LPS对母兔子宫颈IL-1β蛋白表达水平的影响

【目的】革兰氏阴性菌细胞壁的主要成分是脂多糖(LPS),由于革兰氏阴性菌的感染会引发多种繁殖障碍疾病,降低家畜繁殖力。本试验旨在研究革兰氏阴性菌感染对母兔子宫颈IL-1β蛋白表达水平的影响。【方法】选取27只健康新西兰白兔,分为3个组,分别为0h组:3只兔不做处理,LPS组:12只兔耳缘静脉注射LPS(0.5mg·kg^(-1)),对照组:12只兔注射生理盐水(0.5mg·kg^(-1)),在注射后1.5、3、6、12h(n=3)收集子宫颈,采用免疫组化的方法测定子宫颈中IL-1β蛋白表达水平。【结果】母兔子宫颈中黏膜层和肌层均有IL-1β蛋白的表达。在黏膜层中,IL-1β蛋白表达量在注射1.5h后,LPS组极显著高于对照组(P<0.01),且对照组中1.5h显著低于其他时间点(P<0.05),LPS组各时间段无显著差异(P>0.05);在肌层中,IL-1β蛋白表达量在LPS处理后1.5h和6h极显著高于对照组(P<0.01),使用LPS处理该组12h后,其表达量出现显著升高(P<0.05),且对照组中各时间段无显著差异(P>0.05),LPS组6、12h显著高于3h(P<0.05)。【结论】LPS诱导了母兔子宫颈中IL-1β蛋白表达水平的显著增加,且在黏膜层和肌层有一定的差异性。

小鼠受X射线全身照射后腹腔巨噬细胞IL-1β蛋白表达的变化

采用胸腺细胞联合增殖反应法 ,观察了不同剂量 X射线全身照射后小鼠腹腔巨噬细胞 IL- 1β蛋白生物活性的时程 ( 75m Gy和 2 .0 Gy照射后 6、12、2 4、4 8、72、12 0和 168h)变化和剂量效应关系 ( 0 .0 75、0 .2、0 .5、1.0、2 .0、4 .0、6.0 Gy照射后 2 4 h)。时程变化结果表明 ,75m Gy照射后 ,小鼠腹腔巨噬细胞 IL- 1β蛋白生物活性逐渐增高 ,照后 6、12、2 4 h明显高于对照组 ,且以照后 2 4 h时活性最高 ,然后逐渐回降 ,到照后 72 h时已恢复至对照水平 ;2 .0 Gy照射后 6h略降低 ,之后逐渐增高 ,照后 12、2 4 h明显高于对照组 ,之后逐渐下降 ,照后 72、12 0 h明显低于对照组 ,照后 168h又略有回升。剂量效应关系结果表明 ,0 .0 75、0 .2、0 .5、1.0、2 .0、4 .0、6.0 Gy照射后 2 4 h,小鼠腹腔巨噬细胞 IL- 1β蛋白生物活性均高于对照组 ,除 6.0 Gy组外 。

溃结安康汤对溃疡性结肠炎大鼠结肠组织IL-1β的作用及蛋白表达的影响

目的:研究溃结安康汤对溃疡性结肠炎大鼠白介素(IL)影响及其作用机制。方法:健康Wistar大鼠,随机分为空白对照组、模型组、补脾益肠丸组、SASP(柳氮磺胺吡啶)组、溃结安康汤组。TNBS/乙醇法建立溃疡性结肠炎大鼠模型。分组灌胃治疗后,检测溃结大鼠结肠组织IL-1β含量和IL-1β蛋白表达。结果:模型组与正常组比较,IL-1β含量升高、蛋白表达升高,具有统计学意义(P<0.05);补脾益肠丸组、SASP组、溃结安康汤组与模型组比较IL-1β含量下降、蛋白表达下降,具有统计学意义(P<0.05);溃结安康汤组与补脾益肠丸组、SASP组比较,IL-1β含量下降明显、蛋白表达下降明显,具有统计学意义(P<0.05)。结论:溃结安康汤可以降低溃疡性结肠炎大鼠模型中结肠组织IL-1β含量和蛋白表达。

局灶性脑缺血及再灌注大鼠大脑皮质IL-1 RⅠ蛋白和mRNA的表达

①目的 探讨脑缺血白细胞介素 1Ⅰ型受体 (IL 1RⅠ )蛋白和mRNA表达及其在缺血性脑损伤中的作用。②方法 应用免疫组化和原位杂交方法 ,检测栓线法阻塞大脑中动脉制备的局灶性脑缺血及再灌注模型大鼠脑内IL 1RⅠ蛋白和mRNA的表达。③结果 正常及假手术大鼠IL 1RⅠ蛋白免疫阳性细胞主要在皮质表达 ;缺血后IL 1RⅠ蛋白免疫阳性细胞在缺血侧皮质、海马及纹状体表达明显增加 ,在皮质再灌注后 12h达高峰 ,随后逐渐降低。原位杂交结果显示 ,正常及假手术大鼠IL 1RⅠmRNA阳性细胞主要在皮质表达 ,海马区偶见阳性细胞 ;脑缺血大鼠IL 1RⅠmRNA阳性细胞在缺血再灌注后 2h表达增加 ,再灌注后 6h达高峰 ,随后逐渐降至正常水平。④结论 脑缺血后IL 1RⅠ上调竞争结合IL 1β 。

人IL-1受体拮抗蛋白重组逆转录病毒载体的构建、鉴定及在骨关节炎软骨细胞中的表达

目的构建含人IL-1受体拮抗蛋白(IL-1 receptor antagonist,IL-1Ra)逆转录病毒表达载体(PLXRN-IL-1Ra),体外转染人骨关节炎(osteoarthritis,OA)软骨细胞,研究其相关特性。方法利用细菌内同源重组技术快速构建PLXRN-IL-1Ra逆转录病毒重组质粒,经测序及酶切鉴定正确后转染PT67细胞,包装成为重组PLXRN-IL-1Ra逆转录病毒,并使用小鼠肾成纤维细胞系NIH/3T3对病毒进行滴度测定。实验分为3组:未转染组(A组)、PLXRN空质粒转染组(B组)、PLXRN-IL-1Ra转染组(C组),病毒感染人OA软骨细胞后,RT-PCR检测细胞内IL-1Ra基因的转录和表达;ELISA法检测细胞培养上清液中人IL-1Ra蛋白表达。结果酶切鉴定及基因测序证实重组逆转录病毒质粒中含有人IL-1Ra cDNA,测定包装的病毒滴度为3×104CFU/mL。原代软骨细胞体外培养呈多角形或梭形,甲苯胺蓝染色见细胞内有紫色异染颗粒。RT-PCR结果显示在C组出现311bp人IL-1Ra mRNA片段,A、B组未见人IL-1Ra mRNA的表达带,GAPDH在各组均有表达。ELISA检测发现C组细胞上清有一定量的人IL-1Ra表达,蛋白浓度为(60.47±15.13)ng/L,A组和B组均无人IL-1Ra表达。结论构建的IL-1Ra逆转录病毒表达载体成功地感染人OA软骨细胞,并在体外获得稳定表达,为将表达人IL-1Ra基因的人OA软骨细胞用于OA基因治疗提供了实验依据。

小鼠IL-1Ra蛋白的原核表达及其多克隆抗体制备

以小鼠脾脏cDNA为模板,用降落PCR扩增IL-1Ra基因片段,IL-1Ra基因片段长约为537 bp。将IL-1Ra扩增片段和原核表达载体pET-30a(+)连接构建重组表达质粒,在37℃诱导表达,重组表达的小鼠IL-1Ra蛋白的分子质量为19 ku。用纯度较好的小鼠IL-1Ra重组蛋白免疫兔子,制备特异性多克隆抗体;测定多克隆抗体的效价达到1∶4096000。经Western-Blot鉴定该抗体可与Raw264.7细胞中表达的小鼠IL-1Ra天然蛋白发生特异性结合。利用实时荧光定量PCR和Western-Blot检测表明布鲁氏菌S2弱毒株感染Raw264.7细胞(小鼠单核巨噬细胞)后小鼠IL-1Ra上调表达。本研究成功制备了小鼠IL-1Ra重组蛋白和兔抗多克隆抗体,为深入探讨小鼠IL-1Ra与布鲁氏菌感染之间的关系提供工具。

E. tenella河北株重组蛋白IL-2-AMA-1对雏鸡血清主要细胞因子和免疫器官指数的影响

为了确定E.tenella河北株AMA-1基因在毕赤酵母系统中表达产物-重组蛋白IL-2-AMA-1对鸡血清主要细胞因子和免疫器官指数的影响,将150只雏鸡分成5个组,每组30只,第1,第2组分别为阴性对照组和阳性对照组,第3,第4,第5组在7,14,21日龄时分别肌肉注射重组AMA-1蛋白50,100,150μg。在28日龄时,除阴性对照组外,每只鸡经口灌服0.5 mL孢子化卵囊液,其中E.tenella孢子化卵囊含量1.6×10^8个/L,在试验的第14,21,28,35天时每组采集5只鸡心血收集血清,测定其IL-2,IFN-γ的质量浓度。试验第28天时对采血的鸡只剖杀,取脾脏、胸腺、法氏囊进行称质量,并计算免疫器官指数。结果表明,第3组血清IL-2和IFN-γ含量最高,在试验的第21,28,35天时均显著高于第1第2组;在试验的第21,35天时血清IL-2的质量浓度,试验的第35天时血清IFN-γ的质量浓度,与第4组比较也达差异显著水平(P<0.05)。第3第4第5组的脾脏指数、胸腺指数和法氏囊指数均显著高于第2组(P<0.05),与第1组比较差异不显著(P>0.05)。由此表明,适量的重组蛋白IL-2-AMA-1能显著提高雏鸡感染球虫前后的免疫水平,从而提高抗球虫能力。

IL-18BP-Fc-IL-1Ra嵌合蛋白对小鼠阴道上皮细胞模型银屑病的影响

目的:观察IL-18BP-Fc-IL-1Ra嵌合蛋白对小鼠银屑病模型的治疗作用并探讨其可能的机制。方法:腹腔注射己烯雌酚0.2mg天/连续3天,建立处于雌激素期的小鼠阴道上皮模型,腹腔注射甲氨喋呤和IL-18BP-Fc-IL-1Ra嵌合蛋白观察比较对银屑病的治疗作用,监测小鼠体重并检测血清中IFN-γ含量的变化,统计小鼠阴道上皮细胞的有丝分裂指数。结果:IL-18BP-Fc-IL-1Ra剂量依赖性的抑制雌激素期小鼠阴道上皮细胞有丝分裂指数,使血清中IFN-γ含量降低。结论:IL-18BP-Fc-IL-1Ra嵌合蛋白对己烯雌酚诱发的阴道上皮模型性银屑病具有治疗作用而且可能是通过降低血清内IFN-γ的含量实现的。

Toll样受体4信号通路中髓样分化因子88和β干扰素Toll/IL-1受体结构域衔接蛋白在皮肤恶性黑素瘤中的表达及意义

目的探讨Toll样受体4(tol-likereceptor4,TLR4)信号通路下游的髓样分化因子88(myeloid differentiation factor88,MyD88)和β干扰素Toll/IL-1受体结构域衔接蛋白(toll-like receptor-associated activator of interferon,TRIF)在皮肤恶性黑素瘤(cutaneous malignant melano ma,CMM)中的表达及与临床特征之间的关联。方法应用免疫组化方法检测40例CMM患者肿瘤组织、10例痣细胞痣患者皮损组织和10例健康皮肤组织中MyD88和TRIF的表达水平,采用SPSS22.0统计学软件进行t检验及Pearson检验处理分析。结果CMM中的MyD88及TRIF的表达强度显著高于痣细胞痣与正常皮肤组织(P<0.05);MyD88、TRIF的表达与CMM患者的年龄、性别等因素无明显相关性,而与发病部位、Clark分级、Breslow厚度、溃疡等因素相关,其中发生于肢端相较于非肢端的恶性黑素瘤表达更显著(P-0.002,0.001);随着Clark分级的增加,原位与浸润肿瘤之间,MyD88、TRIF的表达水平也增加(P=0.001,0.012);随着Breslow厚度的增加,两者表达水平也增加(P=0.004,0.026);合并溃疡的CMM中,MyD88表达增加,有统计学意义(P=0.019);TRIF表达强度无统计学差异(P>0.05);MyD88和TRIF均与CMM患者的淋巴结转移无相关性(P0.05)。结论TLR4下游的MyD88和TRIF相互协同,共同参与CMM的发生与发展。

扳机点深压按摩辅助治疗轻中度膝骨关节炎疼痛疗效及对患者血清IL-1、TNF-α水平的影响

目的观察扳机点深压按摩辅助治疗轻中度膝骨关节炎疼痛的临床效果,以及对患者血清白细胞介素1(IL-1)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平的影响。方法选取108例轻中度膝骨关节炎患者,按随机数字表法分为观察组和对照组各54例;两组均给予基础抗炎、止痛治疗,观察组同时辅以扳机点深压按摩治疗。分别于治疗前及治疗1、2、4周时,实施西大略湖麦克马斯特骨关节炎量表(WOMAC)评分、视觉模拟疼痛评分(VAS),治疗前及治疗结束时ELISA法检测血清IL-1、TNF-α,评价临床疗效。结果治疗前,两组各指标差异无统计学意义;治疗后,两组WOMAC评分、VAS及血清IL-1、TNF-α水平均较治疗前降低(P均<0.05),且观察组WOMAC评分、VAS及血清IL-1、TNF-α水平均低于同时点的对照组(P均<0.05)。观察组临床控制率、显效率均高于对照组(P均<0.05)。结论扳机点深压按摩结合常规基础治疗轻中度膝骨关节炎疼痛,可降低患者血清IL-1、TNF-α水平,提高临床疗效。

氟对鲤鱼鳃组织免疫相关酶及IL-1β表达影响

以鲤鱼为受试材料,研究水环境中氟对其血液和鳃组织免疫相关酶ACP、AKP、SOD、CAT的活性,NBT阳性细胞数量及白细胞介素-1β(IL-1β)蛋白表达的影响。结果显示,在不同浓度氟化钠(0、40、80、120 mg·L-1)暴露30 d后,与对照组比较,鲤鱼血液中、鳃组织中的氟含量都有增加,且呈一定的剂量效应关系;鲤鱼血清中免疫相关酶ACP和AKP活性低于对照组,且在80、120mg·L-1显著低于对照组,SOD、CAT活性在120mg·L-1显著低于对照组;鲤鱼鳃中免疫相关酶ACP、AKP、SOD、CAT低浓度组活性较高,而高浓度组较低,且均在120 mg·L-1显著低于对照组;随着水环境氟暴露浓度的升高,鲤鱼NBT阳性细胞数量均较对照组低、鲤鱼鳃组织中的IL-1β蛋白表达也均较对照组低。CORREL相关分析结果显示,水氟暴露浓度与鲤鱼免疫相关酶活性ACP、AKP、SOD、CAT活性和IL-1β蛋白表达呈一定的剂量效应关系。实验结果表明:水环境中氟可在一定程度上对鲤鱼鳃免疫能力产生抑制作用。

IL-1ra、IL-1β在Graves眼病发病及治疗中的意义

目的研究IL-1ra、IL-1β与Graves眼病(GO)的发病机理及治疗效果的关系。方法分别用酶联免疫吸附法和放射免疫分析法测定了20例Graves病(GD)无眼病者、20例健康对照者及20例GO(NOSPACES≥4级)患者糖皮质激素治疗前后血中IL-1ra、IL-1β水平的变化,并分析IL-1ra、IL-1β水平、IL-1ra/IL-1β与治疗效果之间的关系。结果GO患者治疗前与GD、健康对照的IL-1ra水平差异无统计学意义,但糖皮质激素治疗后明显升高;而IL-1β在未治疗的GO患者明显升高,经糖皮质激素治疗后有降低趋势。IL-1ra与IL-1β的比值在GO患者明显低于健康对照,经糖皮质激素治疗后明显上升。结论GO患者存在内源性IL-1ra的相对不足,经糖皮质激素治疗,可促进IL-1ra的产生,抑制IL-1β产生。

Hp相关胃病病理演变及不同证候IL-1β蛋白差异表达特征

目的通过对白细胞介素-1β(IL-1β)蛋白表达的定性定位分析,探索幽门螺杆菌相关胃病(HpGD)病理演变及不同证候的蛋白差异表达特征。方法收集548例HpGD受试者临床四诊资料,其中92例为常规体检受试者,456例为慢性非萎缩性胃炎、慢性萎缩性胃炎、胃溃疡或胃癌患者。所有受试者辨证分为无症状者、脾胃湿热、肝胃不和、脾气虚、瘀血内阻证5组。所有受试者在胃窦或胃黏膜病变处钳取标本,采用快速尿素酶和美蓝染色法检测Hp感染情况;HE染色观察胃黏膜病理组织学改变,分为相对正常、炎症、萎缩、癌前病变、重度异型增生、胃癌6组;Elivision plus标记法检测IL-1β蛋白并观察胃黏膜上皮表层、胃小凹、固有层腺体区的表达差异。结果与炎症组比较,Hp阴性者中IL-1β蛋白在胃癌及癌前病变组表达增高(P<0.05);与相对正常及炎症组比较,Hp阳性者IL-1β蛋白在癌前病变、重度异型增生及胃癌组表达增高(P<0.05),且重度异型增生组表达高于萎缩及癌前病变组(P<0.01)。不同证候间可见Hp阳性者中脾胃湿热证表达强度最高的趋势。胃黏膜上皮表层、胃小凹和固有层腺体区的IL-1β蛋白表达主要定位在胞浆,胞膜、胞核也见少量表达。随着胃黏膜从上皮表层、胃小凹到固有层腺体区,以及病理表现异型增生、肠化、癌变阶段,IL-1β蛋白胞浆表达强度不断增强(P<0.05)。结论IL-1β可能主要通过胞浆表达及Hp感染协同参与HpGD病理演变,且Hp感染、脾胃湿热证与IL-1β高表达或可为HpGD胃黏膜恶性病理演变提供早期预警信号。

IL-1家族与Graves眼病

白介素 (IL) 1可刺激人眼眶部成纤维细胞合成氨基多糖及抗原表达 ,在Graves眼病 (GO)的发病中有重要作用。白介素 1受体拮抗蛋白 (IL 1ra)能竞争性地与IL 1受体结合而无受体后效应。其可抑制氨基多糖合成。与正常人相比 ,GO患者眼眶部成纤维细胞不能合成足够的IL 1ra ,可能是GO的发病机制之一。

麦门冬汤对放射性肺损伤大鼠肺组织核转录因子κB及白细胞介素-1表达的影响

目的探讨麦门冬汤对放射性肺损伤大鼠肺组织核转录因子κB(NF-κB)及白细胞介素-1(IL-1)蛋白表达的影响。方法将72只健康成年清洁级雌性Wistar大鼠随机分为空白对照组、模型组及中药组,每组各24只。中药组予麦门冬汤汤剂2 mL/(200 g.d)灌胃给药,空白对照组及模型组予等容积蒸馏水灌胃。1周后模型组及中药组大鼠麻醉后,用60钴放射治疗机照射右侧胸部,每周2次,连续照射5周。空白对照组大鼠麻醉后不进行照射。照射期间各组大鼠继续给药至照射结束。于照射后第5、12、26周末测量NF-κB及IL-1表达情况。结果模型组照射后第5、12、26周末NF-κB及IL-1蛋白表达均较空白对照组同期明显升高(P<0.01);中药组照射后第5、12、26周末NF-κB及IL-1蛋白表达均较模型组同期降低(P<0.01,P<0.05)。结论麦门冬汤可下调肺组织NF-κB及IL-1蛋白表达,具有较好的防治放射性肺损伤作用。

IL-33/ST2信号通路与骨代谢的研究进展

白细胞介素-33(interleukin-33,IL-33)是白细胞介素-1(interleukin-1,IL-1)细胞因子超家族的一个新成员,它可以激活肥大细胞、淋巴细胞、巨噬细胞,产生Th2细胞因子,并且在炎症、感染、自身免疫性疾病中发挥其重要作用。IL-33的经典信号途径是通过ST2和IL-1受体辅助蛋白(interleukin-1 receptor accessory protein,IL-1 RAcP)组成的异三聚体,将信号转导至细胞内。IL-33/ST2信号通路通过激活T、B淋巴细胞等方面影响骨代谢。本文就IL-33/ST2信号通路在骨代谢中的作用研究作一综述,复习文献结果表明,IL-33在骨代谢方面的作用仍存在争议,一些学者研究认为IL-33可抑制破骨细胞的生成,并且在生理性骨重建中起作用;但也有学者认为IL-33可促进破骨细胞的形成及分化,从而导致骨吸收。IL-33及其信号通路参与牙周炎及根尖周炎牙槽骨骨代谢,具体机制尚不清楚,还需进一步研究。

肝细胞生成素——一种非经典分泌蛋白

肝细胞生成素(hepatopoietin ,HPO)是一种分泌蛋白.为了研究肝细胞生成素的分泌途径,利用SignalP软件分析了HPO的氨基酸序列,但HPO序列中没有经典分泌蛋白的信号肽.Western印迹实验证明,HPO能以双体形式从细胞中分泌出来.特异性体外阻断实验表明,布雷菲尔德菌素A(brefeldinA)和莫能菌素(monensin)都不能阻断HPO的分泌,说明HPO并不通过经典的内质网 高尔基体(ER -Golgi)途径分泌;优降糖(glyburide)对HPO的分泌没有抑制作用,说明HPO的分泌并不是由ABC1(ATP bindingcassette)转运子介导的;DNP和NH4Cl也不能刺激HPO的分泌,说明内体 溶酶体系统不参与HPO的分泌.上述结果表明,HPO是一种非经典分泌蛋白(non classicalsecretoryprotein) ,能以双体形式从细胞中分泌出来.但和已知的非经典分泌蛋白IL -1β不同,HPO的分泌并不是通过ABC1转运子介导的,内体 溶酶体系统也不参与其分泌.

急性期川崎病患儿血清FGF21、炎症因子及凝血指标水平变化及其相关性分析

目的观察急性期川崎病(KD)患儿血清成纤维细胞生长因子21(FGF21)、炎症因子及凝血指标水平变化,并分析各指标间的相关性。方法选取急性期KD患儿130例(KD组)和健康体检儿童95例(对照组),KD组中并发冠状动脉病变(CAL)56例;取外周静脉血,采用全自动血凝分析仪检测凝血酶原时间(PT)、凝血酶时间(TT)、活化部分凝血活酶时间(APTT)、纤维蛋白原(FIB),ELISA法检测血清FGF21及炎症因子肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白细胞介素1β(IL-1β);采用Pearson相关分析各指标之间的关系。结果KD组血清FGF21、TNF-α、IL-1β、PT、APTT和FIB高于对照组(P均<0.05),TT低于对照组(P<0.05);KD组中并发CAL患儿血清FGF21、TNF-α、PT、APTT和FIB高于未并发CAL患儿(P均<0.05),TT低于未并发CAL患儿(P<0.05)。Pearson相关分析显示,急性期KD患儿血清FGF21与TNF-α、IL-1β和APTT呈正相关(P均<0.05);TNF-α与IL-1β、PT和APTT呈正相关(P均<0.05),与TT呈负相关(P<0.05);IL-1β与APTT呈正相关(P<0.05),与TT呈负相关(P<0.05)。结论急性期KD患儿血清FGF21和炎症因子水平升高、凝血功能障碍,且伴有CAL者变化更显著;血清FGF21、炎症因子及凝血指标之间存在相关性,共同参与了急性期KD患儿的发病过程,检测这些指标可以辅助诊断及病情评估。

脂多糖(LPS)对小鼠Raw 264.7细胞Irak1bp1表达的影响

目的研究脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)刺激小鼠Raw264.7细胞IL-1受体相关激酶1结合蛋白1(IL-1 receptor associated kinase 1 binding protein1,Irak1bp1)的表达情况。方法体外培养的小鼠Raw264.7细胞随机分为2组:A组为正常对照组,B组为LPS刺激组。LPS刺激小鼠Raw264.7细胞6h后收集细胞及上清液。采用实时荧光定量PCR法检测IL-6及Irak1bp1mRNA水平;采用ELISA分析培养上清液中IL-6含量;采用Western blot方法检测Irak1bp1蛋白质水平。结果LPS刺激组炎症因子IL-6mRNA及蛋白质水平较对照组明显增高(P<0.01),Irak1bp1mRNA及总蛋白质水平高于对照组(P<0.05);胞质内Irak1bp1蛋白质水平与对照组相比无明显变化,而胞核内Irak1bp1蛋白质水平较正常对照组增加(P<0.01)。结论LPS能够诱导Raw264.7细胞核内Irak1bp1表达,且该分子的表达上调可能与细胞的炎性因子释放相关。

IL-1RA-PEP融合蛋白的构建及其对脑缺血再灌注后细胞凋亡的抑制作用研究

目的构建白细胞介素-1受体拮抗剂(IL-1RA)与细胞渗透肽(PEP-1)融合蛋白,探讨其对脑缺血再灌注(I/R)后神经细胞凋亡的抑制作用。方法构建IL-1RA与PEP-1融合基因,通过诱导表达和分离纯化,制备IL-1RA-PEP融合蛋白。建立大鼠大脑中动脉阻断模型(MCAo),形成I/R损伤,静脉注射IL-1RA-PEP,24 h后检测其在大鼠脑组织的分布,以及脑组织梗死体积,炎性细胞浸润和神经细胞凋亡情况,并分析相关凋亡蛋白的表达变化。结果 IL-1RA-PEP融合蛋白具有拮抗IL-1的生物学活性,其能有效地渗透进入I/R大鼠脑组织。给药24 h后,缺血半球脑梗死体积和神经细胞凋亡数量减少,胱天蛋白酶(caspase)3和9等凋亡蛋白表达水平下降,同时Bcl-x L抗凋亡蛋白表达水平升高。结论 IL-1RA-PEP融合蛋白能有效地渗透I/R大鼠脑组织,通过对相关凋亡蛋白的调控,抑制了I/R后脑组织神经细胞凋亡,对I/R损伤具有治疗作用。