重组人源化抗人IL-6R单克隆抗体对类风湿关节炎临床疗效及骨保护的影响

目的:观察重组人源化抗人IL-6R单克隆抗体对类风湿关节炎临床疗效、骨保护的影响,为类风湿关节炎治疗提供更多、更积极手段。方法:选取2019年9月—2020年9月萍乡市人民医院门诊及住院就诊、确诊类风湿关节炎患者120例,按照随机数字表法分组,分为对照组和观察组。对照组为安慰剂(淀粉)+甲氨蝶呤+稳定剂量泼尼松≤10 mg/d;观察组为重组人源化抗人IL-6R单克隆抗体注射液+甲氨蝶呤+稳定剂量泼尼松≤10 mg/d,对比疗效、关节肿胀、关节压痛、骨密度、骨钙素等成果。结果:治疗3个月后,观察组的临床总有效率高于对照组(P<0.05),红细胞沉降率、类风湿因子均低于对照组(P<0.05),观察组骨密度T值、骨钙素均优于对照组(P<0.05)。观察组关节肿胀、关节压痛个数均少于对照组,观察组VAS评分及DAS28均低于对照组(P<0.05)。在治疗期间不良反应发生率上,观察组与对照组差异无统计学意义(P>0.05)。结论:在甲氨蝶呤及稳定剂量泼尼松≤10 mg/d基础上,采用重组人源化抗人IL-6R单克隆抗体对类风湿关节炎具有良好的临床疗效,还有助于改善骨保护、骨密度指标,同时不良反应较少。

大鼠压力性损伤皮肤皮下组织中IL-6受体表达及其意义

目的观察大鼠压力性损伤组织中膜结合型IL-6受体(mIL-6R)和可溶型IL-6受体(sIL-6R)及受其调控的细胞因子表达水平,探讨IL-6受体对压力性损伤发生发展的影响及机制。方法将60只雄性SD大鼠随机分为正常对照组(n=20)、压力性损伤模型组(n=20)、sgp130Fc(特异性IL-6反式信号通路阻断剂)预处理组(n=20)。正常对照组不做任何处理;压力性损伤模型组在麻醉下于股薄肌处建立压力性损伤模型;sgp130Fc预处理组大鼠在麻醉前30 min给予sgp130Fc 250 ng腹腔内注射,随后在麻醉下采取与压力性损伤模型组相同的方法建立压力性损伤模型。大鼠建立压力性损伤模型成功后分别取股薄肌处组织及血液,运用ELISA法检测血液中IL-6、sIL-6R表达水平,运用免疫组化法检测组织中mIL-6R、细胞间黏附分子-1(ICAM-1)、血管内皮生长因子(VEGF)及凋亡因子(Bcl-2、Bax、Caspase-3)的表达。运用Tunel法观察组织中细胞凋亡水平。结果与正常对照组大鼠相比,压力性损伤模型组大鼠血液中IL-6、sIL-6R及组织中ICAM-1、Bax、Caspase-3表达明显增加(P<0.05),而组织中mIL-6R、VEGF表达减少(P<0.05)。sgp130Fc预处理组大鼠组织中mIL-6R、VEGF、Bcl-2的表达与压力性损伤模型组大鼠相比无明显差异(P>0.05),ICAM-1、Bax、Caspase-3的表达及细胞凋亡指数明显低于压力性损伤模型组大鼠(P<0.05)。结论压力性损伤大鼠组织中mIL-6R表达减少,血液中sIL-6R水平异常升高。异常升高的sIL-6R可上调炎症因子和凋亡因子表达,促使压力性损伤发生。

基于IL-6/gp130信号研究逍遥抗癌解郁方调节乳腺癌并发抑郁症模型小鼠肿瘤、海马组织免疫的机制

目的 观察逍遥抗癌解郁方(Xiaoyao Kang’ai Jiyu Formula,XYKAJY)对乳腺癌并发抑郁症(breast cancer related depression, BCRD)模型小鼠肿瘤、海马组织免疫的影响。方法 BALB/c雌性小鼠腋下接种1×106个/m L 4T1炎性乳腺癌细胞,7d后观察成瘤情况,将所有成瘤小鼠根据糖水偏好随机分为5组:模型组、紫杉醇合氟西汀组、逍遥抗癌解郁高剂量组、逍遥抗癌解郁低剂量组,并连续21 d背部皮下注射皮质酮(30 mg/kg)以复制BCRD模型,另设空白组。通过旷场、强迫游泳实验检测各组小鼠行为学变化;采用悬液芯片技术检测小鼠血清、海马、肿瘤、前额皮质中白细胞介素(interleukin, IL)-6的含量;采用免疫组化和Western blot法检测肿瘤、海马中白细胞介素6受体(interleukin 6 receptor, IL-6R)、糖蛋白130(glycoprotein 130, gp130)的蛋白表达。结果 与空白组比较,BCRD小鼠的水平及垂直活动次数降低(P<0.01),强迫游泳不动时间延长(P<0.01);血清、肿瘤、海马、前额皮质中IL-6的含量均显著升高(P<0.01,P<0.05);海马组织中IL-6R、gp130表达均显著升高(P<0.01,P<0.05)。与模型组比较,逍遥抗癌解郁高剂量能显著增加模型小鼠的水平及垂直活动次数(P<0.01,P<0.05),缩短游泳不动时间(P<0.01),降低血清、海马、前额皮质、乳腺肿瘤中IL-6含量(P<0.01或P<0.05),并有效降低肿瘤、海马组织中IL-6R、gp130表达(P<0.01,P<0.05)。结论 XYKAJY具有良好的抗癌解郁功效,其机制可能与IL-6/gp130信号异常紧密相关。

肿瘤细胞系IL-6Rα/IL-6Rβ基因表达的生物学效应

应用非同位素原位杂交技术及反转录ＰＣＲ（ＲＴ－ＰＣＲ），检测了１１种肿瘤细胞系上ＩＬ－６Ｒα／ＩＬ－６ＲβｍＲＮＡ的表达情况，同时应用Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ检测了ＩＬ－６Ｒα／ＩＬ－６Ｒβ蛋白的表达。结果表明，１１种细胞系中有６种细胞系检测到ＩＬ－６ＲαｍＲＮＡ的表达，有５种细胞系有ＩＬ－６ＲβｍＲ－ＮＡ的表达，有两种细胞系中均没有表达，在蛋白检测中得到同样的结果。生物学活性检测发现，在细胞系中只有当ＩＬ－６Ｒα／ＩＬ－６Ｒβ亚基同时在细胞中表达，而且表达量具有一定合适比例时，才能对一定浓度的ＩＬ－６刺激产生明显的生物学效应。

寻常型银屑病血热证患者IL-6R/STAT3通路及其下游基因的表达

目的:探讨IL-6R/STAT3通路及其下游基因在寻常型银屑病血热证中的表达及意义。方法:采用RTPCR方法检测寻常型银屑病血热证患者及正常对照组外周血白细胞IL-6R、JAK2、STAT3、CD80、CCL5的表达。结果:上述检测指标相对表达量在疾病组中分别为0.333±0.079、0.206±0.040、0.296±0.048、0.219±0.053、0.588±0.114,与正常对照组表达量0.205±0.060、0.192±0.038、0.194±0.057、0.003±0.001、0.372±0.107比较,其中IL-6R、STAT3、CD80、CCL5表达水平明显高于正常对照组,差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01),而JAK2表达无明显变化,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:IL-6R/STAT3通路及其下游CD80、CCL5均可能参与了寻常型银屑病血热证的发病过程;IL-6R可能不是通过JAK2而是通过JAK家族中的其他途径或旁路来影响STAT3的表达。

共聚物-1对慢性高眼压模型大鼠视网膜神经节细胞凋亡及IL-6R表达的影响

目的 :观察共聚物 1(copolymer 1,COP 1)诱导的自身免疫反应对慢性高眼压 (elevatedintraocularpressre,EIOP)模型SD大鼠视网膜神经节细胞 (retinalganglioncell,RGC)凋亡和白细胞介素 6受体 (IL 6R)表达的影响。方法 :将SD大鼠随机分为正常对照组、安慰剂免疫的EIOP组和COP 1免疫的EIOP组。应用烧灼巩膜静脉的方法制作大鼠慢性EIOP模型。于COP 1免疫的EIOP组动物的后足皮下注射COP 1,安慰剂免疫的EIOP组动物注射生理盐水 ,对照组动物不做任何处理。用免疫组化染色法检测RGC上IL 6R的表达 ,用TUNEL染色法检测各组RGC的凋亡。结果 :COP 1免疫的EIOP组的RGC凋亡数较安慰剂免疫的EIOP组减少 (P <0 .0 5 )。IL 6R在正常大鼠RGC上有表达 ,安慰剂免疫的EIOP组表达增强 (P <0 .0 5 ) ,COP 1免疫的EIOP组表达水平最高 (P <0 .0 5 )。结论 :COP 1诱导的自身免疫对慢性EIOP条件下的RGC具有保护作用 ,并可使RGC表达IL 6R的水平升高。推测COP 1诱导的RGC上IL 6R表达水平的增高 ,可能与自体免疫反应的神经元保护作用有关。本研究结果对青光眼患者视网膜损伤的治疗具有一定的意义。

人可溶性IL-6R及其突变体基因在COS7细胞中的表达及活性分析

目的：研究人可溶性ＩＬ６Ｒ（ｈｓＩＬ６Ｒ）的空间构效关系，为小分子拮抗剂设计提供理论依据。方法：首先利用ＰＣＲ技术扩增天然人ｓＩＬ６Ｒ基因片段，然后将第２８０位Ｈｉｓ残基突变成Ｉｌｅ。天然基因和突变体基因分别转染ＣＯＳ７细胞，经ＥＬＩＳＡ和Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ检测证实转染细胞上清中的表达产物，并利用ＢｉｎｄｉｎｇａｓａｙＥＬＩＳＡ和生物学功能分析法检测表达产物与ＩＬ６的结合能力以及它们所介导的ＩＬ６信号转导功能的差异。结果：突变体Ｈ２８０Ｉ比天然ｓＩＬ６Ｒ具有更高的ＩＬ６结合能力，但拮抗ＩＬ６在两种效应细胞系上的信号传递功能。结论：第２８０位Ｈｉｓ残基对ｓＩＬ６Ｒ发挥正常生物学功能具有重要影响，是符合拮抗剂设计要求的一个很好的候选位点。

IL-6/IL-6R系统介导靶向治疗白血病策略

导向杀伤是治疗白血病的必然趋势 ,而IL 6 IL 6R系统是细胞因子 受体导向治疗的重要部分。IL 6R在很多肿瘤细胞上都有表达 ,如多发性骨髓瘤、前列腺癌、白血病等。本文简要综述了IL 6R的表达、IL

miR-143-3p靶向IL-6R/STAT3通路抑制IL-6诱导的人肺微血管内皮细胞血管生成

目的探究miR-143-3p在IL-6诱导的人肺微血管内皮细胞(HLMVEC)血管生成中的作用和机制。方法首先使用100 ng/ml重组IL-6蛋白处理HLMVEC细胞,管腔形成实验分析IL-6对细胞管腔形成数目的影响,Real-time PCR检测IL-6对miR-143-3p和VEGF mRNA表达的影响。Western blot检测VEGF蛋白水平的变化。然后使用miR-143-3p mimics过表达miR-143-3p,按照上述方法检测miR-143-3p对IL-6诱导的管腔形成数目、VEGF mRNA和蛋白表达的影响。此外,使用双荧光素酶报告基因检测法分析miR-143-3p和IL-6R的关系,Real-time PCR检测miR-143-3p过表达对IL-6R mRNA表达的影响,Western blot检测IL-6R、STAT3和磷酸化STAT3(p-STAT3)蛋白水平的变化。结果 IL-6能够增加管腔形成数目和VEGF的表达,降低miR-143-3p的表达。过表达miR-143-3p能够抑制IL-6诱导的管腔形成、VEGF、IL-6R和p-STAT3的表达水平,但是不影响STAT3的表达。此外还发现IL-6R是miR-143-3p的一个靶基因。结论 miR-143-3p能够抑制IL-6诱导的内皮细胞血管生成,这可能是通过抑制IL-6R/STAT3通路发挥作用的。

吴茱萸碱对结直肠癌小鼠IL-6R/STAT3通路的影响

目的探讨吴茱萸碱对结直肠癌小鼠的抑瘤作用及对白介素-6受体(interleukin-6 receptor,IL-6R)/信号转导转录激活因子3(signal transducer and activator of transcription 3,STAT3)通路的影响。方法将59只BALA/C小鼠随机留取9只作为对照组,其余皮下接种CT-26结直肠癌细胞株建立结直肠癌小鼠模型,将建模成功的40只小鼠随机分为模型组、顺铂组、吴茱萸碱组和顺铂+吴茱萸碱组,每组10只。顺铂组用15 mg·kg^(-1)·d^(-1)顺铂灌胃,顺铂+吴茱萸碱组用15 mg·kg^(-1)·d^(-1)顺铂+15 mg·kg^(-1)·d^(-1)吴茱萸碱灌胃,对照组、模型组用等量生理盐水灌胃。各组均每日灌胃1次,连续19周。末次灌胃24 h后,处死小鼠,称肿瘤质量并计算肿瘤体积、肿瘤抑制率;用酶联免疫吸附实验(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)检测小鼠肿瘤组织的白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)、白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)水平;用HE染色观察小鼠肿瘤组织的病理学变化;用免疫组织化学法检测肿瘤组织的微血管密度(microvesse density,MVD)和血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)水平;用Western blot检测肿瘤组织中IL-6R/STAT3通路相关蛋白的表达水平。结果从模型组到吴茱萸碱组、顺铂组、顺铂+吴茱萸碱组,小鼠肿瘤的质量依次减轻、肿瘤体积依次减小,IL-6、IL-1β、TNF-α水平依次降低(P<0.05)。模型组小鼠肿瘤组织中可见大片灶性坏死,细胞核增大、深染,大小不一,排列紊乱,有异形表现,呈典型恶性肿瘤细胞形态特征,肿瘤细胞密集;吴茱萸碱组、顺铂组和顺铂+吴茱萸碱组的肿瘤细胞核固缩、变小,肿瘤细胞形态破坏,密度依次降低,肿瘤组织内坏死区依次增大,MVD依次减小(P<0.05),VEGF阳性表达依次减弱(P<0.05)。从模型组到吴茱萸碱组、顺铂组、顺铂+吴茱萸碱组,小鼠肿瘤组织中IL-6R、p-STAT3、G 1/S-特异性周期蛋白-D1(G 1/S specific cyclin D1,Cyclin D1)、生存素(survivin)的蛋白水平依次下降(P<0.05)。结论吴茱萸碱可能通过抑制IL-6R/STAT3通路,发挥抗血管生成效应,从而抑制肿瘤的生长。

胃腺癌细胞系MGC803中miR-23a靶基因IL-6R的鉴定

目的建立双荧光蛋白报告基因分析系统,并用来验证miR-23a的靶基因白细胞介素-6受体(IL-6R)。方法选取表达绿色荧光蛋白的质粒pcDNA3/EGFP,将IL-6R3′UTR的一段特异性序列插入该质粒中,并与miR-23a及表达红色荧光蛋白质pDsRed2-N1共同转染胃腺癌细胞系MGC803,转染后的细胞和提取的蛋白样品,分别用荧光显微镜和荧光分光光度计进行定性和定量检测。结果共转miR-23a和pcDNA3/EGFP-IL-6R3′UTR质粒后,绿色荧光蛋白的表达量明显低于pcDNA3和pcD-NA3/EGFP-IL-6R3′UTR共转组。结论研究表明IL-6R可能是miR-23a的直接靶基因。

bcl-2、IL-6、IL-6R反义寡脱氧核苷酸对小细胞肺癌细胞作用的比较

目的:比较bcl-2、白介素-6(interleukin-6,IL-6)、白介素-6受体(interleukin-6 receptor,IL-6R)反义硫代磷酸寡脱氧核苷酸(antisense phosphorothiate oligodeoxynucleotide,AS-PS-ODN)对小细胞肺癌细胞株NCI-H446细胞增殖及诱导凋亡的作用,初步探讨反义核苷酸技术治疗中靶基因的选择策略。方法:合成反义寡脱氧核苷酸bcl-2AS-PS-ODN、IL-6AS-PS-ODN、IL-6RAS-PS-ODN,分别作用于NCI-H446细胞株,通过细胞克隆形成实验检测细胞增殖活性的变化,细胞凋亡线粒体流式检测及DNA倍体分析检测细胞凋亡,半定量RT-PCR检测相关基因表达水平的变化。结果:(1)bcl-2AS-PS-ODN、IL-6AS-PS-ODN、IL-6RAS-PS-ODN均能够抑制肺癌细胞增殖活性和诱导细胞凋亡,其中以IL-6AS-PS-ODN抑制作用最强,bcl-2AS-PS-ODN次之,IL-6RAS-PS-ODN作用最弱。(2)3种反义寡脱氧核苷酸均能下调肺癌细胞相应基因的表达水平,其中以IL-6下调幅度最大,达(84.1±5.01)%;bcl-2和IL-6R基因下调幅度相近,分别为(62.6±3.42)%和(60.3±4.45)%。(3)反义核苷酸作用后除了引起自身基因表达下调外,还伴对其他基因表达的调节作用,如IL-6AS-PS-ODN作用使bcl-2基因表达下调(32.2±0.20)%;而bcl-2AS-PS-ODN作用使IL-6基因表达上调(74.3±4.13)%。结论:IL-6AS-PS-ODN较bcl-2AS-PS-ODN和IL-6RAS-PS-ODN能更有效地诱导小细胞肺癌细胞凋亡,IL-6是NCI-H446小细胞肺癌反义核苷酸治疗较为合适的靶基因。

IL-6R抗体调节PMMA骨水泥介导的滑膜成纤维细胞MMPs和血管化因子mRNA表达

目的探讨IL-6R抗体对PMMA骨水泥介导的滑膜成纤维细胞MMP-1和MMP-3、VEGF和PDGF mRNA表达的调节。方法从全髋关节置换术中获取滑膜组织消化并传代培养。倒置相差显微镜对滑膜细胞进行形态学观察,免疫细胞化学(SABC法)染色对滑膜成纤维细胞进行鉴定。根据加入不同培养物,实验分为3组:PMMA组:75μg/mL PMMA骨水泥颗粒;IL-6R抗体组:10 ng/mL IL-6R抗体+75μg/mL PMMA骨水泥颗粒;空白对照组。采用细胞计数试剂盒-8(Cell Counting Kit-8,CCK-8)检测IL-6R抗体、PMMA对滑膜成纤维细胞增殖活力影响;实时荧光定量PCR(real timefluorescence quantitative polymerase chain reaction,FQ-PCR)检测MMP-1、MMP-3、VEGF和PDGF mRNA表达。结果原代滑膜细胞贴壁后,初期为短梭形。连续3次传代后,95%以上细胞为长梭形成纤维细胞样细胞。SABC法染色检测结果显示:上述成纤维样细胞抗CD68抗体阴性,抗vimentin抗体呈棕黄色,为阳性反应。CCK-8检测显示:与PMMA组和空白对照组相比,IL-6R抗体组吸光度(A)值明显降低(P<0.01);而空白对照组与PMMA组间吸光度(A)值无统计学差异(P>0.05)。FQ-PCR检测发现:与PMMA组和空白对照组相比,IL-6R抗体组中MMP-1和MMP-3、VEGF和PDGF mRNA的表达明显受到抑制(P<0.01);PMMA组中MMP-1和MMP-3、VEGF和PDGF表达较空白对照组升高(P<0.05)。结论 IL-6R抗体能显著抑制滑膜成纤维细胞MMP-1和MMP-3、VEGF和PDGFmRNA的表达,为生物制剂预防和治疗假体无菌性松动提供分子生物学的理论依据。

首发精神分裂症患者血浆IL-6、sIL-6R及IL-13水平研究

目的 探讨首发精神分裂症患者血浆白细胞介素 6(IL 6)、可溶性白细胞介素 6受体 (sIL6R)及白细胞介素 13(IL 13)水平的变化。方法 采用酶联免疫吸附法 (ELISA)对 30例精神分裂症患者和 28例健康对照者血浆IL 6、sIL 6R及IL 13水平进行检测。结果 精神分裂症患者血浆IL 6 [ ( 20. 18±2. 59)pg/ml]及sIL 6R[ (33. 87±16. 51)pg/ml]水平显著高于对照组 (P<0. 05),而血浆IL 13 [ (16. 15±11. 98)pg/ml]水平显著低于对照组 [ (24. 41±18. 26)pg/ml] (P<0. 05);以阴性症状为主患者的IL 6[ (21. 04±1. 72)pg/ml]及sIL 6R[ (32. 83±15. 72)pg/ml]水平均高于阳性组,其中阴性组患者IL 6显著高于阳性组[ (18. 28±3. 22)pg/ml] (P<0. 05),阴性组患者血浆IL 13[ (12. 72±9. 01)pg/ml]水平显著低于阳性组[ (19. 82±7. 83)pg/ml] (P<0. 05);未发现患者组及对照组血浆IL 6、sIL 6R及IL 13之间的相关性。结论 精神分裂症患者存在IL 6、IL 13介导的免疫功能异常,血浆IL 6水平升高、IL 13水平降低可能是阴性症状为主患者的特征性免疫学指标之一。

电针干预对慢性束缚应激模型大鼠不同时段血清IL-6、sIL-6R表达水平的影响

目的:观察电针干预对束缚应激模型大鼠行为学及血清中白细胞介素6(IL-6)与可溶性白细胞介素6受体(s IL-6R)表达的影响,探讨其相关免疫学机制。方法:将60只SD大鼠随机分为对照组、模型组与电针组,每组20只。对照组群养;模型组采用孤养结合慢性束缚应激方式,每日束缚6 h(9:00—15:00);电针组在每日束缚前给予电针刺激"百会""印堂";束缚期间3组均禁食禁水,其余时间自由饮食饮水。采用旷场和体质量实验进行行为学评价,并在第7天、28天、35天采用Bio-Plex检测大鼠血清中IL-6、ELISA检测SIL-6R水平。结果:1行为学:与对照组相比,模型组大鼠体质量及活动性均显著降低(P<0.01),电针组大鼠体质量及活动性表达无显著差异(P>0.05)。2血清IL-6表达:实验day7,与对照组相比,模型组IL-6表达显著增加(P<0.01),电针组IL-6表达无显著差异(P>0.05);与模型组相比,电针组IL-6表达显著降低(P<0.05)。实验day28,与对照组相比,模型组IL-6表达显著增加(P<0.01),电针组IL-6表达无显著差异(P>0.05);与模型组相比,电针组IL-6表达显著降低(P<0.01)。实验day35,3组大鼠之间IL-6表达无显著差异(P>0.05)。3血清s IL-6R表达:实验day7,3组大鼠之间s IL-6R表达无显著差异(P>0.05);实验day28,与对照组相比,模型组s IL-6R表达显著增加(P<0.01),电针组s IL-6R表达无显著差异(P>0.05);与模型组相比,电针组s IL-6R表达显著降低(P<0.05)。实验day35,3组大鼠之间s IL-6R表达无显著差异(P>0.05)。结论:慢性束缚应激模型大鼠血清IL-6、s IL-6R表达显著增加,并随时间出现相应变化,电针干预可对其进行显著调控,与行为学症状改善一致,这可能是电针抗抑郁的作用机制之一。

IL-6/sIL-6R对人脐血CD34^+细胞体外扩增的作用

背景和目的:造血干细胞具有自我更新、多向分化与重建长期造血的潜能,因此,造血干细胞广泛应用于干细胞移植、免疫治疗、基因治疗等领域。胎儿脐带血中富含造血干细胞,但单份脐带血中造血干细胞的数量有限,不能充分满足临床和科研需要,因此在体外培养使脐带血干/祖细胞数量扩增的研究日益受到重视。已知一些细胞因子可以在体外培养中使脐血干/祖细胞大量扩增。新近发现IL-6/sIL-6R(可溶性IL-6受体)或其融合蛋白可促使脐带血CD34+细胞中CD34+gp130+IL-6R-细胞亚群在体外培养中大量扩增。本实验旨在观察IL-6/sIL-6R在脐带血CD34+细胞体外扩增中的作用,并探讨合适细胞因子组合。方法:脐血CD34+细胞用MiniMACS分离,然后在含有不同细胞因子组合的液体培养基中体外培养7天或14天,培养前后分别进行有核细胞计数、用FCM(流式细胞术)测定CD34+细胞比例计算CD34+细胞总数及进行CFU-GM集落培养。根据不同细胞因子组合分为空白对照组,SCF组,SCF+IL-6/sIL-6R组,SCF+FL+IL-6/sIL-6R组,SCF+FL组。结果:空白对照组和SCF组CD34+细胞数量在培养7天或14天后明显下降。SCF+IL-6/sIL-6R组培养7、14天分别使有核细胞及CD34+细胞绝对数扩增(7.1±2.4)倍、(39.0±14.0)倍及(1.8±0.7)倍、(4.8±2.4)倍;SCF+FL+IL-6/sIL-6R组(16.

人可溶性IL-6R突变体H280 Ⅰ生物学特性的初步研究

利用定点突变技术获得的ｓＩＬ－６Ｒ突变体Ｈ２８０Ⅰ基因与天然ｓＩＬ－６Ｒ（ｗｔｓＩＬ－６Ｒ）基因分别转染Ｃｏｓ７细胞，转染细胞上清在７ＴＤ１、Ｒ２细胞系上测定生物学活性，并同时进行ＩＬ－６结合能力分析。结果显示，ｓＩＬ－６ＲＨ２８０Ⅰ可以保持同ＩＬ－６的结合能力，同时对ＩＬ－６的信号传递过程起拮抗作用，提示Ｈ２８０的改变可能影响ＩＬ－６Ｒ胞外区与ｇｐ１３０的结合。

IL-6/IL-6受体mRNA反义寡核苷酸抑制骨吸收的实验研究

目的 探讨 IL- 6及其受体反义寡核苷酸在体外对骨吸收的影响及意义。方法 分离培养新生小鼠颅盖骨器官 ,分别用 IL- 6m RNA反义寡核苷酸 (ASON- 1 )、IL- 6受体 m RNA反义寡核苷酸 (ASON- 2 )、无义寡核苷酸 (NSO)、IL- 6或 IL- 6联合 ASON- 1及 ASON- 2作用培养颅盖骨 ,未加药组为对照。培养 48h后 ,取培养上清液测定钙含量 ,将实验组钙含量与对照组钙含量比值作骨吸收指数。结果 ASON- 1和 ASON- 2均可轻度降低培养颅盖骨的骨吸收指数。二者在浓度为 5μmol/ L时对骨吸收指数的抑制百分率分别为 1 0 .8%和 8.6% ,且 ASON- 1的作用有一定的剂量依赖关系 ;IL- 6作用颅盖骨使骨吸收指数呈剂量依赖性升高 ;当 IL- 6(40 ng/ ml)分别与 5μmol/ L ASON- 1或 5μmol/ L ASON- 2共同作用颅盖骨时 ,IL - 6对骨吸收的刺激性作用均受到抑制 ,其抑制百分率分别为 1 9.3%和 58.0 % ,ASON- 2对 IL- 6的抑制作用明显强于 ASON- 1 ;NSO对骨吸收指数无影响。结论 ASON- 1和 ASON- 2均能轻度抑制正常的颅盖骨骨吸收 ;对 IL- 6刺激导致的颅盖骨骨吸收 ,ASON- 2的抑制作用明显强于ASON- 1。

消化道恶性肿瘤伴癌性腹水患者腹腔化疗前后血清及腹水IL-6和sIL-6R水平变化的意义

目的:探讨腹腔化疗对癌性腹水患者血清及腹水IL-6及sIL-6R水平影响及其临床意义。方法:采用放免法测定病人腹腔化疗前、治疗后四周血清及腹水IL-6水平变化,用ELISA同时测定sIL-6R水平变化,并与正常对照组相对比。结果:消化道恶性肿瘤伴癌性腹水患者血清IL-6和sIL-6R水平较正常对照组明显升高,腹水IL-6和sIL-6R水平较血清IL-6和sIL-6R水平明显增高。腹腔化疗后血清IL-6和sIL-6R水平下降,腹水IL-6和sIL-6R水平变化与血清水平变化相平行。且血清及腹水IL-6及sIL-6R水平变化与腹腔化疗是否有效有密切关系。结论:监测癌性腹水患者血清及腹水IL-6及sIL-6R水平变化是判断及预测腹腔化疗是否有效的途径之一。

IL-17调控IL-6/IL-6R/JAK1/STAT3信号通路影响喉癌细胞的侵袭和转移

目的研究白介素(IL)-17通过IL-6/IL-6R/JAK1/STAT3信号通路调控人源性高分化喉癌细胞(Hep-2)侵袭、转移。方法以Hep-2细胞为研究对象,设IL-17刺激剂0、1、50、100 ng/ml浓度组,Western blot法检测不同分组在IL-17的刺激下,Hep-2细胞中IL-6、IL-6R、JAK1、p-JAK1、STAT3、p-STAT3的表达变化。迁移、侵袭实验观察IL-17的刺激对Hep-2细胞侵袭、迁移的影响。结果 Western blot实验中,在IL-17刺激下,1、50、100 ng/ml浓度组较0 ng/ml浓度组Hep-2细胞的IL-6、IL-6R、p-JAK1、p-STAT3的表达明显增加(P<0.01),50、100 ng/ml浓度组较1 ng/ml浓度组Hep-2细胞的IL-6、IL-6R、p-JAK1、p-STAT3的表达明显增加(P<0.01),100 ng/ml浓度组较50 ng/ml浓度组Hep-2细胞的IL-6R、p-JAK1、p-STAT3的表达明显增加(P<0.01);各组间JAK1、STAT3的表达无明显变化。侵袭与迁移实验显示IL-17可以促进Hep-2细胞的侵袭和迁移。结论 IL-17可能通过IL-6/IL-6R/JAK1/STAT3信号通路促进Hep-2细胞的侵袭和转移。