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兔抗鼠IL-12p35多克隆抗体的制备及应用
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作者 门颖丽 康巧珍 +5 位作者 王小龙 江慧 刘诗梦 汲振余 王婷 刘鑫 《南昌大学学报(理科版)》 CAS 北大核心 2017年第1期72-76,共5页
利用分子克隆方法构建重组载体pGEX-4T-1-IL-12a,转化BL21(DE3),经IPTG诱导表达,谷胱甘肽琼脂糖凝胶4B亲和层析柱纯化后,获得重组融合蛋白GST-IL-12p35。以此蛋白为免疫抗原免疫新西兰大耳白兔制备IL-12p35多克隆抗体。采用ELISA法评估... 利用分子克隆方法构建重组载体pGEX-4T-1-IL-12a,转化BL21(DE3),经IPTG诱导表达,谷胱甘肽琼脂糖凝胶4B亲和层析柱纯化后,获得重组融合蛋白GST-IL-12p35。以此蛋白为免疫抗原免疫新西兰大耳白兔制备IL-12p35多克隆抗体。采用ELISA法评估抗体效价,Western blot检测抗体特异性。LPS刺激小鼠脾细胞,ELISA法检测IL-12抗体阻断后细胞培养上清中的IFN-γ的分泌量。结果:成功构建重组载体pGEX-4T-1-IL-12a,并获得重组融合蛋白GST-IL-12p35(约48kDa)。抗原免疫新西兰大耳白兔制备IL-12p35多克隆抗体,ELISA法测得IL-12p35多克隆抗体效价为1256 000,Western blot证实制备的多克隆抗体能够识别结合重组蛋白。IL-12p35多克隆抗体能够有效地抑制LPS诱导的脾细胞IFN-γ的表达。 展开更多
关键词 il-12a il-12p35多克隆抗体 LpS IFN-Γ
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人外周血IL-12 P35 cDNA的巢式PCR扩增、克隆与测序
2
作者 雷明军 吴少庭 +4 位作者 戴五星 高世同 张仁利 黄达娜 袁仕善 《中国热带医学》 CAS 2003年第4期432-434,共3页
目的 克隆中国汉族人IL -12P3 5cDNA序列 ,并进行序列测定。 方法 利用反转录巢式PCR从健康人外周血总RNA中扩增IL -12P3 5cDNA序列 ,插入T载体PMD -T中 ,重组质粒转化大肠杆菌JM10 9,所获克隆经PCR初筛后进行酶切鉴定 ,阳性克隆进行... 目的 克隆中国汉族人IL -12P3 5cDNA序列 ,并进行序列测定。 方法 利用反转录巢式PCR从健康人外周血总RNA中扩增IL -12P3 5cDNA序列 ,插入T载体PMD -T中 ,重组质粒转化大肠杆菌JM10 9,所获克隆经PCR初筛后进行酶切鉴定 ,阳性克隆进行DNA测序。 结果 从健康人外周血总RNA中扩增出约 670bp条带 ,与预期大小相同 ,PCR与酶切鉴定证明得到PMD/P3 5阳性克隆 ,DNA测序证实了插入片段的正确性。 结论 在体外成功的扩增、克隆了中国汉族人IL -12P3 5cDNA序列。为继续开展IL -12的基础与应用研究奠定了基础。 展开更多
关键词 人外周血 il-12 p35 CDNA 巢式pCR扩增 克隆 测序 细胞因子 白细胞介素-12
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寻常性银屑病皮损及非皮损中IL-23(p19/p40)和IL-12(p35/p40)mRNA的表达 被引量:4
3
作者 陈旭娥 谭志建 +3 位作者 岳青 刘厚君 刘志香 李家文 《中国皮肤性病学杂志》 CAS 北大核心 2008年第1期14-16,18,共4页
目的检测寻常性银屑病患者皮损及非皮损处IL-23(p19/p40)和IL-12(p35/p40)mRNA表达,探讨其临床意义。方法采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测寻常性银屑病患者皮损、非皮损处及正常人皮肤中IL-23(p19/p40)和IL-12(p35/p40)mRNA的表达... 目的检测寻常性银屑病患者皮损及非皮损处IL-23(p19/p40)和IL-12(p35/p40)mRNA表达,探讨其临床意义。方法采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测寻常性银屑病患者皮损、非皮损处及正常人皮肤中IL-23(p19/p40)和IL-12(p35/p40)mRNA的表达水平。结果寻常性银屑病患者皮损中IL-23p19及p40(IL-23/IL-12)mRNA的表达均高于非皮损组织和正常皮肤组织(P<0.05),且非皮损处高于正常对照组,差异有显著性(P<0.05);IL-12p35mRNA在银屑病皮损处、非皮损处和正常对照中表达水平差异无显著性(P>0.05)。结论在寻常性银屑病发病过程中,IL-23可能发挥较IL-12更重要的作用。 展开更多
关键词 银屑病 il-23 p19 p40(il-23/il-12) il-12 p35
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CRISPR/Cas9建立IL-12p35基因敲除大鼠C6细胞系表达研究 被引量:6
4
作者 孙瑾 张俊卿 +3 位作者 黄延林 杨芳裕 董桂江 田新华 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第20期2452-2456,共5页
目的:运用CRISPR/Cas9技术敲除大鼠C6细胞系的IL-12p35基因,构建IL-12p35基因稳定敲除细胞株。方法:构建Lenti-sgRNA-EGFP质粒CRISPR/Cas9系统的Cas9核酸内切酶基因,慢病毒感染C6细胞后进行MTT[3-(4,5-Dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphen... 目的:运用CRISPR/Cas9技术敲除大鼠C6细胞系的IL-12p35基因,构建IL-12p35基因稳定敲除细胞株。方法:构建Lenti-sgRNA-EGFP质粒CRISPR/Cas9系统的Cas9核酸内切酶基因,慢病毒感染C6细胞后进行MTT[3-(4,5-Dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide]检测及PI-FACS(Facial Action Coding System)细胞周期检测。结果:针对IL-12p35基因的KO1、KO2、KO3三个靶点,进行慢病毒转染,转染效率均大于80%。酶切前后靶点活性均下调,免疫印迹验证C6细胞中靶点有效性。MTT检测结果IL-12p35基因敲除后于第5天细胞增殖倍数明显降低。IL-12p35基因敲除后显著影响细胞周期G1期,G2/M期。结论:本研究构建IL-12p35基因的CRISPR/Cas9敲除系统,获得稳定的IL-12p35基因敲除细胞株,为后期IL-12p35与胶质瘤细胞的发生、发展机制方面研究提供基础。 展开更多
关键词 CRISpR/Cas9 C6 il-12p35 慢病毒源性载体
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白细胞介素12的p35和p40在大肠埃希菌中的克隆表达
5
作者 周慧敏 范晓磊 +2 位作者 张卓然 郭君 张健 《中国微生态学杂志》 CAS CSCD 2005年第1期13-15,共3页
目的用基因工程的方法在大肠埃希菌中克隆表达白细胞介素12(IL12)的两个亚单位基因p35和p40。方法从乳腺癌患者全血中分离淋巴细胞,利用RTPCR扩增获得了IL12的2个亚单位基因p35和p40,分别转化到大肠埃希菌中,获得了高效表达。结果薄层... 目的用基因工程的方法在大肠埃希菌中克隆表达白细胞介素12(IL12)的两个亚单位基因p35和p40。方法从乳腺癌患者全血中分离淋巴细胞,利用RTPCR扩增获得了IL12的2个亚单位基因p35和p40,分别转化到大肠埃希菌中,获得了高效表达。结果薄层扫描分析结果表明,在BL21(DE3)中表达的重组蛋白IL12P35和IL12P40分别占菌体裂解液中蛋白总量的39%和30%。结论该实验结果为IL12在体外的批量生产奠定了基础。 展开更多
关键词 大肠埃希菌 il-12p40 白细胞介素12 亚单位 薄层扫描 体外 乳腺癌 克隆表达 高效表达 基因工程
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猪白细胞介素12 p35、p40亚基基因的克隆和序列分析
6
作者 袁远英 方强 +3 位作者 孙新 王雪梅 李柏青 夏惠 《蚌埠医学院学报》 CAS 2008年第6期644-647,共4页
目的:克隆猪白细胞介素(IL)-12p35、p40亚基基因,为制备猪囊尾蚴的复合基因疫苗奠定基础。方法:分别分离成年猪的外周血单个核细胞和脾细胞,培养10h后用IFN-γ(100ng/ml)刺激增殖12h,随后加入细菌脂多糖(1μg/ml)刺激培养3h,分别收集细... 目的:克隆猪白细胞介素(IL)-12p35、p40亚基基因,为制备猪囊尾蚴的复合基因疫苗奠定基础。方法:分别分离成年猪的外周血单个核细胞和脾细胞,培养10h后用IFN-γ(100ng/ml)刺激增殖12h,随后加入细菌脂多糖(1μg/ml)刺激培养3h,分别收集细胞并提取细胞总RNA,用RT-PCR方法扩增猪IL-12p35、p40cDNA编码基因,克隆至pMD18-T载体,经PCR和双酶切鉴定后进行序列测定。结果:猪IL-12p35、p40cDNAPCR产物电泳结果证明所克隆的基因分别为616bp和1011bp,基因测序结果与GenBank报道的基因序列各有一个碱基差异,但编码氨基酸无差异,证实分别为猪IL-12p35、p40cDNA编码基因。结论:成功克隆了猪IL-12p35、p40cDNA编码基因。 展开更多
关键词 囊尾蚴病 白细胞介素12 p35 p40 RT-pCR 基因克隆 序列测定
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Anti-IL-12/IL-23 p40抗体对实验性自身免疫性葡萄膜炎的抑制作用及其机制
7
作者 崔雪雪 张智慧 +4 位作者 吴凌子 栗勇涛 陈爽 陈努 张晓敏 《中华实验眼科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第8期707-715,共9页
目的探讨Anti-白细胞介素(IL)-12/IL-23 p40抗体对实验性自身免疫性葡萄膜炎(EAU)的抑制作用及其机制。方法选取SPF级健康无眼疾6~8周龄雌性C57BL/6N小鼠66只,其中24只采用光感受器维生素A类结合蛋白(IRBP)651-670诱导小鼠EAU模型,分别... 目的探讨Anti-白细胞介素(IL)-12/IL-23 p40抗体对实验性自身免疫性葡萄膜炎(EAU)的抑制作用及其机制。方法选取SPF级健康无眼疾6~8周龄雌性C57BL/6N小鼠66只,其中24只采用光感受器维生素A类结合蛋白(IRBP)651-670诱导小鼠EAU模型,分别在免疫前及免疫后第3、12、18天各取6只小鼠,流式细胞术检测各时间点小鼠脾脏、淋巴结和眼球中IL-17A^(+)γ干扰素(IFN-γ)^(+)CD4^(+)T细胞比例。取6只小鼠制作EAU模型,免疫后18 d采用小动物成像仪进行眼底拍照并行光相干断层扫描(OCT)检查。检查完成后处死小鼠,摘取眼球,采用苏木精-伊红染色法检测小鼠视网膜炎症反应和组织结构形态学改变;取淋巴结行流式细胞术检测IL-17A^(+)IFN-γ^(+)CD4^(+)T细胞比例,按照表达数量不同分为IL-17A^(+)IFN-γ^(+)细胞高表达组和IL-17A^(+)IFN-γ^(+)细胞低表达组,比较2个组小鼠视网膜损伤情况。取36只小鼠制作EAU模型,采用随机数字表法分成Anti-IL-12/IL-23 p40组和IgG组,每组18只,分别尾静脉注射Anti-IL-12/IL-23 p40和IgG,每3天1次。免疫后第12天和第18天每组各取6只小鼠,分别取淋巴结和眼球组织,采用流式细胞仪检测T细胞亚群比例。免疫后第24天,每组各取6只小鼠,摘取眼球,采用苏木精-伊红染色法观察视网膜损害情况;采用流式细胞仪检测CD4^(+)T细胞体外诱导分化情况;采用酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测IL-17A^(+)IFN-γ^(+)CD4^(+)T细胞诱导分化后IL-17和IFN-γ表达情况;采用实时荧光定量PCR法检测IL-17A^(+)IFN-γ^(+)CD4^(+)T细胞诱导分化后Th1细胞转录因子T-bet和Th17细胞转录因子维甲酸相关孤核受体γt(ROR-γt)相对表达量。结果免疫前和免疫后第3、12、18天,淋巴结、脾脏、眼球中IL-17A^(+)IFN-γ^(+)CD4^(+)T细胞比例总体比较差异均有统计学意义(H=9.642、16.531、10.385,均P<0.05),其中与免疫前相比,EAU小鼠免疫后第12天淋巴结IL-17A^(+)IFN-γ^(+)CD4^(+)T细胞比例明显升高;免疫后第18天脾脏、眼球中IL-17A^(+)IFN-γ^(+)CD4^(+)T细胞比例明显升高,差异均有统计学意义(均P<0.05)。IL-17A^(+)IFN-γ^(+)细胞高表达组小鼠视网膜严重水肿、视网膜脱离、重度炎性细胞浸润和广泛视网膜褶皱;IL-17A^(+)IFN-γ^(+)细胞低表达组小鼠视网膜轻度水肿、局灶性炎性细胞浸润、轻度视网膜褶皱。Anti-IL-12/IL-23 p40组免疫后18 d,眼球中CD3和IL-17A^(+)IFN-γ^(+)CD4^(+)T细胞比例低于IgG组,差异均有统计学意义(t=15.304、8.080,均P<0.05);免疫后12 d,Anti-IL-12/IL-23 p40组淋巴结中IL-17A^(+)IFN-γ^(+)CD4^(+)T细胞比例为(0.33±0.18)%,明显低于IgG组的(4.83±0.45)%,差异有统计学意义(t=15.974,P<0.001)。与IgG组相比,Anti-IL-12/IL-23 p40组Th1、Th17、IL-17A^(+)IFN-γ^(+)CD4^(+)T细胞百分比及IL-17、IFN-γ、T-bet、ROR-γt表达量明显降低,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论Anti-IL-12/IL-23 p40可通过抑制IL-17A^(+)IFN-γ^(+)CD4^(+)T细胞发挥对EAU的治疗作用。 展开更多
关键词 葡萄膜炎 药物治疗 白细胞介素12亚基p40 克隆抗体 光感受器间维生素A类结合蛋白 小鼠
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阻断白介素12p40功能的新型治疗性单克隆抗体的开发 被引量:1
8
作者 李百勇 王忠民 +9 位作者 王谦 詹建军 黄昭亮 庞醒华 刘志兵 叶才果 李钊明 刁思娴 张鹏 夏瑜 《中国医药生物技术》 2014年第4期283-287,共5页
目的设计并利用抗体工程方法构建并制备全新序列的阻断白介素12(IL-12)p40功能的单克隆抗体MAB1,并对其生物学活性进行鉴定,以制备可应用于治疗多种自身免疫病的IL-12通路的阻断剂。方法根据已有的IL-12 p40蛋白序列,设计、构建并制备... 目的设计并利用抗体工程方法构建并制备全新序列的阻断白介素12(IL-12)p40功能的单克隆抗体MAB1,并对其生物学活性进行鉴定,以制备可应用于治疗多种自身免疫病的IL-12通路的阻断剂。方法根据已有的IL-12 p40蛋白序列,设计、构建并制备了全新的单克隆抗体MAB1,利用间接ELISA测定其与抗原结合的亲和力,并用细胞学方法鉴定它的生物学活性。结果抗体MAB1与p40抗原的结合亲和力为0.0399 nmol/L,并能明显抑制IL-12诱导的人皮肤淋巴细胞相关抗原(CLA)水平上调。其抗原结合能力以及抑制IL-12生物学活性能力与美国强生公司抗体药Stelara(ustekinumab)相当或更优。结论全新构建的单克隆抗体MAB1可作为IL-12通路的高亲和力阻断剂,从而成为自身免疫疾病(例如斑块型银屑病)治疗用新药的临床候选药物。 展开更多
关键词 细胞因子类 白细胞介素12亚单位p40 抗体 克隆 自身免疫疾病
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糜烂型口腔扁平苔藓患者EBi3、IL-12p35的表达及临床意义
9
作者 孙丽美 《中外医疗》 2019年第7期1-3,6,共4页
目的探讨糜烂型口腔扁平苔藓患者EB病毒诱导基因3(EBi3)及IL-12p35的表达及临床意义。方法方便选取2016年1月—2018年2月该院收治的口腔扁平苔藓患者56例作为研究组,选取同期健康体检者60名作为对照组,采取免疫组织化学法检测其EBi3及IL... 目的探讨糜烂型口腔扁平苔藓患者EB病毒诱导基因3(EBi3)及IL-12p35的表达及临床意义。方法方便选取2016年1月—2018年2月该院收治的口腔扁平苔藓患者56例作为研究组,选取同期健康体检者60名作为对照组,采取免疫组织化学法检测其EBi3及IL-12p35阳性的表达情况,分析EBi3及IL-12p35与糜烂型口腔扁平苔藓患者临床病理特征的关系。结果研究组EBi3、IL-12p35阳性表达率分别为60.71%、41.07%,均高于对照组,组间比较差异有统计学意义(P<0.05);EBi3及IL-12p35蛋白表达与口腔扁平苔藓患者临床分型有关(χ~2=32.323,13.333,P<0.05),与年龄、性别、病程无关(P>0.05)。结论口腔扁平苔藓病损组织中EBi3、IL-12p35表达上调,其与口腔扁平苔藓患者临床分型有关,提示EBi3、IL-12p35可能在口腔扁平苔藓病损形成中发挥着重要作用。 展开更多
关键词 糜烂型 口腔扁平苔藓 EBi3 il-12p35
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IL-12 p35 silenced dendritic cells modulate immune responses by blocking IL-12 signaling through JAK-STAT pathway in T lymphocytes
10
作者 Xu, H. Zhang, Y. H. Hua, Y. B. Chen, T. Wang, H. Q. Wu, W. X. 《南京医科大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2007年第5期423-423,共1页
关键词 JAK-STAT路径 淋巴细胞 RNA干涉 细胞因子 移植 免疫 il-12 p35 基因沉默
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治疗Crohn病的抗IL-12单克隆抗体ABT-874
11
作者 范鸣 《药学进展》 CAS 2005年第4期189-190,共2页
关键词 治疗 CROHN病 il-12 克隆抗体 ABT-874
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杆状病毒AcMNPV p35基因的克隆表达及多抗制备 被引量:1
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作者 李玲玲 李朝飞 庞义 《微生物学杂志》 CAS CSCD 2007年第5期1-4,共4页
用PCR方法扩增得到苜蓿丫纹夜蛾核多角体病毒(Autographa californic anucleopolyhedrovirus,AcM N-PV)p35基因,将其克隆至质粒pET-32a(+)上,构建得到重组质粒pET-p35,转化大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG诱导,表达了1条约为55 ku的蛋白带。以... 用PCR方法扩增得到苜蓿丫纹夜蛾核多角体病毒(Autographa californic anucleopolyhedrovirus,AcM N-PV)p35基因,将其克隆至质粒pET-32a(+)上,构建得到重组质粒pET-p35,转化大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG诱导,表达了1条约为55 ku的蛋白带。以Ni2+-NTA偶连抗体检测证明所表达的蛋白为带有组氨酸的融合蛋白。采用割胶回收的方法纯化融合蛋白,以纯化的融合蛋白制备多克隆抗体,效价为1/1 024。免疫印迹分析表明,该抗血清能与感染苜蓿丫纹夜蛾核多角体病毒的细胞蛋白样品发生特异性反应。 展开更多
关键词 苜蓿丫纹夜蛾核多角体病毒p35基因基因表达多克隆抗体
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羊轮状病毒LLR VP4单克隆抗体的制备与特性研究 被引量:2
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作者 王三应 孙萍萍 +4 位作者 张磊 张翌 李莎 李燕 杨继红 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第11期1074-1078,共5页
目的建立抗羊轮状病毒LLR(G10P〔12])VP4特异的单克隆抗体。方法用纯化羊轮状病毒LLR免疫Balb/c小鼠,取其脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞进行融合,利用间接ELISA筛选阳性杂交瘤细胞,有限稀释法单克隆化,Western-blot鉴定单克隆抗体识别的抗原... 目的建立抗羊轮状病毒LLR(G10P〔12])VP4特异的单克隆抗体。方法用纯化羊轮状病毒LLR免疫Balb/c小鼠,取其脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞进行融合,利用间接ELISA筛选阳性杂交瘤细胞,有限稀释法单克隆化,Western-blot鉴定单克隆抗体识别的抗原。结果获得4株稳定分泌抗VP4单克隆抗体的杂交瘤细胞株1B1、1B8、1F11和1G10,其中1-B1,1-B8,1-G10分泌的抗体为Ig M型,1-F11为IgG1亚类;腹水抗体效价均在1×104以上;单克隆抗体均特异性识别羊轮状病毒LLR VP4。结论1B1、1B8、1F11和1G10分泌的抗体为抗羊轮状病毒LLR VP4特异的单克隆抗体。 展开更多
关键词 ) Vp4 克隆抗体
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GST-P12融合蛋白的抗体制备、鉴定及免疫组化分析 被引量:2
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作者 邵小钧 陈伟 +3 位作者 孙沫逸 孙文斌 戴建武 张圃 《现代肿瘤医学》 CAS 2007年第4期463-465,共3页
目的:为了进一步研究p12DOC-1基因及其蛋白在口腔癌发生中的作用与调控机制,将已表达纯化好的GST-p12融合蛋白进行多克隆抗体的制备及鉴定。方法:将构建好的融合表达载体pGEX-4T-1-DOC-1转化BL21(DE3)型大肠杆菌,用IPTG诱导表达,得到GST... 目的:为了进一步研究p12DOC-1基因及其蛋白在口腔癌发生中的作用与调控机制,将已表达纯化好的GST-p12融合蛋白进行多克隆抗体的制备及鉴定。方法:将构建好的融合表达载体pGEX-4T-1-DOC-1转化BL21(DE3)型大肠杆菌,用IPTG诱导表达,得到GST-p12融合蛋白,经亲和层析柱纯化后电泳,再割胶研磨作为抗原直接免疫家兔,经Western blot及ELISA检测抗体效价及特异性并做免疫组化分析。结果:得到较高纯度的GST-p12融合蛋白,获得了兔来源的抗p12DOC-1血清,经蛋白免疫印迹杂交反应及免疫组化分析证实所得的抗体具有较高的特异性和效价。结论:成功制备了兔抗人的p12DOC-1抗血清,为进一步研究p12DOC-1在口腔癌中发生缺失的机理打下基础。 展开更多
关键词 p12DOC-1 蛋白 口腔癌缺失 融合蛋白 多克隆抗体 免疫组织化学
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The Expression of Interleukin-23 (p19/p40) and Inteleukin-12 (p35/p40) in Psoriasis Skin 被引量:3
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作者 陈旭娥 谭志建 +3 位作者 岳青 刘厚君 刘志香 李家文 《Journal of Huazhong University of Science and Technology(Medical Sciences)》 SCIE CAS 2006年第6期750-752,共3页
In order to investigate the mRNA expression and function of interleukin-23 (p 19/p40) and interleukin-12 (p35/p40) in the psoriatic lesion, no-lesion and normal human skin, reverse transcriptase-polymerase chain r... In order to investigate the mRNA expression and function of interleukin-23 (p 19/p40) and interleukin-12 (p35/p40) in the psoriatic lesion, no-lesion and normal human skin, reverse transcriptase-polymerase chain reaction (RT-PCR) was used to detect the expression of IL-23 (p19/p40) and IL-12 (p35/p40). The results showed that the expression of IL-23p19 mRNA and p40 (IL-12/IL-23) mRNA were higher in psoriatic lesion than those of non-lesional skin and normal skin. The levels of IL-23p19 mRNA and p40 (IL-12/IL-23) mRNA were higher in psoriatic non-lesional skin than normal skin. However, no significant difference was found in the level of IL-12p35 mRNA among the psoriatic lesional skin, nonesional skin and normal skin. It was suggested that IL-23 might be more important in the pathogenesis of psoriasis than IL- 12. 展开更多
关键词 pSORIASIS il-23p19 il-23/il-12p40 il-12p35
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IL-12瘤苗与^(131)I-1E2协同抗瘤作用研究 被引量:1
16
作者 尹晓玲 赵银晶 +3 位作者 杨彪 何芳 杨小琼 梁后杰 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2010年第16期930-932,940,共4页
目的:建立稳定表达IL-12的小鼠Lewis肺癌瘤苗LLC/mIL-12;评估尾静脉注射^(131)I-1E2(^(131)I标记抗肺癌单克隆抗体1E2)抑瘤效果及LLC/mIL-12对^(131)I-1E2靶向治疗增效作用。方法:制备LLC/mIL-12;Na^(131)I标记1E2;建立C57BL/6小鼠移植... 目的:建立稳定表达IL-12的小鼠Lewis肺癌瘤苗LLC/mIL-12;评估尾静脉注射^(131)I-1E2(^(131)I标记抗肺癌单克隆抗体1E2)抑瘤效果及LLC/mIL-12对^(131)I-1E2靶向治疗增效作用。方法:制备LLC/mIL-12;Na^(131)I标记1E2;建立C57BL/6小鼠移植瘤模型,比较单纯尾静脉注射^(131)I-1E2或联合瘤内注射LLC/mIL-12时^(131)I-1E2在小鼠体内分布。成瘤小鼠随机分组。为GT、LLC/mIL-12)、RIT(Radioimmunotherapy,放射免疫治疗)、PBS和GT+RIT组,治疗后测量肿瘤体积及重量,计算抑瘤率,检测CTL和NK活性。结果:^(131)I-lE2能有效靶向肿瘤组织,尤其联合LLC/mIL-12。与单用GT或RIT比较,GT+RIT能有效地上调IL-12表达、抑制肿瘤生长,GT及联合组有大量CD4^+、CD8^+淋巴细胞浸润,NK和CTL细胞活性增强。联合组。^(131)I-1E2更多积聚在肿瘤组织。结论:^(131)I-1E2明显抑制肿瘤生长,具有潜在的临床应用价值,有可能成为新的肿痛靶向治疗药物。 展开更多
关键词 il-12瘤苗 抗肺癌单克隆抗体1E2 动物模型
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IFN-γ促进LPS对小鼠抑制性巨噬细胞IL-12 p40/p35的表达 被引量:4
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作者 齐洁 张劲松 +3 位作者 冯伟国 罗向东 李昌麟 张宗梁 《中国科学(C辑)》 CSCD 2000年第6期585-592,共8页
IL-12是由p35和p40两个亚基组成的可诱导细胞因子, 其重要的生物学功能是促进Th1细胞分化, 调节细胞免疫的抗病毒和抗肿瘤作用. 用半定量RT-PCR结合银染对LPS, LPS/IFN-γ作用下小鼠抑制性巨噬细胞IL-12 p40 和 p35两个基因mRNA的表达及... IL-12是由p35和p40两个亚基组成的可诱导细胞因子, 其重要的生物学功能是促进Th1细胞分化, 调节细胞免疫的抗病毒和抗肿瘤作用. 用半定量RT-PCR结合银染对LPS, LPS/IFN-γ作用下小鼠抑制性巨噬细胞IL-12 p40 和 p35两个基因mRNA的表达及NF- B信号与表达的相互关系进行了研究, 发现IFN-γ 不仅能显著促进LPS诱导的IL-12 p40 mRNA 的表达, 同样能明显上调IL-12 p35 mRNA水平, 两者表达水平大致相当, 而且IFN-γ相应地促进了IL-12 p70的分泌. 蛋白酶小体抑制剂PSI显著抑制了LPS, IFN-γ, LPS/IFN-γ 诱导的IL-12 p40, p35mRNA的表达, 并对LPS, LPS/IFN-γ 诱导的I Bα降解也有明显的抑制效应. LPS单独处理可增强NF- B与小鼠p40基因启动子-146 --112区DNA特异序列的结合, 但IFN-γ并不能加强LPS诱导的NF- B与DNA的结合, 也不能促进LPS诱导的I Bα降解. 以上结果提示: (ⅰ) IFN-γ/LPS共同作用, 可促使IL-12 p40和p35 两基因mRNA高水平表达并相互协调. 这种高表达和IL-12 p70的分泌增加相一致. (ii) NF- B是LPS, IFN-γ/LPS诱导的IL-12 mRNA表达的基本信号通路. (iii) 蛋白酶小体抑制剂PSI通过抑制I Bα降解, 进而抑制LPS和LPS/IFN-γ 诱导的IL-12 p40与p35 mRNA的表达. (iv IFN-γ 展开更多
关键词 il-12p40/p35 抑制性巨噬细胞 IFN-Γ 诱导 表达
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银屑病与白介素-23和白介素-12 被引量:5
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作者 李瑾 韩维宜 顾军 《中国麻风皮肤病杂志》 2008年第7期549-551,共3页
白介素-23是一种新发现的细胞因子,与白介素-12在结构上有高度相关性,白介素-23由活化的抗原递呈细胞,主要是树突状细胞分泌,通过IL-23、IL-17途径介导免疫炎症反应。现认为IL-23参与多种自身免疫性疾病,包括银屑病的发生和发展,IL-12p4... 白介素-23是一种新发现的细胞因子,与白介素-12在结构上有高度相关性,白介素-23由活化的抗原递呈细胞,主要是树突状细胞分泌,通过IL-23、IL-17途径介导免疫炎症反应。现认为IL-23参与多种自身免疫性疾病,包括银屑病的发生和发展,IL-12p40抗体可能是治疗银屑病的有效药物。 展开更多
关键词 白介素-23 银屑病 白介素-12 il-12p40抗体
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环孢素对正常人PBMCs产生IFN-γ的抑制作用 被引量:2
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作者 迟秀文 杨培增 吴长有 《中山大学学报(医学科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2005年第4期366-370,共5页
【目的】探讨在不同刺激条件下,环孢素(ciclosporine,CsA)对正常人外周血单个核细胞(PBMCs)γ-干扰素(interferon-gamma,IFN-γ)的产生,以及对细胞亚群的影响。【方法】PBMCs在抗CD3单克隆抗体(anti-CD3)、抗CD3和抗CD28(anti-CD28)单... 【目的】探讨在不同刺激条件下,环孢素(ciclosporine,CsA)对正常人外周血单个核细胞(PBMCs)γ-干扰素(interferon-gamma,IFN-γ)的产生,以及对细胞亚群的影响。【方法】PBMCs在抗CD3单克隆抗体(anti-CD3)、抗CD3和抗CD28(anti-CD28)单克隆抗体、IL-12(Th1细胞分化因子)刺激的情况下或在混合淋巴细胞反应中,观察CsA对IFN-γ产生和Th1细胞分化的影响。同时使用流式细胞仪,在单个细胞水平上评价CsA对T淋巴细胞表面活化分子CD25及细胞内细胞因子IFN-γ和IL-2产生的影响。【结果】CsA对由不同条件诱导产生的IFN-γ,均表现为剂量依赖性抑制关系。此外,CsA抑制IL-12诱导的Th1分化。进一步研究结果表明,CsA可抑制CD4+和CD8+T细胞IFN-γ的表达。【结论】CsA剂量依赖性抑制T淋巴细胞的活化,抑制CD4+、CD8+T淋巴细胞产生IFN-γ和Th1细胞的分化,其抑制机理可能与细胞的活化有关。 展开更多
关键词 IFN-Γ pBMCS 环孢素 抑制作用 CD8^%pLUS%T淋巴细胞 剂量依赖性抑制 正常人 人外周血单个核细胞 抗CD3单克隆抗体 混合淋巴细胞反应 细胞内细胞因子 CD4^%pLUS% 细胞分化因子 单个细胞水平 CsA gamma γ-干扰素 流式细胞仪 il-12
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IL-12 p35和 IL-12 p40缺失可引起衣原体生殖道感染后肾脏病变 被引量:2
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作者 符玺宗 陈胜华 +5 位作者 孙源彬 柏琴琴 蔡恒玲 周洲 陆春雪 陈丽丽 《中华微生物学和免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第2期99-105,共7页
目的:探讨IL-12和IL-23在抗衣原体泌尿生殖道感染免疫及病理损伤中的作用。方法用1×10^4 IFU的鼠肺炎型沙眼衣原体( MoPn)经生殖道感染野生型( wt)、IL-12p35 KO和IL-12p40 KO小鼠,每组一半小鼠于感染后114 d,再次感染相同... 目的:探讨IL-12和IL-23在抗衣原体泌尿生殖道感染免疫及病理损伤中的作用。方法用1×10^4 IFU的鼠肺炎型沙眼衣原体( MoPn)经生殖道感染野生型( wt)、IL-12p35 KO和IL-12p40 KO小鼠,每组一半小鼠于感染后114 d,再次感染相同剂量的MoPn。每隔3~4 d取生殖道分泌物,测定其中衣原体包涵体的数量。原发感染后114 d或143 d,处死小鼠,分离泌尿生殖道,肉眼观察其肾脏、输卵管、子宫角水肿程度,并切片, HE染色后,显微镜下观察各组织炎性浸润程度和管腔水肿程度,并计数肾组织中衣原体和细菌数量。结果在MoPn原发感染后,IL-12p35 KO和IL-12p40 KO小鼠清除衣原体的速度相当,带菌时间均较wt小鼠明显延长。所有小鼠均出现严重的上生殖道组织病变,但KO小鼠和wt小鼠病变程度没有明显差异。几乎所有IL-12p40 KO和部分IL-12p35 KO小鼠均发生严重的肾脏病变,而wt小鼠肾脏未见明显异常。在KO小鼠病变的肾组织匀浆及切片中均能检测到衣原体抗原,且包涵体数量均显著高于wt小鼠。结论 IL-12和IL-23可限制经生殖道感染的MoPn扩散到肾脏,IL-12或IL-23基因缺失后生殖道衣原体感染易并发肾脏病变。 展开更多
关键词 鼠衣原体 il-12p35 il-12p40 泌尿生殖道感染 肾脏病变
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