IL-21和CCL19修饰可提高NKP30 CAR-T细胞对肺癌的杀伤效率并促进其肿瘤浸润

目的探讨细胞因子IL-21和趋化因子CCL19修饰的NKP30 CAR-T细胞是否增强对肺癌的杀伤和浸润作用。方法在NKP30 CAR基础上融合基因IL-21和CCL19构建IL-21-CCL19 NKP30 CAR;CAR-T细胞的培养使用CD3CD28单抗及细胞因子IL-2刺激;流式细胞术检测免疫细胞表型;迁移实验检测IL-21对免疫细胞的迁移作用;乳酸脱氢酶(LDH)及成球实验检测CAR-T细胞的杀伤及浸润能力;酶联免疫斑点技术(ELISPOT)检测IFN-γ的分泌数量;ELISA检测IL-21及CCL19的分泌情况;体内实验中,将肿瘤细胞显微注射到斑马鱼卵黄囊,构建斑马鱼移植瘤模型,24 h后将免疫细胞注射至同样部位,体式荧光显微镜拍摄荧光。结果NKP30配体(B7H6)在正常组织及血液细胞不表达,在肺癌细胞上高表达(90%以上)。IL-21-CCL19 NKP30 CAR-T细胞与NKP30 CAR-T细胞和常规T细胞相比,具有更强的增殖能力、迁移能力及中心记忆T细胞的形成(P<0.001),免疫抑制分子CTLA4与PD1显著降低(P<0.005),对肺癌细胞具有更强的杀伤能力(P<0.001),伴随IFN-γ数量明显增加(P<0.001)。IL-21-CCL19 CAR-T细胞杀伤肺癌细胞中产生大量细胞因子IL‑21(3152.33±526.74 pg/mL)和趋化因子CCL19(1853±211.95 pg/mL)。体内实验中,CAR-T细胞和普通T细胞比较,具有较强的杀伤能力和增殖能力,但2种CAR-T细胞无明显差异(P>0.05)。结论IL-21-CCL19 NKP30 CAR-T细胞更容易浸润到肿瘤内部,有效杀伤肿瘤细胞,同时产生更多的记忆T细胞。

加味宣白承气汤对慢性阻塞性肺疾病患者血清IL-21、CTRP-9和IL-33的影响

目的 观察加味宣白承气汤对慢性阻塞性肺疾病急性加重期患者血清白细胞介素-21(IL-21)、肿瘤坏死因子相关蛋白9(CTRP-9)和白细胞介素-33(IL-33)的影响。方法 120例患者随机分为研究组与对照组各60例。对照组患者给予常规治疗,研究组在此基础上予加味宣白承气汤治疗。检查两组患者治疗前后肺功能指标[用力肺活量(FVC)、第1秒用力呼气容积(FEV1)、第1秒用力呼气容积占用力肺活量的百分比(FEV1/FVC)]、中医证候积分、6 min步行试验(6MWT)和血清指标(IL-21、CTRP-9、IL-33),并统计两组患者临床疗效。结果 研究组总有效率为91.67%,显著高于对照组的78.33%(P<0.05);治疗后,研究组FVC、FEV1、FEV1/FVC、中医证候积分和6MWT改善较对照组明显(P<0.05),IL-21、CTRP-9、IL-33均显著低于对照组(P<0.05)。结论 采用加味宣白承气汤治疗急性加重期慢性阻塞性肺疾病患者可抑制IL-21、CTRP-9和IL-33的表达,从而促进肺功能和临床症状康复。

血清IL-21、IL-22作为肝衰竭预后生物学标记的潜在价值

肝衰竭在我国较为常见,发病机制复杂,临床治疗困难,预后差,并且发病率和病死率呈上升趋势。免疫状态是影响肝衰竭预后的重要因素。白细胞介素是分泌型淋巴细胞因子家族,可与包括免疫细胞在内的多种细胞类型相互作用。这些信号分子在信息传递中起着重要作用,例如,调节免疫细胞,介导T细胞和B细胞的活化、增殖和分化,调节炎症反应等。目前,许多研究探讨了白细胞介素表达与肝衰竭预后的相关性。而本文侧重于IL-21、IL-22作为预后生物标志物的潜在用途。总结了两种容易忽视但具有前途的诊断性白细胞介素生物标志物的报道,这些生物标志物可预测对肝衰竭的易感性。使用生物标志物了解早期预后有助于制定不同的治疗措施并提高患者的生存率。同时,这对攻克肝衰竭疑难的发病机制和未来临床前的研究十分重要。

射干麻黄汤对支气管哮喘大鼠巨噬细胞活化及IL-21/STAT3通路调节作用研究

目的探讨射干麻黄汤对支气管哮喘大鼠巨噬细胞活化及白细胞介素(IL)-21/信号转导和转录活化因子3(STAT3)通路调节作用。方法取雄性SD大鼠36只,随机选择6只作为正常组,其余大鼠采用卵清白蛋白致敏法建立支气管哮喘模型。将造模成功大鼠随机分为哮喘组、射干麻黄汤低剂量组、射干麻黄汤中剂量组、射干麻黄汤高剂量组及地塞米松组,每组6只。射干麻黄汤低、中、高剂量组大鼠分别给予1 g/kg、2 g/kg、4 g/kg(以生药含量计)射干麻黄汤灌胃,地塞米松组大鼠给予1 mg/kg地塞米松灌胃,正常组及哮喘组大鼠灌胃等量蒸馏水,均1次/d,连续灌胃20 d。末次灌胃结束后,使用肺功能检测系统测定大鼠肺活量、肺动态顺应性及呼气峰值流速,ELISA法测定肺泡灌洗液中干扰素-γ(IFN-γ)、IL-2、IL-4、IL-13水平,计算肺泡灌洗液中嗜酸性粒细胞及中性粒细胞占比,HE染色法观察肺组织病理学形态,免疫组化法观察肺组织中F4/80蛋白阳性表达情况,Western blot法测定肺组织中IL-21、p-STAT3、STAT3蛋白表达情况。结果与正常组比较,哮喘组大鼠肺活量、肺动态顺应性、呼气峰值流速及肺泡灌洗液中IFN-γ、IL-2水平均明显降低(P均<0.05),肺泡灌洗液中嗜酸性粒细胞占比、中性粒细胞占比、IL-4水平、IL-13水平及肺组织中F4/80蛋白阳性表达相对积分光密度和IL-21蛋白相对表达量、p-STAT3/STAT3比值均明显升高(P均<0.05),肺组织炎症损伤。与哮喘组比较,射干麻黄汤各组及地塞米松组大鼠肺活量、肺动态顺应性、呼气峰值流速及肺泡灌洗液中IFN-γ、IL-2水平均明显升高(P均<0.05),肺泡灌洗液中嗜酸性粒细胞占比、中性粒细胞占比、IL-4水平、IL-13水平及肺组织中F4/80蛋白阳性表达相对积分光密度和IL-21蛋白相对表达量、p-STAT3/STAT3比值均明显降低(P均<0.05),肺组织病理改变明显恢复,且各指标随射干麻黄汤剂量的增加改善更明显。结论射干麻黄汤能够显著改善支气管哮喘大鼠肺功能,缓解气道炎症反应,减轻肺组织病变,其机制可能与抑制肺组织巨噬细胞活化、调节IL-21/STAT3通路有关。

冠心病患者外周血滤泡辅助性T细胞及IL-21异常表达的临床意义

目的:探讨外周血滤泡辅助性T细胞(Tfh)及IL-21与冠心病(CHD)发病的关系。方法:选取2021年1—12月就诊于我院拟诊为CHD并完善冠脉造影术的患者186例,最终确诊CHD者163例为CHD组,排除CHD者23例为对照组。比较两组患者外周血Tfh细胞百分比及血清IL-21水平,并分析CHD患者外周血Tfh细胞百分比及血清IL-21与Gensini评分的相关性。结果:CHD组患者外周血Tfh细胞百分比及血清IL-21水平较对照组明显升高(P<0.05);CHD患者外周血Tfh细胞百分比及血清IL-21水平与Gensini评分呈正相关(P<0.05)。结论:Tfh细胞及IL-21参与CHD发病,且与CHD病情严重程度相关。

外周血miR-21、MIP-2、PCT及IL-6在冠心病慢性心力衰竭合并肺部感染患者中的表达及意义

目的分析外周血microRNA-21(miR-21)、巨噬细胞炎性蛋白-2(MIP-2)、降钙素原(PCT)及白介素-6(IL-6)在冠心病慢性心力衰竭(CHF)合并肺部感染(PI)患者中的表达及意义。方法选取2020年2月至2023年3月秦皇岛市第二医院收治的冠心病慢性心力衰竭患者121例为研究对象,根据是否发生PI分为CHF合并PI组37例与CHF无PI组84例。比较两组一般资料及外周血miR-21、MIP-2、PCT及IL-6水平,采用Logistic分析影响冠心病慢性心力衰竭合并肺部感染发生的危险因素;采用Pearson相关性分析外周血miR-21、MIP-2、PCT及IL-6水平与临床肺部感染评分(CPIS)、序贯器官衰竭评分(SOFA)的相关性;分析CHF合并PI组病原菌情况,对比不同病原菌外周血miR-21、MIP-2、PCT及IL-6水平。结果两组性别、年龄、CHF病程、吸烟史、饮酒史、中性粒细胞百分比、肌酸激酶、心肌型肌酸激酶同工酶比较,差异无统计学意义(P>0.05);两组白细胞计数、CPIS、SOFA评分、miR-21、MIP-2、PCT及IL-6水平比较,差异具有统计学意义(P<0.05)。多元Logistic回归分析结果显示,白细胞计数、CPIS、SOFA评分、miR-21、MIP-2、PCT及IL-6水平升高均是影响冠心病CHF合并PI发生的危险因素(P<0.05)。miR-21、MIP-2、PCT及IL-6水平均与CPIS、SOFA评分呈正相关(P<0.05)。37例CHF合并PI患者痰液标本检出48株病原菌,其中34株革兰阴性菌,12株革兰阳性菌,2株真菌。miR-21、MIP-2、PCT及IL-6水平:革兰阴性菌>革兰阳性菌>真菌,差异有统计学意义(P<0.05)。结论miR-21、MIP-2、PCT及IL-6水平在冠心病CHF合并PI患者中呈上升趋势,且与PI病情程度、病原菌类型相关,早期检测miR-21、MIP-2、PCT及IL-6水平对于冠心病CHF合并PI患者的诊断、病情及鉴别病原菌类型具有重要价值。

血清FGF-21 IL-13 sVEGFR-2与急性心力衰竭患者短期预后的关系

目的 探讨血清成纤维细胞生长因子-21(FGF-21)、白细胞介素-13(IL-13)、可溶性血管内皮生长因子受体-2(sVEGFR-2)水平与急性心力衰竭患者短期预后的相关性。方法 选取2019年1月至2020年12月在我院接受治疗的急性心力衰竭患者136例作为心力衰竭组。选取同期在我院健康体检者80例作为健康对照组。采用ELISA法检测血清FGF-21、IL-13、sVEGFR-2水平。随访1年,根据急性心力衰竭患者有无不良心血管事件发生分为预后良好组和预后不良组,并分析影响患者1年内临床结局的危险因素。采用ROC曲线,分析FGF-21、IL-13、sVEGFR-2对急性心力衰竭患者预后不良的诊断效能。结果 心力衰竭组血清FGF-21、IL-13高于健康对照组[FGF-21(pg/mL):74.81±16.29 vs. 19.37±5.11, IL-13(pg/mL):5.14±1.23 vs.1.62±0.54,P<0.001]、sVEGFR-2低于健康对照组(ng/mL:6.30±1.57 vs.15.18±4.29,P<0.05)。预后不良组血清FGF-21、IL-13、NT-proBNP分别高于预后良好组[FGF(pg/mL):92.31±20.84 vs.67.52±13.70, IL-13(pg/mL):6.94±1.75 vs.4.39±1.18, NT-proBNP(ng/L):4689.16±132.50 vs.2120.59±51.48],LVEF值、血清sVEGFR-2低于预后良好组[LVEF(%):45.27±6.13 vs.53.95±7.80, sVEGFR(ng/mL):4.85±1.24 vs.6.98±2.31,P<0.05]。多因素Logistic回归分析结果显示,LVEF(95%CI 0.265~0.840,P<0.001)及血清NT-proBNP(95%CI 1.002~2.317,P=0.015)、FGF-21(95%CI 1.438~5.019,P<0.001)、IL-13(95%CI 1.027~3.165,P=0.006)、sVEGFR-2(95%CI 1.190~4.283,P=0.002)是影响急性心力衰竭患者不良预后的独立危险因素。ROC曲线结果显示,血清FGF-21、IL-13、sVEGFR-2及三项联合检测预测急性心力衰竭患者不良预后的曲线下面积分别为0.810、0.775、0.821、0.918。结论 血清FGF-21、IL-13、sVEGFR-2水平与急性心力衰竭患者NYHA分级及临床预后密切相关,联合检测血清FGF-21、IL-13、sVEGFR-2对评估患者不良预后有较高参考价值。

脑梗死患者血清miR-21-5p、IL-6、IL-8表达水平及其预测模型构建

目的探究miR-21-5p、白细胞介素(IL)-6、IL-8在脑梗死患者血清中表达水平,明确基于miR-21-5p、IL-6、IL-8建立预测模型的价值。方法102例脑梗死患者临床资料作为观察组,另外选取同时期体检正常人群72例作为对照组。从医院电子病历中获取患者及体检人群基本资料(年龄、性别、是否高血压、糖尿病、高脂血症、心脏病)及miR-21-5p、IL-6、IL-1、IL-8、C反应蛋白(CRP)表达水平。比较两组基本信息(年龄、性别)、miR-21-5p、IL-6、IL-1、IL-8、CRP水平。单因素及多因素分析脑梗死的影响因素,并且建立预测模型,以用受试者工作特征(ROC)曲线下面积(AUC)评价模型的预测效能。结果观察组高血压、高脂血症、糖尿病、心脏病人群显著高于对照组,观察组miR-21-5p、IL-6、IL-1、IL-8、CRP均显著高于对照组(P<0.05)。Logistic回归分析,高血压、心脏病、miR-21-5p、IL-6、IL-8、CRP均是脑梗死的危险因素,上述因素所建立模型的预测效能最好,AUC为0.996,其他影响因素的AUC分别为0.811(高血压)、0.871(心脏病)、0.909(miR-21-5p)、0.857(IL-6)、0.900(IL-8)、0.797(CRP)。预测模型公式Log(P)=高血压×3.273+心脏病×3.263+miR-21-5p×2.596+IL-6×0.156+IL-8×0.194+CRP×0.525-26.006。结论miR-21-5p、IL-6、IL-8在脑梗死患者血清中表达水平较高,并且高血压、心脏病、miR-21-5p、IL-6、IL-8、CRP均是脑梗死的危险因素,基于miR-21-5p、IL-6、IL-8建立的预测模型预测效能较好。

辛伐他汀对慢性阻塞性肺疾病大鼠外周血和肺泡灌洗液中IL-17、IL-21及RORγt的影响

目的观察辛伐他汀对吸烟导致慢性阻塞性肺疾病(COPD)大鼠外周血及肺泡灌洗液(BALF)中白细胞介素(IL)-17、IL-21及转录因子视黄酸相关孤儿受体γt(RORγt)表达的影响,探讨辛伐他汀治疗COPD的价值及其作用机制。方法将大鼠随机分为对照组、吸烟组及治疗组,每组10只。对照组每天自然饮食,不作任何特殊处理。吸烟组及治疗组给予烟雾干预,同时治疗组给予辛伐他汀干预。4个月后,测量大鼠体重、肺功能、计数肺泡灌洗液(BALF)中白细胞数量及分类,观察各组大鼠肺组织的病理改变,采用酶联免疫吸附(ELISA)方法对大鼠外周血及BALF中IL-17、IL-21及RORγt蛋白进行检测;应用流式细胞术对外周血及肺实质中CD4+IL-17+T细胞(Th17)进行测定。结果实验结束后,肺功能检测显示吸烟组中动态肺顺应性(Cdyn)、呼气容积(FEV0.3)/用力肺活量(FVC)较对照组明显下降,呼气相气道相应阻力(Re)、吸气相气道相应阻力(Ri)明显升高。治疗组各项指标相对于吸烟组均有所改善。ELISA检测显示,吸烟组血浆及BALF中IL-17、IL-21和RORγt蛋白表达明显升高;治疗组血浆及BALF中IL-17及RORγt蛋白的表达较吸烟组显著降低(P<0.05)。Th17细胞在吸烟组大鼠外周血及肺实质中的表达较对照组明显升高(P<0.05);治疗后,大鼠外周血及肺实质中的Th17细胞有所下降。结论 COPD大鼠的外周血及BALF中IL-17、IL-21及RORγt蛋白升高,辛伐他汀能够降低COPD大鼠血及BALF中IL-17、IL-21及RORγt蛋白的表达,可能是其抑制COPD大鼠肺组织炎症反应和肺结构破坏的机制之一。

鸡源IL-21基因的密码子优化、表达及生物活性分析初探

本研究旨在对鸡IL-21基因进行克隆、密码子优化、表达分析及生物活性初步研究,为进一步研究其功能奠定基础。首先利用生物信息学软件对鸡IL-21基因进行序列分析,然后,通过RT-PCR扩增鸡的IL-21基因,构建真核表达质粒pcDNA3.1A-IL-21-wt/MH,根据人偏爱密码子对鸡IL-21基因进行密码子优化,构建真核表达质粒pcDNA3.1A-IL-21-opt/MH。测序正确后转染HEK293T细胞进行表达,经His标签纯化后,通过脾脏淋巴细胞增殖实验鉴定纯化后的IL-21蛋白生物活性。结果显示,扩增的鸡IL-21序列与Genbank中的IL-21序列相对比有2个碱基发生突变(141C→141T,312C→312T),但不影响氨基酸序列;生物信息学分析表明,鸡IL-21基因含有信号肽序列可介导其分泌表达,同时含有1个潜在的N-糖基化位点;Western blot在培养基和细胞内均检测到鸡IL-21蛋白的表达;密码子优化后IL-21表达水平与野生型相比显著升高(P<0.0001);MTT法检测发现,纯化后的IL-21具有增强淋巴细胞增殖的功能。综上所述,本试验成功构建了鸡IL-21的真核表达载体,通过密码子优化提高了IL-21在真核细胞中的表达且表达的蛋白具有良好的生物活性,为进一步探索IL-21蛋白功能奠定一定的基础。

IL-21对非霍奇金淋巴瘤细胞凋亡及survivin基因表达的影响

目的:探讨IL-21对非霍奇金淋巴瘤细胞的生长和凋亡的影响及其可能机制。方法:通过MTT(噻唑兰比色法)检测观察IL-21对Raji细胞生长的影响;流式细胞仪观察24 h后IL-21对细胞凋亡的影响;RT-PCR(逆转录-聚合酶链式反应)检测IL-21对survivin mRNA的表达水平的影响。结果:IL-21对Raji细胞生长有抑制作用,呈剂量依赖关系(P<0.05);0,10,50,250μg/L组细胞凋亡率分别为0.00%,7.26%,15.12%,22.57%,药物组与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.01或<0.05);随着IL-21浓度升高,survivin的表达水平逐步下降(P<0.05)。结论:IL-21可以抑制淋巴瘤细胞的生长和诱导其凋亡,其机制可能与降低survivin的表达有关。

IL-21调节外周血中Treg细胞的表达在Graves病发病机制中的研究

目的:探究IL-21调节外周血Treg细胞的表达在Graves病发病机制中的研究。方法:收集28例初发Graves病患者(GD)、27例经药物治疗后甲状腺功能恢复正常的GD(e GD)患者和24例健康对照者(NC),电化学发光法检测患者的血清FT3、FT4、u TSH、Tg Ab、TPOAb和TRAb水平。分离研究对象外周血单个核细胞分为IL-21刺激组与未刺激组。实时荧光定量PCR法检测Foxp3和IL-10 mRNA的表达水平;ELISA法检测培养上清液中IL-10蛋白的表达。结果:GD组甲功和自身抗体水平与e GD组和NC组比较,差异均有统计学意义(P<0.05);但e GD组甲功和自身抗体水平与NC组比较差异无统计学意义(P>0.05)。IL-21刺激前,GD组的Foxp3、IL-10 mRNA和IL-10蛋白表达水平均较e GD组和NC组明显升高,差异有统计学意义(P<0.05),但e GD组与NC组比较差异无统计学意义(P>0.05)。经IL-21刺激后,GD组的Foxp3、IL-10 mRNA和IL-10蛋白的表达水平均显著低于刺激前,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:IL-21可能通过抑制Treg细胞的分化及其效应分子IL-10的产生,使Treg细胞数量和功能下降,降低其对效应T细胞的抑制能力,从而参与GD的发病过程。

IL-21单克隆抗体对MRL/lpr狼疮小鼠的治疗作用

目的:探讨IL-21单克隆抗体对MRL/lpr狼疮小鼠的免疫治疗作用。方法:将20只MRL/lpr狼疮小鼠随机分为模型组和治疗组,每组10只;同年龄同性别C57BL/6小鼠10只作为正常组。治疗组小鼠每周腹腔注射IL-21单克隆抗体(100μg),正常组及模型组小鼠每周腹腔注射等量生理盐水(100μg),连续干预8周。干预结束后观察小鼠皮毛、活动等一般性状及浅表淋巴结大小,并采集小鼠血液、尿液及肾脏标本。采用Western blot法检测三组小鼠肾组织中IL-21蛋白表达情况;采用ELISA法比较三组小鼠血清抗ds-DNA抗体、ANA抗体、血尿素氮、肌酐和炎症因子IL-17A、TGF-β1水平;采用生物化学法比较三组小鼠24 h尿蛋白水平。结果:与正常组比较,模型组小鼠肾组织IL-21、血清抗ds-DNA、ANA抗体水平、尿素氮、肌酐、IL-17A浓度及24 h尿蛋白水平均升高(P<0.05),TGF-β1浓度降低(P<0.01);与模型组比较,治疗组小鼠肾组织IL-21、血清抗ds-DNA、ANA抗体水平、尿素氮、肌酐、IL-17A浓度、24 h尿蛋白水平均降低(P<0.05),TGF-β1浓度升高(P<0.01)。结论:腹腔注射IL-21单克隆抗体可改善MRL/lpr狼疮小鼠免疫功能与肾损害,提示治疗机制可能与重塑Th17/Treg相关细胞因子平衡有关。

Th17/Treg平衡在子痫前期发病中的变化及IL-21、TGF-β对其调节作用的研究

目的:探讨辅助性T细胞17/调节性T细胞(Th17/Treg)在子痫前期(PE)发病中的变化以及白介素-21(IL-21)、转化生长因子-β(TGF-β)对其调节作用。方法:选择在甘肃省妇幼保健院确诊的PE患者35例及同期正常妊娠孕妇30例为研究对象。晨起空腹采集外周静脉血4ml,分离培养外周血单个核细胞,采用流式细胞仪检测外周血Th17和Treg细胞的数量,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测外周血IL-21和TGF-β的水平。结果:PE组Th17细胞在CD4^+T细胞中的占比高于正常妊娠组(P<0.05),而Treg细胞在CD4^+T细胞中的占比低于正常妊娠组(P<0.05),PE组Th17/Treg值以及IL-21和TGF-β水平均高于正常妊娠组(均P<0.05)。结论:Th17/Treg平衡失调,可能是引起PE的原因;IL-21、TGF-β可能参与了对Th17/Treg平衡的调节。

补髓生血颗粒对慢性髓劳病IL-21和IL-21mRNA的影响

目的通过观察补髓生血颗粒对慢性髓劳病IL-21和IL-21mRNA的影响,分析IL-21和IL-21mRNA与慢性髓劳病发病的相关性,进一步探讨补髓生血颗粒调整免疫失衡的疗效机制。方法选取血液病科2013年8月至2015年3月期间门诊和住院的慢性髓劳病患者30例为试验组,口服补髓生血颗粒治疗,以同期10名健康志愿者为正常对照组。试验组应用ELISA法检测治疗前后IL-21表达变化,RT-PCR法检测治疗前后IL-21mRNA表达的变化。结果试验组慢性髓劳病IL-21和IL-21mRNA的表达高于正常对照组(P<0.05);试验组治疗后IL-21和IL-21mRNA的表达较治疗前下降(P<0.05),差异有统计学意义。结论IL-21和IL-21mRNA在慢性髓劳病中的异常表达,提示可能参与了慢性髓劳病的免疫发病过程;补髓生血颗粒通过下调IL-21和IL-21mRNA的表达,以调整异常的免疫反应,进而恢复骨髓的造血功能。

IL-21上调IL-17的表达在Graves病中的意义

目的探讨IL-21上调IL-17表达在Graves病(GD)中的意义。方法收集30例初发GD患者、17例经药物治疗后甲状腺功能恢复正常的GD(eGD)患者和18例健康对照者,采用电化学发光法检测患者的甲状腺功能指标(FT3、FT4和uTSH)和自身抗体(TgAb、TPOAb和TRAb)水平。采集研究对象的外周血并分离单个核淋巴细胞(PBMCs),设IL-21刺激组和IL-21未刺激组。体外培养PBMCs后,ELISA法检测细胞上清液中IL-17蛋白的表达;半定量RT-PCR法检测IL-17和RORγt mRNA的表达。结果 GD组的甲状腺功能指标与正常对照组eGD组比较,差异均有统计学意义(P<0.05);但eGD组与正常对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。GD组和eGD组的自身抗体水平均显著高于正常对照组,差异有统计学意义(P<0.05);但GD组与eGD组比较差异无统计学意义(P>0.05)。IL-21刺激前,GD组、eGD组的IL-17 mRNA、RORγt mRNA和IL-17蛋白表达水平均较正常对照组明显升高,差异有统计学意义(P<0.05),但GD组与eGD组比较差异无统计学意义(P>0.05)。经IL-21刺激后,GD组、eGD组和正常对照组的IL-17 mRNA、RORγt mRNA和IL-17蛋白的表达水平均显著高于刺激前,且GD组和eGD组显著高于正常对照组,差异均有统计学意义(P<0.05);但GD组与eGD组间比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论 IL-21通过上调IL-17的表达参与了GD的发病机制,且这一机制可能并不依赖于甲状腺功能,而与自身免疫过程相关。

miR-21对1型糖尿病患者外周血单个核细胞分泌IFN-γ与IL-17的影响

目的:探讨mi R-21在1型糖尿病患者外周血单个核细胞(PBMC)分泌干扰素-γ(IFN-γ)与白介素-17(IL-17)的影响。方法:采集60例1型糖尿病患者及60例正常健康人外周血,分离外周血单个核细胞(PBMC),用q RT-PCR检测两组PBMC中mi R-21的表达;向PBMC中转染mi R-21,ELISA检测PBMC分泌IFN-γ与IL-17情况。结果:1型糖尿病患者PBMC中mi R-21表达低于对照组,差异有统计学意义(P<0.01);增加1型糖尿病患者PBMC中mi R-21的表达,IFN-γ与IL-17的分泌均减少,差异有统计学意义(P值分别<0.05或<0.01)。结论:mi R-21在1型糖尿病患者PBMC中的表达下降,并可抑制PBMC中IFN-γ与IL-17的分泌。

急性髓细胞白血病患者外周血单核细胞IL-9、STAT3和miR-21的表达及意义

目的探讨急性髓细胞白血病(Aml)患者外周血单核细胞(PBMCs)中白介素-9(IL-9)、信号转导与转录活化因子3(STAT3)和miR-21的表达及临床意义。方法选取2011年2月至2014年6月住院治疗的120例Aml患者为研究对象(Aml组),以同时期的健康体检者100例为对照组,采用RT-PCR检测所有受试者PBMCs中IL-9、STAT3和miR-21mRNA的表达水平,Western blot法检测IL-9和磷酸化STAT3(pSTAT3)蛋白表达,Spearman分析IL-9、STAT3和miR-21表达之间相关性,ROC曲线分析IL-9、STAT3、miR-21及三者联合检测对Aml的诊断价值,Kaplan-Meier法分析IL-9、STAT3和miR-21表达对Aml患者生存期影响。结果与对照组相比,Aml组患者PBMCs中IL-9、STAT3和miR-21mRNA表达水平均上调(P<0.05),IL-9和pSTAT3蛋白表达显著增加(P<0.05)。IL-9、STAT3和miR-21mRNA水平与患者年龄、性别、血红蛋白均不相关(P>0.05),与FBA分型、白细胞计数和骨髓原始细胞相关(P<0.05),IL-9与血小板计数相关(P<0.05)。Spearman相关性分析结果显示,IL-9与miR-21、IL-9与STAT3以及miR-21与STAT3表达均呈正相关(r=0.467,P<0.05;r=0.527,P<0.05;r=0.483,P<0.05)。IL-9、STAT3和miR-21三者联合诊断ALM的灵敏度、特异度以及ROC曲线下面积均较单独诊断时显著提高(P<0.05)。IL-9、STAT3和miR-21高表达患者生存期均较低表达患者显著降低(P<0.05)。结论Aml患者PBMCs中IL-9、STAT3和miR-21均表达升高,IL-9可能通过STAT3信号通路诱导miR-21表达上调参与Aml疾病的发生发展过程。

CXCR5/IL-21/Bcl-6/Blimp-1在不明原因复发性流产患者绒毛中的表达

目的探讨不明原因复发性流产(URSA)患者绒毛中滤泡辅助性T(follicular helper T,Tfh)细胞相关因子白介素-21(interleukin-21,IL-21)、趋化因子受体-5(CXC chemokine receptor-5,CXCR5)、B细胞淋巴瘤分子6(B cell lymphoma 6,Bcl-6)和B淋巴细胞诱导成熟蛋白1(B lymphocyte-induced maturation protein 1,Blimp-1)的表达部位和表达水平及其与URSA发病的免疫学机制。方法收集30例URSA患者(URSA组)和30例要求人工流产的正常早孕妇女(对照组)绒毛组织,采用免疫组织化学法检测IL-21、CXCR5、Bcl-6和Blimp-1的表达情况,采用Pearson相关系数分析4种因子之间的相关性。结果 URSA组绒毛组织中IL-21、CXCR5、Bcl-6和Blimp-1表达水平明显高于对照组(P<0.05);IL-21的表达水平与其它3个因子之间存在正相关,CXCR5与Bcl-6的表达呈正相关(P<0.05)。结论绒毛中Tfh细胞相关因子过表达、Tfh细胞应答在URSA患者体内上调及Tfh相关因子可能是URSA发生的免疫因素。

恩度联合力扑素同步放疗对中晚期宫颈癌患者血清CYFRA21-1、CEA、SCCA、CA125、IL-8及免疫细胞水平的影响

目的:探讨恩度联合力扑素同步放疗对中晚期宫颈癌患者血清细胞角蛋白19片段抗原21-1(cytokerantin-19-fragment antigen 21-1,CYFRA21-1)、癌胚抗原(carcinoembryonic antigen,CEA)、鳞状细胞癌相关抗原(squamous cell carcinoma antigen,SCCA)、糖类抗原125(cancer antigen 125,CA125)、白细胞介素-8(interleukin-8,IL-8)及免疫细胞水平的影响。方法:选择2014年1月~2016年2月在我院确诊的72例中晚期宫颈癌患者,随机分为实验组(n=36)和对照组(n=36),对照组单纯给予放射治疗,实验组给予恩度联合力扑素同步放疗,3周为1个疗程,两组均接受治疗4个疗程,检测并比较两组治疗前后血清CYFRA21-1、CEA、SCCA、CA125及IL-8水平及外周血CD3^+、CD4^+、CD8^+免疫细胞所占的比值。结果:治疗前,两组血清CYFRA21-1、CEA、SCCA、CA125及IL-8水平比较差异无统计学意义(P>0.05);治疗后,两组血清CYFRA21-1、CEA、SCCA、CA125及IL-8水平均明显低于治疗前,同时实验组以上各血清指标均明显低于对照组,差异均具有统计学意义(P<0.05)。治疗前,两组外周血CD3^+、CD4^+及CD8^+细胞所占比值比较差异无统计学意义(P>0.05);治疗后,两组外周血CD3^+、CD4^+细胞所占比值明显低于治疗前,CD8^+细胞所占比值明显高于治疗前,同时实验组各T淋巴细胞亚群所占比值改变优于对照组,差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论:恩度联合力扑素同步放疗能明显降低中晚期宫颈癌患者血清CYFRA21-1、CEA、SCCA、CA125及IL-8水平,改善T淋巴细胞亚群水平,提高患者免疫力,值得在临床上推广应用。