高温和UVB暴露对子代大鼠血清IL-1、IL-2和溶菌酶水平的影响及其交互作用

目的探讨高温和紫外线B(ultraviolet B)联合暴露对大鼠子代血清IL^(-1)、IL-2水平、溶菌酶含量的影响,并分析两种因素的交互作用。方法选取SD大鼠80只,雌雄各半;随机分为对照组、高温组、UVB及高温联合暴露组(联合组),每组20只,雌雄各半。除对照组外,高温组联合组大鼠每天12:00~14:00进行高温(37~42℃)暴露和高温+紫外线(紫外线波长310nm,强度70μW·cm^(-2))联合暴露。连续6个月后,随机抽取各组子鼠10只,对子代大鼠脏器系数、血清IL^(-1)、IL-2水平及溶菌酶的含量进行测定。采用2×2析因设计方差分析法,分析UVB与高温联合是否有交互作用。结果子一代鼠高温组双肾系数高于对照组,UVB组双肾系数低于对照组(P<0.05),联合组与对照组双肾系数差异无统计学意义(P>0.05);高温组脾脏系数大于对照组(P<0.05),UVB组、联合组与对照组差异均无统计学意义(P>0.05);UVB组肝脏系数大于对照组(P<0.05),高温组、联合组与对照组差异无统计学意义(P>0.05);各实验组与对照组肺脏系数均差异无统计学意义(P>0.05)。两种暴露因素(高温、UVB)对双肾系数、脾脏系数的影响有交互作用,联合作用大于单一作用;高温与UVB对肝脏系数、肺脏系数的影响无交互作用。各实验组子一代鼠血清IL^(-1)和溶菌酶水平低于对照组(P均<0.05);而IL-2水平与对照组间差异无统计学意义(P>0.05)。高温与UVB对血清IL^(-1)、IL-2水平的影响无交互作用;高温与UVB对溶菌酶含量的影响有交互作用,联合作用效果大于单一作用。结论亲代大鼠暴露于高温和紫外线两种因素下对子代大鼠双肾系数、脾脏系数、血清溶菌酶含量的影响有交互作用,且联合作用大于单独暴露。两种暴露因素对血清IL^(-1)水平均有影响,对IL-2水平无影响,均无交互作用。

利福喷丁对大鼠IFN-γ、IL-12、溶菌酶及酸性磷酸酶活性的影响

目的研究利福喷丁对正常大鼠的IFN-γ、IL-12、溶菌酶及酸性磷酸酶活性的影响。方法 60只大鼠随机分为实验组和对照组,每组再随机分为喂药30d组(A组)、喂药90d组(B组)、喂药90d停喂药30天组(C组)。实验组给予利福喷丁,对照组给予0.1%羧甲基纤维素钠液。观察IFN-γ、IL-12、溶菌酶及酸性磷酸酶活性变化。结果 1与对照组比较:A组IFN-γ显著降低(P<0.05),溶菌酶显著升高(P<0.05);A组、B组酸性磷酸酶显著升高(P<0.05)。2对照组内比较:B组、C组与A组比较,溶菌酶显著降低(P<0.05),酸性磷酸酶显著升高(P<0.05)。结论利福喷丁抑制大鼠细胞免疫,增强大鼠非特异性免疫。

UVB和高温联合暴露不同时间对大鼠血清IL-1、IL-2和溶菌酶水平的影响

目的探讨不同时间UVB(ultraviolet B)和高温联合暴露对大鼠血清IL-1、IL-2水平以及溶菌酶含量的影响。方法选取40只健康大鼠随机分为中期(3个月)和长期(6个月)UVB和高温联合暴露组,在310nm波长紫外灯和40℃高温下每天暴露2h,对大鼠体重、脏器系数、血清IL-1、IL-2及溶菌酶的含量进行测定。结果长期UVB和高温联合暴露组雌、雄性大鼠体重增长量均较中期UVB和高温联合暴露组下降(P<0.05);长期UVB和高温联合暴露组雌、雄性大鼠的双肾脏系数、脾脏系数、肝脏系数、肺脏系数均低于中期UVB和高温联合暴露组(P<0.05);长期UVB和高温联合暴露组雌、雄性大鼠血清IL-1水平低于中期UVB和高温联合暴露组(P<0.05),血清IL-2、溶菌酶水平均高于中期UVB和高温联合暴露组(P<0.05)。结论随着UVB和高温联合暴露的时间延长,大鼠体重增长速度、脏器重量及血清IL-1水平降低,血清IL-2和溶菌酶含量增高。

中波紫外线照射对大鼠血清IL-1、IL-2及溶菌酶含量的影响

目的探讨中波紫外线(ultraviolet B,UVB)照射对大鼠血清IL-1、IL-2水平以及溶菌酶含量的影响。方法选取健康大鼠40只,雌雄各半,随机分为对照组和UVB组,每组20只,雌雄各半,称取体重并记录,在310nm波长紫外灯下,每天对UVB组大鼠进行2h的照射,持续照射12周时称取体重并记录,解剖各组大鼠取出脏器并称重记录;对大鼠血清IL-1、IL-2水平及溶菌酶的含量进行测定。结果经中波紫外线照射后,UVB组雌雄大鼠体重增长量均较相应对照组下降(P<0.05);各UVB组的双肾脏系数、脾脏系数、肝脏系数、肺脏系数与对照组比较均增高(P均<0.05);各UVB组大鼠血清IL-1、IL-2水平均低于对照组(P均<0.05),而各UVB组大鼠血清溶菌酶含量高于对照组(P<0.05)。结论 UVB照射可以降低大鼠体重增长的速度;增加大鼠双肾脏、脾脏、肝脏、肺脏的重量;降低血清IL-1、IL-2水平;增高血清溶菌酶含量。

血清TNF-α、IL-1β、sIL-2R水平与溃疡性结肠炎患者肠道菌群改变的相关性

目的:分析血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、可溶性白细胞介素-2受体(sIL-2R)、白细胞介素-1β(IL-1β)水平与溃疡性结肠炎(UC)患者肠道菌群改变的关联性。方法:选取我院2020年5月-2022年4月收治的107例UC患者为研究对象,根据入院时疾病状态分成活动期组(69例)、缓解期组(38例)。比较两组入院时肠黏膜屏障功能指标及溃疡性结肠炎内窥镜严重指数(UCEIS)评分,比较两组入院时血清TNF-α、IL-1β、sIL-2R水平,比较两组入院时肠道菌群数量,分析血清TNF-α、IL-1β、sIL-2R水平与肠道菌群、肠黏膜屏障功能及UCEIS评分相关性。结果:与缓解期组相比,入院时活动期组血清DAO、LPS、PCT、D-乳酸、TNF-α、IL-1β、sIL-2R水平及UCEIS评分较高(P<0.05);活动期组肠道内大肠埃希菌、拟杆菌、肠球菌数量较缓解期组高,乳酸杆菌、双歧杆菌数量比缓解期组少(P<0.05);入院时血清TNF-α、IL-1β、sIL-2R水平与UCEIS评分、DAO水平、LPS水平、PCT水平、D-乳酸水平、大肠埃希菌、拟杆菌以及肠球菌数量呈正相关,与双歧杆菌、乳酸杆菌数量呈负相关(P<0.05)。结论:不同发病状况UC者的肠道菌群不同,且与炎症状态存在相关性,能作为评估病情的参考指标。

马拉色菌对角质形成细胞表达TLR-2和分泌sICAM-1及IL-8的影响

目的探讨马拉色菌在直接免疫应答中诱导角质形成细胞表达TLR-2的作用及对sICAM-1和IL-8分泌和表达的影响。方法马拉色菌和角质形成细胞体外共培养,通过免疫细胞化学方法检测角质形成细胞TLR-2蛋白的表达状况,并运用ELISA方法检测马拉色菌对角质形成细胞sICAM-1和IL-8表达和分泌的调节作用。结果体外实验发现,在二者共同培养时,马拉色菌能增强角质形成细胞TLR-2的表达,且角质形成细胞sICAM-1和IL-8均表达和分泌也增加。结论马拉色菌可诱导TLR-2的增强表达,并能促进sICAM-1和IL-8的表达和分泌,这一机制可能在痤疮等相关的炎症反应中起重要作用。

富硒酵母对小鼠IL-2水平、空斑形成细胞溶血能力及肠道菌群的影响

为研究富硒酵母对小鼠血浆IL-2水平、空斑形成细胞溶血能力及肠道菌群的影响,本试验选用60只清洁级KM小鼠(雌雄各半),随机分为对照组、亚硒酸钠组和富硒酵母组,每日分别灌胃蒸馏水、亚硒酸钠(2μg Se/mL)和富硒酵母(2μg Se/mL)各0.5 mL。试验期为28 d。结果表明,富硒酵母组、亚硒酸钠组小鼠血浆IL-2含量和空斑形成细胞溶血能力的OD413较对照组分别提高18.24%(P<0.01)、17.65%(P<0.05)和12.82%(P<0.01)、7.69%(P<0.05);而富硒酵母组、亚硒酸钠组和对照组小鼠肠道中葡萄球菌、肠球菌、肠杆菌、乳杆菌和双歧杆菌数量均无显著差异(P>0.05)。

蜜环菌多糖对小鼠血清IL-2和TGF-β1水平的影响

目的:观察蜜环茵多糖对小鼠血清中IL-2和TGF-β1水平的干预作用。方法:实验组小鼠腹腔注射(i.p)不同浓度的蛮环菌多糖,阴性对照组给予生理盐水,阳性对照组给予香菇多糖,连续给药14天。给药结束后,用形态学方法测定各组小鼠在植物血凝素(PHA)诱导下淋巴细胞转化率,用ELISA法测定各组小鼠血清中白介素2(IL-2)、转化生长因子β1(TGF-β1)水平。结果:蜜环菌多糖具有提高小鼠淋巴细胞转化率,增加血清中IL-2水平,并同时下调血清中TGF-β1水平的作用。结论:蜜环菌多糖可通过调节小鼠免疫细胞及免疫分子的作用,增强小鼠的免疫功能。

S-O_2-1菌核糖体制剂对小鼠NK活性和血清溶菌酶的影响

S-O_2-1菌苗(上海需氧1号)在临床上具有较好的抗肿瘤作用,但因是革兰氏阴性菌,引起机体发烧。为避免脂多糖的副作用,提取制备核糖体制剂(疫苗)。动物实验证明,S-O_2-1菌核糖体制剂对感染S_(180)肿瘤细胞的C_(57)BL/6小鼠,有明显抑瘤作用。其机制是核糖体制剂激活3NK细胞和巨噬细胞杀伤肿瘤细胞。

鸡IL-1β和IL-2及IL-6基因实时荧光定量RT-PCR检测方法的建立

为了建立检测鸡IL-1β、IL-2及IL-6基因的荧光定量PCR方法,根据GenBank上IL-1β、IL-2、IL-6的基因序列,在保守区设计并合成了各自的特异引物,选择β-actin和GAPDH基因为内参,采用SYBRGreenⅠ染料法,以常规PCR产物为标准品,建立标准曲线,并进行熔解曲线分析。结果显示,各基因标准曲线的Ct值检测范围在12-33左右,具有良好的线性关系,r2均大于0.990。熔解曲线分析表明,产物为特异的单峰。结果表明,建立的鸡IL-1β、IL-2及IL-6基因实时荧光定量RT-PCR方法灵敏度高、特异性强、检测周期短,为从mRNA水平对鸡IL进行定量分析奠定了基础。

过敏性紫癜患者外周血单个核细胞中Tim-1,Tim-3mRNA表达和血清中IL-2和IL-4含量测定

目的研究Tim-l,Tim-3及IL-2,IL-4在过敏性紫癜(Henoch-Schonlein purpura,HSP)发病中的作用。方法将28例HSP患者分为单纯组和混合组,采用RT-PCR技术检测两组患者外周血单个核细胞中Tim-1 mRNA和Tim-3 mRNA的表达情况,ELISA法检测血清中IL-2和IL-4的含量,选取健康人20例作为对照组。结果 HSP患者Tim-1 mRNA相对表达量高于正常对照组[RQ值分别为0.974(1.108)和0.760(0.514),P<0.05],而Tim-3 mRNA相对表达量差异无统计学意义[RQ值分别为1.359(1.183)和1.604(1.177),P>0.05];Tim-1 mRNA,Tim-3 mRNA的表达在HSP单纯组和混合组之间差异均无统计学意义(P均>0.05)。HSP患者血清IL-2含量(188.517±12.867)较正常对照组(202.759±20.903)降低,IL-4含量(73.046±8.750)高于正常对照组(62.301±11.232),且HSP患者混合组IL-2含量低于单纯组,IL-4含量高于单纯组,以上差异均有统计学意义(P均<0.05)。结论Tim蛋白可能参与HSP发病,但与疾病严重程度无关;IL-2和IL-4水平可能与疾病严重程度密切相关。

UVB对子代大鼠血清白细胞介素1、白细胞介素2及溶菌酶含量的影响

目的探讨UVB(ultraviolet B)暴露对子代大鼠血清白细胞介素1(IL-1)、白细胞介素2(IL-2)水平及溶菌酶含量的影响。方法选取健康刚出生(子代)大鼠20只,随机分为对照组和实验组,每组10只。称取体质量并记录,在310 nm波长紫外灯下,每天对实验组子代大鼠进行2 h的暴露,持续暴露8周(到性成熟期),每周一称取体质量并记录;8周后解剖各组大鼠,对子代大鼠血清中IL-1,IL-2水平及溶菌酶的含量进行测定。结果经UVB暴露后,试验组子代大鼠体质量增长量及血清中的溶菌酶含量与对照组比较无统计学差异(P>0.05);试验组子代大鼠血清中的IL-1,IL-2水平与对照组比较有统计学差异(P<0.05),试验组子代大鼠与对照组比较无统计学差异(P>0.05)。结论UVB暴露可降低子代大鼠血清中的IL-1,IL-2水平。

抑郁性神经症与IL-1β、IL-2的相关性

为了解白介素-1β(IL-1β)、白介素-2(IL-2)与抑郁性神经症的关系,并初步探讨IL-1β、IL-2可否作为抑郁性神经症的诊断指标,采用双抗体夹心步骤的酶联免疫吸附法(ABC-ELISA)检测抑郁性神经症30例、正常健康者24例的血清IL-1β、IL-2的含量,并通过汉密尔顿抑郁量分表(HAMD)测定其分值。结果表明,抑郁性神经症组IL-1β含量显著高于正常对照组(P<0.05),而IL-2无明显差异(P>0.05),IL-1β、IL-2分别与病程呈正相关。结论:抑郁性神经症IL-1β升高比IL-2快,是可供判断抑郁性神经症的一个参考指标。

复方甘草酸苷对斑秃患者PBMC中IL-4 IL-10表达的调节作用

近年来研究表明：CD4^＋细胞在斑秃的发病机制中起着重要作用,而斑秃患者局部或循环中的Th1/Th2细胞因子平衡与否是影响CD4^＋（Th）细胞分化的关键,斑秃患者存在Th1和Th2功能的失衡。本研究选择具有代表性的Th2细胞因子白细胞介素（IL）-4、IL-10为研究对象，采用定量逆转录聚合酶链反应（RC—PCR）法检测斑秃患者外周血单个核细胞（PBMC）经植物血凝素（PHA），

用酵母单杂交系统筛选人IL-2Rα基因NIRS元件结合蛋白的cDNA

目的筛选与白细胞介素2受体(IL2R)α基因NIRS元件相互作用的结合蛋白。方法采用酵母单杂交体系从HTLV1转化的人外周血淋巴细胞MATCHMAKERcDNA文库中筛选与NIRS相互作用的蛋白。结果经过筛选并排除假阳性后有9个阳性克隆仍保持His+表型和βgal活性;测序后分析发现它们分别属于4个不同蛋白的cDNA克隆。其中一个是已知的反式作用因子Ku抗原,另一个是RNA聚合酶Ⅰ的转录终止因子。它们的C末端分别含有SAP和SANTDNA结合结构域。结论在Jurkat细胞中存在与NIRS元件相互作用的结合蛋白,相关的研究正在进行中。

千佛菌对T1DM模型小鼠Th1∕Th2类细胞因子基因异常表达的双向调节作用

目的:研究千佛菌对1型糖尿病模型小鼠细胞因子基因异常表达的调节作用及血糖水平、小鼠行为变化的影响,以探讨千佛菌对1型糖尿病小鼠模型的双向免疫调节作用。方法:观察千佛菌大、小剂量组、模型对照组与正常对照组小鼠行为变化;血糖的水平;淋巴细胞IL-2m RNA、IL-10m RNA的表达水平。结果:模型对照组小鼠表现为"三多一少"的症状:饮食多,饮水多,尿量增多,体型瘦弱。千佛菌大、小剂量组症状较模型对照组有所减轻,而正常对照组未见异常。与正常对照组比较,模型对照组血糖水平、IL-2m RNA表达水平明显增高(P<0.01),而IL-10m RNA表达水平明显降低(P<0.01);与模型对照组比较,千佛菌大、小剂量组的血糖水平、IL-2m RNA表达水平均明显降低(P<0.01、P<0.05),IL-10m RNA表达水平均明显增高(P<0.01、P<0.05);而千佛菌大、小剂量组的血糖水平、IL-2m RNA及IL-10m RNA表达水平的差异无统计学意义(P>0.05)。结论:千佛菌具有降低1型糖尿病模型小鼠血糖的作用,能下调IL-2m RNA的表达,上调IL-10m RNA的表达,对1型糖尿病模型小鼠脾脏淋巴细胞Thl/Th2细胞因子的平衡具有调节作用。

肺炎克雷伯杆菌分泌因子及活菌诱导人肺上皮细胞表达分泌IL-8的研究

目的 :探讨肺炎克雷伯杆菌 (Klebsiellapneumoniae ,Kp)分泌因子及活菌诱导肺上皮细胞株表达和分泌IL 8的状况。方法 :用临床分离株Kp0 3 1 1 6、Kp0 3 1 83的细菌培养上清或活菌刺激肺上皮细胞株A5 49和SPC A 1 ,酶联免疫吸附实验 (ELISA)检测细胞IL 8表达量。结果 :①两株Kp培养上清分别刺激A5 49或SPC A 1后 ,IL 8表达量均有显著增高 (P <0 .0 1 ) ,且随上清刺激浓度增加而上升。②两株Kp及DH5 (活菌分别与SPC A 1共孵育 2h ,用庆大霉素杀死胞外菌 ,继续孵育 2 4h后两株Kp诱导细胞IL 8表达量均显著高于DH5α(P <0 .0 1 ) ,且随细菌数 /细胞数比例增大而上升。结论 :Kp分泌因子及活菌都能够诱导肺上皮细胞IL 8表达 ,而活菌上调IL 8的效应较培育上清分泌因子更显著 ,提示肺上皮细胞在Kp感染刺激的肺部炎症反应中起重要作用。

鰤鱼诺卡氏菌疫苗对石斑鱼免疫效果研究

为探究鰤鱼诺卡氏菌灭活疫苗对石斑鱼的免疫效果,通过免疫基因表达量分析疫苗对石斑鱼的免疫保护。利用鰤鱼诺卡氏菌制备福尔马林灭活全菌疫苗,通过腹腔注射法对珍珠龙胆石斑鱼进行免疫,利用荧光定量法检测免疫后该鱼的肾脏、肝脏和脾3个器官中TLR2、MyD88、TNF-α、IL-1β免疫基因表达量的变化。结果显示,注射灭活疫苗后,TNF-α、IL-1β基因表达量在肾脏组织中较高,MyD88基因表达量在脾组织中较高,TLR2基因表达量在肝脏组织中较高;除脾组织中的TNF-α基因相对表达量出现下降趋势外,其余基因的表达量在所有器官中都呈现出上调的趋势。研究结果为探索珍珠龙胆石斑鱼与诺卡氏菌的相互作用提供理论基础,为渔业疫苗开发和应用奠定基础。

白细胞介素-4通过上调蛋白质精氨酸甲基转移酶1的表达水平引起对氧磷酶2的精氨酸甲基化修饰

目的验证质谱筛选的结果,确定对氧磷酶2(PON2)是否为蛋白质精氨酸甲基转移酶1(PRMT1)的底物蛋白。方法用白细胞介素-4(IL-4)刺激A549细胞后,用免疫沉淀法捕获发生精氨酸非对称性二甲基化修饰的蛋白,用梯度聚丙烯酰胺凝胶电泳分析捕获的蛋白,通过银染显示差异性条带,质谱分析差异性条带中的蛋白种类。用免疫沉淀检验PON2的甲基化修饰状态。检测PON2和PRMT1对IL-4表达的浓度依赖性和时间依赖性。用免疫共沉淀检测PON2和PRMT1的相互作用,并在MS203抑制Ⅰ型PRMT后检测PON2的甲基化修饰水平的变化。诱导小鼠哮喘模型,检测PON2表达的组织细胞类型,以及肺组织中PON2和PRMT1的表达水平。结果(1)质谱分析显示在IL-4处理的A549细胞中检出311个差异显示的蛋白,PON2为其中之一。(2)免疫沉淀显示,IL-4可促进A549细胞中PON2发生精氨酸非对称性二甲基化修饰,但IL-4刺激对PON2的表达水平无影响。(3)PON2与PRMT1有相互作用,IL-4可促进PON2与PRMT1结合,抑制Ⅰ型PRMT活性可以削弱IL-4对PON2发生精氨酸非对称性二甲基化修饰的促进作用。(4)PON2主要在小鼠气道上皮表达,且PON2的表达水平在对照组与哮喘组组织间差异无统计学意义(P>0.05)。结论PON2为PRMT1的底物蛋白。IL-4可以促进PON2发生精氨酸非对称性二甲基化修饰。

尘螨过敏母亲对新生儿Th1/Th2平衡功能的影响

目的:探讨螨性过敏妊娠母亲对新生儿Th1/Th2平衡功能的影响。方法:选择21例有过敏病史并Dpt/Df试验阳性妊娠母亲的新生儿(AD组),20例无过敏病史并Dpt/Df试验阴性妊娠母亲的新生儿(对照组)。以淋巴细胞分离液分离新生儿脐血单个核细胞(CBMC),经Dpt/Df刺激后,用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测培养上清中IFN-γ、IL-4含量及IFN-γ/IL-4比值变化。结果:(1)未加Dpt/Df刺激前,AD组和对照组的CBMC培养上清中IFN-γ、IL-4含量和IFN-γ/IL-4比值差异均无显著性(均P>0.05)。(2)加Dpt/Df刺激后,AD组IL-4明显增高,IFN-γ/IL-4明显降低,分别与刺激前及对照组相比,差异均有显著性(P<0.05～0.01),但IFN-γ无明显变化(P>0.05)。(3)对照组中,IFN-γ、IL-4和IFN-γ/IL-4比值在Dpt/Df剌激前后均无明显变化(均P>0.05)。结论:螨性过敏母亲的新生儿脐血单个核细胞在相同抗原激发时,IL-4分泌明显增高,导致IFN-r/IL-4比值失衡,提示胎儿免疫细胞在宫内可能已暴露于变应原并致敏,产生过敏原特异性免疫记忆反应。