IL-1、IL-1β、IL-6、IL-10基因多态性与糖尿病性牙周炎发生的关系分析

目的分析白介素-1(IL-1)、白介素-1β(IL-1β)、白介素-6(IL-6)、白介素-10(IL-10)基因多态性与糖尿病性牙周炎发生的关系。方法选取2021年6月至2022年6月石家庄市第二医院口腔科收治的糖尿病性牙周炎患者60例(观察组)及同期接受口腔检查健康人群60名(对照组)为研究对象,比较两组血清、龈沟液IL-1、IL-1β、IL-6、IL-10表达水平,检测全血DNA中IL-1、IL-1β、IL-6、IL-10基因多态性,分析其与糖尿病性牙周炎易感性的关系。结果观察组血清、龈沟液中IL-1、IL-1β、IL-6、IL-10水平明显高于对照组(t=31.987、28.911、14.201、16.562、21.315、19.146、-45.554、-57.942,P<0.05),各组龈沟液中IL-1、IL-1β、IL-6、IL-10水平明显高于血清中表达,差异有统计学意义(t=-4.080、-10.316、-10.686、10.713;t=-9.567、-6.422、-9.904、3.944,P<0.05)。观察组IL-1基因rs7413228、IL-1β基因rs2356789、IL-6基因rs5357964、IL-10基因rs4543211位点与糖尿病性牙周炎发生相关(P<0.05)。IL-1基因rs7413228位点等位基因T、IL-1β基因rs2356789位点等位基因T、IL-10基因rs4543211位点等位基因G分布频率与糖尿病性牙周炎发生相关(P<0.05)。IL-1基因rs7413228、IL-1β基因rs2356789、IL-6基因rs5357964、IL-10基因rs4543211位点多态性是糖尿病性牙周炎发生的独立影响因素(P<0.05)。结论IL-1、IL-1β、IL-6、IL-10基因多态性与糖尿病性牙周炎易感性相关,临床可通过检验患者基因多态性评估糖尿病性牙周炎发生风险。

IL-10-1082G/A基因多态性与急性呼吸窘迫综合征风险的相关性

目的探讨IL-10-1082G/A基因多态性与急性呼吸窘迫综合征(ARDS)风险的相关性。方法选取2022年1月-2022年12月本院急诊医学科收治的ARDS患者83例为ARDS组,同时选取本院体检健康的受试者80例作为对照组。收集受试者的空腹静脉血进行DNA提取,针对IL-10-1082G/A基因位点进行PCR扩增,采用ABI 3730XL遗传分析仪进行Sanger测序,确定IL-10-1082A/G的基因型和等位基因频率。结果IL-10-1082A/G显示了一个390 bp的基因片段和249 bp、196 bp的等位基因特异性片段,IL-10-1082A/G基因型包括野生纯合型AA基因型、突变纯合型GG基因型和突变杂合型AG基因型;对照组和ARDS组的IL-10-1082A/G位点各基因型符合Hardy-Weinberg平衡定律;与对照组相比,ARDS组IL-10-1082A/G位点AG、GG及G等位基因频率显著升高(P<0.05);IL-10-1082A/G位点AG基因型人群较AA型患者ARDS易感性增加(OR=2.97,95%CI=1.09~6.53,P=0.015),G等位基因型ARDS易感性增加(OR=2.16,95%CI=1.01~6.93,P=0.024)。纳入了性别、年龄、BMI、吸烟史等调整因素进行多因素Logistic分析,结果发现,IL-10-1082A/G位点AG基因型(OR=3.13,95%CI=1.19~4.52,P=0.009)和G等位基因型(OR=2.39,95%CI=1.42~5.87,P=0.036)ARDS易感性也增加。结论IL-10-1082A/G位点多态性与ARDS的易感性有关,尤其是共显性IL-10-1082A/G位点AG基因型和G等位基因可增加ARDS的发病风险。

上海市老年高血压患者中医证型与IL-10启动子rs1800871基因多态性的相关性分析

目的:分析上海市老年高血压病中医证型与炎症因子IL-10启动子区rs1800871基因多态性的相关性,探索老年高血压病中医证型发病的基因遗传变异。方法:收取900例体检老年高血压患者,利用Nano Drop技术进行基因分型,分析高血压中医证型与IL-10 rs1800871基因多态性的关系。结果:IL-10 rs1800871基因多态性符合Hardy-Weinberg遗传平衡法则。高血压各中医证型TT、TC、CC分布无显著性差异(P>0.05),经性别分层后,老年男性高血压患者高血压各中医证型中的分布具有显著差异,对老年男性高血压患者虚实证型变化具有显著影响。老年女性高血压患者高血压各中医证型中的分布不具有显著差异,虚实证型变化没有显著影响。结论:rs1800871基因多态性与老年男性高血压中医证型相关,与老年男性高血压虚实辨证相关。

汉族人IL-12b和IL-10启动子区基因多态性与HBV感染的相关性

目的:我国是一个乙型肝炎大国,乙型肝炎感染及其转归显然有人种、人群差异。本研究对我国汉族人群中乙型肝炎病毒(hepatitis virus B,HBV)感染和发病与白介素-12p40(interleukin-12p40,IL-12b)、白介素-10(interleukin-10,IL-10)启动子区基因多态性之间的关系进行了探讨。方法:利用聚合酶链反应-限制性内切酶片段长度多态性分析(restricted enzyme-fragment length polymorphisms,PCR-RFLP)的方法对非相关人群的健康人群与HBV感染患者(轻、中度慢性肝炎、重度慢性肝炎)和HBV感染家系中的HBV携带者、既往HBV感染者、健康人群的IL-12b,IL-10启动子区-540C、-592A(IL10-5’A,IL12-5’C)单碱基多态性(SNP)进行了分析,并且对两个突变位点进行了基因测序。使用SAS统计软件进行统计分析。结果:IL10-5’A、IL12-5’C在非相关人群中的分布符合Hardy-Weinberg平衡。非相关人群IL10-5’A、IL12-5’C突变等位基因在HBV患者中的频率近似于健康人群(IL10-5’A,HBV患者42.08％,健康人41.9％,P>0.05;IL12-5’C,HBV患者55.8％,健康人64.6％,P>0.05)。IL10-5’A与IL12-5’C基因分布在慢性肝炎(轻中)和慢性肝炎(重)两组无显著性差异(P>0.05)。提示IL10-5’A,IL12-5’C单碱基多态性(SNP)对乙型肝炎病情轻中无影响;HBV感染家系中IL10-5’A,IL12-5’C单碱基多态性在携带者、健康人群以及既往感染者三组间均匀分布,IL12-5’C突变频率与非相关人群相似(非相关人群-540T 55.3％,相关人群-540T 55.9％);IL10-5’A 突变频率与非相关人群有显著性差异(非相关人群-592C42.0％,相关人群-592C 19.5％,P<0.01)。结论:IL10-5’A突变比IL12-5’C突变在HBV感染家系中可能起到更重要的作用,或影响相关人群对HBV的易感性。

IL-10基因转染对EAT大鼠脾细胞增殖及Th1细胞因子分泌的影响

目的在建立EAT动物模型的基础上,探索通过非病毒载体基因转染方法,以改善EAT大鼠免疫功能异常状态,并观察对大鼠脾细胞增殖及分泌Th1细胞因子的影响。方法选用♀W istar大鼠建立EAT动物模型。成模大鼠分为4组:A组(PBS+PLL),B组(pORF质粒+PLL)、C组(pOR-Fm IL10质粒+PLL)及D组(pORFm IL10质粒+MEM)。使用R IA方法测定TgAb、TmAb滴度。脾脏淋巴细胞培养,采用[3H]-TdR标记方法测定cpm值并计算淋巴细胞增殖指数,ELISA方法检测细胞因子IFN-γ、TNF-α及IL-2。结果C组与A、B、D组比较,第4、6、8周TgAb、TmAb滴度降低,(P<0.01,F=42.66,F=32.65,F=9.66;F=22.25,F=81.35,F=14.84)。此外,淋巴细胞增殖试验结果显示,C组PTg刺激的淋巴细胞增殖指数低于A,B组,(P<0.05)。PTg刺激的脾细胞培养上清中细胞因子IFN-γ、TNF-α及IL-2检测结果,A、B组高于C组(P<0.01,P<0.05)。结论通过大鼠甲状腺组织内局部注射pORFm IL10质粒使甲状腺滤泡上皮细胞表达IL-10,能够降低自身抗体水平和针对抗原反应的T淋巴细胞增殖反应及PTg刺激的脾细胞产生的Th1细胞因子。多聚赖氨酸可以延长目的基因表达时间,更有效地改善EAT大鼠的免疫功能状态。

肿瘤微环境中IL-10限制SOCS1基因沉默的树突状细胞疫苗的抗肿瘤作用

目的观察SOCS1基因沉默的DC疫苗对荷黑素瘤小鼠的抗肿瘤作用及肿瘤微环境中IL-10对该DC疫苗抗瘤作用的影响。方法从小鼠股骨分离骨髓细胞,GM-CSF和IL-4联合诱导DCs分化,然后感染携带沉默SOCS1基因的Len-SOCS1-shRNA慢病毒;用TRP2抗原肽负载沉默SOCS1的DC细胞制备DC疫苗,LPS诱导成熟,流式细胞仪分析DC细胞表面MHCⅡ和CD86的表达,real-time PCR分析该DC细胞的SOCS1、IL-10和IL-12p40表达。用B16细胞或降低IL-10基因表达的B16(B16-IL-10-/-)制备荷瘤小鼠模型,瘤内注射DC疫苗(3×106/只),观察肿瘤生长和荷瘤小鼠生存期。采用不连续梯度离心法分离肿瘤浸润淋巴细胞,流式细胞仪观察CD8+T细胞的分布;并采用微量细胞毒的方法分析CTL活性。结果 Len-SOCS1-shRNA慢病毒感染DC后,可使SOCS1表达下调80%;下调SOCS1表达的DC细胞MHCⅡ和CD86表达有增加趋势,但与对照组DC相比无明显差异;下调SOCS1表达可降低DC细胞的IL-10表达,提高IL-12p40的表达。沉默SOCS1的DC疫苗对B16荷瘤小鼠的生存率没有明显影响,但可显著提高B16-IL-10-/-荷瘤小鼠的生存率(P<0.05)。下调SOCS1表达的DC疫苗不仅可提高B16-IL-10-/-荷瘤小鼠肿瘤浸润CD8+T淋巴细胞数,还可促进CD8+T细胞IFN-γ的分泌及CTL活性。结论沉默SOCS1可提高DC疫苗的活性,但肿瘤微环境的IL-10依然是限制该DC疫苗有效发挥抗瘤作用的因素。

从基因水平对IL-5与IL-10在日本血吸虫感染小鼠中作用的探讨

本研究对日本血吸虫感染小鼠脾细胞体外在SEA与ConA诱导下产生的IL 5和IL 10 2种细胞因子从mRNA转录水平进行研究 ,以探索这 2种细胞因子mRNA转录水平的动态变化与肉芽肿形成与调节的可能性。日本血吸虫尾蚴感染雄性BALB C小鼠后 ,分别于感染后 3周、 5周、 8周、 10周和 12周取小鼠脾脏 ,制备脾细胞单细胞悬液并于含ConA或SEA的培养基中培养后提取脾细胞总RNA。RT PCR及凝胶分析法被用来分析总RNA样品中IL 5及IL 10mRNA转录水平。研究结果显示 ,未感染和感染 3周小鼠脾细胞均无IL 5和IL 10的表达 ,感染后第 5周的小鼠脾细胞出现IL 5特异性条带 ,感染后第 8周IL 5表达明显增强 ,感染后第 10周IL 5mRNA转录水平下降 ,感染后第 12周未能检测到IL 5表达 ,表明IL 5表达的动态变化与肉芽肿的形成、发展及调节相平行。IL 10mRNA转录也于感染后第 5周出现 ,但感染后第 8周、第 10周、第 12周与第 5周相比 ,IL 10的表达水平并无明显改变 ,显示IL 10mRNA转录水平并未随着肉芽肿的调节而变化。本研究结果提示IL 5可能在肉芽肿形成和调节过程中可能起重要作用 ;而IL 10可能并未直接参与肉芽肿的调节 ,但其转录可能与防止宿主过度肉芽肿炎症反应有关。

TNF-а和IL-10基因多态性预测肾移植效果的临床研究

目的 :探讨 TNF-α和 IL - 10基因多态性预测移植肾急性排斥反应的临床意义。 方法 :用序列特异引物聚合酶链反应 (PCR- SSP)方法 ,对 12 6例肾移植患者进行 TNF-α和 IL - 10基因型检测。 结果 :肾移植后急性排斥反应发生率 :TNF-α为高分泌基因型的患者显著高于低分泌基因型者 (P<0 .0 1) ;IL - 10为高分泌基因型的患者显著高于低分泌基因型者 (P<0 .0 5 ) ;TNF-α与 IL - 10均为高分泌基因型的患者比所有其他基因型组合者高 (P<0 .0 1) ,TNF-α与 IL - 10均为低分泌基因型患者比所有其他基因型组合者低 (P<0 .0 5 )。 结论 :常规检测 TNF-α和 IL - 10基因多态性对于预测移植效果具有重要意义。

IL-10基因给药对BXSB狼疮小鼠发病的影响

目的：为了观察白细胞介素10（IL－10）在系统性红斑狼疮（SLE）发病中的作用。方法：通过基因工程方法构建了真核表达载体pcDNA3－IL－10，采用基因给药方式先后两次将质粒DNA直接肌注于3．5月龄雄性BXSB狼疮小鼠．同时给对照组小鼠注射等量空载体质粒pcDNA3。结果：发现IL－10在该鼠体内过表达可导致其血清ANA滴度、IL－6水平及肾脏IgG沉积明显增加，而尿蛋白和血清GPT水平及肾脏C3沉积无明显差异。结论：提示IL－10在SLE发病中可能具有病理性作用，阻止或减少IL－10的分泌及作用，也许有助于SLE的治疗。

安徽汉族人群IL-1F10-3基因rs3811058位点单核甘酸多态性与强直性脊柱炎患者遗传易感性研究

目的了解IL-1F10-3基因rs3811058位点的单核苷酸多态性与强直性脊柱炎遗传易感性的关系。方法采用病例对照研究设计,通过聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)方法对基因型筛查并进行基因组测序验证,检测151例强直性脊柱炎患者和155例正常对照基因型,并分析基因型及等位基因频率在两组中的分布。结果 IL-1F10-3基因rs3811058位点的等位基因频率和基因型频率在病例组和对照组中的分布差异均无统计学意义。结论安徽地区汉族人群强直性脊柱炎患者遗传易感性可能与IL-1F10-3基因rs3811058位点单核苷酸多态性无关。

IL-10-1082位基因多态性与甘肃地区HBV感染的相关性研究

研究IL-10-1082基因多态性与甘肃地区HBV感染的关系。选择汉族慢性乙型肝炎156例及88例正常对照,采用等位基因特异引物聚合酶链反应(ASPCR)方法,分析甘肃地区IL-10-1082启动子基因多态性。结果发现IL-10-1082位各基因型频率在HBV感染者中和在健康对照者中的差异无显著性。对抗病毒治疗应答组与无应答组基因型频率相比差异有显著性,对抗病毒治疗的反应与G等位基因有一定的相关性。HBV DNA定量中高载量组与低载量组IL—10—1082位基因型频率及等位基因频率相比,差异均无显著性。结论为甘肃地区HBV感染者IL-10—1082位基因多态性与对抗病毒治疗的反应有一定相关性。

IL-10启动子-592基因多态性与肠易激综合征的关系

目的探讨IL-10启动子-592位点基因多态性与肠易激综合征(IBS)的关系。方法采用聚合酶链式反应结合限制性内切酶技术(PCR-RFLP),对312例IBS患者及325例正常对照者的IL-10启动子-592位点进行基因型分析。结果 IL-10启动子-592位点的A等位基因的发生率在IBS组及正常对照组分别为72.8%及68.9%,两组无统计学差异;IL-10启动子-592位点A/A及A/C基因型在IBS组及正常对照组的发生率有统计学差异(p<0.05),A/A基因型在两组的发生率分别为56.1%及46.2%,A/C型分别为33.3%及45.5%。结论 IL-10启动子-592位点A/A基因型可能更易患IBS。

脾虚大鼠脑内IL-10水平与基因表达变化及益气扶正中药的干预作用

目的:研究脾虚模型脑内IL-10水平与基因表达变化及益气扶正中药的干预作用。方法:采用苦降泻下、饮食失节加劳倦过度法建立脾虚大鼠模型,免疫组化法与原位杂交法观察下丘脑腹侧核、海马CA1区IL-10水平与IL-10NmRNA表达变化及四君子汤、玉屏风散干预作用。结果:模型组IL-10水平与IL-10mRNA表达在下丘脑腹侧核、海马CA1区明显增加;治疗组上述脑区的IL-10水平与IL-10mRNA表达明显降低。结论:四君子汤、玉屏风散可通过调控IL-10水平及基因表达而影响机体免疫功能。

IL-10启动子区基因多态性对癌症的调节

人类白细胞介素10(human interleukin-10,IL-10)是人类一种重要的免疫调节细胞因子,其基因启动子区域存在基因多态性,这种多态性与癌症密切相关。本文就近年来与多种癌症相关的IL-10基因多态性的研究进展综述如下。

IL-10基因启动子区域遗传多态性研究

目的比较分析IL-10基因启动子区域SNP等位基因和基因型在不同地区、种族之间的分布。方法使用PCR和DNA测序方法,检测广西地区人群IL-10基因启动子区域rs1800871G/A、rs1800872G/T多态性,并与人类基因组计划研究的4个人群(欧洲、中国北京、日本及非洲)以及新西兰、丹麦及墨西哥等地区人群SNP分型数据相比较。结果 rs1800871G/A、rs1800872G/T SNP的分型数据,在男性、女性组间分布差异无统计学意义(P>0.05)。其SNP分型数据与中国北京地区、日本人群相比较,分布差异无统计学意义(P>0.05);而与非洲、欧洲、墨西哥、丹麦及新西兰地区人群比较,分布差异有统计学意义(P<0.01)。结论 IL-10基因启动子区域rs1800871G/A、rs1800872G/T多态性在不同地区、种族人群之间的分布有差异。

IL-10基因-1082A/G多态性与糖尿病肾病易感性的Meta分析

目的系统评价白细胞介素-10(interleukin-10,IL-10)基因-1082A/G多态性与糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)易感性之间的关系。方法检索建库以来至2019年6月间与IL-10基因1082A/G及DN发病风险相关的病例对照研究,使用纽卡斯尔渥太华(Newcastle-Ottawa Scale,NOS)标准对纳入文献进行质量评价。采用STATA12.0软件进行统计分析,选择发病风险比值比(odds ratio,OR)及95%置信区间(confidence interval,CI)为效应指标。结果本研究共纳入10项研究,包含DN患者1759例,单纯糖尿病(diabetes mellitus,DM)患者1525例,健康对照(healty control,HC)者2209例。DN组与单纯DM组比较,IL-10基因-1082A/G多态性在各遗传模型上差异均无统计学意义(P>0.05)。DN组与健康人群比较,IL-10基因-1082A/G多态性在纯合子模型下与DN呈明显相关性(GG vs AA:OR=0.577,P<0.05)。将地区进行亚组分析发现,亚洲人群中IL-10基因-1082A/G多态性在除杂合子模型外的其他遗传模型中差异均有统计学意义(G vs A:OR=0.589,P=0.031;GG vs AA:OR=0.349,P=0.000;GG vs GA+AA:OR=0.588,P=0.015;GG+GA vs AA:OR=0.629,P=0.000)。结论IL-10基因-1082A/G多态性与DN发病相关,亚洲人群中G等位基因、GG基因型是DN发病的保护因素。

兔IL-10基因外显子4突变对蛋白结构和功能的影响

本研究针对兔IL-10基因外显子4中的碱基突变,运用生物信息学比较分析野生型和突变型蛋白的理化性质和结构。结果表明,外显子4中碱基T的插入并未改变IL-10蛋白的理化性质、二硫键、跨膜结构、信号肽、糖基化位点以及二级结构,但是导致磷酸化位点减少、三级结构改变,从而影响IL-10蛋白的功能并可能对机体疾病的抗病性产生影响。

人IL-10基因重组复制缺陷型腺病毒DNA的构建

目的 构建人IL-10基因的重组腺病毒并进行体外表达和检测。方法从质粒pcDNA3IL-10的CMV启动子下游完整切下IL-10 cDNA的片段,将其定向插入Gateway载体,在克隆酶的作用下将阳性克隆质粒转入目的腺病毒载体。PacI酶线性化IL-10腺病毒DNA后阳离子质脂体转染293A细胞,获得人IL-10的复制缺陷型重组腺病毒。体外感染人胰腺癌细胞株Bxpc-3和大鼠胰腺细胞株AR-42J;Western blot检测人IL-10的表达。结果 成功地构建人IL-10重组腺病毒,病毒滴度达2×109PFU/mL。体外感染的细胞株均检测到IL-10的表达。结论 构建复制缺陷型重组腺病毒能够介导IL-10的基因表达,为细胞因子的抗炎冶疗奠定实验基础。

慢性HBV感染者IL-10启动子592位点基因多态性与血清IL-10的表达分析

目的探讨慢性乙型肝炎患者IL-10-592各基因型与血清中IL-10表达水平的关系。方法以117例HBV感染者作为疾病组,81例体检健康者(仅抗HBc为阳性的既往感染者)作为对照组。用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCRRFLP)技术检测两组IL-10-592基因型,ELISA法检测两组血清IL-10的浓度。结果疾病组血清IL-10水平为348.28(231.9,411.76)pg/mL,与对照组的228.74(160.59,364.18)pg/mL比较,差异有统计学意义(H=14.49,P<0.05)。患者IL-10-592 CC基因型血清IL-10水平为448.64(402.51,584.78)pg/mL,与AA基因型294.78(190.49,354.36)pg/mL和AC基因型297.01(205.99,385.33)pg/mL比较,差异均有统计学意义(H分别为37.87和30.92,P均<0.05)。而AA基因型与AC基因型比较,差异无统计学意义(H=0.10,P>0.05)。结论慢性乙肝患者IL-10启动子592位点的多态性影响血清IL-10的水平,CC基因型促进IL-10高表达,AA基因型引起IL-10低表达。