人IL-2RαcDNA探针的制备及其在mRNA检测上的应用

从质粒pJSB15中分离出人IL-2RαcDNA 673b_p片段,用放射性同位素α-^(32)p标记此片段,制备了IL-2RαcDNA探针。利用该探针与淋巴细胞RNA进行点杂交。结果证明,pHA、TPA均可诱导IL-2Rα转录增加,二者合用有明显的协同效应;且发现新鲜分离的多种白血病细胞测出的IL-2R_α(?)RNA水平高低不同,这可能有助于临床分型。

人IL-2受体α链cDNA5′端缺失变异次级克隆的构建

在机体的免疫应答过程中,IL-2和IL-2高亲和力受体的相互作用,具有非常重要的意义。高亲和力IL-2受体是由α和β两条链构成的复合物,α链被诱导表达,β链持续表达。现已表明。

人白细胞介素2受体α链cDNA导入哺乳细胞及其克隆与稳定表达的研究

按DNA—磷酸钙共沉淀法将人白细胞介素2受体α链cDNA转染中国仓鼠卵巢细胞(CHOdhfr^-)及小鼠成纤维细胞(L929),获得稳定表达人IL-2Rα链的CHOdhfr^+细胞克隆。经RNA点渍杂交分析、荧光标记IL-2染色法、特异性ELISA和玫瑰花环试验检测证明,哺乳细胞表达的重组IL-2Rα链具有结合IL-2和抗Tac McAb的能力。还报道了T细胞白血病Jukat及Molt-4等细胞系异常表达IL-2R的结果,并作了分析讨论。

人类IL-3受体α亚单位与小鼠AIC2B蛋白的相互作用

目的 探索人类IL - 3受体 (IL - 3R)α亚单位与小鼠内源性AIC2B蛋白在诱导细胞增殖信号表达过程中的相互作用。方法 通过PCR扩增技术 ,构建了IL - 3Rα亚单位胞浆域缺失突变子 34、2 2和CD ,然后将野生型和突变型IL - 3Rα亚单位cDNA分别转染到含小鼠IL - 3R基因表达的BaF3细胞 ,并检测了阳性转染子的增殖信号传导和酪氨酸磷酸化。结果 表达野生型hIL - 3Rα/ βc的BaF3阳性对照克隆在生理浓度hIL - 3诱导后即可出现细胞增殖和胞浆信号蛋白 βc、Jak2及Shc磷酸化 ;而含野生型IL - 3Rα亚单位和AIC2B的BaF3细胞可出现高浓度hIL - 3刺激的细胞增殖反应 ,但无信号传导分子的活化 ;共表达突变型IL - 3Rα与AIC2B的BaF3细胞及未转染的BaF3细胞则对各种浓度的hIL - 3刺激均无反应。结论 尽管hIL - 3Rβc亚单位在hIL - 3诱导的信号传导过程中担负关键作用 ,但小鼠内源性AIC2B也可与hIL - 3Rα重建功能性hIL - 3R ,这种功能的表达需要hIL -

质粒P^（JSB15）DNA的提取及鉴定研究

质粒ＰＪＳＢ１５ＤＮＡ含有人ＩＬ２ＲαｃＤＮＡ６７３ｂｐ片段，本研究从３０００ｍｌ菌液中提取出７９２ｍｇ质粒ＰＪＳＢ１５，收获率为２６４ｍｇ／Ｌ。同时对其纯度、浓度、分子量及酶切图谱进行了鉴定和分析。