IL-2-PE40、CsA、雷公藤治疗角膜移植排斥反应实验研究

目的采用ＩＬ２ＰＥ４０、ＣｓＡ、雷公藤对角膜移植排斥反应进行实验性治疗。方法以Ｗｉｓｔａｒ大鼠异种角膜异位移植为模型，比较ＩＬ２ＰＥ４０、ＣｓＡ、雷公藤的免疫抑制疗效，同时测外周血Ｔ淋巴细胞亚群及Ｔ淋巴细胞集落形成数。结果ＩＬ２ＰＥ４０、ＣｓＡ、雷公藤均可推迟排斥反应的发生时间。ＩＬ２ＰＥ４０能明显减弱Ｔ淋巴细胞集落形成能力，Ｔ细胞集落数术前为２０１±１８．９，术后第５天为２１３±１９．４，而ＣｓＡ、雷公藤无该方面作用。结论ＩＬ２ＰＥ４０较ＣｓＡ、雷公藤特异性高，且提示有可能在更高层次上抑制排斥反应的发生。

用ELISA鉴定原核细胞中IL-2-PE40的表达产物

外源基因在原核细胞中表达产物的鉴定,是衡量重组DNA技术构建表达是否成功的重要标志之一。目前最常用的是Western blot门技术,此法可以分离出蛋白质特异性条带,但需经电泳转移和固相免疫检测等步骤,比较繁琐,耗费大。我们在进行IL-2-PE40融合蛋白表达效率的研究时,摸索了用ELISA来鉴定原核表达产物(包涵体或可溶性蛋白)的技术条件,取得较好效果,现介绍如下;

IL-2-PE40抑制大鼠角膜上皮细胞MHC抗原表达的研究

目的 了解正常大鼠角膜细胞在体外经 γ-干扰素诱导后 ,M HC- 、 类抗原异常表达的情况 ,并观察比较 IL- 2 -PE4 0、Cs A对角膜细胞 M HC- 、 类抗原异常表达的免疫抑制作用。方法 采用 ACA S- 570粘附式细胞分析仪和免疫荧光技术 ,对体外原代培养经γ-干扰素诱导后的正常大鼠角膜上皮细胞 M H C- 、 类抗原表达的相对量进行测定 ,并在培养液中加入新型免疫抑制剂 IL- 2 - PE4 0及 Cs A,进一步测定角膜细胞 MH C- 、 类抗原的表达量。结果 未加入 γ-干扰素 ,MH C- 类抗原的表达量为 98.1± 13 .9,MH C- 类抗原无表达 ,经 γ-干扰素诱导后 MH C- 类抗原的表达量为 10 0 6.1±2 6.2 ,MH C- 类抗原的表达量为 997.2± 2 3 .1,有显著性差异。 IL - 2 - PE4 0组 MH C- 类抗原表达量为 618.9± 2 1.3 ,M HC- 类抗原表达量为 691.3± 2 2 .1,Cs A组 MH C- 类抗原表达量为 62 3 .6± 2 2 .1,M HC- 类抗原表达量为 689.3± 2 5.0 ,两者分别与注射用水组比较 ,有显著性差异 ,两者之间比较差异不显著。结论 在体外 ,γ-干扰素可诱导角膜上皮细胞 MH C- 、 类抗原的异常表达 ;IL- 2 - PE4 0及 Cs A均能不同程度地抑制这种表达。

IL－2－PE40对异位角膜植入抗排斥反应的研究

采用新型免疫抑制剂白细胞介素－２－绿脓杆茵外毒素（ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ－２－Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓｅｘｏｔｏｘｉｎ４０，ＩＬ－２－ＰＥ４０）对角膜移植排斥反应进行实验性治疗。以Ｗｉｓｔａｒ大鼠异种角膜异位移植为模型，将３６只鼠随机分为治疗组及对照组，并在术后第２、５、７、１０、１４天分别取出植片做病理切片，收集外周血进行Ｔ淋巴细胞亚群及Ｔ淋巴细胞集落形成数分析。结果显示：ＩＬ－２－ＰＥ４０可推迟排斥反应的发生时间；有明显减少外周血中辅助Ｔ淋巴细胞百分率的作用；并能减弱大鼠外周血Ｔ淋巴细胞巢落形成能力。

IL－2－PE40对小鼠异基因骨髓移植的影响

探讨白细胞介素２（ＩＬ－２）与绿脓杆菌外毒素组成的融合蛋白──ＩＬ－２－ＰＥ４０对小鼠异基因骨髓移植的影响。实验结果表明体外应用ＩＬ－２－ＰＥ４０能够选择性抑制混合淋巴细胞培养（ＭＬＣ）中的异基因反应细胞，清除ＭＬＣ诱导产生的细胞毒效应细胞，保留未活化细胞对ＣｏｎＡ诱导的丝裂原反应；体内应用ＩＬ－２－ＰＥ４０能延长异基因骨髓移植小鼠的存活期，而对ＣＦＵ－ＧＭ产率无明显影响。