IL-1基因多态性与广东地区胃癌关系的研究

【目的】研究IL-1(interleukin-1)B基因+3954、-511、-31位点和IL-1受体拮抗因子基因(IL-1RN)多态性在广东地区普通人群和胃癌患者中的分布,探讨IL-1基因多态性与我国胃癌发生的关系。【方法】用PCR-限制性片段长度多态性(RFLP)分析法检测广东省192名普通人和84例胃癌患者的IL-1基因多态性。【结果】胃癌患者IL-1B-511和IL-1B-31 T基因携带者(T+)频率显著高于普通人群(78.6％vs54.7％,x^2=14.1,P<0.01,OR=3.0,95％CI 1.7-5.5和35.7％ vs 18.8％,x^2=9.2,P<0.01,OR=2.4,95％CI 1.4-4.3),而IL-1 B+3954位点T和IL-1RN2基因携带者频率在两组间无显著差异(x^2=2.1和0.6,P>0.05)。【结论】IL-1B-511和-31位点T等位基因可能与我国广东地区胃癌的发生有关。

四种方法获取DNA用于检测IL-1基因多态性的比较分析

目的 :寻求一种能方便、简捷、有效地获取患者DNA的方法 ,以用于检测患者基因多态性。方法 :采用 4种方法获取患者DNA ,即静脉血中用酚 -氯仿法抽提 ,指尖血血痕中用Chelex 10 0法抽提 ,颊粘膜拭子中用Chelex 10 0法抽提及直接用干燥血痕作为PCR扩增的DNA模板。对同一个体分别用 4种来源的DNA检测其IL 1基因多态性 ,比较结果的特异性和敏感性。结果 :颊粘膜拭子抽提DNA作基因多态性分析特异性高、敏感性强 ,优于静脉血酚 -氯仿法抽提DNA ,且取颊粘膜拭子无创、方便。Chelex 10 0法抽提DNA比酚 -氯仿法更简单、快速。结论 :颊粘膜拭子结合Chelex 10

慢性牙周炎自然病程1年观察及其与IL-1基因多态性的关系

目的:了解慢性牙周炎病程的自然发展及其与IL-1基因多态性的关系。方法:对166位慢性牙周炎患者进行为期1年的自然病程观察,分别在基线、12个月检查全口余留牙的牙周袋深度(PD)、临床附着丧失量(AL)、探诊出血(B0P),每个牙检查6个位点,对其中的111例牙周炎患者,分析其IL-1A-889、IL-1B+3954的基因多态性。结果:166人平均牙周袋深度增加1.12 mm,平均附着丧失量增加1.628 mm;有94位患者249个牙位出现了AL≥2 mm。没有发现IL-1A-889基因型分布及等位基因分布频率在快速进展组(至少1个部位AL增加≥2 mm)和非快速进展组间有显著性差异;IL-1B+3954基因型1/2的分布和等位基因2的频率在快速进展组高于非快速进展组(P<0.05)。1年后PD的改变和AL的改变在IL-1A-889和IL-1B+3954不同基因型携带者间无明显差异(P>0.05)。结论:不同个体其牙周病变的发展是不一样的;虽然IL-1B+3954等位基因2的频率在快速进展组高于非快速进展组,但分布频率很低,实际意义可能不大;没有发现PD和AL的改变与IL-1基因多态性有相关性。

上消化道疾病患者IL-1基因型分布特点

目的:探讨昆明市上消化道疾病患者的IL-1基因型分布特点。方法:选取145例昆明市上消化道疾病患者(慢性非萎缩性胃炎50例、十二指肠球部溃疡57例、胃溃疡38例),用PCR-RFLP检测外周血的IL-1β-511、IL-1β+3954、IL-1RN的基因型,并结合文献进行不同地区间的比较。结果:IL-1β-511基因型中,C/C 25例(17.2%)、C/T 80例(55.2%)、T/T 40例(27.6%);IL-1β+3954基因型中,C/C 139例(95.9%)、C/T 6例(4.1%)、无T/T;IL-1 RN位点L/L与1/2基因型各占116例(80.0%)、28例(19.3%)、2/2基因型1例(0.7%)。与其他地区研究结果相比,存在较大差异。结论:昆明市上消化道疾病患者的IL-1基因型分布特点与其他地区差异明显,可为该地区IL-1基因型与上消化道疾病的关系研究提供参考。

IL-1基因多态性和幽门螺杆菌相关性疾病

在人胃中幽门螺杆菌（helicobactor pylori，HP）感染导致慢性胃炎，然而仅有少数感染个体发展为消化性溃疡、萎缩性胃炎或胃恶性病变。大量的基础及临床研究结果表明，HP感染的严重程度、进展情况及其后果依赖于宿主的遗传背景，特别是影响宿主的免疫应符的基因多态性。细胞因子在HP相关性疾病的发生、发展及转归中起着十分重要的介导作用，其中白细胞介素-1（IL-1）居重要地位，因此IL-1基因多态性受到特别的重视。现就IL-1基因多态性和幽门螺杆菌相关性疾病研究进展概述如下：

新西兰青年人群IL-1基因型与成人牙周炎

菌斑是牙周病的始动因子,某些遗传因素可增加宿主对牙周病的敏感性,使牙周组织的破坏加速。炎性细胞因子IL-1在牙周炎的发生发展过程中发挥着重要作用,其位于染色体2q13上的基因族具有多态性。目前已有采用临床样本研究IL-1基因型与牙周炎相关关系获得阳性结果的报道。

IL-1Ra基因多态性与无症状细菌性阴道病自然转归关系的研究

目的 研究白细胞介素1受体a(IL-1Ra)基因多态性与无症状细菌性阴道病(aBV)患者不同转归的关系,以期对aBV患者进行分组管理。方法 对aBV患者进行自然转归的研究,在入组时,所有患者均留取了一份静脉血标本和阴道灌洗液的标本单独冻存。4个月后,临床研究结束时,根据临床结局,将完成研究的患者分为3组:自愈、进展和无改变。再检测所有患者IL-1Ra基因多态性以及阴道微环境中IL-1β和IL-1Ra浓度,并比对上述指标在3组不同结局的患者间的差别。结果 共有1 014例中国汉族女性患者入组,984例完成临床随访并获得临床结局数据。其中13例患者的冻存标本在检测时无法使用,共有971分标本完成检测。所有患者均检测到IL-1Ra基因,有A_(1)/A_(1)、A_(1)/A_(2)和A_(2)/A_(2) 3种基因型,主流人群的基因型为A_(1)/A_(1),最少见的基因型为A_(2)/A_(2),未发现少见类型的基因型女性。病情进展组的A_(2)等位基因的频率明显高于自愈组(P<0.05)。在所有患者的阴道灌洗液标本中均能检测到IL-1β和IL-1Ra存在。与进展组比较,自愈组的IL-1β水平明显偏低(P<0.05)。当携带A_(2)等位基因时,进展组IL-1β水平相对偏低,而IL-1Ra水平相对升高,无变化组的数值介于进展组和自愈组之间。结论 aBV患者中的IL-1Ra基因多态性特征与阴道分泌物中的IL-1Ra含量有关。携带等位基因A_(2)与IL-1Ra含量升高、IL-1β含量降低有密切相关性。携带等位基因A_(2)可能通过与IL-1Ra和IL-1β有关的机制影响了aBV的临床转归。

IL-1β-511和IL-1RN VNTR基因多态性与冠心病相关性的Meta分析

目的 Meta分析评价IL-1β-511和IL-1RNVNTR基因多态性与冠状动脉粥样硬化性心脏病相关性。方法设定入选条件,文献检索收集关于IL-1β-511和IL-1RNVNTR基因多态性与冠心病关系的病例-对照研究,对相关研究进行同质性检验并合并数据进行Meta分析。结果 7个有关IL-1β-511多态性与冠心病相关研究合并OR值为1.04,95%CI为0.93～1.18(Z=0.71,P=0.48);5个IL-1RNVNTR基因多态性与冠心病相关研究合并OR值为1.01,95%CI为0.78～1.17(Z=0.08,P=0.93)。结论 IL-1β-511和IL-1RNVNTR基因多态性与冠心病易感性无明显相关,但可能影响冠心病的发展和临床表现的变化。

不同程度牙周炎自然发展进程与IL-1RN基因多态性的关系

目的了解慢性牙周炎病程的自然发展及其与IL-1RN(INTRON2)VNTR基因多态性的关系。方法对110例慢性牙周炎患者,其中轻度18例,中度34例,重度58例进行为期6个月的自然病程观察,分别在基线、6个月对全口余留牙牙周袋深度PD、临床附着丧失量AL进行检查,每个牙检查6个位点并检测其IL-1RN(INRON2)VNTR的基因多态性。结果110人平均牙周袋深度增加PD=0.23mm,平均附着丧失量增加AL=0.50mm。其中36例患者44个牙位出现了△AL≥2mm。6个月后PDAL的改变在IL-1RN(INTRON2)VNTR基因型1/1携带者与基因型1/2携带者间无明显差异(P>0.05)。6个月后IL-1RN(INTRON2)VNTR基因型及等位基因频率在△AL≥2mm组和病情无明显改变组无统计学差异(P>0.05),重度牙周炎组较轻中度牙周炎组更易出现快速进展(P>0.05)。结论不同个体、不同程度其牙周病变的发展是不一样的,还不能认为IL-1RN(INTRON2)VNTR基因多态性会影响汉族人群慢性牙周炎的发展。

痛风患者发病危险因素及IL-1β基因启动子区rs2853550位点多态性分析

目的总结痛风患者发病危险因素及IL-1β基因启动子区rs2853550位点多态性。方法新疆地区痛风患者314例(观察组),同期健康体检者507例(对照组)。采用单因素及多因素Logistic回归分析法分析痛风发病的影响因素和危险因素,SNPscan^(TM)分型试剂盒进行PCR反应检测,GeneMapper4.1软件处理分析IL-1β基因启动子区rs2853550位点多态性。结果患有高血压、糖尿病、低密度脂蛋白血症人群罹患痛风的危险较大,而规律运动使罹患痛风的危险降低(P均<0.05)。rs2853550位点基因型频率携带GA和GG基因型的人群发生痛风的危险分别是携带AA基因型的7.12倍和8.50倍,加合模型分析发现携带GG+AA基因型的人群罹患痛风的危险性是携带AA基因型的20.98倍。结论痛风的发病与糖尿病、高血压、高血脂密切有关,规律运动使罹患痛风几率降低;IL-1β基因启动子区rs2853550位点的基因突变可能与痛风发病有关,携带GG+GA基因型的人群罹患痛风的风险增加。

裕固族人群IL-1基因多态性分析

IL-1是一种具有广泛生物活性的细胞因子，近年来研究发现IL-1基因多态性与其基因的转录和表达有关，也与冠心病、自身免疫性疾病等密切相关。结合临床对IL-1基因多态性进行分析，可从基因水平了解疾病个体化临床表现的相关机制，寻找更有针对性的治疗手段。本研究对IL-1（B-511、B-1470、RN）基因的多态性进行了分析。

人IL-1RⅡ基因腺病毒载体的构建及在子宫内膜异位症细胞中的表达

目的:利用AdEasy XL系统,构建并鉴定IL-1RII基因重组腺病毒载体,并在子宫内膜异位症(EM)细胞中表达。方法:PCR扩增含有IL-1RII全长cDNA的片段,亚克隆到pShuttle-CMV穿梭质粒,经酶切和测序验证无误后,再经电转化与pAdEasy-1质粒在大肠杆菌BJ5183中进行同源重组产生腺病毒载体质粒。经过抗性筛选、酶切鉴定以及再次测序验证无误后得到阳性的重组质粒,经PacI酶切线性化再在293细胞中进行包装扩增,用ELISA检测IL-1RII蛋白的表达。利用Adeasy XL系统的对照载体pShuttle-CMV-LacZ同上操作作为对照。收集的重组腺病毒感染原代培养的EM基质细胞,并以免疫组化法鉴定IL-1RII表达。结果:测序证实连接后IL-1RII序列完全正确;抗性筛选及酶切鉴定均表明重组腺病毒载体构建成功;pShuttle-CMV-LacZ转染293细胞3d后X-gal染色阳性,回收病毒可以重复感染293细胞,ELISA鉴定表达IL-1RII可溶性蛋白,证明病毒包装成功。重组的腺病毒感染EM基质细胞后,免疫组化法证实IL-1RII表达。结论:成功地构建了IL-1RII基因重组腺病毒载体,并且在EM基质细胞中表达,为进一步研究IL-1RII基因在EM中的作用乃至生物治疗都奠定了基础。

IL-1β-511基因多态性与妇科手术患者电刺激痛觉敏感性的关系

目的探讨IL-1β-511基因多态性与妇科手术患者术前痛阈及耐痛阈的关系。方法择期腹式子宫全切或子宫肌瘤剔除术患者250例，年龄20-50岁，ASAⅠ或Ⅱ级。术前应用电刺激仪进行痛阈及耐痛阈测定，采用聚合酶链反应-限制性片断长度多态性技术（PCR-RFLP）进行IL-1β-511基因多态性位点检测，根据基因型将患者分为三组：C／C组（野生纯合子组），C／T组（杂合子组），T／T组（突变型纯合子组）。结果共208例患者检测出基因型，其中C／C组54例，C／T组107例，T／T组47例，三组痛阈和耐痛阈组间差异无统计学意义。结论ID-1β-511基因多态性不影响妇科患者电刺激痛觉敏感性。

安徽汉族人群IL-1F10-3基因rs3811058位点单核甘酸多态性与强直性脊柱炎患者遗传易感性研究

目的了解IL-1F10-3基因rs3811058位点的单核苷酸多态性与强直性脊柱炎遗传易感性的关系。方法采用病例对照研究设计,通过聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)方法对基因型筛查并进行基因组测序验证,检测151例强直性脊柱炎患者和155例正常对照基因型,并分析基因型及等位基因频率在两组中的分布。结果 IL-1F10-3基因rs3811058位点的等位基因频率和基因型频率在病例组和对照组中的分布差异均无统计学意义。结论安徽地区汉族人群强直性脊柱炎患者遗传易感性可能与IL-1F10-3基因rs3811058位点单核苷酸多态性无关。

IL-1A基因启动子遗传多态性与冠心病的相关性分析

目的:探讨人白介素1a(IL-1A)基因启动子遗传多态性与冠心病的相关性分析。方法:选取2014年1月至2015年1月期间我院收治的120例冠心病患者作为观察组,选取同期在我院体检的120例健康人群作为对照组,比较两组患者的临床资料、IL-1A-889C>T的基因型多态性和等位基因频率,并比较IL-1A 889不同基因型的冠心病患者相关临床指标及IL-1A 889不同基因型人群的冠心病发生风险。结果:观察组患者收缩压、舒张压、CH、TG、LDL、HDL以及超敏C反应蛋白数据均显著高于对照组(P<0.05);两组患者IL-1A-889 CC基因型与CT+TT型数据比较,差异有统计学意义(P<0.05),两组患者IL-1A-889等位基因频率数据比较,差异有统计学意义(P<0.05);IL-1A-889 CT+TT基因型冠心病患者CH、TG、LDL、HDL以及超敏C反应蛋白数据显著高于CC基因型冠心病患者(P<0.05);Logistic回归分析显示,IL-1A-889CT和TT基因型与CC基因型冠心病发生风险显著增加(χ~2=4.325,P=0.026,OR=1.452,95%CI:1.132~2.345和χ~2=6.246,P=0.012,OR=1.814,95%CI:1.305-2.866)。结论:IL-1A基因启动子889突变显著增加冠心病的发生风险,值得临床诊断和治疗过程中加以关注。

IL-1ra-Fcε融合基因在大鼠体内表达条件优化及免疫原性分析

目的探索基因治疗载体pCI-neo-IL-1ra-Fcε在大鼠体内的最适表达条件及免疫原性。方法采用气道滴注方式将pCI-neo-IL-1ra-Fcε载体滴注至大鼠肺部,利用RT-PCR及Westernblot方法检测不同剂量(0.25、0.5、2.5mg.kg-1)载体在不同时间(d4、d7、d20)的表达量,并采用免疫组化方法进行验证。间接ELISA法检测滴注后IL-1ra-Fcε蛋白IgG抗体变化,并对IgG抗体亚型IgG2a和IgG1进行分析。结果3种不同剂量载体在滴注后d20均可检测到目的蛋白表达,2.5mg·kg-1组蛋白表达量明显高于另外2组;以0.25mg·kg-1剂量滴注载体,目的基因d4时未见表达,d7时表达量增加,d20时达到最大值;免疫组化结果显示IL-1ra-Fcε基因在大鼠肺组织中得到有效表达。结论成功建立pCI-neo-Ira-Feε载体在大鼠体内最适表达条件,此载体可诱导机体产生Th1型免疫应答。

类风湿关节炎与IL-1RAP基因多态性关联的研究

目的探索IL-1RAP基因多态性与类风湿关节炎(RA)的关联性。方法选取178例RA患者(RA组)及207例正常对照的全血标本,提取DNA、基因分型,对病例组与对照组IL-1RAP rs766442的等位基因频率、基因型进行分析。结果 IL-1RAP rs766442基因型包括GG、GT、TT,RA组与正常对照组间三种基因型频率差异有统计学意义(P=0.038)、等位基因频率差异有统计学意义(P=0.018)。结论携带T等位基因的RA患者出现RF-Ig G阳性的几率可能较高,IL-1RAP rs766442的TT基因型可能为RA的易感基因。

牦牛IL-1β基因的鉴定及组织表达

为了克隆麦洼牦牛IL-1β基因并分析其蛋白质结构及表达,给研究IL-1β基因的生物学功能提供理论基础,试验利用RT-PCR方法扩增麦洼牦牛IL-1β基因序列,分析IL-1β基因在不同组织中的表达情况,通过生物学软件进行核酸序列分析及蛋白质结构预测。结果表明:麦洼牦牛IL-1β基因大小为899 bp,Gen Bank登录号为KU510225。此序列编码266个氨基酸,蛋白质分子质量为30 684.0 u,不含跨膜区且没有信号肽;蛋白二级结构以α-螺旋为主,三级结构与小鼠IL-1β蛋白结构类似。IL-1β基因在各组织中表达量的顺序为脾脏>肝脏>心脏>肺脏>肾脏。说明试验成功克隆了麦洼牦牛IL-1β基因,在脾脏表达量高,表明IL-1β基因可能参与机体的免疫应答。