Th2细胞因子和抗IL-12Rβ1mAb抑制由IL-23诱导PBMCIFN-γ的产生

目的:探讨重组人白介素23(IL-23)诱导正常人PBMC IFN-γ的产生,细胞亚群和调节因素。方法:正常人PBMC在不同条件下与IL-23进行培养,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测细胞培养液中IFN-γ的水平。同时采用流式细胞仪,分析IL-23诱导PBMC IFN-γ表达的细胞亚群。结果:IL-23呈剂量依赖性诱导PBMC IFN-γ产生,并可与IL-2协同诱导IFN-γ的产生。细胞亚群分析的结果表明,IL-23诱导高表达CD56+NK细胞产生IFN-γ,对CD4+和CD8+T细胞无明显作用。Th2细胞因子和抗IL-12受体β1mAb(IL-12Rβ1)抑制IL-23诱导IFN-γ产生。结论:IL-23可直接作用于CD3-CD56+NK细胞,诱导产生IFN-γ。Th2细胞因子和抗IL-12Rβ1mAb抑制IL-23诱导IFN-γ产生,提示可以用于由IL-23引起自身免疫病的治疗。

IL-4、IL-10和抗IL-12受体β1mAb抑制IL-23诱导正常人记忆T细胞IFN-γ产生

目的探讨重组人白介素23(IL23)是否能够诱导正常人T细胞IFNγ的产生,作用的靶细胞亚群和调节因素。方法正常人PBMC在抗CD3(antiCD3)单克隆抗体或antiCD3和抗CD28(antiCD28)单克隆抗体刺激的条件下与IL23进行培养,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测细胞培养液中IFNγ的水平;同时采用流式细胞仪,在单个细胞水平上分析IL23诱导PBMCIFNγ表达的T细胞亚群。结果在未经任何刺激的情况下,PBMC产生很低或不产生IFNγ。IL23呈剂量依赖方式促进由antiCD3活化的PBMCIFNγ产生。细胞亚群分析的结果表明,IL23诱导记忆CD4+和CD8+T细胞表达IFNγ,对活化的CD4+T细胞作用较为明显。Th2细胞因子(IL4、IL10)和抗IL12受体β1mAb(IL12Rβ1)抑制IL23诱导T细胞IFNγ产生。结论IL23促进活化的记忆CD4+和CD8+T细胞IFNγ的产生。Th2细胞因子和抗IL12Rβ1mAb抑制由IL23诱导IFNγ产生,提示这些细胞因子和抗体对IL23引起的自身免疫病具有拮抗作用。

尖锐湿疣患者血清IL-8、IL-12、TNF-α和IFN-γ水平的研究

探讨IL-8、IL-12、TNF-α、IFN-γ在尖锐湿疣中的发病机制。采用ELISA双抗体夹心法,测得40例尖锐湿疣患者血清IL-8、IL-12、IFN-γ水平显著低于正常对照组,而TNF-α水平显著高于正常对照组。IL-8与IL-12水平、IL-8与IFN-γ水平、IL-12与TNF-α水平、IL-12与IFN-γ水平、TNF-α与IFN-γ水平均呈正相关,IL-8与TNF-α水平无相关性。尖锐湿疣患者体内存在细胞因子表达异常,尤其是Th1、Th2细胞因子失衡。

丹参注射液联合黄芪注射液对妊娠高血压疾病患者外周血Th_1/Th_2细胞因子和IL-12水平的影响

目的:观察丹参注射液联合黄芪注射液对妊娠高血压疾病(PIH)患者外周血Th1/Th2细胞因子、IL-12水平和母儿结局的影响。方法:选择72例轻中度PIH患者,随机分为治疗组和对照组。对照组采用解痉、镇静、降压、利尿等西医常规综合治疗,治疗组在对照组西药常规治疗基础上,予以黄芪注射液30ml加入5%葡萄糖注射液500mL静滴,1次/d;丹参注射液20mL加入5%葡萄糖注射液250mL,1次/d。用药2周为1个疗程。分别在治疗前和治疗1个疗程后观察两组孕妇平均动脉压(MAP)、24h尿蛋白量和血细胞比容(HCT)的变化,比较两组母儿结局,并检测两组孕妇治疗前后外周血培养上清单个核细胞(PBMC)中IL-4、IFN-γ及IL-12水平的改变。结果:治疗组治疗后MAP、24h尿蛋白量以及HCT降幅均明显大于对照组。治疗组治疗后胎心异常、新生儿窒息和剖腹产均明显低于对照组。治疗后两组孕妇外周血培养上清PBMC中IL-4水平明显上升,而IFN-γ和IL-12水平明显下降,且治疗组比对照组上升或下降更明显。结论:丹参注射液联合黄芪注射液治疗PIH的临床疗效确切,在一定程度上减轻PIH患者的病情,达到改善母儿结局的目的。其作用机制通过抑制外周血IL-12的分泌,使Th1/Th2平衡从Th1优势向Th2优势漂移,从而纠正Th1/Th2细胞因子比例失调。

IFN-γ、IL-12对B7-1转染肝癌细胞诱导T淋巴细胞活化的影响

目的 探讨B7-1基因转染肝癌细胞与IFN-γ、IL-12联合在体外诱导T细胞活化的能力。方法酶联免疫吸附反应(ELISA)检测联合诱导瘤苗刺激淋巴细胞IFN-γ、IL-12蛋白合成及细胞表面CD4、CD8、CD25的表达。MTT法检测瘤苗对淋巴细胞增殖作用的影响。结果 HepG2／B7-1细胞诱导淋巴细胞表达IL-2、IFN-γ,其蛋白质含分别为875 pg／ml和1 246 pg／ml;而联合IL-12、IFN-γ后能进一步诱导IL-2、IFN-γ的蛋白质合成,较各自无细胞因子组明显提高(P<0.05)。细胞表面CD4、CD8、CD25的表达显著增加。两者联合促进了淋巴细胞的增殖,在E／T=10:1时,较HepG2组明显增大。结论IL-12、IFN-γ增强经B7-1基因转染的肝癌细胞(HepG2／B7-1)诱导淋巴细胞产生IL-2、IFN-γ的能力;IL-12、IFN-γ可能通过调节B7-1分子的生物学活性影响其对T细胞的活化。

妊高征患者外周血Th_1/Th_2失衡与细胞因子IL-12的相关性研究

目的 :探讨妊娠高血压综合征 ( pregnancy induced hypertension,PIH)患者外周血 Th1 / Th2 失衡与 IL - 12的关系及 Th1 / Th2 比率失衡的原因。方法 :采集 18例重度 PIH患者、 13例轻中度 PIH患者、 15例正常妊娠妇女及 15例健康未孕妇女的外周血淋巴细胞 ,用酶联免疫吸附法 ( EL SIA)测定 IL - 12水平 ,用流式技术测 Th1 / Th2 比率。结果 :重度 PIH患者外周血 IL- 12 ( 89.83± 6 .2 4 pg/ ml)水平显著高于其他各组 ( P<0 .0 0 1) ,Th1 / Th2 比率 ( 18.2 6± 1.2 4 )亦显著高于其他各组 ( P<0 .0 0 1) ,且二者存在明显正相关 ( r=0 .6 72 ,P<0 .0 0 1)。结论 :PIH患者其外周血单核淋巴细胞 ( peripheral blood mononuclearcell,PBMC)分泌的 IL - 12可引起 Th2 优势向 Th1 优势转变 ,从而导致 Th1 / Th2

外周血中Th17﹑Th1﹑IL-23及IFN-γ在老年系统性红斑狼疮患者中的表达及临床意义

目的分析老年系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血中辅助性T细胞(Th)17、Th1、白细胞介素(IL)-23及干扰素(IFN)-γ的表达及临床意义。方法采用流式细胞术和酶联免疫吸附(ELISA)法分别检测该院2010年2月至2013年3月住院治疗的36例老年SLE患者与同时期的23例老年健康体检者的Th17细胞、Th1细胞百分比,IL-23及IFN-γ浓度,并对其检测结果进行对比分析,另外对SLE患者的相关检测指标与SLE活动指数(SLEDAI)评分进行相关性分析。结果 SLE组、活动组、非活动组的Th17细胞占所有CD4+T细胞的百分比、IL-23及IFN-γ浓度均高于健康组(P<0.05),Th1细胞占所有CD4+T细胞的百分比与健康组无统计学差异(P>0.05)。其中SLE活动组的Th17细胞占所有CD4+T细胞的百分比和IL-23浓度均高于非活动组(P<0.05)。SLE患者外周血中Th17细胞占所有CD4+T细胞的百分比、IL-23浓度均与SLEDAI评分呈正相关(r=0.78、0.56,P<0.05),而Th1细胞占所有CD4+T细胞的百分比、IFN-γ浓度均与SLEDAI评分无相关性(P>0.05)。结论老年SLE患者外周血中Th17、IL-23及IFN-γ的表达增高,Th1细胞表达无差异,Th17细胞与IL-23的表达与病情有关。

慢性乙型肝炎患者血清HBV DNA含量对IL-12诱导PBMC产生Th1/Th2类细胞因子协同效应的影响

目的 探讨慢性乙型肝炎患者血清HBV DNA含量对IL-12诱导其PBMC产生Th1/Th2类细胞因子协同效应的影响。方法 选取2017年1月至2018年6月我院收治的慢性乙型肝炎患者120例,对所有患者的血清乙肝病毒的脱氧核糖核酸(HBV DNA)含量进行测量,对不同血清HBV DNA含量的患者外周血单个核细胞(PBMC)产生Th1/Th2类细胞因子含量进行测量。结果 HBV DNA含量<10^3拷贝/mL的患者21例,在10^3~10^5拷贝/mL之间的患者37例,在10^5~10^7拷贝/mL之间的患者32例,>10^7拷贝/mL的患者30例;随着HBV DNA含量升高,抗原单独诱导或者是与IL-12一同诱导,PBMC产生Th1类细胞因子IL-2(白细胞介素-2)、IFN-γ(γ-干扰素)的含量不断下降,而Th2类细胞因子IL-4(白细胞介素-4)、IL-10(白细胞介素-10)的含量不断增高。抗原单独诱导与联合IL-12一同诱导相比较,随着HBV DNA含量升高,IL-12对PBMC产生的IFN-γ细胞因子协同效应不断下降,尤其对于>10^7拷贝/mL的患者基本无协同效应。对于<10^3拷贝/mL的患者,IL-12对HbeAg(e抗原)诱导PBMC产生的IL-4细胞因子有显著的抑制作用、在10^3~10^5拷贝/mL之间的患者,对IL-4细胞因子、IL-10细胞因子有显著的抑制作用;e抗原阴性患者PBMC产生的IFN-γ、IL-4细胞因子高于e抗原阳性患者( P <0.05);e抗原阴性患者PBMC产生的IL-10细胞因子含量低于e抗原阳性患者( P <0.05)。结论 慢性乙型肝炎患者血清HBV DNA含量对IL-12诱导其PBMC产生Th1/Th2类细胞因子协同效应的研究期间,血清HBV DNA含量越高对IL-12诱导其PBMC产生IFN-γ细胞因子协同效应存在明显的抑制。

羧基肽酶-H抗体阳性成人隐匿性自身免疫糖尿病患者的TNF-α、IL-12,IL-18、IFN-γ水平观察

目的观察羧基肽酶-H抗体(CPH-Ab)阳性成人隐匿性自身免疫糖尿病(LADA)患者的肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白介素-12(IL-12)、白介素-18(IL-18)、干扰素-γ(IFN-γ)的水平。方法对13例LADA患者、20例2型糖尿病(T2DM)患者及20例健康对照者,采用双抗夹心酶联免疫吸附法(ELISA)检测TNF-α、IL-12、IL-18、IFN-γ的含量。结果LADA组各项指标水平与T2DM组和对照组相比均有升高(均P<0.05);T2DM组TNF-α、IFN-γ水平较对照组升高(P<0.05);T2DM组IL-12、IL-18水平与对照组比较无明显差异(P(0.05)。结论LADA患者体内活跃着细胞介导的细胞免疫反应,LADA诊断采取直接检测针对胰岛细胞自身抗原的细胞免疫反应要优于检测针对同一抗原的自身抗体水平。

干扰素辅助治疗对慢性乙型肝炎患者血清TH1/TH2及IL-12水平影响研究

目的探究干扰素辅助治疗对慢性乙型肝炎患者血清TH1/TH2及IL-12水平影响。方法收集慢性乙型肝炎患者105例,随机分为对照组和实验组,实验组53例,对照组52例,2组患者均实施非抗病毒治疗,对照组在此基础上,采取干扰素辅助治疗,治疗结束后对比分析2组患者临床疗效、血清TH1/TH2及IL-12水平。结果与对照组相比,实验组患者的临床总有效率较高(P<0.05);实验组患者治疗后IL-2水平较低,IL-4、IL-12水平较高(P<0.05)。结论干扰素辅助治疗能够提高慢性乙型肝炎患者的临床有效率与生活质量,推测其与降低血清IL-2水平,升高IL-4及IL-12水平有关。

桑叶和鸭跖草对人TH_1、TH_2细胞IFN-γ、IL-4水平影响的体外实验研究

目的 用体外实验观察中药桑叶、鸭跖草对正常人外周血Th1 、Th2 细胞IFN γ、IL 4水平的影响。方法 选取健康献血员 3 0名无菌采集静脉抗凝血 ,用淋巴细胞分离液分离外周血单核细胞 (PBMC) ,并调成 1× 10 6 /ml浓度加PHA P10 μg/ml。分二组 ,分别加入含中药桑叶、鸭跖草的小鼠血清及不含药小鼠血清(对照 ) ,置 5 %CO2 细胞培养箱 3 7℃孵育 48h ,取上清液川流式细胞术检测IFN γ、IL 4水平。结果 正常人外周血单核细胞Th1 /Th2 处于动态平衡 ;桑叶组Th1 、Th2 细胞的IFN γ、IL 4水平明显升高 ,与对照组相比P<0 0 5 ;鸭跖草组Th1 、Th2 细胞的两类细胞因子水平虽有所上升 ,但与对照纽相比不显著 (P >0 0 5 )。结论 中药桑叶具有提高正常人Th1 、Th2 细胞的IFN γ、IL 4水平 ,鸭跖草的作用不明显。

观察全身热疗、化疗联合治疗晚期NSCLC患者对其机体Th1Th2平衡及IL-2、IFN-γ、IL-4、IL-10、VEGF水平的影响

目的 探讨全身热疗、化疗联合应用于晚期非小细胞肺癌患者治疗过程中的具体效果及对机体Th1/Th2平衡、IL-2、IFN-γ、IL-4、IL-10、VEGF水平的影响情况.方法 研究组晚期NSCLC患者选择全身热疗+化疗,对照组晚期NSCLC患者选择局部热疗+化疗.结果 研究组临床总有效率(60.00%)显著高于对照组(33.33%),P<0.05;两组治疗前Th1/Th2、VEGF、IL-2、IFN-γ、IL-4、IL-10检测值对比均P>0.05,治疗后研究组Th1/Th2、IL-2、IFN-γ水平提高幅度以及VEGF、IL-4、IL-10水平下降幅度均大于对照组(P<0.05).结论 应用全身热疗、化疗联合治疗晚期NSCLC患者可显著提高其临床疗效,有利于改善相应实验室检查指标.

IL-12和IL-18的体外联合孵育协同增强P0_(180-199)T/Th1细胞增殖和分化的实验研究

目的 研究 IL- 12和 IL- 18是否能够协同增强 P0 1 80 - 1 99T/ Th1淋巴细胞的增殖和分化。方法 用 IL-12和 /或 IL- 18体外孵育的 P0 1 80 - 1 99T细胞过继免疫正常动物 ,引发 AT- EAN后 ,用流式细胞仪检测单独组和联合组的脾 T淋巴细胞的增殖 ,EL ISA法检测单独组和联合组的细胞培养上清和血清中 Th1和 Th2细胞因子的变化。结果 与 IL- 12组或 IL- 18组比较 ,IL- 12和 IL- 18的联合孵育使 P0 1 80 - 1 99T细胞的 CD4 +T/ Th1分化能力增强 ,表现为脾细胞的 CD4 +/ CD8+的比值显著上调 ,细胞培养上清和 AT- EAN血清中 IFN-γ的显著上调 ,具有显著性差异。结论 IL - 12和 IL - 18能够协同增强 P0 1 80 - 1 99T/

IL-12 IL-18对乙型肝炎患者Th_1/Th_2亚群的影响

目的探讨IL-12I、L-18对乙型肝炎患者Th1/Th2亚群的影响。方法常规分离人外周血单个核细胞(PBMC),在培养基中分别加入IL-12、IL-18和植物血凝素(PHA)培养72 h。用ELISA方法检测上清中IFN-γ、IL-4的含量。结果IL-12联合PHA或IL-18联合HA诱导下,乙型肝炎患者的IFN-γ水平明显高于对照组;IL-12联合PHA诱导下,乙型肝炎患者IL-4水平降低;IL-18联合PHA诱导下轻度患者明显降低;IL-12、IL-18联合PHA诱导下,乙肝患者的IFN-γ水平明显高于对照组,IL-4水平有降低趋势。结论IL-12、IL-18能够诱导乙型肝炎患者PBMC中Th2细胞向Th1细胞转化;而且IL-12的体外作用要强于IL-18。

小檗碱通过抑制Th1恢复IFN-γ/IL-4平衡减轻迟发型超敏反应

目的:观察小檗碱对卵清蛋白(ovalbumin,OVA)诱导的迟发型超敏反应(delayed type hypersensitivity,DTH)模型小鼠的作用并探讨其机制。方法:32只小鼠随机分为对照组、DTH组、小檗碱组、DTH+小檗碱组,制备DTH模型给予小檗碱处理;测量小鼠足垫肿胀厚度,苏木精-伊红染色(hematoxylin-eosin staining,HE)法观察炎性细胞浸润,酶联免疫吸附测定(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)检测足垫组织匀浆中γ干扰素(interferon-γ,IFN-γ)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)和白介素-4(interleukin-4,IL-4)的表达,制备脾脏单个核细胞,刀豆蛋白(concanavalin A,Con A)实验观察IFN-γ水平,卵清蛋白(ovalbumin,OVA)致敏实验检测上清IFN-γ、IL-4表达。结果:小檗碱处理明显降低小鼠足垫肿胀程度,减少炎症细胞浸润,抑制足垫组织中IFN-γ、TNF-α炎性因子释放,并减少脾脏组织中IFN-γ的分泌,抑制Th1反应,恢复IFN-γ/IL-4平衡(P<0.01,P<0.001),差异均有统计学意义。结论:小檗碱通过抑制Th1反应,恢复IFN-γ/IL-4平衡发挥对迟发型超敏反应的抑制作用。

牙周炎患者外周血Th1、Th2、Th17表达及与牙龈组织IL-17、IFN-γ水平的相关性研究

目的观察牙周炎患者外周血辅助性T1(Th1)、辅助性T2(Th2)、辅助性T17(Th17)和牙龈组织白细胞介素(IL-17)、干扰素-γ(IFN-γ)表达水平,分析其相关性。方法选择我院口腔科2017年7月~2019年12月97例牙周炎患者作为研究对象,根据炎症严重程度分别纳入轻度组(n=29)、中度组(n=35)和重度组(n=33),选择30名牙周健康自愿者作为对照组。收集每名者拔除的无保留价值患牙的牙龈组织,行IL-17、IFN-γ免疫组化染色,采用McCarty的H-score评分法评价染色结果。同时取患者外周血采流式细胞检测法检测Th1、Th2、Th17。采用Pearson法分析Th1、Th2、Th17和牙龈组织IL-17、IFN-γ表达的相关性。结果3组外周血Th1、Th2、Th17水平、牙龈组织IL-17、IFN-γ细胞的H-scorce评分差异均有统计学意义(P<0.05)。3组各项指标均高于对照组,中度组、重度组各项指标均高于轻度组,重度组各项指标高于中度组,差异均有统计学意义(P<0.05)。3组外周血Th2均低于对照组,中度组、重度组外周血Th2均低于轻度组,重度组外周血Th2低于中度组,差异均有统计学意义(P<0.05)。Th1、Th17与IL-17呈正相关(r=0.716,0.572,P<0.05);Th1、Th17与IFN-γ呈正相关(r=0.639,0.529,P<0.05);Th2与IL-17、IFN-γ呈负相关(r=-0.489,-0.406,P<0.05)。结论牙周炎患者机体免疫功能降低,且与牙周组织感染和破坏程度相关,Th细胞亚群可能参与了牙周局部的炎症反应,而IL-17、IFN-γ可能是重要的促炎细胞因子。

电针对帕金森病模型大鼠黑质区c-Jun氨基末端激酶和TNF-α、IFN-γ、IL-1β蛋白表达的影响

目的:观察电针对帕金森病模型大鼠黑质区c-Jun氨基末端激酶(c-Jun N-terminal kinase,JNK)信号通路及炎症因子肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、γ-干扰素(interferon-γ,IFN-γ)、白细胞介素1β(interleukin-1β,IL-1β)的作用,探讨针刺治疗帕金森病的作用机制。方法:健康雄性SPF级SD大鼠32只,随机平均分为正常组、假手术组、模型组、电针组。模型组和电针组经颈背部注射鱼藤酮(1 mg/kg,溶于一定比例二甲亚砜和生理盐水中,浓度0.25 mg/m L)造模14 d。电针组给予电针"风府"(GV16)和"太冲"(LR3)两穴治疗,连续治疗14 d,其余各组不做治疗。假手术组给予相同剂量的二甲亚砜(Dimethyl sulfoxide,DMSO)和生理盐水混合液。采用免疫蛋白印迹法检测大鼠黑质区酪氨酸羟化酶(Tyrosine hydroxylase,TH)、磷酸化的c-Jun和TNF-α、IFN-γ、IL-1β蛋白表达情况。结果:与正常组、假手术组比较,模型组大鼠黑质区TH蛋白表达明显减少(P<0.05),p-c-Jun、TNF-α、IFN-γ、IL-1β蛋白表达明显增加(P<0.05);与模型组比较,电针组大鼠黑质区TH蛋白表达明显增加(P<0.05),p-c-Jun、TNF-α、IFN-γ、IL-1β蛋白表达明显减少(P<0.05)。结论:电针可以通过调节帕金森病模型大鼠体内MAPK/JNK信号通路,降低p-c-Jun在帕金森病模型大鼠黑质区的表达,进而减少炎症因子TNF-α、IFN-γ、IL-1β的表达,对帕金森病的发生发展起到一定的调节作用。