IL-1β对神经元样PC12细胞IL-1RⅠ蛋白表达的影响

目的:探讨IL-1β对神经元样PC12细胞IL-1RⅠ蛋白表达的影响。方法:将PC12细胞传代后以一定的密度种植于培养皿后,NGF诱导其分化成神经元样细胞后,随机分为空白对照组(A组)I、L-1β1ng/mL刺激组(B组)I、L-1β5ng/mL刺激组(C组)、IL-1β10ng/mL刺激组(D组)。24h后分别以MTT法测定各组细胞存活率,Western Blotting方法检测神经元样PC12细胞内IL-1RⅠ蛋白表达。结果:MTT法显示,与A组相比,不同剂量组的IL-1β均可导致神经元样PC12细胞存活率的下降(P<0.01);WesternBlotting方法显示,与A组相比,不同剂量组的IL-1β刺激均可引起神经元样PC12的IL-1RⅠ蛋白表达上调(P<0.05)。结论:IL-1β可引起神经元样PC12细胞的IL-1RⅠ蛋白高表达,这可能与其所致神经元样PC12细胞细胞存活率的下降相关。

IL-1β和IL-1RⅠ型在慢性综合应激致抑郁大鼠结肠组织中的表达

目的研究白介素-1β(IL-1β)和白介素-1受体Ⅰ型(IL-1RⅠ型)在慢性综合应激致抑郁大鼠结肠组织中的表达变化。方法 20只雄性Wistar大鼠随机分成两组:对照组(10只)和抑郁组(10只)。抑郁组大鼠连续接受35 d不同的应激,对照组不予任何刺激。整个实验过程中,于实验第0 d和第35 d测量各组大鼠体质量。用旷场试验和液体消耗实验测定大鼠行为。采用RT-PCR方法测定各组大鼠结肠组织IL-1β的表达量,免疫组织化学方法测定各组大鼠结肠组织中IL-1RⅠ型表达量。结果经过35d慢性应激后,抑郁组大鼠质量明显低于对照组(P<0.01);旷场实验显示,抑郁组大鼠总行程、运动平均速度及直立次数较正常对照组明显减少(P<0.05);液体消耗试验显示,造模前两组大鼠糖水消耗无明显差异(P>0.05),35 d应激后抑郁组大鼠糖水消耗显著低于对照组(P<0.01),而纯水消耗显著高于对照组(P<0.01);免疫组织化学显示,抑郁组大鼠结肠平滑肌中IL-1RⅠ型的含量高于对照组(P<0.05);RT-PCR显示,抑郁组大鼠结肠组织中IL-1β的表达量高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论IL-1β和IL-1RⅠ型在慢性综合应激致抑郁大鼠结肠组织中呈高表达,提示IL-1β和IL-1RⅠ型可能在抑郁致结肠动力障碍的发生发展过程中起着重要作用。

sIL-1RⅠ基因对山羊颞下颌关节骨关节病的治疗及预防作用

目的:应用体内基因转染方法,探讨脂质体携带的可溶性白介素-1受体Ⅰ(sIL-1RⅠ)基因重组质粒对山羊颞下颌关节骨关节病(TMJOA)的治疗及预防作用。方法:15只山羊随机分为3组。首先采用1%胶原酶注射山羊关节腔,建立TMJOA动物模型。8周后,治疗组6只山羊双侧TMJ关节上腔注入脂质体携带的sIL-1RⅠ基因重组质粒。预防组6只山羊则在建立TMJOA动物模型的同时,双侧关节上腔注射重组质粒。对照组注射相同量的PBS液。重组质粒注射后第2、4周,各组分别处死3只动物。抽取TMJ关节滑液,ELISA法检测关节滑液中sIL-1RⅠ的表达量。切取完整关节标本,HE染色并用Mankin分级指数确定OA病变的改变程度。免疫组化法检测重组质粒在TMJOA关节组织中的表达情况。采用q检验进行统计学处理。结果:HE染色发现,治疗组及预防组OA病理改变减轻,Mankin分级指数显著低于对照组(P<0.05)。ELISA法检测结果显示,各治疗组、预防组sIL-1RⅠ表达量显著高于对照组(P<0.05)。免疫组化法检测显示对照组重组质粒表达阴性,治疗组、预防组重组质粒表达阳性。结论:人sIL-1RⅠ基因重组质粒对山羊TMJOA具有一定的治疗及预防作用。

IL-1β及其Ⅰ型受体在大鼠肺纤维化发生过程中的动态表达

目的:观察大鼠肺纤维化发生中IL-1β及其Ⅰ型受体(IL-1RⅠ)的动态表达。方法:采用气管内注入博莱霉素制备肺纤维化模型,设正常组、模型组和甲强龙组,于第1、3、7、14、28天分批处死大鼠,观察各组大鼠各期病理切片,检测肺泡灌洗液及血清中IL-1β和其Ⅰ型受体的含量。结果:模型组早期肺泡炎症明显,后期肺组织实变。灌洗液及血清中IL-1β于7d时达峰值,14d时显著下降,28d时回到正常水平,Ⅰ型受体的表达规律与IL-1β相同。结论:IL-1β及其Ⅰ型受体在肺纤维化早期呈现短暂的表达高峰,提示其可能在肺纤维化发生的早期起关键作用。

白细胞介素-1受体Ⅰ型在正常大鼠胰腺的表达

目的研究白细胞介素-1的Ⅰ型受体(IL-1RI)蛋白在正常大鼠胰腺的表达。方法Western blotting和免疫荧光双重染色。结果胰腺组织的Western blotting结果表明,阳性反应条带出现在80 kD处,与IL-1RI分子量一致。免疫荧光双重染色证实,胰岛素(胰岛β细胞的标志物)免疫反应阳性的细胞均为IL-1RI阳性;胰腺外分泌部细胞呈胰岛素免疫反应阴性,但IL-1RI为阳性。结论大鼠胰腺胰岛的β细胞和外分泌部细胞均表达IL-1RI,提示促炎性细胞因子可能对胰腺的内、外分泌功能都有影响。

脂多糖通过诱导白细胞介素-1的生成引起迷走传入神经活动

为探讨脂多糖 (lipopolysaccharide ,LPS)引起迷走传入神经活动是否可能通过白细胞介素 1(interleukin 1,IL 1)的作用 ,将Wistar大鼠随机分为LPS实验组和生理盐水对照组 ,用免疫组织化学方法检测迷走神经结状神经节c Fos及CD14的表达以及腹腔迷走神经周围Mac 1阳性巨噬细胞 (macrophage ,Mφ)。用L92 9细胞增殖法检测LPS刺激Mφ上清IL 1的生物活性。用原位杂交的方法检测迷走神经结状神经节Ⅰ型白细胞介素 1受体 (IL 1RⅠ )mRNA的表达。结果显示 ,LPS组迷走神经结状神经节神经元c Fos蛋白表达为阳性 ,而对照组迷走神经结状神经节神经元c Fos蛋白表达为阴性。LPS注射后 1h ,见腹腔迷走神经周围Mφ数量明显增多。Mφ在LPS刺激后 4 5min、1h和 2h时 ,IL 1生成明显增高。LPS组迷走神经结状神经节IL 1RⅠmRNA表达为阳性。以上结果提示 ,LPS引起迷走传入神经活动可能通过IL

尼古丁对大鼠椎间盘内细胞因子表达的影响及意义

目的观察尼古丁对大鼠椎间盘内细胞因子白细胞介素(IL)-1β、IL-1受体(IL-1RⅠ)表达的意义。方法两个被动吸烟箱各放30只S-D大鼠,分别以不同的吸烟量持续被动吸烟制作动物模型,于第2、4、8周处死大鼠,以免疫组化观察IL-1β、IL-1RⅠ的表达情况,以不吸烟组为对照组。结果低吸烟量组IL-1β、IL-1RⅠ免疫组化阳性细胞率持续上升,在第8周分别达到(52.00±3.91)%、(31.00±2.29)%;同样,高吸烟组分别达到(76.00±3.24)%、(46.00±2.79)%,明显高于对照组,差异具有统计学意义(P<0.01)。结论持续被动吸烟的情况下,大鼠椎间盘内IL-1β、IL-1RⅠ的表达与吸烟的时间和量呈正相关性,IL-1β、IL-1RⅠ表达的异常升高可能与大鼠椎间盘退变有关。