因扩增结合扩增产物直接测序技术分析不同临床期ＭＭ骨髓瘤细胞克隆ＩｇＨ基因重排方式。结果２３例ＭＭ中１８例检测到克隆性ＩｇＨ基因重排，不同患者的重排呈多样性，同一患者不同临床期骨髓瘤细胞具有相同的ＩｇＨ基因重排，３例患者ＰＣＲ扩增产物直接测序证实ＭＭ在病情演变过程中骨髓瘤细胞克隆ＩｇＨ基因未发生突变或碱基置换。结论：ＭＭ平台期脱逸过程中。

不明原因发热患者检测淋巴细胞IgH和TCR基因重排的意义

目的:探讨不明原因发热(FUO)患者淋巴细胞免疫球蛋白重链(Ig H)和T细胞受体-γ(TCR-γ)基因重排的临床意义。方法:采用半巢式PCR方法检测110例FUO患者骨髓淋巴细胞Ig H和TCR-γ基因重排的阳性率。结果:84例淋巴瘤发热患者中,Ig H基因重排阳性34例,TCR-r基因重排阳性29例,两者阳性率达75%;26例非淋巴瘤发热患者中,Ig H基因重排阳性0例,TCR-r基因重排阳性1例,基因重排阳性率3.8%,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:对于FUO患者行基因重排有助于淋巴瘤的早期诊断,特别是对无法取得病理组织的患者意义更大。

24例儿童非霍奇金淋巴瘤IgH和TCR基因重排的研究

目的检测２４例儿童非霍奇金淋巴瘤（ＮＨＬ）ＩｇＨ和ＴＣＲ基因重排，以便选择恰当的引物组合用于ＮＨＬＶＩ期患儿微小残留病（ＭＲＤ）的检测。方法以Ｃｈｅｌｅｘ１００为介质，从初诊的ＮＨＬ患儿病理切片中提取ＤＮＡ，采用聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术检测ＩｇＨ、ＴＣＲβ、ＴＣＲδ和ＴＣＲγ基因重排。结果在ＢＮＨＬ中，ＩｇＨ、ＴＣＲβ、ＴＣＲδ和ＴＣＲγ基因重排的检出结果分别为１０／１３（７７％）例、１３／１３（１００％）例、４／１３（３１％）例和８／１３（６２％）例；在ＴＮＨＬ中，上述不同基因重排的检出结果分别为３／１１（２７％）例、１０／１１（９１％）例、３／１１（２７％）例和３／１１（２７％）例。在１３例ＢＮＨＬ中，用ＴＣＲγ和ＴＣＲβ中的Ｄ１Ｊ２引物组合至少可检出有单一条带的有１１例（８５％），再加ＩｇＨ引物时可达１３例（１００％）。而在１１例ＴＮＨＬ中，用ＴＣＲγ和ＴＣＲβ中的Ｄ２Ｊ２引物组合至少可检出单一条带的有８例（７３％），再增加其他引物，不能显著提高单一条带的检出率。结论可用ＴＣＲγ和ＴＣＲβＤ１Ｊ１基因做为ＢＮＨＬ的ＭＲＤ检测标记，必要时加用ＩｇＨ基因重排；选用ＴＣＲγ和ＴＣＲβＤ２Ｊ２基因?

小儿急性淋巴细胞白血病IgH及TCR γ基因重排研究

应用ＰＣＲ对３３例小儿急性淋巴细胞白血病（ＡＬＬ）进行免疫球蛋白重链（ＩｇＨ）及Ｔ细胞受体γ（ＴＣＲγ）基因重排研究，以探讨该２种重排在小儿ＡＬＬ的发生规律及与免疫分型的关系。结果显示：ＩｇＨ阳性１９例（５７．６％），ＴＣＲγ阳性１０例（３０．３％）。有７例ＩｇＨ及ＴＣＲγ均呈阳性，其中５例来自Ｂ系或Ｔ系分化早期的淋巴细胞白血病，提示在儿童初发淋巴细胞白血病中，ＩｇＨ基因重排的发生率明显高于ＴＣＲγ基因重排，且在免疫表型为分化早期的Ｔ或Ｂ淋巴细胞白血病中，并存上述２种基因重排的可能性很大。

急性非淋巴细胞白血病IgH、TCRr基因重排的检测

研究急性非淋巴细胞白血病（ANLL）基因分型和微小残留病（MRD）的检测方法，选择IgH、TCRr基因重排标记．用PCR技术，对31例ANLL患者进行检测．结果：IgH阳性12．9％（4／31），TCRr阳性6．45％（2／31），表明ANLL中存在IrH和TCRr基因重排．对MRD的研究有一定的临床意义．