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Link between mutations in ACVRL1 and PLA2G4A genes and chronic intestinal ulcers:A case report and review of literature
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作者 Yong-Jing Tang Jian Zhang +7 位作者 Jie Wang Ren-Dong Tian Wei-Wei Zhong Ben-Sheng Yao Bing-Yu Hou Ying-Hua Chen Wei He Yi-Huai He 《World Journal of Gastrointestinal Surgery》 SCIE 2024年第3期932-943,共12页
BACKGROUND Genetic factors of chronic intestinal ulcers are increasingly garnering attention.We present a case of chronic intestinal ulcers and bleeding associated with mu-tations of the activin A receptor type II-lik... BACKGROUND Genetic factors of chronic intestinal ulcers are increasingly garnering attention.We present a case of chronic intestinal ulcers and bleeding associated with mu-tations of the activin A receptor type II-like 1(ACVRL1)and phospholipase A2 group IVA(PLA2G4A)genes and review the available relevant literature.CASE SUMMARY A 20-year-old man was admitted to our center with a 6-year history of recurrent abdominal pain,diarrhea,and dark stools.At the onset 6 years ago,the patient had received treatment at a local hospital for abdominal pain persisting for 7 d,under the diagnosis of diffuse peritonitis,acute gangrenous appendicitis with perforation,adhesive intestinal obstruction,and pelvic abscess.The surgical treat-ment included exploratory laparotomy,appendectomy,intestinal adhesiolysis,and pelvic abscess removal.The patient’s condition improved and he was dis-charged.However,the recurrent episodes of abdominal pain and passage of black stools started again one year after discharge.On the basis of these features and results of subsequent colonoscopy,the clinical diagnosis was established as in-flammatory bowel disease(IBD).Accordingly,aminosalicylic acid,immunotherapy,and related symptomatic treatment were administered,but the symptoms of the patient did not improve significantly.Further investigations revealed mutations in the ACVRL1 and PLA2G4A genes.ACVRL1 and PLA2G4A are involved in angiogenesis and coagulation,respectively.This suggests that the chronic intestinal ulcers and bleeding in this case may be linked to mutations in the ACVRL1 and PLA2G4A genes.Oral Kangfuxin liquid was administered to promote healing of the intestinal mucosa and effectively manage clinical symptoms.CONCLUSION Mutations in the ACVRL1 and PLA2G4A genes may be one of the causes of chronic intestinal ulcers and bleeding in IBD.Orally administered Kangfuxin liquid may have therapeutic potential. 展开更多
关键词 Intestinal ulcers Crohn’s disease Ulcerative colitis Activin A receptor type ii-like 1 Phospholipase A2 group 4A Case report
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polo样激酶1、RNA聚合酶Ⅱ亚基A在人脑胶质瘤中的表达及与预后的关系
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作者 覃重桥 姜又胜 朱华泉 《癌症进展》 2024年第11期1196-1199,1246,共5页
目的 探讨polo样激酶1(PLK1)、RNA聚合酶Ⅱ亚基A(POLR2A)在人脑胶质瘤(BG)中的表达及与预后的关系。方法 选取86例BG患者作为观察组,另选取30例非肿瘤脑疾病患者作为参照组,收集观察组患者的BG组织和参照组患者的非肿瘤脑组织。比较两... 目的 探讨polo样激酶1(PLK1)、RNA聚合酶Ⅱ亚基A(POLR2A)在人脑胶质瘤(BG)中的表达及与预后的关系。方法 选取86例BG患者作为观察组,另选取30例非肿瘤脑疾病患者作为参照组,收集观察组患者的BG组织和参照组患者的非肿瘤脑组织。比较两组患者PLK1、POLR2A表达情况和不同临床特征BG患者的BG组织中PLK1、POLR2A的阳性表达情况;比较不同PLK1、POLR2A表达情况BG患者的生存情况;采用Cox回归模型分析BG患者预后的影响因素。结果 观察组患者PLK1、POLR2A阳性表达率分别高于参照组,差异均有统计学意义(P﹤0.05)。低分化BG患者的BG组织中PLK1、POLR2A阳性表达率均高于中高分化患者,差异均有统计学意义(P﹤0.05)。PLK1、POLR2A阳性表达患者的中位生存时间均明显短于PLK1、POLR2A阴性表达患者,差异均有统计学意义(P﹤0.01)。Cox多因素回归分析结果显示,低分化、PLK1阳性表达、POLR2A阳性表达均为BG患者预后的独立危险因素(P﹤0.05)。结论 BG患者PLK1、POLR2A呈高表达,PLK1、POLR2A高表达BG患者中位生存时间缩短,低分化、PLK1阳性表达、POLR2A阳性表达均为BG患者预后的独立危险因素。 展开更多
关键词 POLO样激酶1 RNA聚合酶Ⅱ亚基A 脑胶质瘤 预后
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微波消解-金纳米星比色法快速检测婴幼儿食品中的Co(II)
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作者 王永存 王素燕 《中国乳品工业》 CAS 北大核心 2023年第10期60-64,共5页
文章建立了一种利用金纳米星粒子(GNSs)作为探针快速检测婴幼儿食品中Co(II)含量的方法,首先使用微波消解对检测样品进行前处理,然后基于钴离子引发类芬顿反应刻蚀GNSs导致粒子形貌及溶液发生改变的原理,通过比色法实现了对婴幼儿食品中... 文章建立了一种利用金纳米星粒子(GNSs)作为探针快速检测婴幼儿食品中Co(II)含量的方法,首先使用微波消解对检测样品进行前处理,然后基于钴离子引发类芬顿反应刻蚀GNSs导致粒子形貌及溶液发生改变的原理,通过比色法实现了对婴幼儿食品中Co(II)的高灵敏检测。结果表明:Co(II)浓度在100 pmol/L~20μmol/L范围内与GNSs溶液的局部表面等离子体共振峰(LSPR)吸收峰的波长差Δλ具有良好的线性关系(R2=0.995),对婴幼儿食品样品中Co(II)含量检测表现出良好的重现性和准确性(RSD<5%)。肉松中钴含量最高,其平均值高达0.3285 mg/kg,其次是鱼肠和奶酪棒,蔬菜泥和水果泥中钴含量较低。食品安全国家标准只规定了婴幼儿食品中铅、汞、砷、锡的限量值,而对于钴元素未设定限量值,本研究可为今后制定营养素或污染物限量标准提供参考依据,以提高婴幼儿食品的质量和安全水平。 展开更多
关键词 金纳米星 婴幼儿食品 CO(II) 比色检测 类芬顿反应
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孕中晚期胰岛素样生长因子水平及静脉血流改变与胎儿宫内生长受限关系
4
作者 王璇 韩燕媚 原二芳 《中国计划生育学杂志》 2023年第5期1156-1160,共5页
目的:研究孕中晚期胰岛素样生长因子-Ⅰ(IGF-Ⅰ)、胰岛素样生长因子-Ⅱ(IGF-Ⅱ)水平及静脉血流改变与胎儿宫内生长受限(FGR)的关系。方法:选取本院2018年4月-2021年3月诊治的53例孕中晚期胎儿FGR孕妇(FGR组)临床资料,同期产前检查健康... 目的:研究孕中晚期胰岛素样生长因子-Ⅰ(IGF-Ⅰ)、胰岛素样生长因子-Ⅱ(IGF-Ⅱ)水平及静脉血流改变与胎儿宫内生长受限(FGR)的关系。方法:选取本院2018年4月-2021年3月诊治的53例孕中晚期胎儿FGR孕妇(FGR组)临床资料,同期产前检查健康孕中晚期孕妇62例(对照组)。收集孕妇一般资料,并检测血清和羊水中IGF-Ⅰ、IGF-Ⅱ水平,采用彩色多普勒超声检测胎儿静脉血流相关参数,分析IGF-Ⅰ、IGF-Ⅱ水平以及静脉血流变化与FGR的关系。结果:FGR组羊水IGF-Ⅰ、IGF-Ⅱ水平以及血IGF-Ⅰ水平均低于对照组(P<0.05),两组血IGF-Ⅱ水平无差异(P>0.05);FGR组胎儿S波流速(S)、A谷流速(A)均低于对照组,阻力指数(RI)RI、搏动指数(PI)PI以及收缩期、舒张期比值(S/D)S/D水平均高于对照组(均P<0.05);logistic回归分析,羊水IGF-Ⅰ、IGF-Ⅱ,及血流参数RI、PI、S/D是胎儿FGR发生的独立危险因素(P<0.05);Pearson相关性分析,羊水IGF-Ⅰ、IGF-Ⅱ分别与RI、PI、S/D均呈负相关(P<0.05);受试者工作特征曲线ROC曲线分析,羊水IGF-Ⅰ、IGF-Ⅱ,及血流参数RI、PI、S/D联合预测曲线下面积AUC(0.964)和敏感度(98.1%)最高(P<0.05)。结论:孕中晚期羊水IGF-Ⅰ、IGF-Ⅱ,以及胎儿静脉血流参数异常变化为胎儿FGR危险因素,临床可加以关注并可作为预测FGR的早期依据。 展开更多
关键词 宫内生长受限 孕中晚期 胰岛素样生长因子-Ⅰ 胰岛素样生长因子-Ⅱ 静脉血流参数 预测 危险因素
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肝癌、癌旁肝组织IGF-Ⅱ、IGF-Ⅱ受体及CSF-1受体/c-fms癌基因产物的表达 被引量:3
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作者 杨冬华 刘为纹 +6 位作者 顾健人 刘尚廉 万大方 马安卿 蒋惠秋 李岱宗 李宏年 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 1991年第6期517-524,共8页
本文采用免疫组织化学(ABC)法、Western印迹法和Northern印迹法从细胞、蛋白及转录水平观察17例肝癌及癌旁肝组织中IGF-Ⅱ、IGF-Ⅱ受体和CSF-1受体/c-fms癌基因产物的表达。结果表明,肝癌组织中3种基因产物的表达水平显著高于正常肝组织... 本文采用免疫组织化学(ABC)法、Western印迹法和Northern印迹法从细胞、蛋白及转录水平观察17例肝癌及癌旁肝组织中IGF-Ⅱ、IGF-Ⅱ受体和CSF-1受体/c-fms癌基因产物的表达。结果表明,肝癌组织中3种基因产物的表达水平显著高于正常肝组织;癌旁肝组织中IGF-Ⅱ和IGF-Ⅱ受体的表达水平显著高于肝癌组织;肝癌及癌旁肝组织IGF-Ⅱ基因呈胚胎型表达特点。但是,肝癌组织中CSF-1受体基因表达则显著高于癌旁肝组织。由此提示3种基因产物异常的过量表达与肝癌细胞自分泌生长刺激机制有关。 展开更多
关键词 肝肿瘤 IGF CSF 受体 癌旁 肝组织
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高加速度环境作用颞下颌关节软骨基质成分与相关生长因子及炎性因子的变化 被引量:2
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作者 栗洪师 陈新 +2 位作者 冯岩 尹音 曹均凯 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2015年第11期1663-1667,共5页
背景:强大的加速性能可产生持续性高正加速度(+Gz),使颞下颌骨关节内部受到各种方向的压力和撞击,引起微小创伤,进而引发颞下颌关节紊乱病症。目的:观察颞颌关节紊乱后软骨关节基质成分Ⅱ型胶原、多糖聚糖体、胶原酶以及胰岛素样生长因... 背景:强大的加速性能可产生持续性高正加速度(+Gz),使颞下颌骨关节内部受到各种方向的压力和撞击,引起微小创伤,进而引发颞下颌关节紊乱病症。目的:观察颞颌关节紊乱后软骨关节基质成分Ⅱ型胶原、多糖聚糖体、胶原酶以及胰岛素样生长因子1、转移生长因子β1、肿瘤坏死因子α、白细胞介素2与白细胞介素3的变化。方法:建立不同持续性正高加速度(+Gz)环境和作用时间下的大鼠模型,分成阴性对照组,+5 G加速度组,+10 G加速度组。按不同+Gz值进行正高加速度模拟处理,离心5 min,4 d/周,每天连续离心5次,共持续3周;阴性对照组大鼠按相同时间和频次只在离心机的固定装置上固定5 min,不做持续高正加速度离心处理,每天离心前所有动物均空腹12 h。分离并体外培养各组大鼠的颞下颌软骨细胞,提取总蛋白,Western Blot检测。结果与结论:与阴性对照组比较,在持续性高加速度下,颞下颌关节软骨细胞的软骨基质成分Ⅱ型胶原、多糖聚糖体、胶原酶以及胰岛素样生长因子1、转移生长因子β1明显减少,肿瘤坏死因子α、白细胞介素2与白细胞介素3显著增高。结果说明在持续性高正加速度下,颞下颌关节软骨基质成分受到严重影响,修复能力下降,炎症反应增加。 展开更多
关键词 组织构建 软骨组织工程 高加速度 Ⅱ型胶原 多糖聚糖体 胶原酶 胰岛素样生长因子1 转移生长因子Β1 肿瘤坏死因子α 白细胞介素2 白细胞介素3
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哲罗鱼胰岛素样生长因子-II的原核表达与活性分析 被引量:4
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作者 吴秀梅 徐黎明 +4 位作者 赵景壮 刘淼 曹永生 卢彤岩 尹家胜 《中国水产科学》 CAS CSCD 北大核心 2015年第2期243-249,共7页
在鱼类胚胎发育过程中,胰岛素样生长因子-II(insulin-like growth factors-II,IGF-II)起着关键的作用。本研究根据Gen Bank收录的鲑鳟鱼IGF-II基因序列设计引物,以哲罗鱼(Hucho taimen)肝RNA提取物为模板,利用RT-PCR方法扩增出哲罗鱼IGF... 在鱼类胚胎发育过程中,胰岛素样生长因子-II(insulin-like growth factors-II,IGF-II)起着关键的作用。本研究根据Gen Bank收录的鲑鳟鱼IGF-II基因序列设计引物,以哲罗鱼(Hucho taimen)肝RNA提取物为模板,利用RT-PCR方法扩增出哲罗鱼IGF-II基因开放阅读框。将目的基因IGF-II与原核表达载体p SUMO连接构建出重组表达载体p SUMO-IGF。将该重组质粒转化到大肠杆菌Rosetta中进行目的蛋白的诱导表达。SDS-PAGE电泳分析显示,约在40 k D处含有清晰的条带,与预期结果相符;目的蛋白以包涵体形式存在。对包涵体进行变性/复性后获得较纯的目的蛋白,利用ELISA和MTT方法对目的蛋白进行免疫学活性及生物学活性分析。ELISA结果显示该目的蛋白能够与商品化的抗鲑鳟鱼IGF-II的抗体发生特异性反应,并且呈现抗原浓度依赖性,该结果说明本研究获得了具有良好免疫原性的IGF-II蛋白;MTT方法测定IGF-II蛋白对鲤(Cyprinus carpio)上皮细胞(epitheliaoma papulosum cyprini,EPC)和虹鳟(Oncorhynchus mykiss)性腺细胞(rainbow trout gonad,RTG-2)的增殖效果来鉴定IGF-II蛋白的生物学活性,结果显示所表达的哲罗鱼IGF-II蛋白能够有效的刺激EPC细胞和RTG-2细胞增殖。该结果表明利用原核表达系统获得的哲罗鱼IGF-II蛋白具有良好的生物学活性。本研究为哲罗鱼的生长模式和生长繁殖的研究奠定了基础。 展开更多
关键词 胰岛素样生长因子-II 哲罗鱼 生物活性 MTT
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测定心衰患者血清胰岛素样生长因子Ⅱ和肾上腺髓质素的意义 被引量:5
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作者 蔡建林 季乃军 +5 位作者 梅益斌 樊必夫 王成尧 童丽军 陈东海 李付远 《心血管康复医学杂志》 CAS 2004年第1期33-35,共3页
目的:探讨慢性心力衰竭患者血清胰岛素样生长因子Ⅱ(IGFⅡ)和肾上腺髓质素(ADM)的变化及其临床意义。方法:用放射免疫法测定了92例慢性心力衰竭(CHF)患者和40例非慢性心力衰竭患者的血清IGF Ⅱ和ADM水平,并进行对照统计分析。结果:CHF... 目的:探讨慢性心力衰竭患者血清胰岛素样生长因子Ⅱ(IGFⅡ)和肾上腺髓质素(ADM)的变化及其临床意义。方法:用放射免疫法测定了92例慢性心力衰竭(CHF)患者和40例非慢性心力衰竭患者的血清IGF Ⅱ和ADM水平,并进行对照统计分析。结果:CHF组患者血清IGFⅡ和ADM水平均显著高于对照组(P<0.01),相互间呈显著正相关(r=0.391,P<0.05)。在心功能Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ级组间,血清ADM水平依次递增(方差F检验,P<0.05),且Ⅳ级组显著高于Ⅱ级组(P<0.01)。住院期间死亡组患者血清IGFⅡ和ADM水平均显著高于好转出院组(P分别<0.01,<0.05)。结论:CHF患者血清IGF Ⅱ和ADM水平显著升高,相互间成正相关,Ⅳ级组血清ADM显著高于Ⅱ级组,死亡组血清IGFⅡ和ADM水平均显著升高。 展开更多
关键词 心力衰竭 血清 胰岛素样生长因子Ⅱ 肾上腺髓质素 IGFⅡ ADM CHF 心功能
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三维多立方烷类氯桥连的Cu(II)簇合物[Cu_3Cl_6]_∞的水热合成及其晶体结构 被引量:1
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作者 陈延民 解庆范 林碧洲 《化学研究与应用》 CAS CSCD 北大核心 2003年第6期821-822,共2页
A new type of three-dimensional open-framework copper chloride,prepared simply by the hydrothermal treatment of CuCl2·H2O and melamine,is built up from unusual chloride bridged{Cu4Cl4}distorted cubane units con... A new type of three-dimensional open-framework copper chloride,prepared simply by the hydrothermal treatment of CuCl2·H2O and melamine,is built up from unusual chloride bridged{Cu4Cl4}distorted cubane units connected by sharing copper cations and has voids in the framework.Each Cu with six Cl atoms forms the distorted octahedron.The crystal is triclinic,Space group Pī,lattice parameters,a=6.1020(12)?,b=6.7860(14)?,c=9.0570(18)?,α=89.67(3)°,β=80.15(3)°,γ=89.45(3)°,V=369^49(13)?3,Z=2,Dc=2.417g·cm-3,F(000)=252,R1=0.0922,and wR2=0.2720. 展开更多
关键词 立方烷结构 铜(Ⅱ)簇合物 水热合成 晶体结构 [Cu3Cl6]∞ 氯桥连
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Toll样受体4在血管紧张素Ⅱ所致高血压小鼠血管重构中的作用 被引量:16
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作者 康晓敏 吕宏娟 +3 位作者 王霞 王蕾 李汇华 尹洪超 《中华老年心脑血管病杂志》 CAS 北大核心 2013年第1期67-70,共4页
目的探讨Toll样受体4(TLR4)在血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)所致高血压小鼠血管重构中的作用。方法选择野生型C57小鼠18只,随机分为对照组、AngⅡ组和TLR4组,每组6只。AngⅡ灌注7d,于灌泵前2d至灌泵后7d小鼠尾静脉注射TLR4中和抗体。免疫组织化... 目的探讨Toll样受体4(TLR4)在血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)所致高血压小鼠血管重构中的作用。方法选择野生型C57小鼠18只,随机分为对照组、AngⅡ组和TLR4组,每组6只。AngⅡ灌注7d,于灌泵前2d至灌泵后7d小鼠尾静脉注射TLR4中和抗体。免疫组织化学检测胸主动脉内皮素1、增殖细胞核抗原(PCNA)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、细胞间黏附分子1(ICAM-1)的表达;流式细胞仪检测T细胞表面活化分子CD69的表达。结果与对照组比较,AngⅡ组小鼠血压、内皮素1、PCNA、ICAM-1、CD69表达明显上调,α-SMA表达明显下调(P<0.05,P<0.01)。与AngⅡ组比较,TLR4组小鼠血压、内皮素1、PCNA、ICAM-1、CD69表达明显下调,α-SMA表达明显上调(P<0.05,P<0.01)。结论 TLR4通过介导炎性反应参与AngⅡ所致高血压小鼠血管重构。 展开更多
关键词 高血压 TOLL样受体4 血管紧张素 II 免疫组织化学 胞间黏附分子1
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脱细胞真皮基质修复猪胆管缺损:促进血管及胆管上皮再生 被引量:4
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作者 陈刚 白建华 +4 位作者 朱新锋 曹俊 刘其雨 赵英鹏 李立 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2015年第43期6940-6945,共6页
背景:脱细胞真皮基质是无细胞的天然组织支架,与人体软组织十分相近,易于塑形,无毒副作用,已被用于修补尿道与输尿管。目的:观察脱细胞基质修补胆管损伤的效果。方法:将30头滇南小耳猪随机均分为3组,空白对照组切断胆管后行端端吻合,实... 背景:脱细胞真皮基质是无细胞的天然组织支架,与人体软组织十分相近,易于塑形,无毒副作用,已被用于修补尿道与输尿管。目的:观察脱细胞基质修补胆管损伤的效果。方法:将30头滇南小耳猪随机均分为3组,空白对照组切断胆管后行端端吻合,实验组人为制作胆管缺损后以脱细胞真皮基质修补,对照组人为制作胆管缺损后以膨体聚四氟乙烯修补。修补后6,24周取胆管补片及其周围组织,进行免疫组织化学与RT-PCR检测。结果与结论:免疫组织化学显示,实验组细胞角蛋白表达高于空白对照组与对照组,转化生长因子β1表达低于空白对照组与对照组。术后24周内RT-PCR检测显示,实验组总体转化生长因子β1基因表达低于空白对照组与对照组(P<0.05),总体胰岛素样生长因子2基因表达高于空白对照组(P<0.05),总体血管内皮生长因子基因表达高于空白对照组与对照组(P<0.05)。表明脱细胞基质修复胆道损伤可促进血管及胆管上皮的再生,并且不增加瘢痕的形成。 展开更多
关键词 胆管 胰岛素样生长因子Ⅱ 转化生长因子β1 组织工程 生物材料 材料相容性 脱细胞基质 胆管损伤 胰岛素样生长因子2 血管内皮生长因子A
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p21和IGF-II在肝癌、肝硬化组织中表达的研究 被引量:6
12
作者 冯震博 吕自力 何如昆 《肿瘤防治研究》 CAS CSCD 2003年第4期270-272,F002,共4页
目的 探讨 p2 1、IGF II在肝硬化、肝细胞癌 (HCC)中表达的意义及其与肝细胞不典型增生(LCD)的关系。方法 用免疫组化S P法检测单纯肝硬化、癌旁肝硬化及肝细胞癌 (HCC) p2 1、IGF II表达情况。结果 p2 1、IGF II在癌旁肝硬化和单纯... 目的 探讨 p2 1、IGF II在肝硬化、肝细胞癌 (HCC)中表达的意义及其与肝细胞不典型增生(LCD)的关系。方法 用免疫组化S P法检测单纯肝硬化、癌旁肝硬化及肝细胞癌 (HCC) p2 1、IGF II表达情况。结果 p2 1、IGF II在癌旁肝硬化和单纯肝硬化组织中的阳性表达率 (92 .86 %和 75 % ;6 8%和 74 % )与HCC(5 4 .5 5 %和 36 .36 % )相比差别有显著性意义 (P <0 .0 5 )。IGF II与p2 1阳性表达存在相关关系。HBsAg阳性或伴LCD改变的肝硬化 ,p2 1、IGF II阳性率均高于HBsAg阴性或不伴有LCD改变的肝硬化 (P <0 .0 5 )。结论  (1)在肝细胞癌变演化过程中 p2 1、IGF II可能发挥协同作用。 (2 )LCD可能是一群具有肿瘤增殖潜能的癌前细胞群 ,尤其有 p2 1、IGF II共同过度表达者 ,有发生HCC的高度危险。 展开更多
关键词 肝癌 肝硬化 P21蛋白 胰岛素样生长因子Ⅱ 肝细胞不典型增生
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大肠杆菌SLT-IIvB基因的克隆和表达 被引量:6
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作者 倪振亚 焦新安 +2 位作者 高崧 张如宽 刘秀梵 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2000年第6期591-597,共7页
采用聚合酶链式反应 (PCR) ,从大肠杆菌O1 38基因组DNA中分别扩增出志贺菌样毒素II型变体B的结构序列和包括信号肽的全序列两段基因 ,定向克隆进表达载体质粒pYA3334(asd+)的EcoRI、BamHI位点之间 ,构建成重组表达质粒。在大肠杆菌X62 1... 采用聚合酶链式反应 (PCR) ,从大肠杆菌O1 38基因组DNA中分别扩增出志贺菌样毒素II型变体B的结构序列和包括信号肽的全序列两段基因 ,定向克隆进表达载体质粒pYA3334(asd+)的EcoRI、BamHI位点之间 ,构建成重组表达质粒。在大肠杆菌X62 1 2(Δasd)筛选出重组质粒 pB0 和 pB1 后 ,经中间宿主X3730转化过渡 ,再导入ΔasdΔcyaΔcrp减毒鼠伤寒沙门氏菌X4550 ,构建成宿主和载体之间具有平衡致死结构的SLT IIvB重组菌。SDS PAGE和Western blot分析重组菌X4550 ( pB0 )在 7 6kD左右处有一条特异性蛋白条带。动物免疫试验表明该重组菌能刺激机体产生针对SLT IIvB和沙门氏菌的特异性抗体。这为进一步研制相应的抗猪水肿病及相应沙门氏菌病的双价活疫苗奠定了重要基础。 展开更多
关键词 大肠杆菌 SLT-IIvB基因 重组疫苗载体
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IGF2基因印记丢失对胚胎干细胞向胰岛样细胞诱导分化的影响 被引量:5
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作者 刘峰 彭宇环 +1 位作者 汤佳珍 姜杉 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2017年第9期1362-1367,共6页
背景:IGF2是一种重要的胚胎有丝分裂生长促进因子,在维持细胞正常生长过程中起关键作用,其基因表达以基因组印迹方式受表观遗传调控。当IGF2发生印迹丢失时,与个体的非正常发育以及肿瘤发生存在一些联系。目的:探讨IGF2基因发生印记丢... 背景:IGF2是一种重要的胚胎有丝分裂生长促进因子,在维持细胞正常生长过程中起关键作用,其基因表达以基因组印迹方式受表观遗传调控。当IGF2发生印迹丢失时,与个体的非正常发育以及肿瘤发生存在一些联系。目的:探讨IGF2基因发生印记丢失对小鼠胚胎干细胞定向诱导分化为胰岛样细胞的影响。方法:体外诱导2种小鼠胚胎干细胞(SF1-G和SF1-1)向胰岛样细胞分化;Real-Time PCR和细胞免疫荧光检测Insulin基因的表达;聚合酶链式反应-限制性内切酶片段长度多态性(PCR-RFLP)检测印迹基因IGF2在诱导分化前后细胞中的亲本表达;体外胰岛素释放实验检测诱导终末细胞的胰岛素释放水平。结果与结论:(1)IGF2基因印记正常(SF1-G)和印记丢失(SF1-1)的2种小鼠胚胎干细胞在诱导分化前后印迹状态没有发生改变;(2)在诱导的终末细胞中,尽管2种细胞的胰岛素释放水平差异无显著性意义,但是Insulin基因在SF1-1组中的表达水平要高于其在SF1-G组的表达水平;(3)IGF2基因印记丢失可能与诱导分化来源的终末细胞中Insulin基因的表达上调相关。 展开更多
关键词 胚胎干细胞 基因组印迹 胰岛素样生长因子Ⅱ 胰岛素 组织工程 干细胞 基因印记 诱导分化 糖尿病 胰岛素释放 SF1-1 SF1-G 胰岛相关标记基因
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早孕绒毛滋养层细胞胰岛素生长因子-II mRNA表达与胚胎发育的关系 被引量:11
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作者 周萍 邹丽 《现代妇产科进展》 CSCD 2004年第3期207-209,共3页
目的 :探讨早孕绒毛组织中IGF IImRNA表达水平的变化与胎盘、胚胎早期发育的关系。方法 :采用逆转录聚合酶链反应 (RT PCR)检测 2 0例正常早孕妇女 (正常对照组 )、15例自然流产妇女 (自然流产组 )及 2 0例药物流产妇女 (药物流产组 )... 目的 :探讨早孕绒毛组织中IGF IImRNA表达水平的变化与胎盘、胚胎早期发育的关系。方法 :采用逆转录聚合酶链反应 (RT PCR)检测 2 0例正常早孕妇女 (正常对照组 )、15例自然流产妇女 (自然流产组 )及 2 0例药物流产妇女 (药物流产组 )绒毛组织中IGF IImRNA的表达 ,同时用PAS染色法分别观测其绒毛组织中糖原储存水平的变化 ,并进行半定量分析和相关性分析。结果 :(1)IGF IImRNA在自然流产组、药物流产组绒毛组织中的表达水平分别为 1.19± 0 .6 7、1.4 2± 0 .6 4,明显低于正常早孕组的 2 .2 2± 0 .95 ,差异均具有显著性 (P <0 .0 5 ) ,药物流产组与自然流产组差异无显著性 (P >0 .0 5 ) ;(2 ) 3组绒毛组织中糖原灰度值分别为 10 6 .0 4± 12 .6 0、82 .85± 2 2 .79、85 .94± 16 .15 ,自然流产组、药物流产组与正常对照组相比差异有显著性 (P <0 .0 5 ) ;(3)绒毛组织中IGF IImRNA的表达强度与其糖原储存水平呈正相关 (P <0 .0 5 )。结论 :推测早孕绒毛组织IGF IImR NA的适量表达与胎盘、胚胎发育有关 ,IGF对胎盘糖原合成的调节可能是其重要作用机制之一。 展开更多
关键词 胰岛素样生长因子-Ⅱ 妊娠初期 胚胎发育
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TGF-α与IGF-Ⅱ在血液透析中的检测及其临床意义 被引量:3
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作者 罗南萍 杨道理 +2 位作者 孟建中 徐军 武翠华 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2000年第1期49-50,共2页
目的:研究多肽生长因子TGF-α与IGF-Ⅱ在长期血透(HD)患者血清及体液中的表达特征。方法:采用放射免疫分析法,检测45例维持性HD患者血清及12h尿液中TGF-α与IGF-Ⅱ的水平。结果:TGF-α水平明显低于... 目的:研究多肽生长因子TGF-α与IGF-Ⅱ在长期血透(HD)患者血清及体液中的表达特征。方法:采用放射免疫分析法,检测45例维持性HD患者血清及12h尿液中TGF-α与IGF-Ⅱ的水平。结果:TGF-α水平明显低于正常组,IGF-Ⅱ则明显高于正常组。HD后血清中两项指标水平均明显高于HD前,测定12h尿液TGF-α和IGF-Ⅱ含量均较正常对照组增高明显(P<0.05;P<0.01)。结论:尿毒症状态或血透过程透析膜等因素可激活单核细胞,导致TGF-α和IGF-Ⅱ的产生增多。 展开更多
关键词 放射免疫分析法 血液透析 TGFΑ IGF-Ⅱ
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hAFP及hTERT双启动子调控的针对人IGF-II基因的siRNA特异性抑制人肝癌细胞生长 被引量:5
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作者 汤绍辉 吴胜兰 +4 位作者 王旷靖 张良鹏 罗羽宏 曹明溶 周鸿科 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第8期1422-1427,共6页
目的:设计并筛选高效沉默胰岛素样生长因子II(IGF-II)基因的小干扰RNA(siRNA)序列,构建由重组人甲胎蛋白(hAFP)和人端粒酶逆转录酶(hTERT)双启动子调控的该siRNA表达载体,观察其对肝癌细胞生长的影响。方法:根据siRNA设计原则,参照IGF-I... 目的:设计并筛选高效沉默胰岛素样生长因子II(IGF-II)基因的小干扰RNA(siRNA)序列,构建由重组人甲胎蛋白(hAFP)和人端粒酶逆转录酶(hTERT)双启动子调控的该siRNA表达载体,观察其对肝癌细胞生长的影响。方法:根据siRNA设计原则,参照IGF-II mRNA序列设计3对siRNA序列及1对阴性对照序列,转染人肝癌Huh7细胞,转染24 h后采用实时荧光定量PCR检测IGF-II mRNA表达量变化,筛选干扰效率最高的siRNA序列。采用PCR扩增出hAFP及hTERT启动子的核心序列,应用基因重组技术构建重组hAFP和hTERT双启动子调控的该siRNA表达载体。将上述siRNA表达载体转染Huh7细胞及L-02人正常肝细胞,观察IGF-II mRNA表达及细胞生长情况变化。结果:实时荧光定量PCR显示,siRNA3在25 nmol/L浓度时抑制效率最高,约90%。成功扩增hAFP及hTERT启动子核心序列,将其分别克隆入pGL3-Basic载体,构建成重组pGL3-hAFP-hTERT载体;将siRNA3克隆至pGL3-hAFP-hTERT载体,构建成重组pGL3-hAFP-hTERT-siRNA3表达载体。Huh7细胞IGF-II mRNA表达量显著降低,抑制效率达86%,细胞增殖受到明显抑制,G1期细胞比例显著增加;L-02细胞上述指标无明显改变。结论:成功构建双重RNA聚合酶II启动子(hAFP及hTERT双启动子)调控的针对IGF-II基因的siRNA表达载体,即pGL3-hAFP-hTERT-siRNA3;该siRNA表达载体可特异性抑制IGF-II mRNA表达及肝癌细胞生长。 展开更多
关键词 hAFP hTERT双启动子 RNA干扰 人胰岛素样生长因子II 肝细胞
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妊高征胎盘滋养细胞浸润能力的检测及胰岛素样生长因子-II、转化生长因子-β1对其的影响 被引量:8
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作者 李真 林桂兰 +1 位作者 王智 成娅 《生殖医学杂志》 CAS 2004年第4期198-201,共4页
目的 检测妊娠高血压综合征 (妊高征 )胎盘滋养细胞浸润能力 ,胰岛素样生长因子 II(IGF II)、转化生长因子 β1(TGF β1)对细胞滋养细胞侵袭力的影响。  方法 从正常及妊高征胎盘分离、纯化细胞滋养细胞行体外培养 ;用体外侵袭试验... 目的 检测妊娠高血压综合征 (妊高征 )胎盘滋养细胞浸润能力 ,胰岛素样生长因子 II(IGF II)、转化生长因子 β1(TGF β1)对细胞滋养细胞侵袭力的影响。  方法 从正常及妊高征胎盘分离、纯化细胞滋养细胞行体外培养 ;用体外侵袭试验检测正常及妊高征胎盘滋养细胞的侵袭力 ;IGF II、TGF β1对两组滋养细胞侵袭力的影响。  结果 妊高征滋养细胞较正常滋养细胞的侵袭力显著降低 (P <0 .0 5 ) ;IGF II明显促进、TGF β1明显抑制正常妊娠滋养细胞的侵袭能力(P <0 .0 5 ) ;二者对妊高征滋养细胞侵袭力的影响不显著 (P >0 .0 5 )。 结论 妊高征胎盘滋养细胞的侵袭力显著降低 ;IGF II、TGF β1可能在妊高征胎盘滋养细胞浅浸润过程中起一定作用。 展开更多
关键词 胰岛素样生长因子-Ⅱ 转化生长因子β1 滋养细胞 浸润 妊娠高血压综合征
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肝癌胰岛素样生长因子II基因启动子P3甲基化的检测及意义 被引量:1
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作者 黄卫 杨冬华 汤绍辉 《暨南大学学报(自然科学与医学版)》 CAS CSCD 2004年第6期708-712,共5页
 目的:建立检测肝癌胰岛素样生长因子II(IGF-II)基因启动子P3甲基化状态的方法。方法:培养三株肝癌细胞系(BEL7402、SMMC7721、HepG2),选取正常肝组织3例;提取基因组DNA,亚硫酸氢钠修饰,巢式聚合酶链反应(nestedPCR)加甲基化特异性PCR(...  目的:建立检测肝癌胰岛素样生长因子II(IGF-II)基因启动子P3甲基化状态的方法。方法:培养三株肝癌细胞系(BEL7402、SMMC7721、HepG2),选取正常肝组织3例;提取基因组DNA,亚硫酸氢钠修饰,巢式聚合酶链反应(nestedPCR)加甲基化特异性PCR(MSP)检测IGF-II基因启动子P3的甲基化状态,PCR产物经克隆、测序验证。结果:三株肝癌细胞系IGF-II基因启动子P3去甲基化,正常肝组织IGF-II基因启动子P3甲基化,目的片段无突变,甲基化修饰完全。结论:巢式PCR加甲基化特异性PCR可准确检测IGF-II基因启动子P3的甲基化状态。 展开更多
关键词 肝细胞癌 胰岛素样生长因子Ⅱ 启动子 甲基化
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乙型肝炎病毒X蛋白通过降低P4启动子甲基化水平上调人IGF-Ⅱ基因的转录 被引量:2
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作者 汤绍辉 张良鹏 +5 位作者 吴小娟 张嫚嫚 王旷靖 周鸿科 罗羽宏 曹明溶 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第9期1633-1638,共6页
目的:构建稳定表达乙型肝炎病毒X蛋白(HBx)的肝癌细胞株HepG2-HBx,探讨HBx对胰岛素样生长因子Ⅱ(IGF-Ⅱ)基因P4启动子甲基化水平及转录表达的影响。方法:应用基因重组技术,构建含HBx基因的重组逆转录病毒载体pBABE-puro-HBx,采用磷酸钙... 目的:构建稳定表达乙型肝炎病毒X蛋白(HBx)的肝癌细胞株HepG2-HBx,探讨HBx对胰岛素样生长因子Ⅱ(IGF-Ⅱ)基因P4启动子甲基化水平及转录表达的影响。方法:应用基因重组技术,构建含HBx基因的重组逆转录病毒载体pBABE-puro-HBx,采用磷酸钙共沉淀法将其转染293FT包装细胞产生逆转录病毒,感染HepG2肝癌细胞,采用嘌呤霉素进行阳性克隆筛选,Western blotting鉴定表达HBx蛋白的肝癌细胞株HepG2-HBx。采用亚硫酸氢盐测序法及实时荧光定量RT-PCR检测HepG2-HBx细胞中P4启动子甲基化水平及P4mRNA表达水平变化。进一步将体外甲基化的人IGF-Ⅱ基因P4启动子驱动的荧光素酶报告载体pGL3-P4及含HBx基因的pCMV-tag2B-X质粒共转染HepG2肝癌细胞,采用亚硫酸氢盐测序法及双萤光素酶实验检测pGL3-P4载体上P4启动子甲基化水平及转录调控活性变化。结果:(1)经Western blotting鉴定,成功构建了稳定表达HBx蛋白的肝癌细胞株HepG2-HBx;(2)表达HBx蛋白的HepG2-HBx细胞中P4启动子甲基化CpG位点的比例(9.0%)明显低于对照细胞HepG2-control(25.0%)(P<0.01),而其P4 mRNA表达水平则为对照细胞HepG2-control的2.8倍;(3)共转染pCMV-tag2B-X质粒的HepG2细胞中pGL3-P4载体上P4启动子甲基化CpG位点的比例(60.8%)明显低于共转染对照质粒pCMV-tag2B的HepG2细胞(84.1%)(P<0.01),而前者P4启动子相对萤光素酶活性(14.12±0.89)则明显高于后者(4.61±0.76)(P<0.01)。结论:HBx蛋白可降低IGF-Ⅱ基因P4启动子甲基化水平,进而上调其转录表达。 展开更多
关键词 乙型肝炎病毒X蛋白 胰岛素样生长因子Ⅱ 启动子 DNA甲基化
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