细胞因子IL-15、IL-16、IFN-γ及TGF-β在慢性乙型肝炎病毒感染者外周血中的表达及临床意义的研究

目的探讨HBV感染者外周血细胞因子IL-15、IL-16、IFN-γ、TGF-β的表达水平变化的及临床意义。方法选择肝癌患者60例(HCC组)、肝硬化患者60例(LC组)、慢性乙型肝炎患者60例(CHB组)、慢性乙型肝炎病毒携带者60例(ASC组)和健康对照者40例(健康对照组),采用酶联免疫法检测细胞因子表达水平,运用聚合酶链反应检测HBV DNA载量,同时检测各项生化指标。结果随着患者病情加重,细胞因子IL-15、IL-16、IFN-γ、TGF-β表达水平均呈逐渐升高的趋势,且在肝硬化患者中达到最大值。与健康对照组相比,不同临床类型HBV感染者细胞因子表达水平均显著升高,差异有统计学意义(P<0.05)。IL-15、IL-16、IFN-γ、TGF-β在CHB患者外周血HBV DNA高载量组表达水平最高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 IL-15、IL-16、IFN-γ、TGF-β可能参与了乙型肝炎的肝脏炎性损伤过程,且其表达水平与病毒量具有一定相关性。

慢性阻塞性肺疾病血浆IL-16、TNF-α和FIB的表达

目的探讨COPD患者急性加重治疗前后IL-16、TNF-α和FIB在血浆水平的表达。方法收集2012年10月-2013年12月确诊为COPD(共96例)急性加重的患者,同时选取20例健康体检者为正常对照组。将受试者分两组,正常对照组(20例)和COPD(96例),并按肺功能分级将COPD组分为4组(Ι级20例,Ⅱ级26例,Ⅲ级23例,Ⅳ级27例,共96例),采用酶联免疫吸附法(ELASA)检测血清中IL-16、TNF-α和FIB的表达。结果 COPD患者血浆IL-16、TNF-α和FIB水平显著高于健康对照组,P均<0.01。COPDⅠ级、Ⅱ级、Ⅲ级、Ⅳ级两两比较,IL-16、TNF-α和FIB表达水平随气道受限严重程度增高而显著升高,差异均有统计学意义(P均<0.05)。血浆IL-16、TNF-α和FIB在COPD患者中呈直线正相关,相关系数分别为0.733、0.651和0.576,差异均具有统计学意义(P均<0.05)。COPD急性加重患者血浆中IL-16、TNF-α、FIB水平在治疗后显著降低,但仍显著高于正常对照组(P均<0.01)。结论血浆IL-16、TNF-α、FIB在COPD中表达水平增高,并与肺功能下降程度呈正相关。

慢性HBV感染者血清IL-15和IL-16水平与HBV DNA载量的关系及临床意义探讨

目的探讨HBV感染者外周血IL-15和IL-16水平变化及其与HBV DNA载量的相关性。方法选择肝癌(HCC组)60例,肝硬化(LC组)60例,慢性乙型肝炎(CHB组)60例,乙型肝炎病毒携带者(ASC组)60例和健康人40例,采用酶联免疫法检测IL-15和IL-16水平,采用聚合酶链反应法检测HBV DNA载量。结果随着患者病情加重,血清IL-15和IL-16水平均呈逐渐升高的趋势,且在肝硬化患者中达到最大值,分别是(222.89±96.95)ng/ml和(109.77±11.96)ng/ml,显著高于其他各组(P<0.01);与健康人比,各种HBV感染者血清细胞因子水平均显著升高,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01);在CHB患者,外周血HBV DNA高载量组IL-15和IL-16水平最高,分别是(86.67±15.92)ng/ml和(41.64±7.30)ng/ml,显著高于低载量组(P<0.05)。结论 IL-15和IL-16可能参与了乙型肝炎的肝脏炎性损伤过程。

哮喘患儿血IL-16 IL-18免疫球蛋白的动态变化及相关分析

目的探讨哮喘患儿IL16,IL18,免疫球蛋白的动态变化及IL16,IL18与免疫球蛋白之间的关系,为哮喘的发病机制及抗变态反应性炎症治疗提供理论依据。方法对34例哮喘儿童及21例健康体检儿童(对照组)运用双抗夹心酶联免疫吸附试验(ELISA)法测定IL16,IL18,IgE,运用免疫比浊法测定IgG,IgM,IgA。结果哮喘发作期、缓解期IL18与对照组比较差异有显著性(P<0.01);发作期IL16,IgE,IgG均显著高于对照组(P<0.01或P<0.05),IgA显著低于对照组(P<0.01);缓解期IL16,IgE均显著高于对照组(P<0.01)。发作期及缓解期IL16,IL18呈正相关(r=0.70,P<0.01;r=0.70,P<0.05),发作期IL16与IgE呈正相关(r=0.624,P<0.01)。结论哮喘患儿发作期与缓解期均存在免疫失衡状态,IL16,IL18及IgE与哮喘发病机制有关,哮喘患儿在缓解期也应继续抗变态反应性炎症治疗,针对这些细胞因子的治疗具有潜在的价值。

转染IL-16基因对T淋巴瘤细胞的增殖抑制作用

目的 构建 IL-1 6真核表达载体 ,研究其对 T淋巴瘤细胞的增殖抑制作用。 方法 应用 RT-PCR技术从人外周血单个核细胞中获取 IL-1 6c DNA,构建并鉴定真核表达载体 Pc DNA3 -IL-1 6转染 Karpas T淋巴瘤细胞 ,采用 MTT法和流式细胞术分析 IL-1 6对 Karpas T淋巴瘤细胞的增殖抑制。 结果 PT-PCR显示转染 Pc DNA3 -IL-1 6的 Karpas T淋巴瘤细胞高表达 IL-1 6m RNA,MTT法检测显示其对 Karpas T淋巴瘤细胞具有抑制作用 ,流式细胞术检测转染 Pc DNA3 -IL-1 6的 Karpas T淋巴瘤细胞高表达 CD95分子。 结论 成功构建了真核表达载体 Pc DNA3 -IL-1 6,转染 Karpas T淋巴瘤细胞能使其生长受到明显抑制 ,并且 CD95分子表达增高 ,可能与诱导细胞凋亡有关 ,说明向肿瘤细胞转染 IL-1 6是一种有用的肿瘤生物治疗方法。

IL-16基因23核苷酸插入/缺失在广西人群中的分布

目的研究IL-16基因单核苷酸多态性(SNP)位点rs150605585 I/D在广西人群中的分布,并对比不同种族间IL-16插入/缺失频率分布的差别。方法采用单碱基延伸的聚合酶链反应(PCR)技术和DNA测序法检测303例广西人IL-16基因多态性,分析广西人群这个位点的基因型和等位基因的分布频率,并与人类基因组计划(HapMap)公布的欧洲人、中国北京汉族人、日本人和非洲人的基因多态性分型数据比较,分析这5类人群rs150605585插入/缺失的分布频率。结果在我国广西人群中存在IL-16基因rs150605585 I/D多态性,分别有I/I、I/D、D/D 3种基因型。与人类基因组计划(HapMap)公布的4类人群的SNP分型数据进行比较,IL-16基因rs150605585I/D与北京、日本人群的分布差异不具有统计学意义(P均>0.05);rs150605585I/D与非洲人、欧洲人相比差异具有统计学意义(P<0.05)。结论在广西地区人群中存在着IL-16基因多态性。广西人群IL-16基因多态性的分布与其他种族人群比较存在有差异,这种差异也许是与IL-16相关的疾病在不同地区人群间发病率不同的原因之一,这为我们研究基因与疾病的关系提供遗传数据支持。

人IL-16C端cDNA的克隆表达及初步鉴定

人 Ｉ Ｌ１６ 是近年报道的一个新的细胞因子，其 Ｃ 端 １３０ 个氨基酸的分泌型 Ｉ Ｌ１６ 广泛地参与了体内的免疫调节及炎症反应，并具有抑制 Ｈ Ｉ Ｖ 复制等多种功能．经从 Ｃｏｎ Ａ 刺激的人外周血单核细胞中分离总 Ｒ Ｎ Ａ，采用 Ｒ Ｔ Ｐ Ｃ Ｒ、分子克隆及序列测定的方法获得了 Ｉ Ｌ１６ Ｃ 端 １３０ 个氨基酸编码区的 ｃ Ｄ Ｎ Ａ，并在生物 素化融合蛋白表达系统中表达和纯化了该蛋白．结果表明：所得到的中国人 Ｉ Ｌ１６ Ｃ端的编码序列与国外报道的序列完全一致；已获得的 ３３ ｋ Ｄ 融合蛋白易于纯化，这一工作为进一步研究 Ｉ Ｌ１６ 的功能奠定了基础 ．

过敏性紫癜患儿外周血IL-16、IL-18水平的研究

目的探讨IL-16、IL-18在过敏性紫癜患儿中的应用价值。方法采用固相酶联免疫分析法检测69例过敏性紫癜患儿血清IL-16、IL-18水平。结果过敏性紫癜急性期患儿血清IL-16、IL-18较健康对照组明显升高(P<0.01),而过敏性紫癜缓解期患儿与健康对照组间无显著差异(P>0.05),过敏性紫癜患儿IL-16与IL-18呈正相关。结论 IL-16、IL-18可能参与过敏性紫癜血管炎的发病,IL-16、IL-18的检测与过敏性紫癜病情发展有一定关系。

血清IL-16、IFN-r在慢性阻塞性肺疾病患者中的检测价值

目的:探讨慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者血清及痰中白介素-16、IFN-r水平相关性及临床意义。方法:采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测COPD急性加重期、稳定期及健康对照组血清及痰中IL-16、IFN-r水平。结果:血清及痰液中COPD急性加重期患者IL-16、IFN-r水平均明显高于稳定期及健康对照组,且稳定期血清IL-16水平明显高于健康对照组,差异具有统计学意义((P<0.05)。在血清和痰液中IL-16与IFN-r水平呈正相关性(r=0.630、0.594,P<0.01)。结论:在COPD气道炎症中,IL-16、IFN-r共同参与了炎症发病过程,二者联合检测对COPD患者病情程度判断有一定意义。

DC-CIK生物免疫疗法用于甲状腺癌术后的疗效及对患者IL-16、TNF水平的影响

目的研究DC-CIK生物免疫疗法用于甲状腺癌术后的疗效及对患者IL-16、TNF水平的影响。方法随机选取甲状腺癌患者60例,随机分为2组:化疗组采用CMF化疗方案辅助治疗,DC-CIK生物免疫疗法组(30例)在CMF化疗方案辅助治疗基础上进行DC-CIK生物免疫治疗,统计分析2组患者的临床疗效、T细胞水平、血清VEGF、TNF-α、IL-1、IL-6水平。结果DC-CIK生物免疫疗法组患者的总缓解率为86.7%(26/30),显著高于CMF化疗方案辅助治疗组的60.0%(18/30)(P<0.05);CD4+Th17均显著低于CMF化疗方案辅助治疗组(P<0.05),Th17/Treg、CD4+CD25+Treg均显著高于CMF化疗方案辅助治疗组(P<0.05),血清VEGF、TNF-α、IL-1、IL-6水平均显著低于CMF化疗方案辅助治疗组(P<0.05)。结论DC-CIK生物免疫疗法能够有效降低甲状腺癌患者术后IL-16、TNF水平,提升临床疗效。

人乳头瘤病毒16型E5与IL-12联合基因疫苗的免疫活性

为了研制人乳头瘤病毒16型(HPV16)防治性疫苗,分析了HPV16 E5与IL-12联合基因疫苗的免疫活性。将构建的pcDNA3.1(+)/E5与pcDNA3.1(+)/IL-12联合免疫BALB/c小鼠,以ELISA测定小鼠血清中抗HPV16 E5 IgG水平、小鼠脾细胞培养上清中IFN-γ和IL-4含量;MTT法检测脾淋巴细胞增殖反应。结果显示末次免疫后,联合基因疫苗组和单基因疫苗组血清IgG A450值分别明显高于pcDNA3.1(+)组、pcDNA3.1(+)/IL-12组和PBS组(P<0.01);且联合基因疫苗组显著高于单基因疫苗组(P<0.01)。联合基因疫苗组和单基因疫苗组的IFN-γ和IL-4含量分别均明显高于pcDNA3.1(+)组、pcDNA3.1(+)/IL-12组和PBS组IFN-γ和IL-4含量(P<0.01),且联合基因疫苗组含量显著高于单基因疫苗组(P<0.01)。联合基因疫苗组和单基因疫苗组脾淋巴细胞刺激指数(SI)分别显著高于pcDNA3.1(+)组、pcDNA3.1(+)/IL-12组和PBS组(P<0.01);联合基因疫苗组与单基因疫苗组比较,SI差异无统计学意义(P>0.05)。结果表明HPV16 E5单基因疫苗以及与IL-12联合基因疫苗均能刺激机体产生较强的免疫应答,且联合基因疫苗优于单基因疫苗。

人IL-16重组腺病毒抑制MT-4细胞增殖和促进细胞凋亡

目的探讨人IL-16重组腺病毒对MT-4细胞增殖和凋亡的影响。方法用IL-16重组腺病毒感染MT-4细胞后,不同时间收获细胞。MTT法检测细胞增殖,藻红蛋白标记的annexin V和7-氨基放线菌素D联合染色(annexin V-PE/7-AAD)结合流式细胞术检测感染后MT-4细胞的凋亡、Western blot法检测MT-4细胞Bax、Bcl-2蛋白的表达。结果 MTT法结果证明IL-16腺病毒感染的MT-4细胞增殖受到明显抑制;流式细胞术检测结果表明细胞凋亡增加,Western blot法证实Bax蛋白表达量增强,而Bcl-2蛋白表达量减弱。且呈现一定程度的时间依赖性。结论人IL-16重组腺病毒可通过下调Bcl-2蛋白的表达、上调Bax蛋白的表达上调诱导MT-4细胞凋亡。

人IL-16重组腺病毒对Hela细胞中HPV18病毒蛋白表达的影响及凋亡机制的研究

目的探讨人IL-16重组腺病毒对Hela细胞增殖和凋亡的影响。方法用IL-16重组腺病毒感染Hela细胞后,不同时间收获细胞。MTT法检测细胞增殖,藻红蛋白标记的annexin V和7-氨基放线菌素D联合染色(annexin V-PE/7-AAD)结合流式细胞术检测感染后Hela细胞的凋亡、Western blot法检测Hela细胞中HPV病毒相关蛋白p16、E7以及凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2的表达。结果 MTT法结果证明IL-16腺病毒感染的Hela细胞增殖受到明显抑制;流式细胞术检测结果表明细胞凋亡增加,Western blot法证实HPV病毒相关蛋白P16、E7表达降低,Bax蛋白表达量增强,而Bcl-2蛋白表达量减弱,且呈现一定程度的时间依赖性。结论人IL-16重组腺病毒可通过下调Bcl-2蛋白的表达和上调Bax蛋白的表达诱导Hela细胞凋亡。

血IL-16、CA199在子宫内膜异位症的诊断、病情程度中的价值研究

目的:检测子宫内膜异位症(Endometriosis,EMT)患者血IL-16、CA199水平,评估其在诊断、病情程度中的价值研究。方法:选择我院2019年6月至2020年3月收治并行腹腔镜治疗的75例EMT患者为EMT组,根据美国生育协会分期标准分为轻度组(I~II期,40例)和重度组(III~IV期,35例);另选择同期行健康体检的75例为对照组,分别采用酶联免疫法和电化学发光免疫检测腹腔镜手术当日空腹静脉血IL-16和CA199水平,比较不同患者的表达差异;同时分析单独及联合检测在EMT中的诊断价值。结果:EMT组患者的血IL-16、CA199水平均明显高于对照组(P<0.05);EMT轻度组患者血IL-16、CA199水平均明显低于EMT重度组(P<0.05);血IL-16联合CA199检测诊断EMT的灵敏度为87.5%,特异度为79.3%,曲线下面积(Area under the curve,AUC)为0.898(95%CI:0.805~0.956)。结论:血IL-16、CA199联合检测能够提高EMT的诊断效能,且表达水平随病情严重程度增高。

鸡IL-1β、IL-16基因真核表达质粒对IBV DNA疫苗的免疫增强效应研究

为研究鸡IL-1β、IL-16基因真核表达质粒对鸡传染性支气管炎病毒(IBV)DNA疫苗免疫效果的影响,根据GenBank登录的鸡IL-1β和IL-16序列设计两对引物,采用RT-PCR方法从四川山地乌骨鸡外周血淋巴细胞RNA中克隆IL-1β和IL-16基因,与真核表达质粒pcDNA3.1(+)连接构建了pDNAIL-1β和pDNAIL-16。分别将两种重组质粒与IBVDNA联合免疫SPF雏鸡并进行攻毒试验。结果表明,pDNAIL-1β和pDNAIL-16均能促进血清中特异性抗体水平和外周血T淋巴细胞亚群数量的增加(p<0.05),增强IBV DNA疫苗对同型强毒的保护率15%～25%,pDNAIL-1β提升DNA疫苗的抗体水平的时间比pDNAIL-16多7d。试验表明,鸡IL-1β、IL-16基因真核表达质粒对IBV DNA疫苗的免疫具有增强作用。

哮喘患者外周血IL-16水平及其多态性检测

目的探讨哮喘患者外周血IL-16的变化及IL-16基因多态性(T-295C)与哮喘的关系。方法选择确诊的42例哮喘患者为哮喘组,并选择同期健康体检者37例为对照组,应用酶联免疫吸附试验(ELISA)双抗体夹心法检测哮喘患者外周血IL-16水平,应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)方法检测IL-16基因多态性,并进行统计学分析。结果哮喘组血浆IL-16水平为(89.4±8.2)ng/L,与对照组(30.8±5.2)ng/L比较差异有统计学意义(P<0.05);哮喘组和对照组IL-16基因259位点基因型分布及等位基因突变频率间差异均无统计学意义(P>0.05)。结论IL-16参与了哮喘发病的病理生理过程,但IL-16突变与哮喘无相关性。

HIV感染者血清IL-16水平变化及HAART对其水平的影响

目的:探索HIV感染者血清白介素16(IL-16)水平变化及HAART对其水平的影响。方法:77例HIV感染者为研究组,按美国疾病控制中心与世界卫生组织标准分期,对照组15例。检测血清CD4+T细胞、CD8+T细胞和IL-16,观察HIV感染组及各期与对照组、HAART治疗组与未治疗组之间的差异。结果:HIV感染者及各期的CD4+T细胞均低于对照组(P<0.01)、CD8+T细胞均高于对照组(P<0.05或P<0.01)。HAART治疗组55例血清IL-16为(266.6±174.1)ng/ml,未治疗组22例血清IL-16为(182.9±63.5)ng/ml,治疗组血清IL-16水平明显高于未治疗组(t=3.087,P<0.01)。HIV感染者及A、B期的血清IL-16均低于对照组(P<0.05)。细分期显示,HAART治疗后HIV感染者血清IL-16逐渐回升,C期治疗组明显高于未治疗组(P<0.05)。结论:HAART可提高血清IL-16水平,HIV感染者动态观察血清CD4+T细胞、IL-16,对病情监测有价值。

IL-16基因-295 T>C多态性与肾透明细胞癌易感性的相关性研究

目的研究中国南方汉族人群中白细胞介素-16(IL-16)基因-295 T>C多态性与肾透明细胞癌(CCRCC)易感性的相关性。方法采用以医院为基础的病例对照研究模式,通过面访填写调查表并采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)方法检测年龄和性别匹配的中国南方汉族300例患者和300例正常人群的IL-16 gene-295 T>C基因型。并采用分层分析进一步探讨与罹患CCRCC相关的可能因素。结果与TT型携带者相比,CT型(OR=0.7 8,9 5%CI=0.5 5～1.09)或CC型(0.37,0.19～0.73)携带者发生CCRCC的危险性明显降低。分层分析显示年龄、体重指数及饮酒与CCRCC危险性之间无明显关联,携带CT或CC型从不吸烟的女性患者发生CCRCC的危险性明显降低(从不吸烟:0.61,0.41～0.91;女性:0.52,0.30～0.91)。结论 IL-16 gene-295 T>C多态性可能与我国南方地区汉族人群CCRCC易感性有关,CC型或CT型携带者发生CCRCC的危险性要明显低于TT型携带者。

IL-16和IL-17在慢性阻塞性肺疾病中的表达水平及意义

目的检测慢性阻塞性肺疾病急性加重（AECOPD）患者、COPD稳定期患者、健康志愿者肺功能FEV1、FEV1／FVC水平、外周血及痰分泌物中IL-16和IL-17的表达水平，初步探讨IL-16和IL-17可能参与COPD发病的免疫学机制。方法选取2012年6月至2014年10月本院慢性阻塞性肺疾病患者45例，其中AECOPD患者25例，COPD稳定期患者20例，健康对照组45例，分别检测肺功能检查中FEV1、FEV1／FVC水平，采集患者外周血及痰分泌物检测IL-16和IL-17的表达水平。结果AECOPD、COPD稳定期两组肺功能FEV1、FEV1／FVC水平明显低于对照组，差异具有统计学意义（P〈0．05）；AECOPD、COPD稳定期两组在外周血中，IL-16和IL-17表达水平高于健康对照组。差异具有统计学意义（P〈0．05）；AECOPD、COPD稳定期两组痰分泌物中，IL-16和IL-17表达高于健康对照组。差异具有统计学意义（P〈0．05）。结论IL-16和IL-17可能参与慢性阻塞性肺疾病的病理过程，具体机制有待进一步探讨。

老年肝衰竭患者CD14、CD16与血清IL-10、IL-32的表达水平及临床意义

目的研究老年肝衰竭患者外周血CD14、CD16与血清中白细胞介素(IL)-10、IL-32的表达水平及临床意义。方法选取老年肝衰竭患者68例作为研究对象,另选70例体检正常老年患者作为正常组,分析两组患者CD14、CD16、IL-10、IL-32指标水平情况,测定不同分期下肝衰竭患者及死亡存活者CD14、CD16、IL-10、IL-32水平,并采用受试者工作特征(ROC)曲线对存活患者进行预测分析。结果肝衰竭患者CD14、CD16、IL-10、IL-32指标显著高于正常患者(P<0.05);肝衰竭早期患者CD14、CD16、IL-10指标显著低于中期与晚期患者,晚期肝衰竭患者CD14、CD16、IL-10显著高于中期,早期患者IL-32显著高于中、晚期患者,晚期患者IL-32显著高于中期患者(P<0.05);肝衰竭存活患者CD14、CD16、IL-32显著低于死亡患者,存活患者IL-10指标显著高于死亡患者(P<0.05);采用ROC曲线对存活患者进行分析,显示CD14、CD16、IL-10、IL-32指标均具有较高敏感度与特异度。结论老年肝衰竭患者CD14、CD16、IL-10、IL-32指标水平表达较高,其不同分期及存活、死亡患者上述指标均存在显著差异,且上述指标对患者存活情况具有较大的预测价值。