PBMC中CARD9、MDC、IL⁃32在溃疡性结肠炎诊断和病情评估中价值

目的探讨外周血单个核细胞(PBMC)中胱天蛋白酶募集域蛋白9(CARD9)、髓样树突状细胞(MDC)、白介素⁃32(IL⁃32)在溃疡性结肠炎(UC)诊断和病情评估中价值。方法选取2019年1月至2021年1月南方医科大学珠江医院消化内科收治的82例UC患者(UC组)及体检中心40例健康体检人群(对照组),比较两组CARD9 mRNA、MDC、IL⁃32 mRNA、CARD9蛋白、IL⁃32蛋白,采用受试者工作特征曲线(ROC)分析各指标诊断UC价值,比较UC患者不同病情程度者各检测指标水平,采用Spearman及多分类Logistic回归方程分析各指标与UC活动期患者病情程度关系。结果UC组CARD9 mRNA、MDC、IL⁃32 mRNA、CARD9蛋白、IL⁃32蛋白高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);CARD9 mRNA、MDC、IL⁃32 mRNA诊断UC的AUC依次为0.712、0.901、0.739,各指标联合的AUC为0.920;活动期患者CARD9 mRNA、MDC、IL⁃32 mRNA高于缓解期(P<0.05),随着活动期患者病情程度加重,CARD9 mRNA、MDC、IL⁃32 mRNA依次增高,两两比较差异均有统计学意义(P<0.05);Spearman相关性分析显示,CARD9 mRNA(r=0.808,P<0.001)、MDC(r=0.815,P<0.001)、IL⁃32 mRNA(r=0.874,P<0.001)、CARD9蛋白(r=0.735,P<0.001)、IL⁃32蛋白(r=0.803,P<0.001)均与病情程度呈正相关;多分类Logistic回归方程分析显示,CARD9 mRNA、MDC、I L⁃32 mRNA、CARD9蛋白、IL⁃32蛋白是UC患者病情程度的相关独立影响因素(P<0.05)。结论UC患者PBMC中CARD9 mRNA、MDC、IL⁃32 mRNA、CARD9蛋白、IL⁃32蛋白显著升高,并与病情程度有关,联合检测CARD9 mRNA、MDC、IL⁃32 mRNA能为临床诊断UC及评估UC病情提供参考。

溃疡性结肠炎患者肠道菌群、外周血中IL⁃32、miR⁃223、miR⁃505水平与预后相关性

目的探讨溃疡性结肠炎(UC)患者肠道菌群、外周血单个核细胞(PBMC)中白细胞介素-32(IL⁃32)、微小RNA⁃223(miR⁃223)、微小RNA⁃505(miR⁃505)水平与预后相关性。方法选取2017年1月-2019年4月佛山市高明区人民医院收治的92例UC患者作为研究组,并对患者进行规范化治疗,选取同期体检健康者100例作为对照组,观察两组研究对象及不同严重程度患者肠道菌群、PBMC中IL⁃32、miR⁃223、miR⁃505水平变化,肠道菌群、PBMC中IL⁃32、miR⁃223、miR⁃505表达相关性及与患者预后的关系。结果研究组大肠杆菌、乳酸菌属、双歧杆菌属数量、IL⁃32、miR⁃223表达均高于对照组,miR⁃505表达低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05);重度组、中度组患者大肠杆菌、乳酸菌属、双歧杆菌属数量与PBMC中IL⁃32、miR⁃223表达高于轻度组,重度组高于中度组,差异均有统计学意义(P<0.05),重度组患者PBMC中miR⁃505表达低于中度组、轻度组(P<0.05);UC患者大肠杆菌、乳酸菌属、双歧杆菌属均数与IL⁃32、miR⁃223表达呈正相关,与miR⁃505表达呈负相关,差异均有统计学意义(P<0.05),miR⁃505与IL⁃32、miR⁃223表达呈负相关,IL⁃32与miR⁃223表达呈正相关,差异均有统计学意义(P<0.05);预后不良组患者大肠杆菌、乳酸菌属、双歧杆菌属数量与PBMC中IL⁃32、miR⁃223表达高于预后良好组,miR⁃505表达低于预后良好组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论UC患者肠道菌群失调,PBMC中IL⁃32、miR⁃223高表达,miR⁃505低表达,肠道菌群失调及IL⁃32、miR⁃223、miR⁃505表达与患者预后相关。

腺样体肥大伴变应性鼻炎患儿致敏原谱及腺样体组织中IL-25 IL-32 EOS表达分析及诊断价值

目的:分析腺样体肥大伴变应性鼻炎患儿致敏原谱及腺样体组织中IL-25、IL-32、EOS表达及诊断价值。方法:选取96例变应性鼻炎患儿作为研究的临床资料进行回顾性分析,研究时间2017年5月至2020年5月,按照1∶1个体匹配原则选择腺样体肥大伴变应性鼻炎患者48例为A组与单纯变应性鼻炎患者48例为B组。另选取48例健康体检者设立为对照组,且观察变应性鼻炎患儿的致敏原谱,评估三组受检人员的IL-25、IL-32、EOS,分析腺样体肥大伴变应性鼻炎患者的独立影响因素,IL25、IL32与EOS相关性,以及评估IL25、IL32、EOS及三项联合的AUC值。结果:96例变应性鼻炎患儿经血清变应原总IgE检测,其阳性为94例(97.92%);其中仅对一种变应原过敏共42例(44.68%),对2种以上变应原过敏共52例(55.32%)。吸入性变应原中以户尘螨阳性率最高,以狗毛皮屑阳性率最低;食入性变应原中以鸡蛋白阳性率最高,以鱼蟹虾阳性率最低。A组与B组的IL-25、IL-32、EOS均高于对照组(P均<0.05);A组的IL-25、IL-32、EOS高于B组(P均<0.05)。经二元Logistic回归分析显示,IL-25、IL-32、EOS均是腺样体肥大伴变应性鼻炎患者的独立影响因素(P<0.05)。Pearson相关性分析显示,IL25、IL32与EOS呈正相关(r=0.742/0.871,P<0.05)。ROC曲线分析显示,IL-25、IL-32、EOS、三项联合预测腺样体肥大伴变应性鼻炎的AUC值分别为(0.855、0.977、0.996、0.994,P<0.05);敏感度分别为(72.90%、95.80%、93.80%、100.00%)、特异度分别为(91.70%、93.70%、100.00%、91.70%)。结论:IL-25、IL-32、EOS在腺样体肥大伴变应性鼻炎患儿中呈异常表达,对临床诊断具有一定指导作用。

IL-32,Cys-C和β2-MG在多发性骨髓瘤患者外周血中的表达

目的:探讨多发性骨髓瘤(multiple myeloma,MM)患者血清白介素32(interleukin 32,IL-32)、胱抑素-C(Cys-C)和β2微球蛋白(β2-MG)水平变化与MM肿瘤负荷、疾病分期、近期疗效的关系.方法:选择初诊MM患者62例(MM组)和28例健康体检者(对照组),MM组化疗前后、对照组体检当日采集空腹血,采用ELISA法检测IL-32水平,免疫比浊法测定Cys-C,β2-MG水平.结果:MM组患者化疗前血清IL-32,Cys-C,β2-MG水平均显著高于对照组(p<0.05).不同国际分期系统(ISS)分期MM患者化疗前IL-32,Cys-C,β2-MG水平存在显著差异(p<0.05),Ⅲ期MM患者IL-32,Cys-C,β2-MG水平均明显高于Ⅰ期和Ⅱ期患者(p<0.05).化疗前MM患者血清IL-32,Cys-C,β2-MG水平显著高于化疗后(p<0.05).化疗后评估疗效,部分缓解、疾病进展MM患者血清IL-32,Cys-C,β2-MG水平均高于完全缓解MM患者(p<0.05).将血清IL-32,Cys-C,β2-MG水平与MM患者疾病分期、化疗后疗效进行Spearman相关性分析,提示MM患者ISS分期与血清IL-32,Cys-C,β2-MG水平呈正相关(p<0.05),MM患者化疗后疗效与血清IL-32,Cys-C,β2-MG水平呈负相关(p<0.05).结论:IL-32可能在MM发生、发展中发挥作用;血清IL-32,Cys-C,β2-MG水平变化与MM患者肿瘤负荷、疾病分期及近期疗效相关.上述指标检测简单快速易操作,可以为临床诊疗工作提供有利的实验依据.

呼出气NO及IL-32在慢性阻塞性肺疾病中的改变及意义探讨

目的探讨FeNO及血清IL-32水平在慢阻肺中的改变和意义。方法收集确诊慢阻肺患者87例,其中AECOPD组46例,慢阻肺稳定期组41例并按严重程度分为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ级;随机选择同期健康成年人93例作为对照组。检测血清IL-32、FeNO和FEV_1/FVC、FEV_1%水平并分析其相关性。结果血清IL-32、FeNO总体水平均呈现AECOPD组高于慢阻肺稳定期组高于健康对照组(P<0.01)。AECOPD组治疗后总体患者血清IL-32、FeNO水平较治疗前降低显著(P<0.01;P<0.05)。Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ级各级之间血清IL-32、FeNO水平随着级数增加,血清IL-32浓度渐高(P<0.01),而FeNO水平渐低(P<0.05)。血清IL-32与FEV_1/FVC、FEV_1%在AECOPD治疗前(r=-0.651,-0.621,P<0.01)、后(r=-0.711,-0.745,P<0.01)及慢阻肺稳定期(r=-0.594,-0.618,P<0.01)均呈现显著负相关。FeNO在AECOPD治疗前与FEV_1/FVC呈现正相关(r=0.323,P=0.033)。结论血清IL-32在一定程度上与慢阻肺气流受限的严重程度有关,血清IL-32和FeNO均与AECOPD炎症加重有关,二者在慢阻肺的诊疗上具有一定的指示作用。

结缔组织病并间质性肺病患者血清IL-32、IL-12的临床意义

目的探讨结缔组织病并间质性肺病患者(CTD-ILD)与非结缔组织病引起的间质性肺疾病(IFP+NSIP)患者及正常人外周血血清中白细胞介素32(IL-32)和白细胞介素12(IL-12)水平的差异及意义。方法选择8例结缔组织病并间质性肺病患者(CTD-ILD),其中包括6例类风湿性关节炎(RA)并间质性肺病患者(RA-ILD组),2例硬皮病(SSA)并间质性肺病患者(SSA-LD组);10例非结缔组织病引起的间质性肺疾病(IPF+NSIP),其中包括8例特发性肺间质纤维化患者(IPF组),2例非特异性间质性肺炎患者(NSIP组);选择10例正常人(control组),采用特异的酶联免疫吸附法测定外周血血清中IL-32、IL-12的水平。结果 CTD-ILD组外周血血清中IL-32、IL-12水平明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);CTD-ILD组外周血血清中IL-32、IL-12水平明显高于IPF+NSIP组,差异有统计学意义(P<0.05)。

IFN-γ、IL-32、IL-1β在原因不明习惯性流产中的临床意义

目的探讨干扰素-γ、白介素-32和白细胞介素-1β在原因不明习惯性流产中的表达及临床意义。方法ELISA法检测URSA组、正常妊娠组和健康对照组血清中IFN-γ、IL-32和IL-1β的浓度,并进行统计学分析。结果URSA组IFN-γ、IL-32和IL-1β的血清浓度水平显著高于健康对照组和正常妊娠组(P<0.01);正常妊娠组较健康对照组的IFN-γ、IL-32和IL-1β血清浓度水平均显著下降(P均<0.01)。结论IFN-γ、IL-1β、IL-32反馈环可能参与了URSA的发生,对其血清浓度的检测可作为监测URSA病人治疗效果和再次妊娠结局的指标。

乙型肝炎患者T细胞亚群、IL-32水平的变化及其临床意义

目的比较感染乙型肝炎(乙肝)病毒(HBV)后患者血液T细胞亚群及血清白细胞介素-32(IL-32)水平的变化,探讨HBV对机体免疫系统(特别是细胞免疫)的影响。方法选择2013年2月至2014年2月于感染科就诊的328例乙肝患者(包括急性乙肝患者53例,慢性乙肝患者189例,乙肝合并肝硬化患者45例,肝癌患者41例)及67例健康者,使用流式细胞仪检测T细胞亚群分布、酶联免疫吸附试验(ELISA)测定血清IL-32水平,实时荧光定量PCR法(real-time PCR)测定乙肝患者血液中HBV-DNA的载量,比较各种不同类型乙肝患者的T细胞亚群和血清IL-32水平,以及它们与HBV-DNA载量的相互关系。结果 (1)患者在感染HBV后,CD3+和CD4+T细胞百分比明显降低(P<0.05),CD8+T细胞百分比明显增高(P<0.05),CD4+/CD8+T细胞比例也明显降低(P<0.05);各指标的变化程度与肝脏病变的程度呈正比,并且与HBV-DNA载量呈正比(r=0.05,P<0.01)。(2)乙肝患者血清IL-32水平与健康对照组相比明显升高(P<0.01),急性乙肝患者的IL-32水平最高,但IL-32水平与HBV-DNA载量无明显相关性(r=0.00,P=0.45)。结论 HBV感染人体后会严重扰乱免疫系统,特别是细胞免疫功能;IL-32可能参与了细胞免疫应答,但与HBV-DNA的复制调控没有太大的关系。

急性白血病IL-32水平动态变化与病情发展的关系

目的:检测急性白血病(AL)患者的白介素32(IL-32)的表达,探讨其表达的临床意义。方法:应用酶联免疫吸附法和实时荧光定量PCR分别检测82例AL患者和30例健康人血清中IL-32的浓度及其mRNA的表达。结果:与健康人群相比,AL组及其两个分型组(ANLL和ALL)的外周血清IL-32蛋白水平及IL-32 mRNA表达水平均显著提高(P<0.05)。ANLL和ALL处于初诊、PR和复发期的患者的IL-32蛋白水平及IL-32 mRNA表达水平明显高于健康人群(P<0.05),并且其复发期组患者的IL-32蛋白水平及IL-32 mRNA表达水平显著高于其他分期组患者(P<0.05);而在ANLL和ALL患者中处于CR期患者的IL-32蛋白水平及IL-32 mRNA表达水平与健康人群相比无显著性差异(P>0.05)。结论:急性白血病患者外周血中IL-32与其自身的病情发展有密切联系,检测患者体内IL-32的动态变化,有助于了解疾病的进展,因而IL-32水平可作为监测急性白血病的疗效指标。

人IL-32α二级结构及B细胞表位的预测

以人IL-32α的氨基酸序列为基础,采用SOPMA法预测IL-32α的二级结构;应用ProScale、Bcepred服务器和EMBOSS软件,分析人IL-32α亲水性、柔韧性、可及性和抗原性指数,并结合二级结构特征,预测IL-32α的B细胞表位.结果显示:IL-32α的二级结构由α螺旋(61.07%)和无规卷曲(38.93%)组成;其B细胞表位可能位于N端第87～94、102～108、121～127区段.预测结果将有助于确定IL-32α的B细胞表位,为研制抗人IL-32单克隆抗体提供了理论依据.

新生VAP小鼠和肽素IL-32 IL-17水平变化与不同程度肺炎的相关性分析

目的:探讨呼吸机相关性肺炎(VAP)的发病症状与影响因素,为临床诊断与治疗提供基础。方法:将54只BALB/c雄性小鼠随机分为空白组、VAP轻症组(1×10^(6)cfu/L菌液)、VAP重症组(6×10^(6)cfu/L菌液),每组18只。除空白组外,其余各组小鼠进行机械通气24h与气管滴注铜绿假单胞菌构建VAP模型。模型构建后1d、3d、7d分别测定用力肺活量(FVC)、第1秒用力呼气量(FEV1),计算FEV1/FVC%值;ELISA法测定血清中Copeptin、IL-32、IL-17的含量;HE染色观察7d后肺脏中病理学改变;免疫组化法测定7d后肺组织NF-κB、TLR2与TLR4的表达水平;将肺功能与Copeptin、IL-32、IL-17的测定结果进行相关性分析,对Copeptin、IL-32、IL-17的结果进行ROC分析,评价VAP的影响因素。结果:VAP发生7d内,与空白组相比,轻症组与重症组动物的FVC、FEV1降低,血清中Copeptin、IL-32、IL-17升高(P<0.05);肺脏中炎性细胞、中性粒细胞数量,以及TRL2、TRL4、NF-κB蛋白的表达随VAP症状的加重而增多;相关性分析与ROC分析的结果显示:肺功能指标与Copeptin、IL-32、IL-17水平呈密切关联性,趋势呈负相关。结论:呼吸机相关性肺炎的发病程度与Copeptin、IL-32、IL-17具有密切相关性,其机制可能与激活NF-κB通路介导炎症反应相关,从而降低肺功能。

屋尘螨过敏原对人支气管上皮细胞IL-32和相关炎症因子的影响

目的探究IL-32在气传过敏原诱导的固有免疫反应中的作用。方法将同一批次处在指数生长期的人支气管上皮细胞(16HBECs)随机分为4组,设置空白对照组(A组),不同浓度(B:2μg/mL,C:10μg/mL,D:20μg/mL)屋尘螨(house dust mite,HDM)稀释液组,B、C和D组均分别刺激16HBE细胞6、12和24 h。通过荧光定量PCR技术检测胞内IL-32、IL-8、TNF-α和NF-κB等炎症因子的mRNA表达水平;酶联免疫吸附试验检测细胞上清液中IL-32、IL-6、IL-8和IL-1β的水平;Western blotting法检测p-p38、p-p65、TLR-4等蛋白的表达,探究HDM刺激16HBE细胞后的炎症效应。结果与对照组相比,随着HDM浓度和刺激时长增加,高浓度实验组IL-32、IL-8、IL-1β、TNF-α、NF-κB等炎症因子mRNA表达水平显著升高(1.74±0.03,1.87±0.05,2.62±0.20,2.35±0.14,1.40±0.07,P<0.01);IL-32、IL-6、IL-8、IL-1β水平也出现分泌性上调(P<0.05)。Western blotting结果显示,随着HDM浓度增加,p-p38和p-p65蛋白以及TLR-4表达均上调。结论HDM刺激16HBE细胞,会引起气道固有免疫效应,激发IL-32表达上调。IL-32可能通过TLR4/MD-2信号路径激活NF-κB信号通路,并与p38-MAPK通路发生交互作用产生促炎效应,导致过敏性气道炎症的发生与发展。

外周血T细胞亚群、IL-32、IL-6水平在乙型肝炎患者的表达及相关性分析

目的探讨乙型肝炎患者外周血T细胞亚群及IL-32、IL-6水平并进行相关性分析。方法选择2010年6月-2012年6月来我院就诊的120例乙型肝炎患者,急性乙型肝炎患者25例(急性乙肝组),慢性乙型肝炎95例(慢性乙肝组),其中轻度34例,中度31例,重度30例;同期选择来我院体检健康的志愿者30例作为对照组。使用流式细胞仪检测T细胞亚群,采用Elisa法检测细胞因子IL-6、IL-32水平。结果与对照组相比,乙肝患者外周血中的CD4+T细胞比例降低,CD4+/CD8+细胞的比值也降低,而CD8+T细胞的比例升高,差异均有统计学意义(P<0.05);各病例组与对照组血清中的IL-32、IL-6水平平行比较差异均有统计学意义(P<0.001);乙型肝炎患者血清中的IL-32、IL-6水平与丙氨酸转氨酶、总胆红素水平呈正相关,而与白蛋白水平呈负相关。结论乙型肝炎病毒感染机体后,IL-32、IL-6可能通过参与免疫应答增强了肝脏的炎性损伤。

慢性阻塞性肺疾病患者血清中IL-32、8-iso-PGF2α的变化及意义

目的:通过测定慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者血清中IL-32、8-iso-PGF2α水平,观察其在COPD不同时期中的变化及临床意义。方法:随机选取40例COPD患者,40例健康体检者作为对照组,通过酶联免疫法测定AECOPD、稳定期及健康对照组血清中IL-32及8-iso-PGF2α变化水平。结果:检测者血清中IL-32、8-iso-PGF2α水平健康对照组、COPD稳定期、AECOPD患者三组数据呈现逐渐增高趋势,即急性加重期高于稳定期,稳定期高于对照组。结论:血清中IL-32及8-iso-PGF2α在COPD的动态变化参数,为判断该疾病严重程度,并为临床治疗、评估治疗效果及出院后是否继续治疗提供理论依据。

白介素(IL)-32在胆道闭锁患儿肝组织中的表达水平及临床意义

目的：研究白介素-32（interleukin-32,IL-32）在胆道闭锁（biliary atresia,BA）及胆总管扩张（choledochal cyst,CC）患儿肝脏组织中的表达水平变化,从而探讨白介素（IL）-32在胆道闭锁患儿肝脏组织中的临床意义。方法：选取我院2012年2月~2015年10月期间收治的胆道闭锁患儿35例及未发生胆管炎的胆管扩张症患儿14例为研究对象,划分胆道闭锁患儿为观察组（BA）及胆管扩张患儿为对照组（CC）。采用荧光实时定量（Real-time quantitative PCR,q PCR）和蛋白质印迹（western blot,WB）方法分别检测胆道闭锁组（BA）和胆总管扩张组（CC）两组中肝脏组织内白介素（IL）-32的表达水平,并对两组间IL-32的表达水平进行比较分析,同时对BA组中白介素（IL）-32表达情况与肝功能相关的血清指标进行相关性分析。结果：BA组中IL-32 mRNA及蛋白表达水平明显高于CC组（P〈0.05）;BA组IL-32与γ-谷氨酰转肽酶（γ-glutamyl transpeptidase,γ-GT）、谷丙转氨酶（Alanine aminotransferase,ALT）、谷草转氨酶（Aspartate transaminase,AST）肝功能相关指标表达水平进行相关性研究表明：IL-32与γ-GT、ALT、AST之间呈正性相关的关系（P〈0.05）。结论：肝功能相关指标如γ-GT、ALT、AST的检测值随着IL-32表达水平的增高而增高,说明了胆道闭锁患儿肝组织IL-32与其肝功呈正相关的特点,对预测胆道闭锁患儿肝功能具有临床参考意义。

儿童先天性胆管扩张症胆总管组织中白介素(IL)-32的表达及临床意义

目的针对儿童先天性胆管扩张症胆总管组织中白介素（IL）-32的表达及临床意义进行研究。方法随机选择2013年1月-2016年1月期间，我院收治的先天性胆管扩张症患儿60例，以及足月新生儿胆总管组织20例，作为本次研究的对象。先天性胆管扩张症患儿作为观察组，足月新生儿尸体胆总管组织作为对照组。对两组患儿实施血清实验室各指标的检测，并对两组患儿的血清白介素（IL）-32、白介素（IL）-32mRNA表达水平、蛋白表达量等指标进行观察比较。结果在本次研究中，观察组和对照组患儿血清中的血清白介素（IL）-32、以及白介素（IL）-32mRNA表达水平、蛋白表达量存在着显著的差异性，经比较，P〈0．05，具有统计学意义。先天性胆管扩张症患者的白介素（IL）-32水平与肝功能指标的相关性进行分析研究，得出，白介素（IL）-32与γ-谷氨酰转移酶有相关性，P〈0．05，具有统计学意义。观察组和对照组患者的白介素（IL）-32蛋白的灰度值进行比较，P〈0．05，具有统计学意义。结论在儿童先天性胆管扩张症的治疗中，对其进行白介素（IL）-32的检测，对患者病情的严重程度判断以及患者的预后有重要的意义，为先天性胆管扩张症的防治，提供重要的理论依据。

局麻和全麻对患者血清IL-23、IL-32和PCT水平的影响

目的:探讨了局麻和全麻对手术病人血清IL-23、IL-32和PCT水平的影响。方法:根据不同的麻醉方法对直肠癌患者分为硬膜外麻醉组(A组)和静吸复合全麻组(B组),每组30例。在麻醉诱导前、手术切皮和手术开始后1h抽取静脉血3ml,分别测定血清IL-23、IL-32和PCT浓度。结果:A组血清IL-23、IL-32和PCT含量在切皮和术中1h与术前比较有显著性差异(P<0.05),B组血清IL-23、IL-32和PCT含量在切皮和术中1h,比A组含量降低(P<0.05)。结论:静吸复合麻醉能明显降低血清IL-23、IL-32和PCT浓度。

IL-32γ对LX-2细胞表达Ⅰ型胶原的影响

目的研究IL-32γ可否诱导肝星状细胞LX-2表达Ⅰ型胶原(CollagenⅠ)。方法不同浓度的IL-32γ与LX-2共培养,分别收集培养上清液、提取细胞总RNA,real-time PCR检测CollagenⅠmRNA表达水平,ELISA法检测CollagenⅠ蛋白质表达水平。用不同浓度的人重组磷酸化p38α蛋白(recombinant human active p38α蛋白)与LX-2细胞共培养,48 h后收集细胞培养上清液,ELISA法检测CollagenⅠ蛋白质表达水平。再用不同浓度的p38MAPK抑制剂SB203580加入LX-2细胞与IL-32γ共培养的培养液中,分别收集培养上清液,采用ELISA检测CollagenⅠ蛋白质表达水平,同时提取细胞总RNA采用real-time PCR检测CollagenⅠmRNA表达水平。结果 IL-32γ诱导人LX-2细胞表达CollagenⅠ,且其表达水平随IL-32γ浓度的增加而增强;人重组磷酸化p38α蛋白可诱导LX-2细胞表达CollagenⅠ增高,阻断p38MAPK可降低IL-32γ诱导的CollagenⅠ表达。结论 IL-32γ通过活化p38MAPK通路诱导LX-2细胞表达CollagenⅠ,IL-32γ可能通过诱导肝星状细胞表达CollagenⅠ而参与肝纤维化的形成。

IL-32在PR3-ANCA相关性血管炎中的表达水平的变化

目的:分析蛋白酶3-抗中性粒细胞抗体(proteimase 3-antineutrocyte antibody,PR3-ANCA)相关性血管炎患者外周血IL-32的表达,初步探讨IL-32在PR3-ANCA相关性血管炎的发病中的作用。方法:运用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测PR3-ANCA相关性血管炎患者血清和外周血单个核细胞培养上清液中的IL-32。结果:与正常对照组比较,PR3-ANCA相关性血管炎患者血清和外周血单个核细胞中IL-32明显升高(P<0.05)。结论:PR3-ANCA相关性血管炎的发生与发展可能与IL-32表达水平密切相关。

IL-32通过PI3K/AKT/mTOR信号通路抑制胃癌细胞自噬

目的探讨对人胃癌细胞自噬的影响及其可能的作用机制。方法体外培养人胃癌细胞株,应用RNA干扰技术沉默IL-32基因表达,设立阴性对照组(siNC)及实验组(siIL-32#1、siIL-32#2)。采用免疫荧光技术检测IL-32对胃癌细胞自噬的影响。Western blot法检测自噬相关蛋白LC3、p62和Beclin1以及PI3K/AKT/mTOR信号通路的关键蛋白mTOR、p-mTOR、AKT、p-AKT、p110α、p85α的表达。结果沉默IL-32基因后,胃癌细胞MGC-803和AGS的LC3荧光斑点数量显著增多(P<0.05);Western blot检测结果显示,沉默IL-32基因后,p62表达水平显著下调(P<0.05),LC3-Ⅱ和Beclin1表达水平明显上调(P<0.05);且显著降低信号通路关键蛋白p-mTOR/mTOR、p-AKT/AKT、p110α、p85α的表达(P<0.05)。结论IL-32可抑制胃癌细胞发生自噬,其作用机制可能与PI3K/AKT/mTOR信号通路有关。