补阳还五汤对AD大鼠海马区β-APP mRNA、IL-1β mRNA、IL-6mRNA、TNF-α mRNA表达影响的研究

目的:采用分子杂交技术观察补阳还五汤对Aβ1-40所致老年痴呆(AD)大鼠海马区β-APP mRNA、IL-1βmRNA、IL-6 mRNA及TNF-αmRNA表达的影响,进一步探讨该组方治疗AD的机制,为其临床应用提供实验依据。方法:70只Wistar雄性大鼠随机分为正常组、假手术组、模型组、补阳还五汤组、补气组、活血组和脑复康组,每10只。采用注射Aβ1-40的方法制备AD模型,分子杂交技术检测大鼠海马区β-APP mRNA、IL-1βmRNA、IL-6 mRNA、TNF-αmRNA的表达。结果与结论:补阳还五汤能够明显降低AD大鼠海马区β-APP mRNA、IL-1βmRNA、IL-6mRNA和TNF-αmRNA的表达,从而改善大脑记忆障碍,达到防治AD的作用。

氧化苦参碱干预急性出血坏死性胰腺炎大鼠TNF-α mRNA和IL-1β mRNA的表达

目的探讨氧化苦参碱(oxymatrine,OM)干预实验性急性出血坏死性胰腺炎(acute hemorrhagic necrotizing pan-creatitis,AHNP)大鼠TNF-αmRNA和IL-1βmRNA的表达。方法以5 g/dl牛磺胆酸钠胰胆管逆行注射建立Sprague-Dewley(SD)大鼠AHNP,将SD大鼠随机分为SO组、AHNP-NS组及AHNP-OM组。检测血清TNF-α和IL-1β含量及胰腺组织中TNF-αmRNA和IL-1βmRNA的表达。结果AHNP-NS组和AHNP-OM组血清TNF-α水平3 h与6 h分别为286.5±50.3pg/ml和150.3±40.7 pg/ml及500.5±45.3 pg/ml和240.5±60.3 pg/ml(P<0.05);AHNP-NS组和AHNP-OM组3 h与6 h血浆IL-1β分别为:293.8±46.3 pg/ml,388.0±44.5 pg/ml和150.2±47.5 pg/ml,182.7±30.6 pg/ml(P<0.05);AHNP-OM组造模3 h与6h胰腺组织TNF-αmRNA和IL-1βmRNA的表达较AHNP-NS组显著减弱(P<0.05)。结论OM预处理能够显著减少牛磺胆酸钠SD大鼠AHNP模型炎症细胞因子IL-1β和TNF-α,从而改善胰腺炎病变的严重程度。

MEK抑制剂阻断小鼠脑缺血后ERK通路的激活和IL-1β mRNA合成

目的 研究细胞外信号调节激酶 (ERKs)在脑缺血中的作用以及U0 12 6对缺血脑组织保护作用的机制。方法 线栓法制作小鼠大脑中动脉栓塞 (MCAO)模型 ,颈内静脉注射U0 12 6 ;Westernblot法和免疫组化法检测 pMEK、pERK1/2和 pElk 1;核糖核酸酶保护测定法检测IL 1βmRNA含量。 结果 注射U0 12 6后的MCAO小鼠 pMEK活性降低 ,其降低幅度与U0 12 6有剂量依赖的关系 ,并在缺血前给药有效 ;U0 12 6注射后pERK1/2和 pElk 1也表现出相似的下降变化。小鼠MCAO后 1到 2hIL 1βmRNA水平上升 ;而注射U0 12 6后IL 1βmRNA在MCAO后 1至 4h内下降。 结论 ERK在小鼠脑缺血中发挥重要作用。静脉注射MEK抑制剂U0 12 6可阻断脑缺血引起的pMEK、pERK1/2和 pElk 1的活性增加。U0 12 6通过阻断ERK通路进而降低IL

WPY对重症急性胰腺炎大鼠肺内IL-1β mRNA表达的影响

目的 :观察中药WPY对重症急性胰腺炎 (severeacutepancreatitis,SAP )肺组织内IL 1 βmRNA表达的影响。方法 :SD大鼠 48只随机分为 4组 ,正常对照组、SAP模型组、WPY高 ,低剂量治疗组。采用牛磺胆酸钠胰腺被膜下注射诱导大鼠SAP模型 ,分别于术后 3、6、1 2小时检测血清淀粉酶 ,半定量RT PCR检测肺组织IL 1 βmRNA的表达。 结果 :造模组血清淀粉酶显著升高 ,WPY治疗后血清淀粉酶显著下降 ;正常对照组、造模组和治疗组肺组织均可见IL 1 β的表达 ,造模组较正常对照组表达高 ,且随时间 3、6、1 2h变化肺组织内IL 1 β表达呈递增趋势 ,用WPY后 ,随着药物剂量增加IL 1 β表达呈递减趋势。 结论 :中药WPY可以降低大鼠急性胰腺炎早期 3 ,6,1 2h血清淀粉酶和肺内IL 1 βmRNA的表达 ,从而提示WPY可以减轻细胞因子介导的全身炎症反应。

微量胃黏膜IL-1β mRNA水平Real-time PCR检测方法的建立

目的建立微量IL-1βmRNA表达水平的Real-time PCR检测法。方法 20例消化道疾病患儿的胃粘膜用来做本次研究。IL-1βmRNA水平检测使用Real-time PCR荧光探针法,保守基因GAPDH做内参,采用比较循环CT法分析IL-1βmRNA的表达量。结果运用IL-1βmRNA Real-time PCR荧光探针法检测出了20例消化道疾病患儿胃粘膜IL-1βmRNA的表达量。结论成功建立了微量胃粘膜IL-1βmRNA水平Real-time PCR检测法,为IL-1β在胃肠道疾病发生发展过程中的研究提供了有力工具。

中药熏蒸疗法对Ⅱ型胶原诱导型关节炎大鼠滑膜细胞IL-1β mRNA表达的影响

目的观察中药熏蒸疗法对II型胶原诱导型关节炎(CIA)大鼠关节滑膜细胞IL-1βmRNA表达水平的影响,以探讨中药熏蒸疗法治疗类风湿性关节炎(RA)的机理。方法建立CIA模型,将雄性Wistar大鼠40只随机分为正常组、模型组、水熏组、低熏组、高熏组,观察各组大鼠膝关节滑膜细胞IL-1βmRNA的表达。结果熏蒸各组大鼠滑膜细胞中IL-1βmRNA的表达量明显低于模型组,具有非常显著差异(P<0.01);而各熏蒸组组间比较,高、低熏组明显低于水熏组,均有非常显著差异(P<0.01);高熏组明显低于低熏组,亦具有显著差异(P<0.01)。结论中药熏蒸疗法能明显抑制CIA大鼠滑膜细胞IL-1βmRNA表达,并推测中药熏蒸疗法抗炎机制与其抑制IL-1β的表达相关。

巨噬细胞IL-1β mRNA在高温和内毒素复合影响下的表达

目的研究高温和内毒素(LPS)双重因素对巨噬细胞IL-1βmRNA表达的影响。方法采用体外培养的巨噬细胞系RAW264.7细胞,分为常温(37℃)对照组,高温(40℃)对照组,37℃+LPS组,38℃+LPS组,39℃+LPS组和40℃+LPS组。在含95%O2和5%CO2条件下培养1、2、3 h后,TRIZOL提取细胞总RNA,核酸蛋白分析仪检测RNA的浓度和纯度,琼脂糖凝胶电泳分析RNA的完整性,RT-PCR方法检测巨噬细胞IL-1βmRNA的表达。结果在提取的总RNA无降解、无蛋白质污染的前提下,温度升高和内毒素都能引起IL-1βmRNA表达上调,内毒素在38℃时对IL-1βmRNA表达的上调作用最大,但高温和内毒素复合影响可下调RAW264.7细胞IL-1βmRNA表达。结论单纯的高温或内毒素均能上调RAW264.7细胞IL-1βmRNA表达,但高温复合内毒素却下调IL-1βmRNA表达。

过表达miR-144-3p下调感染巨噬细胞 IL-6 mRNA抑制BCG的存活

探究miR-144-3p对巨噬细胞IL-6 mRNA表达量和巨噬细胞免疫能力的影响,为结核诊疗提供理论参考。方法(1)建立BCG感染THP-1巨噬细胞模型,qPCR检测感染不同时间miR-144-3p和IL-6 mRNA表达变化;(2)瞬转miR-144-3p模拟物/抑制剂来过表达/抑制miR-144-3p后,qPCR检测感染不同时间miR-144-3p和IL-6 mRNA表达变化;皮尔森相关系数分析miR-144-3p和IL-6 mRNA的相关性;(3)CCK-8检测瞬转miR-144-3p模拟物/抑制剂后,CCK-8检测BCG感染的巨噬细胞增殖能力;CFU检测BCG存活状态。结果显示:(1)巨噬细胞感染BCG后,miR-144-3p和IL-6 mRNA表达均显著上升(P<0.05),miR-144-3p表达量在12 h达到峰值,IL-6 mRNA表达量在24 h达到峰值;(2)巨噬细胞感染BCG后,过表达miR-144-3p使IL-6 mRNA表达显著下降(P<0.01);抑制miR-144-3p使IL-6 mRNA表达显著上升(P<0.01);皮尔森相关系数分析结果显示两者存在负相关性;(3)过表达/抑制miR-144-3p不影响巨噬细胞增殖能力,但过表达miR-144-3p能抑制巨噬细胞中BCG的存活。结论:BCG感染巨噬细胞后miR-144-3p和IL-6 mRNA表达均显著上升;过表达/抑制巨噬细胞miR-144-3p,miR-144-3p可能负调控IL-6 mRNA表达;过表达miR-144-3p能抑制BCG存活,进而增强巨噬细胞的先天免疫能力。

电针对脑缺血再灌注大鼠缺血脑区IL-1β和TNF-α mRNA表达的调节

目的 :探讨早期针刺治疗抗脑缺血再灌注炎性损伤的机制。方法 :采用大脑中动脉线栓法制备MCAO缺血再灌注模型 ,应用原位杂交的方法观察脑缺血再灌注及电针对大鼠大脑皮质、纹状体IL 1 βmRNA、TNF αmRNA表达的影响。结果 :脑缺血再灌注后 ,缺血侧皮层及纹状体IL 1 βmRNA、TNF αmRNA免疫阳性细胞表达增高 (模型组与正常组、假手术组比较P <0 0 1 ) ;电针可显著降低缺血侧皮层及纹状体IL 1 βmRNA、TNF αmRNA免疫阳性细胞表达 (电针组与模型组比较P <0 0 1 )。结论 :早期针刺治疗可能通过下调缺血脑区IL 1 βmRNA、TNF

IL-1βmRNA、TNF-αmRNA在成人牙周炎患者牙龈组织中表达的研究

目的 :检测白细胞介素 1β(IL_1β)mRNA、肿瘤坏死因子α(TNF_α)mRNA在成人牙周炎患者牙龈组织中表达 ,探讨IL_1β和TNF_α与牙周炎致病机理的关系。 方法 :采用RT_PCR方法检测IL_1βmRNA、TNF_αmRNA在 19例成人牙周炎患者炎症牙龈和 9例牙周健康者牙龈组织中表达。结果 :IL_1βmRNA表达强度在成人牙周炎病变牙龈(0 819± 0 0 45 )显著高于正常牙龈 (0 30 6± 0 0 87) (t=3 71,P <0 0 1)。TNF_αmRNA表达强度在成人牙周炎病变牙龈 (0 6 96± 0 0 98)显著高于正常牙龈 (0 ) (t=7 0 9,P <0 0 1)。结论

+Gz重复暴露大鼠脑组织中IL-1β和TNF-αmRNA表达变化

目的了解反复高 +Gz暴露后大鼠脑组织中IL 1 β和TNF αmRNA表达变化。方法 2 0只SD大鼠随机分成对照组、+Gz重复暴露后 3 0min、6h、2 4h和 48h五组 ,每组 4只。对照组大鼠G值为 +1Gz ,实验组大鼠在动物离心机上经历了 3次 +1 4Gz/45s(两次间间隔 3 0min)作用。分别于暴露后 3 0min、6h、2 4h和 48h处死大鼠取脑 ,提取总RNA ,用半定量反转录聚合酶链反应 (RT -PCR)检测方法检测大鼠脑组织中IL 1 β和TNF αmRNA表达水平。结果 +Gz暴露后 3 0min、6h和 2 4h大鼠脑组织IL 1 β和TNF αmRNA均有升高 ,但 48h时均恢复正常。结论反复高 +Gz暴露可刺激大鼠脑组织内IL 1 β和TNF αmRNA表达 ,它们在 +Gz所致脑损伤中起一定的作用 。

国产降纤酶对缺血/再灌注大鼠脑组织TNF-α及IL-1βmRNA表达的影响

目的观察国产降纤酶对局灶性缺血/再灌注不同时程大鼠脑组织TNF-αmRNA和IL-1βmRNA表达的影响,探讨降纤酶减轻脑缺血/再灌注损伤的可能机制。方法应用RT-PCR技术,分析降纤酶治疗的脑缺血3h/再灌注3h、6h、24h和72h大鼠脑组织TNF-αmRNA和IL-1βmRNA表达水平。结果缺血3h/再灌注72h,降纤酶治疗组动物缺血侧脑组织TNF-αmRNA的表达水平明显低于生理盐水对照组(P<0.01);降纤酶治疗组动物缺血侧脑组织IL-1βmRNA的表达水平在缺血3h/再灌注3h和6h时显著低于生理盐水组(P<0.05)。结论降纤酶减轻脑的缺血/再灌注损伤与下调细胞因子TNF-αmRNA和IL-1βmRNA的表达有一定的关系。

Graves病患者甲状腺细胞IL-10与TNF-α mRNA的表达

研究白细胞介素 - 10 (IL - 10 )、肿瘤坏死因子 -α(ΤΝF -α)基因在Graves病 (GD)患者甲状腺上皮细胞(TEC)中的表达水平 ,以探讨细胞因子对自身免疫性甲状腺疾病 (AITD)的影响。采用原代甲状腺细胞培养技术做TEC培养 ,用逆转录 -聚合酶链反应定性分析方法对TEC中IL - 10、TNF -αmRNA表达进行检测。GD组TEC中仅有 1例表达IL - 10mRNA ,而TNF -αmRNA在GD组TEC中均有表达。对照组TEC均未转录IL - 10或TFN -αmRNA。甲状腺特别是TEC能产生某些细胞因子 ,其在AITD中的表达模式与正常人不同 ,说明细胞因子对AITD的发生和发展过程及其导致的甲状腺功能异常有重要意义。

IL-1β和TNF-α对体外培养的人RPE细胞FasL蛋白及mRNA表达的影响

目的:观察IL-1β和TNF-α对培养的人RPE细胞FasL蛋白、mRNA表达的影响。方法:流式细胞仪检测暴露于IL-1β和/或TNF-α的RPE细胞FasL的表达,并用mRNA斑点杂交分析mRNA的改变。结果:流式细胞仪显示23.4%培养的RPE细胞表达FasL。IL-1β,TNF-α和二者联合应用后FasL阳性率则分别为25.7%,9.7%和17.2%。mRNA斑点杂交亦证实TNF-α下调FasLmRNA的表达。结论:TNF-α可下调体外培养的人RPE细胞FasL蛋白,mRNA的表达。

舒芬太尼预处理对大鼠急性胃黏膜病变组织中TNF-α mRNA与IL-1β mRNA表达的影响

目的观察舒芬太尼预处理对大鼠急性胃黏膜病变过程中胃组织TNF-αmRNA与IL-1βmRNA表达的影响,探讨舒芬太尼是否通过抗炎机制发挥胃黏膜保护作用。方法 24只成年Wistar大鼠随机分成正常组、应激组、舒芬预处理组3组,每组8只,在(20±1)℃水温下,应激组、舒芬预处理组用浸水束缚应激法(WIRS)复制急性胃黏膜病变模型。6h后处死大鼠取胃组织标本,10×解剖显微镜下观察各组胃黏膜损伤指(GI)数,采用RT-PCR技术测定各组胃组织中TNF-αmRNA与IL-1βmRNA的表达变化。结果①与正常组比较,应激组大鼠经WRIS6h后胃黏膜损伤严重,GI明显升高(P<0.01);与应激组比较,舒芬组能显著减轻WRIS后胃粘膜损伤,降低GI(P<0.05)。②与正常组比较,应激组TNF-αmRNA与IL-1βmRNA表达显著上调(P<0.05);与应激比较,舒芬组TNF-αmRNA与IL-1βmRNA表达显著下调。③GI的变化与TNF-αmRNA和IL-1βmRNA的变化呈正相关(r1=0.983,r2=0.993,P<0.05)。结论舒芬太尼预处理能明显下调大鼠急性胃黏膜病变过程中胃组织TNF-αmRNA与IL-1βmRNA的表达,舒芬太尼预处理抑制应激后炎性反应可能为其发挥胃黏膜保护作用的重要机制之一。

荷叶水提物对3 T3-L1前体脂肪细胞增殖、凋亡及前体脂肪细胞、成熟脂肪细胞IL-6 mRNA、TNF-αmRNA的影响

目的:研究荷叶水提物对3T3-L1前体脂肪细胞增殖、凋亡的影响,以及对3T3-L1前体脂肪细胞、成熟脂肪细胞白介素-6(IL-6)信使核糖核酸(mRNA)、肿瘤坏死因子(TNF-α)mRNA的影响.方法:体外培养3T3-L1细胞,采用MTT法检测荷叶水提物对3T3-L1前体脂肪细胞增殖的影响;采用荧光定量PCR检测其对3T3-L1前体脂肪细胞和成熟脂肪细胞IL-6 mRNA、TNF-αmRNA的表达,采用DAPI染色法检测其对3T3-L1前体脂肪细胞凋亡的影响.结果:不同质量分数的荷叶水提物均能抑制3T3-L1细胞增殖,且呈现量-效关系;1 g/L荷叶水提物可增高3T3-L1成熟脂肪细胞TNF-αmRNA和IL-6 mRNA的表达,降低3T3-L1前体脂肪细胞TNF-αmRNA的表达;还可以促进3T3-L1前体脂肪细胞的凋亡.结论:荷叶水提物可能是通过抑制细胞增殖、降低细胞炎症因子mRNA的表达、促进细胞凋亡进而影响脂肪细胞的活性.

DMN诱导的小鼠慢性中毒性肝炎过程中IL-18、TNF-αmRNA及FasmRNA的动态变化

目的 观察二甲基亚硝胺(DMN)所致小鼠慢性中毒性肝炎时肝组织损伤与IL-18、TNF-α mRNA、FasmRNA表达的动态变化。方法 取30只小鼠作为模型组,腹腔注射0.1％的DMN14 mg／kg,每隔4 d注射1次,共注射5次。分别在第1、3、5次注射后2 d(即实验第3 d、11 d、19 d)及停止注射14 d(即实验第31 d)眼球取血后分批处死动物(每次处死6只),检测血清IL-18、肝组织TNF-α mRNA及Fas mRNA的表达。对照组6只小鼠,腹腔注射生理盐水,每隔4 d 1次,共5次,于第31 d处死,检测指标同模型组。结果 小鼠第一次注射DMN后肝细胞气球样改变为主,炎症、坏死不明显。随着注射次数的增加,炎症、坏死逐渐加重。停止注射后,肝组织逐渐修复。血清IL-18、肝组织TNF-α mRNA及Fas mRNA水平随着炎症、坏死的加重而升高,且呈正相关关系。结论DMN所致小鼠中毒性慢性肝炎的IL-18、TNF-α mRNA、Fas mRNA的改变与肝组织病理改变同步,呈正相关关系,与人类肝炎时有一定的相似性。

子痫前期患者外周血TNF-α、DCN和MAPK1 mRNA表达变化及临床意义探究

目的 分析子痫前期(PE)患者外周血肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、核心蛋白聚糖(DCN)和中性粒细胞丝裂原活化蛋白激酶1(MAPK1)mRNA水平及其临床意义。方法 回顾性分析临床资料,选取2020年6月至2023年6月我院收治的PE患者73例为观察对象,纳为PE组;PE组根据病情严重程度分为轻度PE组及重度PE组。选取同期于我院产科产检的健康孕妇50例为健康组。比较两组临床资料,采集外周血,比较两组外周血TNF-α、DCN和中性粒细胞MAPK1 mRNA水平,采用Pearson相关性分析分析PE组外周血TNF-α、DCN和MAPK1mRNA指标的两两相关性;采用受试者工作特征(ROC)曲线评估外周血TNF-α、DCN和MAPK1 mRNA辅助评估PE病情严重程度。结果 两组年龄、孕周、孕前BMI等临床资料差异无统计学意义(P>0.05)。PE组外周血TNF-α、DCN和中性粒细胞MAPK1 mRNA明显高于健康组(P<0.05)。重度PE组外周血TNF-α、DCN和中性粒细胞MAPK1 mRNA明显高于轻度PE组(P<0.05)。Pearson相关性分析显示,TNF-α与DCN、MAPK1 mRNA均呈明显正相关(r=0.618、0.739,P<0.05);DCN与MAPK1 mRNA均呈明显正相关(r=0.711,P <0.05)。ROC曲线显示,TNF-α、DCN、MAPK1 mRNA在诊断PE的AUC分别为0.782、0.718、0.751,三者联合诊断PE病情严重程度的AUC为0.880(P<0.05)。结论 PE患者外周血TNF-α、DCN和MAPK1 mRNA水平明显异常高表达,且TNF-α、DCN和MAPK1 mRNA水平随PE病情加重而升高,三者相互存在一定相关性,在辅助评估PE病情严重程度方面具有一定价值,定期监测有助于早期诊断PE,帮助改善母子妊娠结局。

低氧对大鼠大脑皮层细胞表达IL-1β、IL-6和TNF-α mRNA的影响

目的:观察不同氧浓度环境下不同时间处理对大鼠大脑皮层细胞表达IL-1β、IL-6和TNF-α mRNA的影响。方法:原代培养新生SD大鼠大脑皮层细胞,设1%、4%两个低氧浓度和3、6 h两个低氧处理时间,处理结束后收集各组细胞,采用实时荧光定量PCR(RT-QPCR)方法检测各组细胞表达IL-1β、IL-6和TNF-αmRNA情况。结果:与相应的常氧对照组相比,1%和4%氧浓度环境处理细胞3 h和6 h时,IL-1β和TNF-αmRNA表达量均无明显变化(P>0.05);处理细胞3 h时,IL-6 mRNA表达量均无明显变化(P>0.05),但有上升的趋势,处理细胞6 h时IL-6 mRNA表达量均显著升高(P<0.05)。结论:1%和4%氧浓度环境虽均对大脑皮层细胞表达IL-1β和TNF-α mRNA无影响,但可诱导细胞表达IL-6 mRNA,且具有时间依赖性。

电针对佐剂性关节炎大鼠病灶局部皮肤组织IL-1β、IL-1ra mRNA表达的影响

目的 :观察电针对单侧佐剂性关节炎大鼠的疼痛试验评分、炎症灶局部病理反应 ,以及病灶局部皮肤组织IL 1β、IL 1ramRNA表达的影响。方法 :通过将完全弗氏佐剂 50 μL注入SD大鼠左后肢外踝关节皮下制造单侧佐剂性关节炎疼痛模型 ,电针“环跳”穴、“阳陵泉”穴 (刺激参数为0 .5～ 1.5V ,4～ 16Hz,3 0min) ,应用跖、背屈关节评分连续观察大鼠 7d内的痛反应曲线 ,应用HE组织化学染色方法观察病灶局部皮肤组织炎性病理反应 ,应用RT PCR技术检测IL 1β、IL 1ramRNA表达情况。结果 :电针可明显减少炎症痛大鼠的疼痛评分 ,抑制佐剂性关节炎大鼠病灶局部炎性病理反应 ,并抑制病灶局部皮肤组织IL 1βmRNA表达 ,促进IL 1ramRNA表达 ,使IL 1ra/IL 1β比值上升 (P <0 .0 1)。结论 :电针可能通过调节炎症灶局部致炎细胞因子及抗炎细胞因子之间的平衡 ,从根本上解除局部病灶免疫细胞的激活状态 ,达到扶正祛邪、平衡阴阳的调控作用 ,从外周途径缓解疼痛。