平喘方对哮喘小鼠HMGB1/TLR4/NF⁃κB通路及IKKs、TGF-β1的影响

目的研究平喘方对哮喘小鼠高迁移率族蛋白B1(HMGB1)/Toll样受体4(TLR4)/核因子-κB(NF-κB)及气道重塑相关因子IκB激酶家族(IKK_(s))、转化生长因子-β1(TGF-β1)的影响。方法将32只雄性Balb/c小鼠随机分为空白组、模型组、地米组、平喘方组,每组8只。采用卵清白蛋白(OVA)联合氢氧化铝腹腔注射和5%OVA雾化吸入激发的方法建立哮喘模型,当日雾化结束1 h后灌胃给药14 d。各组于最后一次给药后收集小鼠血清、肺泡灌洗液(BALF)及肺组织。采用HE染色法观察小鼠肺组织病理改变,免疫组化染色法观察HMGB1、TLR4、NF-κB表达,ELISA法检测BALF及外周血中HMGB1、TLR4、TGF-β1、IKK_(s)含量,RT-PCR检测肺组织中HMGB1、TLR4、NF⁃κB及IKK_(s) mRNA表达,Western blot法检测肺组织中HMGB1、TLR4蛋白表达。结果与空白组比较,模型组气道重塑严重,HMGB1、TLR4及NF-κB表达明显增强,HMGB1、TLR4、TGF-β1及IKK_(s)含量升高(P<0.05),HMGB1、TLR4、NF⁃κB及IKK_(s) mRNA表达升高(P<0.05),HMGB1、TLR4蛋白表达升高(P<0.05)。与模型组比较,平喘方组气道重塑减轻,HMGB1、TLR4、TGF-β1及IKK_(s)含量均明显降低(P<0.05),HMGB1、TLR4、NF⁃κB及IKK_(s) mRNA表达降低(P<0.05),HMGB1、TLR4蛋白表达减少(P<0.05)。结论平喘方能降低HMGB1、TLR4、NF⁃κB及IKK_(s) mRNA表达,降低IKK_(s)和TGF-β1分泌,减少HMGB1、TLR4蛋白表达,减轻哮喘模型小鼠肺组织炎症,改善肺组织病理改变。