IL-12/IL-23拮抗剂治疗炎症性肠病有效性及安全性的Meta分析

目的评价IL-12/IL-23拮抗剂治疗炎症性肠病(inflammatory bowel disease,IBD)的有效性及安全性。方法利用PubMed、EmBase、Cochrane Library、中国知网、万方、维普等数据库检索自建库至2019年6月的相关文献,并对Gastroenterology and Hepatology、United European Gastroenterology Week和AGA Abstracts(2016-2018年)的会议记录进行回顾,制定严格的纳入、排除标准,进行筛选,并对相关研究指标进行数据提取,采用RevMan 5.3软件进行统计学处理。结果11项随机双盲安慰剂对照试验研究符合纳入标准,共计活动性IBD患者4181例,包括试验组2837例,安慰剂组1344例。Meta分析结果显示,试验组临床缓解率高于安慰剂组,差异有统计学意义(RR=3.02,95%CI:1.94~4.76,P<0.00001);临床反应率高于安慰剂组,差异有统计学意义(RR=1.57,95%CI:1.37~1.81,P<0.00001);不良反应发生率与安慰剂组比较,差异无统计学意义(RR=0.96,95%CI:0.91~1.02,P=0.16)。结论IL-12/IL-23拮抗剂可有效治疗中-重度活动性IBD,且安全性较好。

血清IFN-γ、IL-4、IL-12、IL-23对肺结核免疫的作用研究

目的研究血清γ干扰素(IFN-γ)、白介素-4(IL-4)、白介素-12(IL-12)、白介素-23(IL-23)在结核免疫中的相互关系及在抗结核免疫中发挥的作用。方法使用双抗体夹心酶联免疫吸附试验(ELISA)定量法检测活动性肺结核组(42例)患者和健康对照组(42例)的血清IFN-γ、IL-4、IL-12、IL-23表达水平,并比较这些细胞因子在抗结核治疗前及治疗后的变化水平。结果 (1)肺结核组患者的血清IFN-γ、IL-12、IL-23水平降低,IL-4水平升高,与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。(2)肺结核组患者在2HRZS(E)/4HR方案治疗3个月后,血清IFN-γ、IL-12、IL-23水平较治疗前升高,IL-4水平较治疗前降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论检测血清IFN-γ、IL-4、IL-12、IL-23等细胞因子有助于判断肺结核患者的免疫反应功能;在抗结核病治疗中,动态监测这些细胞因子,可以判断治疗效果。

寻常性银屑病皮损及非皮损中IL-23(p19/p40)和IL-12(p35/p40)mRNA的表达

目的检测寻常性银屑病患者皮损及非皮损处IL-23(p19/p40)和IL-12(p35/p40)mRNA表达,探讨其临床意义。方法采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测寻常性银屑病患者皮损、非皮损处及正常人皮肤中IL-23(p19/p40)和IL-12(p35/p40)mRNA的表达水平。结果寻常性银屑病患者皮损中IL-23p19及p40(IL-23/IL-12)mRNA的表达均高于非皮损组织和正常皮肤组织(P<0.05),且非皮损处高于正常对照组,差异有显著性(P<0.05);IL-12p35mRNA在银屑病皮损处、非皮损处和正常对照中表达水平差异无显著性(P>0.05)。结论在寻常性银屑病发病过程中,IL-23可能发挥较IL-12更重要的作用。

雷公藤多苷对结肠炎小鼠结肠组织IL-23、IL-17和IL-12表达的影响

目的:观察雷公藤多苷(GTT)、美沙拉嗪对三硝基苯磺酸(TNBS)诱导的急性结肠炎小鼠结肠组织中IL-23、IL-17、IL-12表达的影响,探讨其可能的作用机制。方法:C57BL/6小鼠随机分为4组:正常对照组、模型组、美沙拉嗪组、雷公藤多苷组,后3组应用TNBS建立小鼠急性结肠炎模型,模型组不作其他处理,雷公藤多苷组和美沙拉嗪组于造模前4d开始每天给予雷公藤多苷灌胃或美沙拉嗪灌肠液灌肠直到实验结束,正常对照组不作任何特殊处理。各组小鼠均于TNBS灌肠后48h处死,检测各组小鼠结肠组织大体、组织学损伤评分及髓过氧化物酶(MPO)活性;ELISA法检测结肠组织IL-23p19、IL-17蛋白含量,实时荧光定量RT-PCR检测结肠组织IL-23p19、IL-17、IL-12p35的mRNA表达。结果:美沙拉嗪组和雷公藤多苷组小鼠结肠大体及组织学损伤记分、MPO活性明显低于模型组(P<0.05);模型组结肠组织IL-23p19、IL-17、IL-12p35mRNA表达水平明显高于正常对照组、美沙拉嗪组、雷公藤多苷组(P<0.05);模型组结肠组织IL-23p19、IL-17蛋白水平明显高于正常对照组、美沙拉嗪组、雷公藤多苷组(P<0.05),后三者间无统计学差异。结论:雷公藤多苷可能通过非选择性抑制IL-23p19、IL-17、IL-12p35的表达来抑制结肠炎小鼠的炎症反应,效果与美沙拉嗪类似。

脂多糖和金黄色葡萄球菌对IL-23、IL-12表达的调控

目的:检测脂多糖(LPS)和金黄色葡萄球菌(SAC)对人外周血单个核细胞(PBMC)IL-23和IL-12各亚基表达的调节作用并探索其作用机制。方法:用LPS和SAC直接刺激人PBMC,或用CD14抗体或p38丝裂原活化蛋白激酶(MAPK) 抑制剂Mastoparan预处理PBMC后再予LPS和SAC刺激,半定量RT-PCR方法检测IL-23p19、IL-12p35和IL-12p40亚基的基因表达变化。结果:人PBMC组成性表达p19和p35,不表达p40。LPS和SAC可上调各亚基的表达。LPS诱导的IL-23和IL- 12各亚基表达均需通过CD14;CD14仅部分参与SAC诱导的IL-12 p40和p35表达上调,而与p19上调无关。LPS和SAC诱导的IL-23和IL-12各亚基表达均需要p38 MAPK通路。结论:LPS和SAC刺激下IL-23和IL-12亚基表达及信号传导通路既有相似之处又有不同点,为单独或同时调控这两种因子的表达提供线索。

IL-4、IL-10和抗IL-12受体β1mAb抑制IL-23诱导正常人记忆T细胞IFN-γ产生

目的探讨重组人白介素23(IL23)是否能够诱导正常人T细胞IFNγ的产生,作用的靶细胞亚群和调节因素。方法正常人PBMC在抗CD3(antiCD3)单克隆抗体或antiCD3和抗CD28(antiCD28)单克隆抗体刺激的条件下与IL23进行培养,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测细胞培养液中IFNγ的水平;同时采用流式细胞仪,在单个细胞水平上分析IL23诱导PBMCIFNγ表达的T细胞亚群。结果在未经任何刺激的情况下,PBMC产生很低或不产生IFNγ。IL23呈剂量依赖方式促进由antiCD3活化的PBMCIFNγ产生。细胞亚群分析的结果表明,IL23诱导记忆CD4+和CD8+T细胞表达IFNγ,对活化的CD4+T细胞作用较为明显。Th2细胞因子(IL4、IL10)和抗IL12受体β1mAb(IL12Rβ1)抑制IL23诱导T细胞IFNγ产生。结论IL23促进活化的记忆CD4+和CD8+T细胞IFNγ的产生。Th2细胞因子和抗IL12Rβ1mAb抑制由IL23诱导IFNγ产生,提示这些细胞因子和抗体对IL23引起的自身免疫病具有拮抗作用。

抗氧化剂N-乙酰半胱氨酸对巨噬细胞产生IL-12及IL-23的不同作用

目的观察N-乙酰半胱氨酸(NAC)对巨噬细胞产生白介素-12(IL-12)及白介素-23(IL-23)的作用。方法 IL-12p35,p40,IL-23p19及IL-17的mRNA表达采用RT-PCR进行检测。IL-12p40,IL-12p70,IL-23及IFN-γ的产生使用ELISA进行测定。结果小鼠巨噬细胞经过NAC刺激6h后IL-12p35和p40的mRNA表达增强,而NAC刺激24h后p35的mRNA表达和IL-12p70的产生被减弱。另一方面,NAC增进了IL-23p19的mRNA表达和IL-23产生。此外,在小鼠脾细胞中,NAC增强了IL-23p19mRNA表达而抑制了IFN-γ的产生。NAC刺激后的CD11b+细胞能够促进T细胞中IL-17mRNA的表达。结论 NAC抑制巨噬细胞产生IL-12而促进巨噬细胞产生IL-23,从而促进Th17免疫反应。

Th2细胞因子和抗IL-12Rβ1mAb抑制由IL-23诱导PBMCIFN-γ的产生

目的:探讨重组人白介素23(IL-23)诱导正常人PBMC IFN-γ的产生,细胞亚群和调节因素。方法:正常人PBMC在不同条件下与IL-23进行培养,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测细胞培养液中IFN-γ的水平。同时采用流式细胞仪,分析IL-23诱导PBMC IFN-γ表达的细胞亚群。结果:IL-23呈剂量依赖性诱导PBMC IFN-γ产生,并可与IL-2协同诱导IFN-γ的产生。细胞亚群分析的结果表明,IL-23诱导高表达CD56+NK细胞产生IFN-γ,对CD4+和CD8+T细胞无明显作用。Th2细胞因子和抗IL-12受体β1mAb(IL-12Rβ1)抑制IL-23诱导IFN-γ产生。结论:IL-23可直接作用于CD3-CD56+NK细胞,诱导产生IFN-γ。Th2细胞因子和抗IL-12Rβ1mAb抑制IL-23诱导IFN-γ产生,提示可以用于由IL-23引起自身免疫病的治疗。

甘珀酸对EAE小鼠IL-12、IL-23表达的影响

目的探讨甘珀酸(CBX)对小鼠实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)IL-12、IL-23表达的影响。方法-制作小鼠EAE模型,然后将CBX(20mg/kg)或生理盐水隔日1次静脉注射,比较各组行为学变化。小胶质细胞与树突细胞与阶梯浓度的CBX共培养后,用RT-PCR检测IL-12和IL-23-mRNA的表达。用ELISA检测IL-12与IL-23水平。结果 CBX组和EAE组比较,行为学表现有所好转(P<0.05)。体外实验证实与LPS组比较,CBX组小胶质细胞及树突细胞IL-23-p19的表达降低(P<0.05),同时CBX处理后能够抑制小胶质细胞IL-23水平(P<0.05)。结论 CBX可通过抑制小胶质细胞或树突细胞IL-23的表达改善多发性硬化的临床症状。

rMBP-NAP依赖IL-12/IL-23轴对肝癌H22荷瘤小鼠的抑瘤作用研究

目的研究r MBP-NAP在肝癌H22荷瘤小鼠模型中的肿瘤生长抑制作用以及IL-12/IL-23在其发挥抗肿瘤作用中的角色。方法 BABL/c小鼠左前肢腋下皮下注射2×106个H22肿瘤细胞,建立荷瘤小鼠模型,荷瘤后第2天将小鼠随机分为两组,PBS组和r MBP-NAP组,并通过皮下瘤旁注射给药的方式进行治疗,期间监测肿瘤体积。取荷瘤小鼠脾脏制成单细胞悬液,分为对照组和抗体阻断组,同时加入丝裂霉素C处理过的H22细胞和r MBP-NAP与脾细胞共培养,抗体阻断组中分别加入anti-IL-12抗体和anti-IL-23抗体,对照组中加入同型抗体。于培养3 d和7 d后检测IFN-γ的表达。结果相对于PBS组,r MBP-NAP治疗组小鼠的肿瘤生长显著减缓。r MBP-NAP刺激后,荷瘤小鼠脾细胞分泌大量IFN-γ,共培养3 d和7 d后,IFN-γ表达持续累积。anti-IL-12抗体和anti-IL-23抗体阻断后,均可导致IFN-γ的表达量显著性下降。结论 r MBP-NAP能够显著性抑制H22荷瘤小鼠肿瘤的生长。

系统性白念珠菌感染小鼠IL-12和IL-23的表达

目的了解系统性白念珠菌感染小鼠IL-12和IL-23的表达特征,探讨IL-23在抗白念珠菌系统感染中的作用,并重新认识和评价IL-12的作用。方法通过尾静脉接种白念珠菌建立小鼠白念珠菌系统感染模型,观察小鼠肾脏的病理变化,RT-PCR法检测小鼠肾脏IL-23及IL-12mRNA的相对表达水平,平皿稀释法检测肾脏内菌落形成单位(CFU)。结果IL-12mRNA表达水平在初次感染后第1、3天明显升高(P<0.05),感染后第7天基本正常。IL-23mRNA水平在初次感染后的第1天无明显改变(P>0.05),感染后第3、7天明显升高(P<0.05),而再次感染中其mRNA始终呈现高表达(P<0.05)。结论IL-12和IL-23均参与I型免疫反应,有效抵御白念珠菌系统感染,IL-12可能在炎症反应的早期发挥重要作用,而IL-23可能在炎症反应的后期发挥重要作用。

IL-23与IL-12诱导NK细胞功能的异同及机制初探

目的探讨细胞因子IL-23与IL-12对NK细胞功能的影响及可能的机制。方法密度梯度离心法分离人外周血单个核细胞(PBMCs)或磁珠纯化NK细胞,不刺激或用IL-23或IL-12刺激,用流式细胞术和ELISA法检测NK细胞产生IFN-γ的情况;以K562或Jurkat细胞作为靶细胞,用流式细胞术检测NK细胞的杀伤功能并分析NK细胞在不同的刺激条件下杀伤相关分子的表达情况及pSTAT的表达情况。结果与未刺激组相比,IL-23和IL-12均可以诱导NK细胞呈剂量和时间依赖方式产生IFN-γ;但IL-12而非IL-23可以增强NK细胞对靶细胞K562或Jurkat细胞的杀伤功能。进一步研究表明,IL-12而非IL-23可以诱导杀伤相关分子TRAIL及CD107a/b的表达。此外,IL-12诱导NK细胞表达更高水平的pSTAT4,而IL-23诱导NK细胞表达更高水平的pSTAT3。结论与IL-12相比,IL-23亦可以诱导NK细胞产生细胞因子但不能增强NK细胞的杀伤功能,IL-23不能诱导杀伤相关分子TRAIL及CD107a/b的表达,IL-23可以诱导低水平的pSTAT4但高水平的pSTAT3的表达。

胸腺五肽对复发性外阴阴道念珠菌病患者IL-12p70和IL-23p19水平的影响及疗效分析

目的研究观察胸腺五肽对复发性外阴阴道念珠菌病患者阴道分泌物IL-12p70和IL-23p19水平的影响及疗效。方法采用酶联免疫吸附实验(ELISA)双抗体夹心法检测复发性外阴阴道念珠菌病患者治疗组、对照组治疗前后及正常人阴道分泌物IL-12p70和IL-23p19水平。结果两组治疗前复发性外阴阴道念珠菌病患者IL-12p70和IL-23p19水平均低于正常人(P<0.01),两组患者间IL-12p70和IL-23p19水平相近(P>0.05)。治疗后胸腺五肽组IL-12p70和IL-23p19水平升高,对照组治疗前后水平差异无统计学意义(P>0.05)。治疗组的疗效(总有效率80.00%)明显高于对照组的43.33%(P<0.05)。结论复发性外阴阴道念珠菌病患者存在着Th1/Th2型细胞因子失衡,胸腺五肽可通过纠正两型细胞因子失衡而改善患者免疫功能,提高治疗效果。

IL-23及其相关细胞因子在慢性特发性血小板减少性紫癜中的表达与作用探讨

本研究旨在探讨lL-23及其它的IL-12家族成员在慢性特发性血小板减少性紫癜(ITP)的表达及其免疫调节功能。运用反转录实时PCR方法检测30例慢性ITP患者和15例正常对照者外周血单个核细胞(PBMNC)中IL-23p19、IL-12p35、IL-12p40、IL-27、IL-17 mRNA的表达水平,用ELISA方法检测血浆IL-23、IL-12、IL-17含量并分析其在慢性ITP中的表达规律及与T亚群的关系。结果表明,慢性ITP患者及正常人PBMNC均低水平表达IL-23p19、IL-12p35、IL-27、IL-12p40 mRNA;部分患者及正常人PBMNC微量表达IL-17 mRNA。IL-12p35、IL-27、IL-17mRNA的表达水平与正常对照相比无显著差异,IL-23p19、IL-12p40 mRNA的表达水平比正常对照明显减低(p<0.01)。慢性ITP患者血浆IL-12水平高于正常对照者(p<0.01),IL-23、IL-17水平与正常对照者相比无显著差异。结论:ITP患者体内T淋巴细胞异常主要与IL-12相关,可能与IL-23/IL-17调节轴无直接关系。

IL-12家族抗肿瘤作用的研究进展

IL-12家族是一类结构相似、共价结合的异二聚体细胞因子家族，目前其主要成员包括 IL-12、IL-23、IL-27和 IL-35。IL-12由 p35和 p40两个亚基通过二硫键结合形成，是细胞免疫应答过程中的关键调节因子，在激活 NK 细胞、T 细胞，并诱使其分泌大量 IFN-γ，抑制肿瘤血管生成等方面具有重要的作用。IL-23由 p40和 p19亚基以二硫键结合形成，在抗肿瘤及抗自身免疫病中发挥着重要作用。IL-27由 p28和 EBI3亚基通过二硫键结合形成，在维持机体免疫系统的自身稳定、抗感染及抗肿瘤中起着重要的作用。IL-35由 p35和 EBI3亚基通过二硫键结合形成，在抑制效应 T 细胞增殖、Th17细胞分化和 IL-17的合成方面发挥重要作用。随着 IL-12家族成员的丰富，IL-12家族成员的功能研究也越来越深入，近年来大量研究认为 IL-12家族在肿瘤的发生、发展中具有至关重要的作用，因此，本文就 IL-12家族与其抗肿瘤作用的研究作一综述。

山茱萸水提液对胶原诱导关节炎模型小鼠滑膜组织中IL-12家族调控作用的实验研究

目的观察山茱萸水提液对胶原诱导的关节炎(collagen induced arthritis,CIA)小鼠的干预作用,并通过检测山茱萸水提液对CIA小鼠滑膜组织中IL-12、IL-23、IL-27及IL-35表达的影响,探讨山茱萸水提液通过调控IL-12家族发挥对CIA小鼠干预作用的机制,揭示"酸入肝,酸补肝"中药性味理论指导下的补肝养血疗法治疗痹证的分子机制。方法SPF级DBA/J小鼠,雄性,8~10周龄,40只。采用随机数字表法随机分为4组:空白对照组、模型对照组、山茱萸组、西药对照组,每组10只。然后对模型对照组、山茱萸组、西药对照组小鼠以Ⅱ型胶原诱导CIA小鼠模型,采用关节炎指数评分法进行模型评价,评价成功的小鼠开始给予药物干预,空白对照组不作处理;模型对照组给予等量生理盐水经口灌胃;山茱萸组给予山茱萸[24 g/(kg·d)]悬液经口灌胃,1次/d,连续2周;西药对照组给予布洛芬[0.08 g/(kg·d)]悬液经口灌胃,1次/d,连续2周。末次给药后2 h,评价各组小鼠关节炎指数评分并记录;然后将小鼠过量麻醉处死,取左侧膝关节,剥离滑膜组织,冻存于-80℃冰箱中,用于ELISA法检测滑膜组织中IL-12、IL-23、IL-27及IL-35的含量;同时取右侧膝关节,去皮肤及肌肉,浸泡于4%多聚甲醛溶液中,固定24 h以上,EDTA螯合脱钙剂脱钙,制备石蜡切片,采用IHC法检测滑膜组织中IL-12、IL-23、IL-27及IL-35的表达水平。结果与空白对照组比较,模型对照组小鼠关节炎指数评分及病理评分显著升高(P<0.01),差异有统计学意义;与模型对照组比较,山茱萸组、西药对照组关节炎指数评分及病理评分显著降低(P<0.01),差异有统计学意义;山茱萸组与西药对照组间关节炎指数评分及病理评分差异无统计学意义。与空白对照组比较,模型对照组小鼠膝关节滑膜组织中IL-12、IL-23表达水平显著升高(P<0.01),IL-27、IL-35表达水平显著降低(P<0.01),差异有统计学意义;与模型对照组比较,山茱萸组、西药对照组小鼠膝关节滑膜组织中IL-12、IL-23表达水平显著降低(P<0.01),IL-27、IL-35表达水平显著升高(P<0.01),差异有统计学意义;山茱萸组与西药对照组间膝关节滑膜组织中IL-12、IL-23、IL-27及IL-35表达水平差异无统计学意义。结论山茱萸水提液对CIA小鼠干预作用明显,能够明显降低关节炎指数评分及病理评分。该作用可能是通过抑制CIA小鼠膝关节滑膜组织中IL-12、IL-23,促进IL-27、IL-35的表达而实现的。

IL-23研究进展

IL 2 3是新近发现的一种促炎性细胞因子 ,隶属于IL 12分子家族。类似于IL 12 ,IL 2 3是由两种亚单位 (p4 0和p19)通过二硫键形成的异二聚体分子 ,二者的生物学功能也有很多相似之处 ,但并不完全相同 ,提示IL 2

IL-12家族细胞因子在系统性红斑狼疮发病机制中的研究进展

系统性红斑狼疮(SLE)是一种自身免疫性疾病,其特征是多器官受累和自身抗体的产生。尽管SLE的发病机制仍然未知,但其与T细胞和B细胞过度活跃以及自身抗体产生有关。细胞因子介导的T细胞和B细胞的活化,在包括SLE在内的各种自体免疫疾病的发病机理中都起着至关重要的作用。白介素12(IL-12)家族的异二聚体细胞因子,包括IL-12、IL-23、IL-27和IL-35,对免疫系统的调节具有多种生物学效应。在SLE的治疗中,针对IL-12和IL-23为靶点的研究也在近几年逐渐增多,IL-27和IL-35对T细胞分化的调节也为SLE的治疗提供了新思路。